雌激素受體β表達(dá)評(píng)估老年直腸癌術(shù)后放化療療效的價(jià)值

吳 陽 居 培 余紅民

(徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院放療科，江蘇 徐州 221002)

結(jié)直腸癌好發(fā)于中老年人群，是我國(guó)常見消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一〔1〕。近年來,隨著人民生活水平的不斷提高,飲食習(xí)慣和飲食結(jié)構(gòu)的改變及人口的老齡化,我國(guó)結(jié)直腸癌的發(fā)病率和死亡率均保持上升趨勢(shì)，且大多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已屬中晚期〔2〕。在結(jié)直腸癌構(gòu)成中，直腸癌約占60%〔3〕。術(shù)后放化療為Ⅱ ～Ⅲ期直腸癌的標(biāo)準(zhǔn)治療手段〔4〕。雌激素受體(ER)有2種形式：ERα和ERβ。在結(jié)直腸癌細(xì)胞株中ERα亞型不表達(dá),而ERβ亞型高表達(dá)〔5〕,ERβ在結(jié)直腸癌中即使少量表達(dá)，也能起到保護(hù)效應(yīng)，而ERα的生理作用與ERβ相反〔6〕。本文探討ERβ表達(dá)預(yù)測(cè)老年Ⅱ ～Ⅲ期直腸癌術(shù)后放化療療效的價(jià)值。

1 資料及方法

1.1一般資料 對(duì)2008年10月至2012年2月于徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院放療科接受序貫放化療的54例Ⅱ、Ⅲ期直腸癌根治術(shù)(Miles或Dixon)術(shù)后患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，年齡60～80(中位68)歲，男30例，女24例。

1.2術(shù)后放化療方案 2組患者術(shù)后輔助治療開始的時(shí)間為術(shù)后3～8 w，放療采用調(diào)強(qiáng)放療，體膜固定，經(jīng)螺旋CT 定位機(jī)5 mm 層厚連續(xù)掃描，將影像學(xué)信息數(shù)據(jù)傳輸至Eclipes 治療計(jì)劃系統(tǒng)，靶區(qū)范圍根據(jù)直腸癌靶區(qū)勾畫指南〔7〕，臨床靶區(qū)包括直腸系膜區(qū)加吻合口加骶前加髂內(nèi)血管周圍淋巴引流區(qū)，計(jì)劃靶區(qū)為臨床靶體積外放1 cm。如為Dixon 保肛手術(shù)后，則下界在閉孔下緣；如為Miles 術(shù)，則下界在原肛門口水平。照射總劑量為45～50 Gy/25～28次/5～5.5 w，每次1.8～2.0 Gy。輔助化療方案分別按照標(biāo)準(zhǔn)XELOX 和FOLFOX 方案進(jìn)行，周期數(shù)4～6個(gè)。

1.3免疫組化法檢測(cè)ERβ表達(dá) 石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。蒸餾水洗滌，5 min×3次。3%過氧化氫(甲醇配)室溫10 min，以阻斷內(nèi)源性氧化酶。再蒸餾水洗滌，5 min×3次。置于0.01 mol/L檸檬酸緩沖液(pH 6.0)中微波爐高火預(yù)熱3 min，低火保溫5 min，共2次，自然冷卻，作抗原修復(fù)。TBS洗滌，5 min×3次。正常小牛血清1∶20，37℃水浴20 min，以阻斷非特異性結(jié)合。仔細(xì)吸干血清，滴加一抗，抗體稀釋度均為1∶50，不加一抗為陰性對(duì)照。37℃水浴1 h。TBS 洗滌，5 min×3次。滴加EnVision試劑,37℃水浴1 h。TBS 洗滌,5 min×3次。二氨基聯(lián)苯胺(DAB)室溫顯色10 min或在顯微鏡下觀察至棕黃色反應(yīng)后終止。流水洗10 min。蘇木素復(fù)染細(xì)胞核，鹽酸乙醇分化、藍(lán)化。遞增梯度乙醇脫水1 min，二甲苯1 min，常規(guī)樹脂封片。陽性信號(hào):癌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒。陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)：光鏡下用10×10的視野觀察整張切片，如陽性癌細(xì)胞數(shù)占全部癌細(xì)胞總數(shù)的10%以上，則判為陽性。10.0%～50.0%為(+)， 50.1%～75.0%為()，75.0%以上為()。

1.4監(jiān)測(cè)及隨訪 入院后完善相關(guān)理化檢查，如血常規(guī)、肝腎功、心電圖、胸腹部及盆腔MRI/CT等，評(píng)估患者病情及放化療耐受性。每周行血常規(guī)、肝腎功等血液學(xué)檢查，監(jiān)測(cè)并及時(shí)處理放療期間不良反應(yīng)。治療結(jié)束后隨訪：全部病例進(jìn)行3年隨訪，時(shí)間從手術(shù)開始起，截至2015年3月1日。采用電話、信訪及門診隨診等方式進(jìn)行隨訪，隨訪終點(diǎn)為死亡。隨訪內(nèi)容為患者的一般情況、有無毒副反應(yīng)發(fā)生、進(jìn)行過何種治療、有無腫瘤局部復(fù)發(fā)、復(fù)發(fā)的時(shí)間及部位、有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的時(shí)間及部位，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移后的治療、生存情況及死亡時(shí)間、死亡原因等。其中1例失訪，隨訪率98.1%。

1.5觀察指標(biāo) 總生存率(OS)、無病生存率(DFS)。不良反應(yīng)發(fā)生率(%)=至少發(fā)生一個(gè)不良反應(yīng)的例數(shù)/評(píng)價(jià)安全性人數(shù)×100%。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行Mamm-WhiteyU及χ2檢驗(yàn)。應(yīng)用Kaplan-Meier生存曲線和Logranktest檢驗(yàn)比較兩組OS及DFS。

2 結(jié) 果

2.1ERβ不同表達(dá)組臨床資料比較 ERβ陽性組與ERβ陰性組性別、年齡、手術(shù)方式、病理類型、腫瘤分化程度及TNM分期差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

2.2ERβ不同表達(dá)組不良反應(yīng)發(fā)生率比較 ERβ陽性組與ERβ陰性組中放射性直腸炎、放射性膀胱炎、骨髓抑制和胃腸道反應(yīng)發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。治療期間，不良反應(yīng)經(jīng)對(duì)癥處理后均可以逐漸恢復(fù)，不影響治療，無不良反應(yīng)相關(guān)死亡。

表1 ERβ不同表達(dá)組臨床資料比較(n)

表2 ERβ不同表達(dá)組不良反應(yīng)發(fā)生率比較(n)

2.3療效評(píng)價(jià) ERβ陽性組3年OS(86.1%)與ERβ陰性組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(77.8%，χ2=0.390，P=0.532)，但二條生存曲線有分開的趨勢(shì)，其結(jié)果仍需進(jìn)一步隨訪，見圖1。ERβ陽性組3年DFS(72.2%)與ERβ陰性組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(55.6%，χ2=2.000，P=0.157)。ERβ陽性組3年局部復(fù)發(fā)率(16.7%)較ERβ陰性組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(33.3%，χ2=5.120，P=0.024)。ERβ陽性組3年遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率(22.2%)較ERβ陰性組明顯降低(38.9%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.738,P=0.030)。

圖1 兩組總生存率的比較

3 討 論

ERα和ERβ在多途徑發(fā)揮著相反的作用：ERα在促進(jìn)生長(zhǎng)和增殖方面起著重要作用；而ERβ起著抗增殖、分化和促進(jìn)凋亡的作用〔8〕。研究顯示ERβ在抑制腫瘤方面起著十分重要的作用，而干擾ERα信號(hào)通路卻顯示無作用，例如，ERβ對(duì)鼠結(jié)腸癌的保護(hù)作用〔9〕；ERβ能夠激活結(jié)腸癌細(xì)胞系中抗炎信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的作用〔10〕；ERβ在腫瘤體積比較大和分期比較晚的病人中的表達(dá)明顯降低〔11〕等。除此之外，ERβ可作為發(fā)生結(jié)直腸癌危險(xiǎn)的潛在生物標(biāo)志物〔12〕，也可作為治療有效性的監(jiān)測(cè)指標(biāo)，例如有報(bào)道稱激素治療對(duì)ERβ陽性的結(jié)直腸癌患者有效，而對(duì)ERβ陰性的患者卻無效〔13,14〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，ERβ可作為預(yù)測(cè)老年直腸癌術(shù)后3年局部復(fù)發(fā)率和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率的有效指標(biāo)，即ERβ可作為預(yù)測(cè)老年直腸癌術(shù)后放化療療效的指標(biāo)，可改善患者的預(yù)后。

1馮 莉，王貴英.老年晚期結(jié)直腸癌患者腫瘤組織胸苷酸合成酶表達(dá)與氟尿嘧啶敏感性、副反應(yīng)及預(yù)后的關(guān)系〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志,2015;35(6):1474-6.

2何振華,張 森.結(jié)直腸癌NCCN、NICE指南及中國(guó)衛(wèi)生部診療規(guī)范的比較〔J〕.世界華人消化雜志,2013;21(14):1297-302.

3Wong RK,Berry S,Spithorff K,etal.Preoperative or postoperative therapy for stageⅡor Ⅲ rectal cancer:all updated practice guideline〔J〕.Clin Oncol(R Coll Radiol),2010;22(4):265-71.

4任 驊，金 晶，王 鑫，等.術(shù)前同步放化療是直腸癌標(biāo)準(zhǔn)治療模式〔J〕.實(shí)用腫瘤雜志,2013;28(1):20-3.

5朱 冰,張傳珉.雌激素受體和孕激素受體與結(jié)直腸癌預(yù)后關(guān)系的研究進(jìn)展〔J〕.醫(yī)學(xué)綜述,2008;14(21):3236-8.

6Galluzzo P,Caiazza F,Moreno S,etal.Role of ERbeta palmitoylation in the inhibition of human colon cancer cell proliferation〔J〕.Endocr Relat Cancer,2007;14(1):153-67.

7Roels S,Duthoy W,Haustermans K,etal.Definition and delineation of the clinical target volume for rectal cancer〔J〕.Int J Radiat Oncol Biol Phys,2006;65(4):1129-42.

8Dey P,Barros RP,Warner M,etal.Insight into the mechanisms of action of estrogen receptor β in the breast,prostate,colon,and CNS〔J〕.J Mol Endocrinol,2013;51(3):T61-74.

9Saleiro D,Murillo G,Lubahn DB,etal.Enhanced induction of mucin-depleted foci in estrogen receptor {beta} knockout mice〔J〕.Cancer Prev Res(Phila),2010;3(9):1198-204.

10Edvardsson K,Str?m A,Jonsson P,etal.Estrogen receptor β induces antiinflammatory and antitumorigenic networks in colon cancer cells〔J〕.Mol Endocrinol,2011;25(6):969-79.

11Rudolph A,Toth C,Hoffmeister M,etal.Expression of oestrogen receptor β and prognosis of colorectal cancer〔J〕.Br J Cancer,2012;107(5):831-9.

12Principi M,Di Leo A,Pricci M,etal.Phytoestrogens/insoluble fibers and colonic estrogen receptor β: randomized,double-blind,placebo-controlled study〔J〕.World J Gastroenterol,2013;19(27):4325-33.

13Rudolph A,Toth C,Hoffmeister M,etal.Colorectal cancer risk associated with hormone use varies by expression of estrogen receptor-β〔J〕.Cancer Res,2013;73(11):3306-15.

14Caiazza F,Ryan EJ,Doherty G,etal.Estrogen receptors and their implications in colorectal carcinogenesis〔J〕.Front Oncol,2015;5:19.