血清肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子在肺炎支原體肺炎兒童中的檢測(cè)意義

葉菁，劉長(zhǎng)山，王志華

通常情況下，肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）占兒童社區(qū)獲得性肺炎的10%～40%。近年來(lái)，重癥及難治性MPP病例呈增多趨勢(shì)［1-2］，部分患兒甚至出現(xiàn)如胸腔積液、肺壞死等并發(fā)癥［3-4］，嚴(yán)重影響患兒健康和生活質(zhì)量，并且易遺留閉塞性細(xì)支氣管炎、肺不張以及支氣管擴(kuò)張等后遺癥。目前，有關(guān)MPP的致病機(jī)制尚未完全清楚，因此，在臨床中早期明確MPP患兒病情嚴(yán)重程度及其可能進(jìn)展方向?qū)χ笇?dǎo)兒童MPP治療有重要臨床意義。肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatocyte growth factor，HGF）是一種對(duì)急性受損組織有保護(hù)和促進(jìn)再生作用的細(xì)胞因子，近年有研究報(bào)道急性肺損傷和急性呼吸窘迫綜合征患者肺泡液中HGF升高，而且HGF升高與死亡率有關(guān)［5］。本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)檢測(cè)MPP兒童血清HGF水平的變化，探討其與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系，為臨床尋找新的血清學(xué)指標(biāo)提供依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2014年1月—2015年6月于天津市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院南開(kāi)醫(yī)院兒科住院的肺炎患兒107例，兒童肺炎及MPP依據(jù)兒童社區(qū)獲得性肺炎管理指南（2013年修訂）的診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］。107例中MPP組65例，男36例，女29例，平均年齡（7.2±3.2）歲，重癥MPP 27例，非重癥MPP 38例；細(xì)菌性肺炎組42例，男18例，女24例，平均年齡（5.8±3.7）歲。同期30例健康體檢者為對(duì)照組，男14例，女性16例，平均年齡（6.9±3.4）歲。3組患兒年齡（F=2.469）及性別（χ2=1.737）比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性（P＞0.05）。本研究獲得醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)以及家屬的知情同意。

1.1.1 重癥MPP患兒入選標(biāo)準(zhǔn) MPP患兒年齡在3～14歲，且符合重癥MPP診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］，完成治療且臨床資料完整。除外重癥MPP并排除標(biāo)準(zhǔn)后診為非重癥MPP患兒。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) （1）入院7d內(nèi)經(jīng)病原學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)合并其他病原感染。（2）肺炎恢復(fù)期入院者（一般為病程超過(guò)4周，體溫平穩(wěn)1周以上，影像學(xué)顯示有吸收好轉(zhuǎn)）。（3）既往患支氣管哮喘、反復(fù)呼吸道感染、先天性或繼發(fā)性免疫抑制或缺陷，慢性肺疾病、腎臟或肝臟疾病，心血管疾病及結(jié)締組織疾病等。（4）既往有重癥肺炎病史未能痊愈。（5）病歷資料不完整。

1.2 方法 收集患兒年齡、性別、身高、呼吸、脈搏、血氧飽和度等一般資料。所有入組肺炎患兒當(dāng)天取血，抽取靜脈血1.5 mL，分離血清，收集上清，置-80℃冰箱內(nèi)保存。血清HGF采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）進(jìn)行檢測(cè)（試劑盒購(gòu)自BD公司），嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。比較3組HGF的差異；MPP患兒比較重癥MPP組和非重癥MPP組血HGF、C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）、乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）的差異，CRP、LDH使用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。符合正態(tài)分布且方差齊的計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較采用方差分析。2組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。非正態(tài)分布或方差不齊資料以M（P25，P75）表示，組間比較采用秩和檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組兒童血清HGF水平比較 健康對(duì)照組、MPP組及細(xì)菌性肺炎組的HGF差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，呈逐漸升高趨勢(shì)，分別為（4 174.3±247.6）、（6 507.1±1 895.9）及（7 128.7±1 990.2）ng/L（F=28.116，P＜0.05）。

2.2 重癥MPP與非重癥MPP組患兒血清HGF、CRP、LDH水平比較 重癥組血清中HGF、CRP、LDH高于非重癥組（P＜0.05），見(jiàn)表1。

Tab.1 Comparison of laboratory characteristics between severe MPP group and non-severe MPP group表1 重癥MPP與非重癥MPP組血清HGF、CRP、LDH水平比較

3 討論

肺炎支原體（mycoplasma pneumoniae，MP）是介于病毒和細(xì)菌之間能自行繁殖的原核生物，是兒童時(shí)期肺炎或其他呼吸道感染的重要病原體之一。MP感染通常是良性的，為自限性疾病，但有些情況下可發(fā)展成難治性或嚴(yán)重的甚至危及生命的肺炎。近年來(lái)重癥及難治性MPP病例明顯增多。目前，MPP發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，但免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制在MPP發(fā)生中具有重要的作用已為共識(shí)，尤其是細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答以及大量細(xì)胞因子的釋放尤為重要。

HGF是一種對(duì)急性受損組織有保護(hù)和促進(jìn)再生作用的細(xì)胞因子，主要來(lái)源于支氣管上皮細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，在肺部炎癥和急性肺損傷的修復(fù)中起著極為重要的作用［7-8］。研究顯示，HGF在軍團(tuán)菌肺炎患者血清中升高明顯［9］。本研究結(jié)果顯示，HGF在MPP患兒血清中較健康對(duì)照組也升高，提示HGF可能參與兒童MPP的發(fā)病，考慮原因?yàn)镸PP感染時(shí)，白細(xì)胞介素-2（interleukir-2，IL-2）、IL-6和腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor alpha，TNF-α）被釋放入外周血中，刺激HGF的釋放，進(jìn)而MPP患兒血清HGF升高。

目前研究顯示，禽流感病毒H7N9感染患者的HGF與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)［10］，而且在軍團(tuán)菌肺炎患者中血清HGF水平也與疾病的嚴(yán)重程度有關(guān)［9］。本研究發(fā)現(xiàn)，重癥MPP患兒血清中HGF明顯高于非重癥MPP，這與以上文獻(xiàn)報(bào)道相一致，提示對(duì)于MPP患兒如血清HGF明顯升高，應(yīng)注意重癥MPP可能，積極給予治療。

LDH作為細(xì)胞質(zhì)酶，存在于各個(gè)重要臟器，當(dāng)細(xì)胞溶解或細(xì)胞膜受到破壞，LDH可釋放到細(xì)胞外，引起血清中LDH的升高，可能是炎癥嚴(yán)重程度的預(yù)測(cè)指標(biāo)之一。目前國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道，難治性或重癥MPP患兒血清LDH多明顯升高，可作為給予全身糖皮質(zhì)激素治療的參考指標(biāo)［11-13］。本研究發(fā)現(xiàn)，重癥MPP患兒血清中LDH明顯高于非重癥MPP，這與上述報(bào)道相一致。此外有文獻(xiàn)報(bào)道，CRP能夠評(píng)價(jià)MPP患兒對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類藥物是否耐藥，且是唯一的重要預(yù)測(cè)因子［14］。而本研究也發(fā)現(xiàn)，重癥MPP患兒血清中CRP明顯高于非重癥MPP，因此對(duì)于MPP肺炎患兒如果血清LDH、CRP明顯升高，提示病情重，且耐藥可能性大，應(yīng)在給予大環(huán)內(nèi)酯類藥物的同時(shí)，常規(guī)給予糖皮質(zhì)激素治療。

綜上所述，HGF參與了MPP的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，且與病情輕重有關(guān)，若結(jié)合患兒血清LDH及CRP水平均升高，考慮重癥MPP可能性大，應(yīng)引起臨床重視，給予積極治療。

［1］Zhao C，Liu J，Yangh，et al.Mycoplasma pneumoniae-associated bronchiolitis obliterans following acute bronchiolitis［J］.Sci Rep，2017，7（1）：8478.doi：10.1038/s41598-017-08861-7.

［2］Poddighed，Marseglia GL.Is there any relationship between extrapulmonary manifestations of Mycoplasma pneumoniae infection and atopy/respiratory allergy in children?［J］.Pediatr Rep，2016，8（1）：6395.doi：10.4081/pr.2016.6395.

［3］Lin YL，Hung KL，Lo CW.Mycoplasma pneumoniae-associated encephalitis complicated by cerebral salt wasting syndrome［J］.Clin Case Rep，2017，5（11）：1830-1833.doi：10.1002/ccr3.1192.

［4］Mishra R，Cano E，Venkatram S，et al.An interesting case of mycoplasma pneumonia associated multisystem involvement and diffuse alveolar hemorrhage［J］.Respir Med Case Rep，2017，21：78-81.doi：10.1016/j.rmcr.2017.03.022.

［5］Verghese GM，McCormick-Shannon K，Mason RJ，etal.Hepatocyte growth factor and keratinocyte growth factor in the pulmonary edema fluid of patients with acute lung injury.Biologic and clinical significance［J］.Am J Respir Crit Care Med，1998，158（2）：386-394.doi：10.1164/ajrccm.158.2.9711111.

［6］中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)呼吸學(xué)組，《中華兒科雜志》編輯委員會(huì)．兒童社區(qū)獲得性肺炎管理指南（2013修訂）［J］.中華兒科雜志，2013，51（10）：745-752.Subspecialty Group of Respiratory Diseases，The Society of Pediatrics，Chinese Medical Association;Editorial Board，Chinese Journal of Pediatrics.Guidelines for management of community acquired pneumonia in children（the revised edition of 2013）［J］.Chin J Pediatr，2013，51（10）：745-752.doi：10.3760/cma.j.issn.0578-1310.2013.10.006.

［7］Przybylski G，Chorostowska-Wynimko J，Dyczek A，et al.Studies of hepatocyte growth factor in bronchoalveolar lavage fluid in chronic interstitial lung diseases［J］.Pol Arch Med Wewn，2015，125（4）：260-271.

［8］Narasaraju T，Yang E，Samy RP，et al.Combination therapy with hepatocyte growth factor and oseltamivir confers enhanced protection against influenza viral pneumonia［J］.Curr Mol Med，2014，14（5）：690-702.

［9］Higa F，Akamine M，F(xiàn)urugen M，et al.Hepatocyte growth factor levels in Legionella pneumonia：a retrospective study［J］.BMC Infect Dis，2011，11：74．doi：10.1186/1471-2334-11-74.

［10］Guo J，Huang F，Liu J，et al.The serum profile of hypercytokinemia factors identified in H7N9-infected patients can predict fatal outcomes［J］.Sci Rep，2015，5：10942.doi：10.1038/srep10942.

［11］Inamura N，Miyashita N，Hasegawa S，et al.Management of refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia：utility of measuring serum lactate dehydrogenase level［J］.J Infect Chemother，2014，20（4）：270-273.doi：10.1016/j.jiac.2014.01.001.

［12］Miyashita N，Kawai Y，Inamura N，et al.Setting a standard for the initiation of steroid therapy in refractory or severe Mycoplasma pneumoniae pneumonia in adolescents and adults［J］.J Infect Chemother，2015，21（3）：153-160.doi：10.1016/j.jiac.2014.10.008.

［13］中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)呼吸學(xué)組，《中華實(shí)用兒科臨床雜志》編輯委員會(huì)．兒童肺炎MPP診治專家共識(shí)（2015年版）［J］.中華實(shí)用兒科臨床雜志，2015，30（17）：1304-1308.Respiratory Branch of Chinese Pediatric Society of Chinese Medical Association，Editorial Board of Chinese Journal of Applied Clinical Pediatrics.Expertconsensuson diagnosisand treatmentof Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children（2015）［J］.Chin J Appl clin Pediatr，2015，30（17）：1304-1308.doi：10.3760/cma.j.issn.2095 428X.2015.17.006.

［14］Seo YH，Kim JS，Seo SC，et al.Predictive value of C-reactive protein in response to macrolides in children with macrolideresistantMycoplasmapneumoniaepneumonia［J］.Korean J Pediatr，2014，57（4）：186-192.doi：10.3345/kjp.2014.57.4.186.