進展期和靜止期尋常型銀屑病患者Th17細胞表達差異的Meta分析

喬 霞 陳官芝 趙正偉

尋常型銀屑病按皮損表現(xiàn)分為三期：進展期、靜止期和退行期。該病確切病因尚未清楚，大多數(shù)研究發(fā)現(xiàn)銀屑病發(fā)病機制的核心是免疫功能異常，主要是T細胞為主的免疫功能紊亂。而Th17細胞是一種新型的CD4+T細胞，越來越多的研究支持Th17細胞是銀屑病發(fā)病中的關(guān)鍵性效應(yīng)細胞[1,2]。

輔助性T細胞17(T helper cell 17，Th17)是近年來發(fā)現(xiàn)的一種不同于Th1、Th2細胞的CD4+效應(yīng)性T細胞亞群，通過分泌IL-17、IL-22、IL-21等多種效應(yīng)因子介導(dǎo)炎癥反應(yīng)而發(fā)揮作用，與自身免疫性疾病、腫瘤及感染性疾病的發(fā)生機制密切相關(guān)。

Th17細胞與銀屑病相關(guān)性研究有很多，但與進展期及靜止期相關(guān)性的研究較少，我們對此進行全面、系統(tǒng)的分析，探討進展期和靜止期銀屑病患者外周血及皮損組織中Th17細胞表達的差異，進一步揭示Th17細胞與尋常型銀屑病病情進展的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 研究資料 納入尋常型銀屑病與外周血及皮損組織Th17細胞表達關(guān)系的臨床對照研究的相關(guān)臨床研究文獻。

1.1.2 觀察對象 為臨床確診為尋常型銀屑病，并根據(jù)臨床特征診斷為進展期及靜止期銀屑病的患者，具體診斷標準見《臨床皮膚病學》[3]。

1.1.3 測量指標 外周血及皮損組織中Th17細胞的比例。

1.1.4 排除標準 ①關(guān)于尋常型銀屑病與Th17細胞關(guān)系的綜述、個案報道及動物研究；②重復(fù)的研究；③未進行尋常型銀屑病分期的研究；④病例中合并本病以外的系統(tǒng)性或免疫性疾病以及其他皮膚病、合并2周內(nèi)接受系統(tǒng)治療或1周內(nèi)大面積應(yīng)用強效糖皮質(zhì)激素。

1.2 檢索策略 以“銀屑病、Th17”為檢索詞檢索中國知網(wǎng)、萬方、維普、CBM數(shù)據(jù)庫，以“psoriasis、psoriases、Th17、T helper cell 17”為檢索詞檢索PubMed、Embase數(shù)據(jù)庫所有文獻。

1.3 質(zhì)量評價 采用Jadad評分量表從隨機、盲法、失訪三個方面對各研究進行評價，由2位作者進行質(zhì)量評價，分歧通過討論以及查閱相關(guān)資料解決，匯總后得出最終評分結(jié)果。

1.4 資料提取 由一位作者提取和錄入資料，另一位作者進行核對。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用Rev Man5.3進行Meta分析。計量資料采用SMD及其95%CI，計數(shù)資料采用RR及其95%CI為相關(guān)性分析的統(tǒng)計量。首先對納入研究進行臨床異質(zhì)性和方法學異質(zhì)性分析，按照臨床同質(zhì)性和方法學同質(zhì)性對各研究進行亞組分析，然后分析亞組內(nèi)的統(tǒng)計學異質(zhì)性。統(tǒng)計學異質(zhì)性分析采用χ2檢驗，檢驗水準α=0.1；同時采用I2定量分析異質(zhì)性大小，其檢驗水準設(shè)定為50%，即I2> 50%時，認為研究結(jié)果間的異質(zhì)性較大，結(jié)果采用隨機效應(yīng)模型合并分析，并進行亞組分析進一步討論。無統(tǒng)計學異質(zhì)性的研究結(jié)果采用固定效應(yīng)模型進行合并分析。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)果檢索 初檢到985篇文獻，通過閱讀題目和摘要，排除無法獲取以及重復(fù)的文獻，最終納入12篇，所有納入文獻均以中文或英文發(fā)表。

2.2 納入研究文獻的特點 見表1。納入文獻的例數(shù)從9～68例不等，共納入尋常型銀屑病834例，其中進展期419例，靜止期415例。上述研究采用流式細胞學或雙標記免疫熒光法檢測Th17細胞比例，均采用病例對照研究設(shè)計。

2.3 納入文獻的質(zhì)量評價 根據(jù)Jadad評分量表對12篇文獻由2人進行質(zhì)量評分，結(jié)果兩人評分一致(1～3分視為低質(zhì)量，4～7分視為高質(zhì)量)，見表2。

2.4 Meta分析結(jié)果 所納入的12項研究中，有1項研究采用雙標記免疫熒光法對Th17細胞進行定量測定，其余研究均采用流式細胞學檢測方法。各研究結(jié)果之間差異性較大(2.12%～53.83%)，有統(tǒng)計學異質(zhì)性(P<0.00001，I2=96%)，采用隨機效應(yīng)模型進行合并，結(jié)果顯示進展期銀屑病組患者外周血及皮損組織中Th17細胞比例明顯高于靜止期銀屑病組，有統(tǒng)計學差異[SMD=2.15,95%CI(1.28,3.02)]。見圖1。

表1 納入研究文獻的基本特征

表2 納入研究文獻的質(zhì)量評價

圖1 外周血和皮損組織中Th17細胞表達差異的Meta分析

圖2 皮損組織中Th17細胞的比例的Meta分析

圖3 外周血中Th17細胞的比例的Meta分析

2.4.1 以皮損組織為標本的研究 1項研究采用免疫熒光法對銀屑病患者皮損組織中Th17細胞的比例進行測定，結(jié)果顯示進展期銀屑病患者皮損組織中Th17細胞的比例高于靜止期銀屑病組，差異有統(tǒng)計學意義[SMD合并=3.77,95%CI(1.92,5.62)]。見圖2。

2.4.2 以外周血為標本的研究 11項研究均采用流式細胞學法對銀屑病患者外周血中Th17細胞的比例定量測定，各研究間差異較大，研究間有統(tǒng)計學異質(zhì)性，(P<0.00001，I2=96%)，采用隨機效應(yīng)模型進行分析，結(jié)果顯示進展期銀屑病患者皮損組織中Th17細胞的比例高于靜止期銀屑病組，差異有統(tǒng)計學意義[SMD合并=2.04,95%CI(1.14,2.93)]。見圖3。按觀察指標的表示方法不同，分為四個亞組：Th17/CD3+T細胞組納入3個研究，研究間無統(tǒng)計學異質(zhì)性(P=0.85，I2=0%)，合并結(jié)果分析顯示進展期銀屑病患者外周血中Th17細胞的比例有高于靜止期銀屑病組的趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義[SMD合并=0.29,95%CI(-0,05,0.63)]；Th17/CD4+T細胞組納入2個研究，各研究間無統(tǒng)計學異質(zhì)性(P=0.21，I2=37%)，合并結(jié)果分析顯示進展期銀屑病患者外周血中Th17細胞的比例高于靜止期銀屑病組，差異有統(tǒng)計學意義[SMD合并=1.53,95%CI(0.88,2.18)]；Th17細胞的比例組納入4個研究，各研究結(jié)果差異較大(3.26～18.18%)，有統(tǒng)計學異質(zhì)性(P<0.00001，I2=95%)，合并分析結(jié)果顯示進展期銀屑病患者外周血中Th17細胞的比例高于靜止期銀屑病組，差異有統(tǒng)計學意義[SMD合并=2.79,95%CI(1.61,3.97)]；CD4+IL-17+T細胞的比例組納入2個研究，研究間有統(tǒng)計學異質(zhì)性(P<0.00001，I2=98%)，結(jié)果顯示進展期銀屑病患者外周血中Th17細胞的比例有高于靜止期銀屑病組的趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義[SMD合并=6.16,95%CI(-6.12,18.45)]。見圖3。

3 討論

3.1 本系統(tǒng)評價的局限性 本次研究納入文獻質(zhì)量略差，所有文獻均提到隨機選擇對象，但并未提及具體的隨機方法，并且所有文獻均未提及測量結(jié)果是否采用盲法，有3篇文獻[4，7，12]未詳細闡述具體的觀察指標。因此，所有文獻均存在選擇性偏倚及測量偏倚可能性。

3.2 結(jié)論 本系統(tǒng)評價納入研究主要采用流式細胞術(shù)(FlowCytometry，F(xiàn)CM)檢測Th17細胞的濃度，此方法具有速度快、精確度高、準確性好等優(yōu)點，缺點是結(jié)果的重復(fù)性欠佳，且操作技術(shù)要求高，使測定值差異較大，且由于抗原質(zhì)量穩(wěn)定性和抗體親和力不一，使測定值差異較大。檢測時的操作過程亦未規(guī)范化，檢測值各不相同，缺乏良好的重復(fù)性，可能導(dǎo)致測量性偏倚。這也是研究結(jié)果不一致的可能原因。

本研究表明，Th17細胞與銀屑病病情進展有一定關(guān)系，其在進展期銀屑病患者的外周血及皮損組織中比例高于靜止期銀屑病患者外周血中的比例，且差異有統(tǒng)計學意義。但由于各研究可能存在發(fā)表偏倚，所以未來研究應(yīng)致力于提高隨機對照臨床試驗(randomized controlled clinical trials, RCT)的方法學質(zhì)量，做好樣本估算，隨機分組，做好分配隱藏，采用盲法研究。

本次研究僅納入12項病例對照研究，如需更準確的了解Th17細胞與銀屑病病情進展的關(guān)系還需要更多、更高質(zhì)量的隨機對照臨床試驗來提供更高質(zhì)量的證據(jù)。

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