不同廠家當歸配方顆粒與當歸飲片的質量分析研究

張中華，牟倩倩，張亞會

甘肅省中醫(yī)院，甘肅 蘭州 730050

當歸是最常用的中藥之一，始載于《神農本草經》，為傘形科多年生草本植物當歸的干燥根[1]。當歸味甘而重，專能補血，為婦科調經補血第一要藥，具有調經止痛、潤腸通便、補血活血的功效。當歸能調節(jié)血脂、抗血栓、抑制血小板凝結，擴張血管、降低血壓，抗氧化和清除自由基、增強免疫力，調節(jié)子宮平滑肌并且能促進機體造血功能。當歸的主要成分有酚類、揮發(fā)油、生物堿、當歸多糖、有機酸等，其中分布于有機酸中的阿魏酸是當歸的有效成分之一，由于其屬于水溶性有效成分，可溶于水及醋酸乙脂等溶劑，在制劑過程中易提取也易破壞，阿魏酸具有抑制膠原和抑制血小板聚集作用[2-6]，所以對當歸及當歸配方顆粒中阿魏酸的含量測定是藥品質量控制的重要手段。當歸配方顆粒便于管理與貯藏、便于藥師調配、便于攜帶、免煎易服，也可用于急救用藥，所以在臨床上的使用率逐步提高。本研究對當歸飲片及當歸配方顆粒質量進行分析比較，為臨床合理用藥提供依據。

1 材料

1.1 儀器 Waters高效液相色譜儀，Waters 717自動進樣器，Waters1525泵，Waters 2487雙通道紫外檢測器(美國，Waters公司)；FW-400A型萬能粉碎機(北京利偉永興儀器有限公司)；SB-3200DTT型超聲波清洗機(寧波新芝生物科技股份有限公司)；FA1004型電子分析天平(上海良平儀器儀表有限公司)；CP225D型電子天平(德國，Sartorius公司)。

1.2 試藥 當歸飲片(甘肅省中醫(yī)院藥學部提供)；當歸配方顆粒A、B(不同廠家提供)；阿魏酸對照品(中國食品藥品檢定研究院，供含量測定用，批號：110773-200611)；磷酸(優(yōu)級純，北京益利精細化學品有限公司)；乙腈(色譜純，山東禹王實業(yè)有限公司化工分公司)；水為超純水；甲醇、乙醇均為色譜純；其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱為Waters Symmetry Shield RP-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；檢測波長：320 nm；流動相：甲醇 -0.5%醋酸溶液(20∶80)；流速：1.0 mL/min，柱溫：室溫；進樣量：10 μL[7-9]。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱定對照品阿魏酸適量，置于50 mL容量瓶中，用流動相溶解并定容，制成濃度為0.069 mg/mL的對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 精密稱定當歸飲片粉末6.9 mg及A、B廠家的當歸配方顆粒各6.9 mg，置于容量瓶中，精密加入流動相溶解并定容至100 mL，密塞，超聲處理30分鐘，提取之后，定容，用0.45 μm微孔濾膜過濾，即為供試品溶液。

2.4 專屬性 分別取適量阿魏酸對照品溶液(質量濃度為0.069 mg/mL)、當歸飲片粉末、當歸配方顆粒，加70%甲醇稀釋，超聲破乳，過0.45 μm微孔濾膜，取濾液按“2.1”項下色譜條件進樣測定[10]。阿魏酸色譜峰峰型良好，溶劑對樣品測定無干擾，見圖1—4。

圖1 阿魏酸對照品的HPLC圖

圖2 當歸飲片中阿魏酸的HPLC圖

圖3 A廠家當歸配方顆粒中阿魏酸的HPLC圖

圖4 B廠家當歸配方顆粒中阿魏酸的HPLC圖

2.5 線性及其范圍 精密吸取“2.2”項下阿魏酸對照品溶液 2.0，2.5，3.3，5.0，10.0mL 置于 10 mL 容量瓶中，制成阿魏酸對照品系列溶液，分別取10 μL，按“2.1”項下色譜條件進樣，測得峰積分面積。以阿魏酸濃度為橫坐標(X)，峰積分面積為縱坐標(Y)繪制標準曲線，得阿魏酸回歸方程為：

Y=2×10-7X+7989.5(r=0.999)

結果表明在0.013 8～0.069 0 mg/mL范圍內阿魏酸濃度與峰積分面積線性關系良好。

2.6 方法學考察

2.6.1 穩(wěn)定性實驗 取“2.3”項下供試品溶液，分別于 0、4、8、12、18、24 小時進行測定，并計算其RSD為1.26%。結果表明，供試品溶液在常溫條件下24小時內穩(wěn)定。

2.6.2 精密度實驗 取“2.2”項下阿魏酸對照品溶液按“2.1”項下色譜條件進樣測定，1天進樣6次，連續(xù)進樣6天，計算日間與日內精密度，結果表明，日內精密度為0.71%，日間精密度為1.25%，均小于2%，表明高效液相色譜法測定阿魏酸含量，其精密度符合方法學要求[11-13]。

2.6.3 加樣回收率實驗 精密稱取已知含量的樣品6份，每份5 mL，分別精密加入同等含量的阿魏酸對照品溶液，分別加入一定量的阿魏酸對照品，按供試品制備方法制備供試品6份，進樣量10 μL，進行 HPLC 測定[14]，測得阿魏酸的平均回收率為97.72%，RSD=1.06%(n=6)。表明本法回收率高。

2.7 水分測定 按照2015版《中華人民共和國藥典》水分測定法(通則0832第四法)，分別精密稱定當歸飲片粉末及A、B兩個廠家的配方顆粒各2 g。在圓底燒瓶中放置當歸飲片粉末2 g，加入甲苯200 mL，在電熱套中放置圓底燒瓶，緩慢加熱，當甲苯沸騰時，對溫度進行調節(jié)，每秒餾出2滴，待水分完全餾出，即測定管刻度部分的水量不再增加時，用甲苯沖洗冷凝管內部，蒸餾5分鐘，冷卻至常溫，拆卸裝置，若觀察二層管壁存在水滴情況，可用蘸有甲苯的銅絲進行相關操作，對水量進行檢測[1]。結果測得：當歸飲片含水量為1.78 mL，百分比為7.0%；A廠家當歸配方顆粒含水量為0.9 mL，百分比為3.4%。B廠家當歸配方顆粒含水量為0.72 mL，百分比為2.83%；當歸飲片中阿魏酸含量為0.052%，符合藥典規(guī)定；A廠家當歸配方顆粒中阿魏酸含量為0.034%，B廠家當歸配方顆粒中阿魏酸含量為0.021%，A、B兩個廠家當歸配方顆粒中阿魏酸含量均低于當歸飲片，且兩個廠家配方顆粒中阿魏酸的含量存在差異。

3 討論

本實驗主要以甘肅省中醫(yī)院門診使用的當歸飲片、A、B兩個不同廠家的當歸配方顆粒中主要成分阿魏酸的含量作為考察對象，所采用的HPLC法中流動相的選擇與藥典不同，藥典選擇乙腈-0.085%磷酸梯度完成洗脫，本實驗以甲醇-0.5%醋酸溶液(20∶80)作為流動相，得到的色譜圖分離度高，峰形好，無拖尾現(xiàn)象，色譜干擾峰可清楚分開。本實驗測得的A廠家當歸配方顆粒中阿魏酸含量高于B廠家，說明A廠家當歸配方顆粒質量優(yōu)于B廠家。造成當歸不同廠家配方顆粒中阿魏酸含量差異的原因是由于企業(yè)之間配方顆粒的生產工藝不統(tǒng)一，質量標準不一致，添加輔料品種及用量未評價等，對產品質量有一定影響。面對中藥配方顆粒目前存在的問題，相關部門應進一步明確并建立一套中藥配方顆粒規(guī)范化生產和管理的技術標準體系，加大監(jiān)管力度，以確保藥品質量，為臨床用藥的安全性、有效性提供保障。

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