臍血血細(xì)胞參數(shù)生物參考區(qū)間的建立與研究

陳小燕 杜琪

【摘要】目的 建立魯南蘇北地區(qū)新生兒臍血血細(xì)胞參數(shù)的生物參考區(qū)間，研究新生兒性別、胎齡、分娩方式與產(chǎn)婦年齡對臍血血細(xì)胞參數(shù)的影響。方法 收集2016年1月～2016年12月在臨沂市婦兒童醫(yī)院出生的新生兒臍血共2280例，標(biāo)本采用EDTA-K2抗凝。用Beckman公司的DXH800全血?jiǎng)友?xì)胞分析儀檢測白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、有核紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等24項(xiàng)血細(xì)胞參數(shù)。各參數(shù)的生物區(qū)間統(tǒng)計(jì)采用均值與標(biāo)準(zhǔn)差表示或百分位數(shù)法來建立。不同組間的比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)。結(jié)果 共有2280例臍血標(biāo)本納入研究，建立了臍血24項(xiàng)血細(xì)胞參數(shù)的生物區(qū)間。性別、分娩方式、胎齡是臍血全血細(xì)胞分析參數(shù)的影響因素。不同的產(chǎn)婦年齡組對臍血血細(xì)胞參數(shù)沒有顯著差異。結(jié)論 建立了魯南地區(qū)臍血24項(xiàng)血細(xì)胞參數(shù)的生物區(qū)間。新生兒性別、分娩方式與胎齡是影響臍血血細(xì)胞參數(shù)的重要因素。

【關(guān)鍵詞】臍血；生物區(qū)間

【中圖分類號】R722 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】ISSN.2095-6681.2018.6..02

【Abstract】Objective To build the reference ranges of umbilical cord blood cell parameters among healthy newborns， to investigate the effects of sex， gestational age，mode of delivery and mother age on umbilical cord blood cell counting.Methods Umbilical cord blood samples of 2280 nowborns were collected from January 2016 to December 2016 in Linyi Maternity and Childrens Hospital.24 parameters were tested by an automated hematologic analyzer（Beckman DXH800）.The reference ranges were built with mean and standard deviation or percentile.Mann-Whitney U were used to compare the difference between two groups.Results 2280 umbilical cord blood were enrolled in this study and the reference value of 24 parameters were built. Sex of newborns，the mode of delivery， gestational age had an effect the reference range.The maternal age had no effect on umbilical cord blood cell parameters.Conclusion 24 reference values of umbilical cord blood cell parameters were built for newborns of South Shandong Province.Newborn sex， the mode of delivery，gestational age influenced umbilical cord blood cell parameters. But maternal age had no effect on it.

【Key Word】Umbilical cord blood； biological interval

1 簡 介

胎兒娩出后，及時(shí)進(jìn)行臍帶結(jié)扎并離斷，將殘留在臍帶內(nèi)以及胎盤近胎兒側(cè)血管內(nèi)的血液收集，可作為新生兒最早的血液標(biāo)本，臍帶血在新生兒諸多常見疾病中起到良好的預(yù)測作用，因而近年來被科研工作者廣泛重視。對新生兒來說，順利進(jìn)行靜脈穿刺并采集足夠多的標(biāo)本是一件非常困難的事，對健康狀況較差的患兒或早產(chǎn)兒來說更是如此。采血對新生兒的健康產(chǎn)生影響，發(fā)生血栓栓塞、動(dòng)脈痙攣甚至局部壞死等[1]。而臍血為剛出生的新生兒的血液檢測提供了可替代的選擇[2]。

臍血全血細(xì)胞計(jì)數(shù)是最為廣泛應(yīng)用于評估新生兒臨床狀況的實(shí)驗(yàn)室檢查之一?？蓪θ頎顩r進(jìn)行初步的評估，有利于疾病的診斷和鑒別診斷?？梢詾樾律鷥杭膊〉脑缙谠\斷提供及時(shí)有效、創(chuàng)傷性小的檢查方式。臍帶血全血細(xì)胞分析的各個(gè)檢測指標(biāo)往往會(huì)因?yàn)樵袐D和嬰兒的生理狀態(tài)不同而發(fā)生變化。因此建立一個(gè)全面而準(zhǔn)確的生物參考區(qū)間是合理利用臍血全血細(xì)胞計(jì)數(shù)對新生兒狀況進(jìn)行評估的前提。因此建立本地區(qū)本實(shí)驗(yàn)室臍血全血細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的生物參考區(qū)間具有重要的臨床意義。

2 方法與材料

2.1 臍血采集

2.1.1 研究對象的選擇

選擇在2016年1月～2016年12月在臨沂市婦婦兒童醫(yī)院出生的健康新生兒共2280例，產(chǎn)婦年齡22～45歲。

2.1.2 臍血采集

采用臍靜脈穿刺法，采集前先準(zhǔn)備含EDTA-K2抗凝劑的BD公司生產(chǎn)的抗凝管一支，放在無菌臺，待新生兒娩出后，在距離臍輪約5～8 cm處用止血鉗夾住臍帶的兩端，于兩鉗之間剪斷臍帶，兩分鐘內(nèi)在胎盤的一端選擇臍靜脈，消毒后用采血針向著胎盤最粗臍靜脈的方向穿刺，約采集2 mL的臍帶血，注入含有EDTA-K2抗凝劑的試管中，立即顛倒混勻5～8次，1小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。肉眼觀察標(biāo)本是否有凝塊、溶血等標(biāo)本不合格的現(xiàn)象，剔除不合格的標(biāo)本。于2小時(shí)內(nèi)完成血細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類。

2.2 臍血血細(xì)胞檢測

2.2.1 檢測儀器與試劑

用Beckman公司生產(chǎn)的DXH800全血?jiǎng)友?xì)胞分析儀進(jìn)行血液常規(guī)檢測，試劑為該公司配套產(chǎn)品。利用上述試劑與儀器對臍血進(jìn)行血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)，并自動(dòng)進(jìn)行白細(xì)胞分類，完全按照儀器與試劑生產(chǎn)廠家的操作說明進(jìn)行。

2.2.2 檢測項(xiàng)目

白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞百分比、單核細(xì)胞百分比、中性粒細(xì)胞百分比、嗜酸粒細(xì)胞百分比、嗜堿粒細(xì)胞百分比、淋巴細(xì)胞絕對值、單核細(xì)胞絕對值、中性粒細(xì)胞絕對值、嗜酸粒細(xì)胞絕對值、嗜堿粒細(xì)胞絕對值、紅細(xì)胞、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞平均體積、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量、紅細(xì)胞體積分布寬度、有核紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板、血小板分布寬度、血小板壓積、大血小板比例共24個(gè)指標(biāo)。

2.3 判斷生物區(qū)間的建立是否需要分組

按新生兒性別將標(biāo)本分為男性組和女性組；按分娩方式將標(biāo)本分為剖宮產(chǎn)組和經(jīng)陰分娩組；按出生時(shí)新生兒的胎齡，將標(biāo)本分為早產(chǎn)、足月、過期產(chǎn)三組。按產(chǎn)婦年齡將標(biāo)本分為≥35歲和<35歲組。統(tǒng)計(jì)分析各組之間臍帶血全血細(xì)胞分析24項(xiàng)指標(biāo)是否有顯著差異。有顯著差異的項(xiàng)目分別建立生物參考區(qū)間，無顯著差異的項(xiàng)目則不再進(jìn)行分組，建立一個(gè)通用的生物參考區(qū)間。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

檢測數(shù)據(jù)中是否有離群值，對各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析。如果服從正態(tài)分布，則各項(xiàng)指標(biāo)的參考值范圍用均值與標(biāo)準(zhǔn)差來進(jìn)行估計(jì)，雙側(cè)采用x±1.96s確定參考區(qū)間，單側(cè)則采用x±1.64s。如果為偏態(tài)分布，則用百分位數(shù)法，雙側(cè)采用P2.5-P97.5。單側(cè)則采用小于P5或大于P95。

3 結(jié) 果

3.1 男性新生兒與女性新生兒臍血血細(xì)胞參數(shù)的比較

根據(jù)新生兒性別，將所有標(biāo)本分為男、女兩組。對臍血全血細(xì)胞分析各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行分析，其中紅細(xì)胞（P=0.005）、血紅蛋白（P=0.002）、白細(xì)胞（P=0.011）、血小板（P=0.021）、血小板壓積（P=0.032）在男女新生兒之間具有顯著性差異，其他項(xiàng)目之間沒有顯著性差異。

3.2 分娩方式對臍血全血細(xì)胞分析各項(xiàng)參數(shù)的影響

根據(jù)分娩方式的不同，臍血被分為經(jīng)陰分娩組與剖宮產(chǎn)組，將臍血全血細(xì)胞分析各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行分析，其中紅細(xì)胞（P=0.009）、血紅蛋白（P<0.001）、紅細(xì)胞壓積（P<0.001）、有核紅細(xì)胞（P<0.001）、血小板（P=0.009）在經(jīng)陰分娩組與剖宮產(chǎn)組之間具有顯著性差異，其他項(xiàng)目之間沒有顯著性差異。

3.3 不同胎齡新生兒臍血全血細(xì)胞分析比較表

根據(jù)分娩胎齡的不同，將臍血標(biāo)本分為早產(chǎn)組與足月產(chǎn)組和過期產(chǎn)組，對臍血全血細(xì)胞分析各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行分析，其中紅細(xì)胞（P=0.020）、血紅蛋白（P=0.030）、紅細(xì)胞壓積（P=0.041）、紅細(xì)胞平均體積（P=0.001）、有核紅細(xì)胞（P=0.032）、網(wǎng)織紅細(xì)胞（P=0.011）、血小板（P=0.031）、血小板壓積（P=0.035）在三組之間具有顯著性差異，其他項(xiàng)目之間沒有顯著性差異。

4 討 論

臍血對于剛出生的新生兒來說，是理想的實(shí)驗(yàn)室檢查的標(biāo)本來源。它不僅能反映胎兒造血系統(tǒng)的狀況，也能反映新生兒在圍生期的狀況，如圍生期窒息，胎糞污染、絨毛膜羊膜炎等[4]。臍血全血細(xì)胞分析與諸多因素有關(guān)，以往的研究表明，新生兒在宮內(nèi)發(fā)生的情況，如宮內(nèi)窒息、感染、新生兒溶血均會(huì)影響全血細(xì)胞分析的結(jié)果。有研究表明，胎兒的分娩方式、新生兒體重、胎盤娩出方式均可影響臍血采集質(zhì)和量。宮內(nèi)感染時(shí)，新生兒臍血與正常新生兒的白細(xì)胞等參數(shù)有顯著差異[5]。臍血與成人或兒童期的血液標(biāo)本有很大不同，白細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞、白蛋白、免疫球蛋白、尿素氮等都存在顯著差異[6]，因此不能用成人的血細(xì)胞檢測的生物參考區(qū)間來評估新生兒的臍血標(biāo)本。臍血與兒童期血液標(biāo)本也存在很大差異[7]。因此，需要單獨(dú)建立臍血的生物參考區(qū)間，才能在臨床上進(jìn)行更好的應(yīng)用。

Yu Hsun Chang等研究發(fā)現(xiàn)，新生兒性別對臍帶血有核紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、MCHC的影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[8]。Lee等[4]進(jìn)行的研究中，性別對臍帶血中嗜堿性粒細(xì)胞百分比和有核紅細(xì)胞比例有明顯影響。我們的研究發(fā)現(xiàn)除紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、血小板壓積與性別有關(guān)外，血紅蛋白濃度也與性別有關(guān)，但MCV、MCH、MCHC與性別無關(guān)。

Lee等進(jìn)行的研究中，分娩方式對單核細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞有一定的影響[4]。而Yu-Hsun Chang等進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn)，剖腹產(chǎn)影響臍血中紅細(xì)胞、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積、和血小板計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及部分白細(xì)胞分類結(jié)果，但對MCV、MCH、MCHC沒有顯著影響[8]。在我們的研究中，剖腹產(chǎn)的新生兒臍血中紅細(xì)胞、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積、有核紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)都較經(jīng)陰分娩的新生兒低。

毛維玉等研究了孕20-24周的臍靜脈穿刺標(biāo)本的白細(xì)胞、紅細(xì)胞等血細(xì)胞參數(shù)，與成人相比，具有顯著性差異[11]。我們的研究中，早產(chǎn)兒與足月兒及過期產(chǎn)的新生兒相比，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積增高，而MCV，有核紅細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板、血小板壓積有所下降。

參考文獻(xiàn)

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