熱應(yīng)激條件下添加中草藥渣對(duì)獺兔生產(chǎn)性能、血液生化及免疫功能的影響

李艷軍， 溫旭杰，2， 代發(fā)文*， 高 來(lái)， 葉應(yīng)建， 霍小東*

（1.北京大偉嘉生物技術(shù)股份有限公司，北京通州 101105；2.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山西太谷 030801）

近年來(lái)，大量研究表明，中草藥渣作為畜禽飼料原料，在畜禽日糧中應(yīng)用獲得較好的飼喂效果,一方面可作為非常規(guī)飼料源，降低飼養(yǎng)成本，另一方面藥渣中存留一定活性物質(zhì)，具有促生長(zhǎng)、保健和抗應(yīng)激作用（王向民，2008；耿春銀，2007）。 但中草藥渣在獺兔方面的研究報(bào)道較少。因此，本試驗(yàn)在飼料中添加清瘟敗毒中草藥渣，研究其對(duì)熱應(yīng)激條件下生長(zhǎng)獺兔生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)和免疫力的影響,為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)中草藥渣飼料資源提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 淸瘟敗毒中草藥渣是制備清瘟敗毒口服液（由梔子 、黃連、牡丹皮、黃芩、赤芍、玄參、知母、連翹、桔梗、甘草、淡竹葉等組成）后的殘?jiān)＝?jīng)測(cè)定，藥渣中含粗蛋白質(zhì)14.1%、粗脂肪1.7%、粗纖維15.8%、酸性洗滌纖維31.0%、中性洗滌纖維67.7%、鈣1.7%、磷0.3%。

1.2 試驗(yàn)日糧 試驗(yàn)日糧參照美國(guó)（NRC，1977）和獺兔營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（谷子林，2002），利用當(dāng)?shù)刂饕暳显显O(shè)計(jì)飼料配方并壓制成Φ4.5×2.5 mm的顆粒?；A(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物及設(shè)計(jì) 試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用 42 日齡體重相近[平均體重（650±50）g]、健康無(wú)病的生長(zhǎng)兔80只,隨機(jī)分成4組（即：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四組），每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)4只。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組為試驗(yàn)組，分別用1%、2%、3% 的清瘟敗毒中草藥渣等量替代基礎(chǔ)日糧中的麩皮。Ⅳ組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)日糧；預(yù)試期7 d，預(yù)試期結(jié)束后進(jìn)行空腹稱(chēng)重，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，差異不顯著 （P＞0.05），正式期為42 d，自由飲水和采食。試驗(yàn)結(jié)束前3 d天采集各組料樣，將每個(gè)重復(fù)3 d收集的糞便烘干混勻，粉碎，過(guò)40目篩備用。于試驗(yàn)結(jié)束次日早晨空腹采血，每組隨機(jī)抽取3只，每只采血5 mL，3000 r/min離心10 min得血清，分裝到小離心管中，-20℃保存，待測(cè)。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.4 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn) 試驗(yàn)于夏季高溫季節(jié)（2017年7月15日～9月3日）在河北保定俊英兔場(chǎng)進(jìn)行，每天分別于 6∶00、14∶00 和 22∶00 測(cè)定兔舍環(huán)境溫度，其平均值為當(dāng)日兔舍溫度。

1.5 指標(biāo)測(cè)定 粗蛋白質(zhì)(CP)采用凱氏定氮法；粗脂肪(EE)采用醚浸提法；酸性洗滌纖維（ADF）和中性洗滌纖維（NDF）采用 Van Soest（1963）方法；鈣（Ca）采用高錳酸鉀滴定法；磷（P）采用鉬黃比色法；尿素氮（BUN）、膽固醇（CHO）采用酶法；乳酸脫氫酶（LDH）、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、肌酸激酶（CK）、堿性磷酸酶（ALP）采用酶動(dòng)力學(xué)速率法；總蛋白（TP）采用雙縮脲法;白蛋白（ALB）采用溴甲酚綠法；三碘甲腺原氨酸（T3）、四碘甲腺原氨酸（T4）和皮質(zhì)醇（Cortisol）采用放射免疫分析方法測(cè)定。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS(13.0)軟件進(jìn)行ONEWAY ANOVA方差分析,用Duncan氏檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)的多重比較。

2 結(jié)果

2.1 添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔生產(chǎn)性能的影響 由表2可知，1～2周,采食量方面，Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組的分別高于Ⅳ組0.03%、0.01%、0.04%，差異均不顯著（P＞0.05）；在日增重方面，Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組的分別高于Ⅳ組0.10%、0.09%、0.02%，差異均不顯著（P＞0.05）；在料重比方面，Ⅰ組和Ⅱ組低于Ⅳ組0.07%、0.08% ，Ⅲ組高于Ⅳ組0.02%，差異均不顯著（P ＞ 0.05）。

3～4周,采食量方面，Ⅰ組和Ⅱ組分別高于Ⅳ組 0.01%、0.02% ，差異均不顯著（P＞0.05）；在日增重方面，Ⅱ組高于Ⅳ組0.03%，差異不顯著（P＞0.05）；在料重比方面，Ⅰ組高于Ⅳ組0.01%，差異不顯著（P＞0.05）。

5～6周，采食量方面，Ⅱ組高于Ⅳ組0.02%，差異不顯著（P＞0.05）；在日增重方面，Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組的分別高于Ⅳ組0.02%、0.09%、0.05%，差異均不顯著（P＞0.05）；在料重比方面，Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組分別低于Ⅳ組0.01%、0.06%、0.05%，差異均不顯著（P ＞ 0.05）。

全期，采食量方面，Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組分別高于Ⅳ組0.01%、0.02%、0.01%，差異均不顯著 （P＞0.05）；在日增重方面，Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組的分別高于Ⅳ組 0.04%（P ＞ 0.05）、0.07%（P ＜ 0.05）、0.02%（P＞0.05）；在料重比方面，Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組低于Ⅳ組0.03%、0.05%、0.02% ，差異均不顯著（P ＞ 0.05）。

2.2 添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔血液生化指標(biāo)的影響 由表3可見(jiàn)，Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組與Ⅳ組相比，CHO 分別降低了 19.62%、22.43%、33.64%,各組間差異不顯著 （P＞0.05）；BUN分別降低了9.82%、10.50%16.37%,各組間差異不顯著 （P＞0.05）；CK 分別降低了 11.66%、11.64%、12.00%，Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組與Ⅳ組相比差異顯著（P＜0.05）；隨著清瘟敗毒中草藥渣量的增加，血清中LDH、ALP、AST和ALT分別呈現(xiàn)降低趨勢(shì)。LDP分別降低了 7.05%、1.39%、20.86%；ALP分別降低了2.48%、5.58%、24.28%；AST分別降低了 3.23%、5.38%、13.50%；ALT分別降低了 17.87% 、20.60%、33.80%，各組間差異均不顯著（P ＞ 0.05）。與Ⅳ相比,TP分別提高了0.32%、0.76%、5.58%，ALB趨于穩(wěn)定，球蛋白的含量表現(xiàn)為先降低后增高的趨勢(shì)，Ⅰ組降低了2.63%，Ⅱ組、Ⅲ組分別增高了 0.57%、10.80%，差異均不顯著（P ＞ 0.05），白球比例表現(xiàn)為先增高后降低趨勢(shì)，Ⅰ組、Ⅱ組分別增高了5.88%、3.14%，Ⅲ組降低了8.24%，各組間差異不顯著（P ＞ 0.05）。

表2 添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔生產(chǎn)性能的影響

表3 添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔血液生化指標(biāo)的影響

2.3 添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔免疫指標(biāo)的影響 表4顯示，Ⅱ、Ⅲ組lgA含量比Ⅳ組提高了9.00%、18.01%，各組間差異均不顯著（P＞0.05）；lgM含量分別比對(duì)照組提高了1.47%、2.35%、5.28%，各組間差異不顯著（P＞0.05）；lgG含量分別提高了12.11%、13.15%、14.53%。差異均顯著（P＜0.05）。添加清瘟敗毒中草藥渣，提高了血液中l(wèi)gG含量，表明添加清瘟敗毒中草藥渣有增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用。

表4 添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔免疫指標(biāo)的影響g/L

2.4 添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔T3、T4、皮質(zhì)醇的影響 表5顯示，Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組與Ⅳ組相比，T3含量分別提高了 28.13%（P ＞ 0.05）、30.47%（P ＞0.05）、48.44%（P ＜ 0.05）；T4含量分別提高了5.96%、7.24%、13.53%，各組間差異不顯著 （P＞0.05）。Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組與Ⅳ組相比皮質(zhì)醇含量分別降低了 13.37%（P ＞ 0.05）、44.01%（P ＜ 0.05）、50.77%（P＜0.05）。表明添加清瘟敗毒中草藥渣，有提高血清中T3、T4組的趨勢(shì)，其中Ⅲ組差異達(dá)到顯著水平（P＜0.05）；而皮質(zhì)醇含量有明顯的降低趨勢(shì)，其中Ⅱ組和Ⅲ組達(dá)到差異顯著水平（P＜0.05），表明添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔有抗熱應(yīng)激作用。

表5 添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔 T3、T4、皮質(zhì)醇的影響ng/mL

3 討論

3.1 添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔生產(chǎn)性能的影響 試驗(yàn)期間，兔舍最高平均溫度為32℃，最低平均溫度為28℃，平均溫度為30℃。熱應(yīng)激時(shí)兔采食中樞的興奮受到抑制，維持需要的能量降低，采食量下降（宋智娟，2006），導(dǎo)致兔的生產(chǎn)性能降低。藥渣含有的活性成分具有解肌清熱、涼血止血、生津解毒、清熱瀉火等作用。全期，Ⅱ組日增重達(dá)到了差異顯著水平（P＜0.05）。表明添加清瘟敗毒中草藥渣能有效地緩解生長(zhǎng)兔熱應(yīng)激，提高生長(zhǎng)兔生產(chǎn)性能的作用。

3.2 添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔血液生化指標(biāo)的影響 血液生化指標(biāo)是衡量兔生理健康狀況的重要指標(biāo)之一，對(duì)于科學(xué)研究有重要的意義。本試驗(yàn)獺兔血清中CHO有一定程度的降低，表明藥渣具有降低CHO的作用。BUN是衡量腎功能主要指標(biāo)，也是衡量動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)利用效率的指標(biāo)。當(dāng)腎功能損害時(shí)，BUN的濃度升高。本試驗(yàn)中血清中BUN的濃度均有不同程度的下降，表明清瘟敗毒中草藥渣不會(huì)造成腎損害，同時(shí)對(duì)于提高蛋白質(zhì)的利用率有一定作用。CK是熱應(yīng)激的重要指標(biāo)，試驗(yàn)組血清中CK有明顯的下降趨勢(shì) （P＜0.05），表明添加清瘟敗毒中草藥渣能有效的緩解生長(zhǎng)兔的熱應(yīng)激作用。各試驗(yàn)組中ALP（P＞0.05）、LDH（P ＞ 0.05）、AST（P ＞ 0.05）、ALT（P ＞ 0.05）含量均有不同程度的降低，表明清瘟敗毒中草藥渣能有效的改善獺兔的心臟、肝臟、腎臟系統(tǒng)。TP、球蛋白、ALB的含量與機(jī)體蛋白質(zhì)的吸收和代謝狀況有關(guān),同時(shí)也可反映機(jī)體的免疫水平。ALB具有參與物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、維持血漿滲透壓、合成組織蛋白的作用。血清球蛋白是抗體蛋白，可參與機(jī)體的免疫。本試驗(yàn)中獺兔血清中TP、ALB、球蛋白含量雖差異不顯著（P＞0.05），但有一定程度的提高，表明清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔有效利用體內(nèi)蛋白質(zhì),加強(qiáng)蛋白質(zhì)的沉積，維持機(jī)體免疫機(jī)能有一定的作用。

3.3 添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔免疫指標(biāo)的影響 血清中的IgA、IgM和IgG是機(jī)體主要免疫球蛋白,具有抗菌、抗病毒、抗毒素作用（吳德峰，2006），熱應(yīng)激時(shí),機(jī)體免疫抑制與抗體水平下降（Franci，1996）。 試驗(yàn)組 IgA、IgM 和 IgG 均有不同程度的提高，其中IgG含量達(dá)到差異顯著水平（P＜0.05）。清瘟敗毒中草藥渣含有生物堿、多糖、鞣質(zhì)、甙類(lèi)等生物活性物質(zhì),能夠加速生長(zhǎng)兔新陳代謝、刺激造血機(jī)能、促進(jìn)紅細(xì)胞再生，從而對(duì)機(jī)體的免疫器官和免疫細(xì)胞進(jìn)行調(diào)節(jié),提高機(jī)體的免疫力。

3.4 添加清瘟敗毒中草藥渣對(duì)生長(zhǎng)兔T3、T4、皮質(zhì)醇的影響 生長(zhǎng)兔熱應(yīng)激時(shí)，可促進(jìn)皮質(zhì)醇的分泌,抑制甲狀腺素分泌。由于皮質(zhì)醇能加速機(jī)體分解反應(yīng),抑制蛋白質(zhì)合成，導(dǎo)致生產(chǎn)性能降低。試驗(yàn)組中T3含量有明顯的提高，其中Ⅲ組中T3含量達(dá)到差異顯著水平（P＜0.05）；試驗(yàn)組中皮質(zhì)醇含量有明顯的降低，其中Ⅱ組和Ⅲ組中皮質(zhì)醇含量達(dá)到差異顯著水平（P＜0.05）。表明添加清瘟敗毒中草藥渣，能降低血清中皮質(zhì)醇含量，提高血清中T3、T4含量，有效地緩解生長(zhǎng)兔熱應(yīng)激。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加清瘟敗毒中草藥渣，能提高熱應(yīng)激條件下生長(zhǎng)兔的生產(chǎn)性能和機(jī)體免疫力，并建議最適添加量為2%～3%。

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