成都市58650名婦女宮頸人乳頭狀瘤病毒HPV6/11，HPV16/18感染狀況研究

張俊英,楊叔哲，鄧 耀，賀葦軍

(成都市婦女兒童中心醫(yī)院 檢驗(yàn)科，四川 成都610031)

人類(lèi)乳頭狀瘤病毒(HPV)是一種小分子雙鏈DNA病毒，對(duì)人皮膚、黏膜有高度親嗜性。目前，已經(jīng)鑒定出的HPV約有150種亞型，根據(jù)其致病性大小分為低危型和高危型。低危型HPV6和HPV11致尖銳濕疣最主要的基因型，尖銳濕疣治愈后容易復(fù)發(fā)，隨著病程遷延，復(fù)發(fā)次數(shù)增多[1]，尖銳濕疣患者也可能導(dǎo)致癌變；高危型中的HPV16、18在世界范圍內(nèi)始終是引起宮頸癌變的最重要的亞型。HPV16在感染率和致病率上均占有絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，被認(rèn)為具有完全的細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能和致瘤性[2]；雖然HPV18在國(guó)內(nèi)的檢出率不高，但HPV18感染者并發(fā)高危亞型HPV的持續(xù)或反復(fù)感染已被確認(rèn)為宮頸癌發(fā)生的最主要原因。宮頸癌是威脅到女性生命的重要?dú)⑹?，篩查和疫苗是防治宮頸癌的主要手段[3]。我國(guó)對(duì)于宮頸癌的篩查缺乏完全統(tǒng)一的方案，疫苗在我國(guó)大陸地區(qū)還沒(méi)有普及，本文力求從大量的患者中尋找威脅女性健康的重要兩類(lèi)基因型HPV(6/11)和HPV(16/18)的感染情況、感染模式及其年齡特點(diǎn)，旨對(duì)宮頸癌的篩查和以后相關(guān)疫苗的使用起到一定的作用。本文標(biāo)本來(lái)自于2012年6月至2016年5月成都地區(qū)58650例女性宮頸脫落細(xì)胞，采用亞能生物公司試劑盒檢測(cè)出人乳頭瘤病毒基因分型23型，其中HPV 18種高危亞型和5種低危亞型，本文重點(diǎn)研究其中的HPV(6/11)和HPV(16/18)，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1一般資料同期來(lái)我院做孕前檢查或常規(guī)體檢女性，年齡13-81歲，平均年齡34.62歲，按年齡分為<20歲、20-29歲、30-39歲、40-49歲、50-59歲、>60歲共6個(gè)組。

1.2儀器與試劑儀器包括Hema9600梯度基因擴(kuò)增儀、YN-H16恒溫雜交儀，采用亞能生物公司人乳頭瘤病毒基因分型(23型)檢測(cè)試劑盒(PCR-反向點(diǎn)雜交法)。

1.3方法嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用EXCEI軟件處理數(shù)據(jù)。組間率的比較采用χ2檢驗(yàn)分析數(shù)據(jù)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.158650例宮頸脫落細(xì)胞HPV總體感染情況

58650例標(biāo)本中感染HPV12399例數(shù)，總感染率21.14%，其中 HPV6、11、16、18四種基因型占陽(yáng)性感染率的26.33%；18種高危型HPV排例前八位的依次是52、16、58、53、51、68、56、18，HPV16和HPV18順序分別為第二位和第八位，感染率分別為9.86%和3.93%；五種低危型HPV感染的順序?yàn)?1、43、42、6、11,HPV6和HPV11位居第四位和第五位，感染率分別3.10%和1.92%。

2.258650例宮頸脫落細(xì)胞低危型HPV(6/11)和高危型HPV(16/18)檢出結(jié)果。

從表1中看出12399例感染標(biāo)本中，四種基因型中高危型HPV(16/18)的陽(yáng)性率為73.32%(2394/3265)，HPV16占HPV(16/18)的71.51%(1712/2394)；四種基因型中低危型HPV(6/11)陽(yáng)性率為26.68%(871/3265)，而HPV6占HPV(6/11)的61.77%(538/871)。

表1 低危型HPV(6/11)和高危型HPV(16/18)檢出結(jié)果(n=12399)

2.3不同年齡段四種基因型感染情況

從表2 中可得出HPV6在<30歲年齡組高于其他年齡組(P均<0.01)，HPV18在<20歲年齡組高于其他年齡組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其他年齡感染率差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)； HPV11和HPV16感染率隨年齡曲線(xiàn)呈U型分布，具有兩個(gè)感染高峰年齡段是<20歲和≥60歲(P均<0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 不同年齡組HPV(6/11)和HPV(16/18)檢出結(jié)果

*P<0.01

圖1 不同年齡組HPV(6/11)、(16/18)感染率

2.4HPV(6/11)和HPV(16/18)的感染模式

從表3得知HPV(6/11)一重感染率為43.97%(383/871)，二重感染率為28.13%(245/871)，三重感染率16.65%(145/871)；HPV(16/18)一重感染率為52.30%(1252/2394)，二重感染率為28.49%(682/2394)，三重感染率11.49%(275/2394)。一重感染率和多重感染幾乎50%，二重感染占多重感染的一半，多重感染隨合并感染的型別數(shù)增加逐漸下降。

表3 HPV(6/11)和HPV(16/18)的感染模式

2.5多重感染出現(xiàn)頻率最多的前五位基因型

從表4可算出HPV6、HPV11、HPV16、HPV18的合并多重感染頻率最多前五位基因型比重分別是85.16%、84.83%、71.04%、85.93%；HPV6和HPV18的前五位基因型順序皆是52、16、58、51、81，HPV11前五位依次是16、81、52、59、58，HPV16前五位依次是52、58、81、53、51， HPV16最常與HPV52、HPV58構(gòu)成多重感染,HPV18和HPV6最常與HPV52、HPV16構(gòu)成多重感染,HPV11最常與HPV16和HPV81構(gòu)成多重感染；多重感染中最常見(jiàn)的基因型HPV(6/11)是52，16，58，81，51，59，33；而HPV(16/18)是52，16，58，81，51，53，33。

表4 HPV(6/11)和HPV(16/18)的多重感染模式

3 討論

四種基因型感染率與新疆[4]HPV16、HPV18檢出率為10.9%和1.7%相比， HPV(16/18)檢出率均比之高與無(wú)錫市[5]HPV6、HPV11、HPV16、HPV18檢出率分別為2.43%、1.35%、13.99%、6.74%相比，HPV(6/11)比之高，HPV(16/18)基本一致，這說(shuō)明四種基因型有地區(qū)差異。

四種基因型感染率隨年齡有差異，HPV6、HPV18感染高峰分別為<30歲和<20歲(P<0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)意義。HPV11、HPV16感染隨年齡呈U型分布，<20歲和≥60歲是感染的兩個(gè)高峰期(P<0.01)。HPV18感染高峰年齡段為<20歲與新疆[4]研究結(jié)果一致，HPV11和HPV16感染高峰年齡段與Lazcano[6]報(bào)道一致，在普通人群中，年齡小于25歲(16.7%)和大于65歲的女性(23.10%)HPV的檢出率最高。<20歲HPV較高的感染率與性行為活躍相關(guān)，中老年人較高的感染率認(rèn)為與機(jī)體免疫力下降有關(guān)[7]，我們應(yīng)該抓住每個(gè)年齡段HPV感染的特征，加強(qiáng)對(duì)女性預(yù)防HPV知識(shí)的培訓(xùn)和篩查，降低HPV感染率。

HPV(6/11)和HPV(16/18)一重感染率和多重感染幾乎50%，二重感染占多重感染的一半，說(shuō)明HPV(6/11)和HPV(16/18)都以單獨(dú)感染為主，二重感染也占很高比例。多重感染中最常見(jiàn)的基因型HPV(6/11)是52，16，58，81，51，59，33；而HPV(16/18)是52，16，58，81，51，53，33，說(shuō)明52，16，58，81，51，59，33，53與四種基因型高頻率合并多重感染，這種模式在宮頸病變的發(fā)生發(fā)展中起著不可忽視的作用。關(guān)于多重感染的原因，Keith等[8]指出由于HPV不同亞型編碼外殼蛋白的基因變異較大，不同亞型HPV間基本無(wú)交叉保護(hù)性抗體，易造成HPV多重感染或多次感染。多重感染是否增加宮頸癌的發(fā)生率，目前說(shuō)法不一。Teresa S M[9]宮頸病變嚴(yán)重程度與HPV多重感染不相關(guān)，與HPV亞型密切相關(guān)，2/3的CIN患者的HPV16陽(yáng)性；但也有研究[10]認(rèn)為，多重HPV感染是宮頸上皮內(nèi)低級(jí)別病變向高級(jí)別病變和宮頸癌發(fā)展的重要危險(xiǎn)因素；趙愛(ài)華[11]研究指出從正常組織到CINII的不同病變中，多型別感染比例隨病變級(jí)別上升逐漸增加，多型別感染對(duì)宮頸病變以及宮頸癌的發(fā)展起促進(jìn)作用；Sang A L等[12]研究顯示，單一HPV感染可使宮頸癌患病風(fēng)險(xiǎn)增加19.9倍，而多重HPV感染使其風(fēng)險(xiǎn)增加31.8倍；樓微華[13]指出HPV16單一感染者中發(fā)生宮頸高級(jí)別病變的比例最高，HPV18多重感染者中發(fā)生宮頸高級(jí)別病變的比例顯著高于HPV18單一感染者，這可能提示HPV18亞型在CINⅠ-Ⅲ進(jìn)展階段感染的病程短暫且進(jìn)展較快，F(xiàn)ragoso等[14]指出HPV18相關(guān)的宮頸癌通常以整合的形式存在于宿主細(xì)胞中，具有高E6/E7表達(dá)性，能迅速活化細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路和促進(jìn)相關(guān)癌基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)。盡管HPV6、HPV11在低危型中感染率最低但嚴(yán)重引起尖銳濕疣，HPV18感染率位居高危第八位但嚴(yán)重引起宮頸癌，可能多種基因型相互促進(jìn)起了一定的作用。

關(guān)于HPV6、HPV11與生殖道尖銳濕疣，有很多的研究報(bào)道。劉紅杏[15]研究指出生殖道尖銳濕疣主要與HPV6、11、42、43、44等低危型有關(guān)，少數(shù)為高危型或混合感染，混合感染以HPV6+11型為主,其次是HPV11+16型；LIU XG[16]研究指出在近100種HPV亞型中有30余種與尖銳濕疣相關(guān)，其中HPV6、11、16型和HPV18型4個(gè)亞型是引起尖銳濕疣的常見(jiàn)亞型；周權(quán)[17]指出尖銳濕疣患病率有2個(gè)高峰：20-24歲和35-39歲，并指出處于性活躍期的女性是尖銳濕疣的高危人群。

我國(guó)是宮頸癌高發(fā)國(guó)家，近年來(lái)年輕的宮頸癌患者有明顯上升趨勢(shì)。有性行為的女性80%曾感染HPV病毒，但大多數(shù)人可自然清除病毒，只有HPV持續(xù)性感染才是導(dǎo)致宮頸上皮惡性轉(zhuǎn)化的最重要的危險(xiǎn)因素[18]。HPV高危亞型持續(xù)感染由宮頸上皮內(nèi)瘤變發(fā)展為浸潤(rùn)癌可長(zhǎng)達(dá)8-12年[19]。HPV基因型似乎是感染持續(xù)及進(jìn)展最重要的決定因素，其中HPV16亞型致癌風(fēng)險(xiǎn)最高，約占全球?qū)m頸癌病例的55%-60%，其次是HPV18亞型，約占10%-15%，另有其他12個(gè)亞型與其余病例相關(guān)。劉北陸[20]調(diào)查研究HPV16，18感染女性3年轉(zhuǎn)陰率≥36.4%，HPV16，18感染的轉(zhuǎn)陰率隨時(shí)間推移逐漸下降，而轉(zhuǎn)陰性后沒(méi)有再轉(zhuǎn)陽(yáng)的情況發(fā)生。早篩查，及時(shí)有效的干預(yù)治療將對(duì)宮頸癌的防治具有重要意義。

人乳頭瘤病毒疫苗的成功研制和運(yùn)用，開(kāi)啟了人類(lèi)一級(jí)預(yù)防宮頸癌的新的篇章，美國(guó)食品和藥物管理局研究出預(yù)防宮頸癌為主的高危型HPV三種疫苗，第一種二價(jià)疫苗，包括HPV16 和HPV18型;第二種四價(jià)疫苗，包括HPV16、HPV18、HPV6、HPV11亞型，第三種九價(jià)疫苗四種高危HPV基因亞型外還覆蓋了另5種高風(fēng)險(xiǎn)基因亞型，由于不同國(guó)域、地區(qū)，HPV流行基因型不同，研究出適合我國(guó)的疫苗是當(dāng)務(wù)之急。

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