烏腺金絲桃不同采收期不同部位中金絲桃苷含量變化研究

肖鳳艷 高峰 吉成維 張克勤

【摘 ?要】 本試驗采用HPLC法測定烏腺金絲桃不同采收期不同部位中金絲桃苷的含量。結(jié)果表明，金絲桃苷含量由低到高依次分布為：果實<花<嫩莖<葉;葉、嫩莖、果實中金絲桃苷含量最高的時期為7月份，花中為8月份。烏腺金絲桃的最佳采收部位是葉，最佳采收期為7月下旬。

【關(guān)鍵詞】 烏腺金絲桃;金絲桃苷;采收期;部位;含量

Study on the Content of Hyperin in Different Parts and Harvest Period of Hypericum attenuatum Choisy

Xiao Fengyan1 ? Gao Feng2 ? Ji Chengwei1 ? Zhang Keqin1

[Abstract] In order to investigate the content of the hyperin in different parts and harvest period of the Hypericum attenuatum Choisy，the experiment assay the content changes of different parts and different harvest time of Hypericum attenuatum Choisy by the method of high performance liquid chromatography （HPLC） . The results showed that the contents of the hyperin were as follows： fruits< flower < tender stems < leaves. the highest content of leaves is in July， flowers in August， tender stem in July， and fruit in July， too. So the best part is leaves and the best harvest time of Hypericum attenuatum Choisy is July.

[Keywords] hypericum attenuatum choisy; hyperin; harvest time; position;content

烏腺金絲桃是藤黃科植物，能鎮(zhèn)痛、止血、通乳 [1]，研究表明[2-3] 其金絲桃苷等黃酮類化合物有很好的治療心臟病和風(fēng)濕炎癥的作用。當(dāng)藥用植物所處的外界環(huán)境條件發(fā)生變化時，其體內(nèi)的次生代謝活動就會受到影響，從而使次生代謝成分含量因部位和時期的不同而發(fā)生變化。因此確定次生代謝產(chǎn)物金絲桃苷的含量變化規(guī)律，對資源人高效利用尤為重要。

1 ?材料

1.1 ?材料與試劑

烏腺金絲桃各部位采自于吉林省吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院試驗樣地，烘干粉碎備用。金絲桃苷標(biāo)準(zhǔn)品（成都瑞芬思生物科技有限公司，含量≥98%）;乙腈（色譜級）、甲醇、磷酸。

1.2 ?儀器

高效液相色譜儀、電熱鼓風(fēng)干燥箱、電子分析天平、超聲提取儀、循環(huán)水式多用真空泵。

2 ?方法

2.1 ?供試品溶液的制備

取1g粉末，置具塞錐形瓶中，用50mL甲醇在45℃下超聲處理40min，冷卻，定容，離心，上清液即為供試品溶液。

2.2 ?對照品儲備液的制備

精密稱取金絲桃苷標(biāo)準(zhǔn)品1.9mg，用甲醇制成濃度為190?g/mL的溶液。取對照品母液用甲醇稀釋得濃度為47.5?g/mL對照品儲備液。

2.3 ?色譜條件

在參考文獻(xiàn)[4-6]基礎(chǔ)上，經(jīng)試驗摸索，最終確定色譜條件：C18柱（4.6mm×150mm，5μm），流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液（16∶84），檢測波長360nm，流速1.0mL/min，柱溫40℃，理論板數(shù)按金絲桃苷≥3000。

2.4 ?標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密吸取對照品儲備液2μl、4μl、8μl、12μl、16μl，測定峰面積，以對照品進(jìn)樣量（?g）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性方程為：Y=2814900.77X+20496.79（0.095～0.76ug），R2=0.9998。

2.5 ?金絲桃苷含量的測定

精密量取提取液，依據(jù)情況進(jìn)行適當(dāng)稀釋（使峰面積處在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)），測峰面積，計算金絲桃苷的含量。

3 ?結(jié)果與分析

烏腺金絲桃不同采收期不同部位中金絲桃苷含量測定結(jié)果見表1。方差分析表明差異顯著。嫩莖、葉、果中金絲桃苷含量隨著時間的推移均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，嫩莖、葉、果中均在7月22日含量最高，分別為2.2651、7.7478、0.8569mg/g;花中金絲桃苷含量呈上升趨勢，8月15日含量最高為2.8639mg/g。這與長柱金絲桃中金絲桃苷的含量變化基本一致，含量最高時期為7月;與野馬追中金絲桃苷含量最高時期（9月）不一致[7-8]。烏腺金絲桃的不同采收部位中所含的金絲桃苷含量差異明顯，含量分布由低到高依次為：果<花<嫩莖 <葉，與貫葉連翹中不同部位中金絲桃苷的含量變化基本一致，葉中的金絲桃苷含量普遍較高[9]。

4 ?結(jié)論

不同采收期不同部位對烏腺金絲桃中金絲桃苷的含量變化有顯著的影響，金絲桃苷含量由低到高依次分布為：果實<花<嫩莖<葉;葉、嫩莖、果實中金絲桃苷含量最高的時期為7月份，花中為8月份。烏腺金絲桃的最佳采收部位是葉，最佳采收期為7月下旬。

參考文獻(xiàn)：

[1] 周繇.中國長白山植物資源志[M]. 北京：中國林業(yè)出版社，2010： 304.

[2] 高彥宇. 烏腺金絲桃對缺血性心臟病模型動物的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)理的研究[D]. 黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，2008.

[3] 董建勇，賈忠建. 趕山鞭中黃酮類化學(xué)成分研究[J].中國藥學(xué)雜志，2005，（12）：897-899.

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[5] 中國藥典委員會.中國藥典[S].北京： 中國醫(yī)藥科技出版社，2010：215.

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[8] 肖晶，王鋼力，林瑞超. HPLC法測定野馬追藥材及其制劑中金絲桃苷的含量[J].中草藥，2005，36（1）：60-1.

[9] 李卓恒，孟德勝，盧來春等.（第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所藥劑科，重慶 40042）[J].中國藥房，2012，43（23）：4082-4083.