適宜桉木屑栽培的猴頭菇優(yōu)良菌株篩選

王燦琴，韋仕巖，吳圣進，覃曉娟，陳雪鳳，吳小建

(廣西農業(yè)科學院微生物研究所，廣西 南寧 530007)

【研究意義】廣西桉樹人工林面積、生長量、蓄積量均占全國首位[1]。桉樹加工產業(yè)在促進廣西經濟發(fā)展的同時，也產生了大量的剩余物，如桉木屑、桉樹皮等，其中桉木屑占絕大多數(shù)。傳統(tǒng)的處理剩余物的方式以堆放丟棄或焚燒為主，產生的滲出物和氣體對土壤、水體和空氣均造成嚴重污染。近年來，隨著食用菌栽培產業(yè)的快速發(fā)展，對栽培原料的需求也相應增加，棉籽殼、雜木屑、桑枝屑、甘蔗渣等傳統(tǒng)栽培原料產量有限、用途較廣、銷量增長，導致食用菌產業(yè)面臨原料短缺、價格上漲的問題。因此，尋找新型食用菌栽培原料已逐漸成為行業(yè)發(fā)展的新方向[2]。將桉木屑資源化利用于食用菌栽培，既可以延長桉樹木材加工的產業(yè)鏈，又可以減輕其對環(huán)境的污染，同時也緩解了食用菌產業(yè)存在的原料短缺問題?！厩叭搜芯窟M展】長期以來，人們認為桉樹芳香油含量豐富，不適于栽培食用菌，因此在食用菌栽培產業(yè)上應用桉樹原料的研究仍較少。吳繼林等[3]研究發(fā)現(xiàn)，桉木屑可以用于栽培香菇、鮑魚菇、茶樹菇、杏鮑菇等食用菌，且栽培出的食用菌在口感、外觀、營養(yǎng)成分等方面與使用木屑栽培的并無差別。夏鳳娜等[4]2011年以桉樹加工剩余物(皮屑、桿屑、皮桿混合屑)為基質，栽培靈芝、秀珍菇、刺芹側耳和金針菇4種食用菌，結果表明，靈芝、秀珍菇、刺芹側耳能正常生長及出菇，而金針菇菌絲生長弱，不能出菇。王燦琴等[5]2016年以桉木屑為主料，對秀珍菇的栽培配方進行了研究，發(fā)現(xiàn)以桉木屑為主料，配以桑枝或甘蔗渣，可以顯著降低秀珍菇栽培的原料成本，提高經濟效益。【本研究切入點】目前桉木屑栽培食用菌尚處于可行性研究階段，對適于桉木屑栽培的優(yōu)良菌株篩選還有待深入研究。猴頭菇是一種珍貴的藥食相用菌，富含多糖、蛋白質等營養(yǎng)成分[6]，不僅營養(yǎng)豐富，味道鮮美，還具有抗?jié)兒脱装Y，增強免疫力，抗腫瘤，降血糖等作用[7]，深受消費者歡迎，是近年來廣西發(fā)展較快的食用菌品種之一。猴頭菇的不同菌株間產量和商品性狀差異較大，即使在傳統(tǒng)栽培原料雜木屑、棉籽殼培養(yǎng)料上，菌株間的產量、抗雜能力、子實體外觀品質等性狀也存在明顯差別[8]?！緮M解決的關鍵問題】為降低栽培成本，提高經濟效益，以桉木屑為主要栽培原料，對不同來源的10個猴頭菇菌株進行了栽培比較試驗，篩選出適合廣西栽培的猴頭菇優(yōu)良菌株。

1 材料與方法

1.1 參試菌株

從國內食用菌有關單位引進及本單位分離保存的10個猴頭菇菌株作為參試菌株(表1)。

表1 參試猴頭菇菌株來源

1.2 參試培養(yǎng)基

1.2.1 母種培養(yǎng)基 PDA加富培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g、蛋白胨3 g，用麥麩10 g煮水濾汁定溶至1000 mL，pH自然。

1.2.2 原種和栽培種培養(yǎng)基 棉籽殼40 %、雜木屑40 %、麥麩15 %、石灰2 %、石膏1 %、白糖1 %、過磷酸鈣1 %，含水量65 %。

1.2.3 出菇培養(yǎng)基 桉木屑55 %、棉籽殼10 %、桑枝屑10 %、花生殼5 %、木薯酒廢渣5 %、麥麩10 %、石灰2 %、石膏1 %、過磷酸鈣1 %、白糖1 %，含水量65 %。

1.3 試驗方法

1.3.1 菌種制作 根據母種、原種、栽培種三級制種方法制作菌種，配制好培養(yǎng)基后，母種培養(yǎng)基滅菌溫度為126 ℃，時間30 min。原種、栽培種培養(yǎng)基滅菌溫度為126 ℃，時間2.5 h，滅菌結束后冷卻接種并靜置培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25～28 ℃。

1.3.2 菌袋制作 提前5 d將桉木屑、棉籽殼、桑枝屑和花生殼浸泡預濕，再按配方將其余成分補齊，攪拌均勻，調節(jié)培養(yǎng)基含水量至65 %左右，pH值8.0～8.5。將配好的培養(yǎng)基分裝入聚乙烯筒料袋(23 cm×43 cm)，每袋裝干料1.0 kg，100 ℃常壓滅菌10～12 h。冷卻至60 ℃左右移入接種室進行接種，接種按無菌操作要求進行。每個菌株接種50個菌袋，試驗重復3次。

1.3.3 菌袋菌絲培養(yǎng) 接種完成后，將菌包轉移至培養(yǎng)室進行菌絲培養(yǎng)，期間培養(yǎng)室溫度應控制在25～28 ℃，濕度控制在65 %～70 %，并進行避光暗培養(yǎng)。在菌絲生長期間定期觀察記錄菌絲生長情況并測量菌絲生長速度(直線生長測量法)，標記菌絲長勢(用“+”號表示菌絲密度和長勢強弱)，發(fā)現(xiàn)污染的菌袋要及時移除。

1.3.4 出菇管理及采收 出菇管理可參照王賀祥等2008[9]年的記錄方法進行。

1.3.5 菌株農藝性狀記錄 記錄各菌株的原基形成時間、形態(tài)特征、轉潮時間等。

1.3.6 產量統(tǒng)計 統(tǒng)計各菌株前3潮鮮菇的產量，計算其生物學效率，并進行差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 猴頭菇菌株菌絲體在菌袋培養(yǎng)基上生長狀況比較

參試猴頭菇菌株的菌絲生長狀況見表2。其中菌絲長速最快的是野生猴頭菌株，其日平均生長速度達6.38 mm/d，除了與常山猴頭菌株的菌絲長速存在顯著差異以外，與其它菌株之間均存在極顯著差異。菌絲生長速度較慢的是猴頭4903和魯猴1號，兩者之間差異不顯著，但與其它菌株的生長速度均存在極顯著差異，其中猴頭4903菌株的長速最慢，僅為4.12 mm/d。

表2 參試猴頭菇菌絲體在出菇菌包培養(yǎng)基上生長狀況

注: +++表示菌絲長勢強，粗壯、潔白、整齊; ++表示菌絲長勢較強，粗壯、潔白，但生長不夠整齊。

Notes: + + + means that mycelium is strong, thick, white, neat; + + means that mycelium is strong, thick, white, but not neat.

圖1 以桉木屑為栽培主料的不同猴頭菇菌株菌絲生長情況比較Fig.1 Comparison of mycelium growth of different Hericium erinaceus strains in the culture medium with eucalyptus sawdust as the main material

圖2為空載工況下列車主被動頭車的車輪抬升量，圖中G代表剛性輪，T代表彈性輪。曲線軌道上，剛性輪和彈性輪最大車輪抬升量分別為26.32 mm和22.19 mm，剛性輪已經非常接近于脫軌的邊緣。直線軌道上，剛性輪最大車輪抬升量為16.67 mm，而彈性輪為14.28 mm。與剛性輪相比，彈性輪的車輪抬升量在曲線軌道和直線軌道上分別降低了15.69%和14.34%。

10個參試菌株的污染率均在10 %以下，其中常山猴頭和猴頭6號菌株的抗雜能力最強，污染率為0；猴頭4903和猴頭4916菌株的抗雜能力最差，污染率最高，達8 %；猴頭T3、猴頭王、魯猴1號，3個菌株的抗雜能力較差，污染率達6 %。

在菌絲長勢方面，野生猴頭、常山猴頭、猴頭6號、魯猴1號的菌絲長勢均濃密、潔白、粗壯、有力，其余菌株則長勢稍差，生長不夠整齊(圖1)。

2.2 參試猴頭菇菌株子實體農藝性狀比較

參試猴頭菇菌株子實體農藝性狀見表3，從表中可以看出，10個參試菌株子實體的顏色均為白色。除常山猴頭、猴頭T3和魯猴1號3個菌株的子實體的刺較短以外，其它菌株的子實體均為長或較長刺。猴頭BJ和猴頭4903為耐高溫菌株，而猴頭T3和猴頭6號高溫偏高時呈花椰型；常山猴頭、猴頭4903和猴頭BJ的子實體個體較大，其中常山猴頭菌株的單個平均重量最重，達88.41 g。而猴頭T3菌株的子實體個體最小，其單個平均重量最輕，僅為58.69 g，其余菌株的個體均為中等大小。10個參試菌株從接種到原基形成需24～36 d，其中了出現(xiàn)原基最早的是猴頭4903，接種后僅24 d便開始現(xiàn)蕾?，F(xiàn)原基最晚的是野生猴頭，接種后36 d才開始現(xiàn)蕾(圖2)。

表3 參試猴頭菇菌株子實體農藝性狀

圖2 不同猴頭菇菌株的子實體農藝性狀比較Fig.2 Comparison of agronomic characters of subentities of different strains of Hericium erinaceus

2.3 參試猴頭菇菌株潮次產量比較

參試猴頭菇菌株前3潮產量結果見表4。從表中可以看出，在桉木屑培養(yǎng)基中常山猴頭的產量最高，前3潮的平均產量達276.19 g/袋，生物學轉化率達69.05 %，在0.05和0.01水平上，除與猴頭BJ相比差異不顯著外，與其它菌株的產量均存在顯著差異。猴頭BJ產量次之，前3潮平均產量為245.10 g/袋，生物學轉化率為61.28 %。產量最低的是野生猴頭，前3潮平均產量僅為150.04 g/袋，生物學轉化率僅為37.51 %。除了與猴頭6號無顯著差異外，與其它菌株之間存在顯著或極顯著差異(圖3)。

3 討 論

用桉木屑作為栽培主料，對10個猴頭菇菌株進行出菇篩選試驗，結果表明不同菌株的菌絲生長情況、出菇性狀等表現(xiàn)各異。從生物學轉化率方面看，李碧瓊等[7]用雜木屑和棉籽殼為栽培主料篩選猴頭菇的優(yōu)良菌株，篩選出產量最高的菌株生物學轉化率為66.3 %，而本試驗中產量最高的菌株的轉化率達69.05 %接近，說明桉木屑完全可以作為猴頭菇的栽培主料。

研究結果表明，常山猴頭菌株的綜合性狀表現(xiàn)最好，產量及生物學效率最高，且單個均重最重，污染率最低，菌絲長勢良好，長速僅次于野生猴頭菌株居第2位；其次表現(xiàn)較好的是猴頭BJ菌株，雖然菌絲長速較慢，居第6位。但產量和生物學轉化率、單個均重均僅次于常山猴頭菌株居第2位，且兩者的生物學效率與其它菌株間均存在顯著或極顯著差異，但兩者間差異不顯著。野生猴頭菇菌株的菌絲生長速度最快，長勢和菇型也表現(xiàn)良好，但生物學轉化率最低，產量最低。這種現(xiàn)象一方面表明產量與長速無直接關系，另一方面說明野生猴頭菇菌株具有一些潛在的優(yōu)良性狀，然而，可能由于馴化時間太短，在產量上表現(xiàn)一般，可進行深入的馴化篩選； 猴頭4903菌株的菌絲長速最慢，長勢也相對較弱，產量較低，生物學轉化率低僅為47.13 %，污染率高，但其出菇和轉潮最快，且耐高溫，高溫環(huán)境下其它菌株不能正常出菇甚至出現(xiàn)花椰菜型的畸形菇，但4903菌株仍然可以正常出菇，且菇型表現(xiàn)良好；除以上4個菌株外，其它6個菌株表現(xiàn)一般。

表4 參試猴頭菇菌株潮次產量比較

圖3 不同猴頭菇菌株以桉木屑為主料的出菇比較試驗Fig.3 Comparison fruiting test of Hericium erinaceus strains in the culture medium with eucalyptus wood chips as the main material

4 結 論

本研究結果表明，常山猴頭和猴頭BJ兩個菌株在以桉木屑作為栽培主料的出菇比較試驗中表現(xiàn)優(yōu)良，可作為廣西猴頭菇的主栽培品種進一步在全區(qū)示范推廣；而野生猴頭和猴頭4903兩個菌株各性狀的優(yōu)缺點并存，且非常明顯，可作為育種材料對其優(yōu)良性狀進一步挖掘利用。

參考文獻：

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