自貢地區(qū)無償獻(xiàn)血者HIV感染初篩與確證試驗(yàn)結(jié)果分析

張品品，劉付奎，何 剛，李 江，喬鳳伶*

（1.自貢市中心血站，四川 自貢 643000；2.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 618000）

輸血安全一直是各級(jí)血站和用血單位密切關(guān)注的焦點(diǎn)問題[1]。經(jīng)輸血傳播疾病的預(yù)防和控制更是其重中之重，尤其是防止經(jīng)輸血傳播人類免疫缺陷病毒（HIV）更是各級(jí)血站面臨的重要難題[2-4]。對(duì)獻(xiàn)血人群進(jìn)行HIV篩查，盡量縮短“窗口期”，提高血液安全性，對(duì)預(yù)防輸血傳播HIV具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

近年來，隨著血源管理強(qiáng)度增大，對(duì)輸血傳播病原體檢測(cè)技術(shù)的改進(jìn)，以及新方法、新試劑的應(yīng)用，發(fā)達(dá)國家經(jīng)輸血傳播病毒的感染率顯著降低。但是，在國內(nèi)因各地供血機(jī)構(gòu)發(fā)展極不平衡，輸血傳播病原體檢測(cè)技術(shù)水平差異較大。為此，本研究就自貢市中心血站2011年1月～2016年12月無償獻(xiàn)血者HIV感染率及HIV檢測(cè)陽性標(biāo)本進(jìn)行分析，為更好的利用HIV ELISA檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行獻(xiàn)血者的結(jié)果反饋及咨詢工作提供客觀依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源

自貢市中心血站2011年1月1日～2016年12月31日無償獻(xiàn)血者，共185673人，所有獻(xiàn)血人群均符合中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《獻(xiàn)血者健康檢查要求》（GB18467-2011），年齡18～55周歲，男：女=1.68：1。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)

①全部獻(xiàn)血人群的年齡應(yīng)是18～55歲；②全部獻(xiàn)血人群中，男性人群的體重應(yīng)＞50 kg，女性人群的體重應(yīng)＞45 kg；③全部獻(xiàn)血人群的收縮壓是90～150 mmHg，舒張壓是60～90 mmHg，脈壓差應(yīng)＞30 mmHg；④全部獻(xiàn)血人群的脈搏是60～100次/min；⑤全部獻(xiàn)血人群的體溫要處在正常范圍中；⑥全部獻(xiàn)血人群的皮膚沒有產(chǎn)生黃染，沒有產(chǎn)生創(chuàng)面感染，沒有罹患大范圍的皮膚病癥，淺表的淋巴結(jié)沒有過于腫大；⑦全部獻(xiàn)血人群的五官?zèng)]有罹患重型病癥；⑧全部獻(xiàn)血人群的心臟與肺部等各大臟器均正常；⑨全部獻(xiàn)血人群的腹部均處在正常狀態(tài)，沒有產(chǎn)生腫塊，沒有壓痛，且肝脾沒有過于腫大。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)

①排除在15d中進(jìn)行了拔牙與其余小型手術(shù)的獻(xiàn)血人群；②排除處于分娩期、月經(jīng)期與哺乳期中的女性獻(xiàn)血人群；③排除罹患了流感與急性腸胃炎等病癥的患者；④排除罹患了急性泌尿道感染與肺炎等病癥的獻(xiàn)血人群；⑤排除罹患了某類重型傳染病癥的獻(xiàn)血人群；⑥排除罹患了傷寒病癥的獻(xiàn)血人群；⑦排除罹患了布氏桿菌與瘧疾等病癥的獻(xiàn)血人群。

1.3 儀器

STAR全自動(dòng)加樣器、FAME全自動(dòng)酶免分析儀器（瑞士 Hamilton公司）。使用兩種ELISA試劑檢測(cè)HIV抗體（試劑批號(hào)：2004086606、20051208、A56NA、A45MB等），英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司和荷蘭生物梅里埃有限公司生產(chǎn)。2011年1月1日至今，使用法國伯樂生產(chǎn)的ELISA HIV 試劑檢測(cè)HIV抗體（試劑批號(hào)：0H0162、9L0133、2A0210、2L0239）。1NCU/mL抗-HIV質(zhì)控血清由康徹斯坦生物科技有限公司提供（批號(hào)：201306001、201208002、201501001等）。

1.4 方法

所有獻(xiàn)血者的血液標(biāo)本均根據(jù)《血站技術(shù)操作規(guī)程》，同時(shí)用一種進(jìn)口和一種國產(chǎn)試劑進(jìn)行抗-HIV ELISA檢測(cè)，2種試劑檢測(cè)結(jié)果均無反應(yīng)則判為合格，若其中任1種試劑有反應(yīng)，則按照《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》、《全國艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》及試劑盒使用說明書要求進(jìn)行雙孔復(fù)查，若其中任何一孔仍呈反應(yīng)性結(jié)果，則判為有反應(yīng)性。若檢ELISA測(cè)結(jié)果呈現(xiàn)為進(jìn)口或國產(chǎn)試劑雙孔檢測(cè)有反應(yīng)性或單一試劑雙孔復(fù)檢有反應(yīng)性者，則按要求及時(shí)將標(biāo)本送至本市疾病預(yù)防控制中心艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行免疫印跡法（WB）確認(rèn)，結(jié)果以檢測(cè)報(bào)告單為依據(jù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料以例（n），百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用x2檢驗(yàn)；計(jì)量資料應(yīng)用“±s”描述，采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 自貢地區(qū)無償獻(xiàn)血人群抗-HIV初篩及確證檢測(cè)結(jié)果

自貢地區(qū)2011年～2016年間146 983人次的無償獻(xiàn)血標(biāo)本中，ELISA方法初篩檢測(cè)抗-HIV，其中288例至少1種試劑初篩試驗(yàn)呈陽性反應(yīng)，初篩檢測(cè)陽性率15.51/萬人。ELISA法初篩反應(yīng)呈雙陽性者共84例。本中心將任一初篩檢測(cè)陽性標(biāo)本視為不合格樣本，高度懷疑為HIV感染，并相應(yīng)樣本送至本市疾病預(yù)防控制中心艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行WB法確認(rèn)，共確證HIV陽性獻(xiàn)血員83例，確證陽性率5.65/萬人，不確定人數(shù)29例，不確定率1.97/萬人，本地區(qū)近年HIV感染率為5.65/萬人。各年抗HIV初篩及確認(rèn)檢測(cè)情況見表1和圖1。

表1 自貢地區(qū)2011～2016年無償獻(xiàn)血人群抗-HIV初篩與確證陽性結(jié)果

圖1 自貢地區(qū)2011～2016年無償獻(xiàn)血人群抗-HIV初篩及確認(rèn)情況

2.2 自貢地區(qū)無償獻(xiàn)血人群抗-HIV初篩及確證檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性分析

初篩陽性標(biāo)本中呈ELISA反應(yīng)雙陽性標(biāo)本共84例，其中83例被確證為HIV陽性，占98.8%，僅有1例確證結(jié)果呈不確定反應(yīng)，占1.2%，結(jié)果提示抗HIV檢測(cè)ELISA法雙陽反應(yīng)結(jié)果與確證陽性結(jié)果高度吻合，見表2。我們將ELISA方法篩查單陽性反應(yīng)結(jié)果和雙陽性反應(yīng)結(jié)果與確證檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示“國產(chǎn)-單陽”、“進(jìn)口-單陽”結(jié)果與確證結(jié)果間相關(guān)性比較結(jié)果分別為：r=0.067，P=0.851和r=0.2，P=0.573；結(jié)果提示初篩抗-HIV ELISA法檢測(cè)“單陽”結(jié)果與WB確證結(jié)果間吻合度較差。而“ELISA雙陽”與WB確證結(jié)果間相關(guān)性分析r=1，P=0.000，兩者之間呈高度相關(guān)性。確證試驗(yàn)與“EILSA雙陽、單陽、進(jìn)口-單陽、國產(chǎn)-單陽”之間的吻合性評(píng)價(jià)，“ELISA雙陽”與WB確證結(jié)果比較的kappa=0.000，亦呈現(xiàn)出“ELISA雙陽”與WB確證結(jié)果之間的高度吻合性。

表2 自貢地區(qū)無償獻(xiàn)血人群HIV初篩陽性結(jié)果及確證結(jié)果比較

3 討 論

自貢地區(qū)2011年～2016年間的無償獻(xiàn)人群，ELISA方法初篩檢測(cè)抗-HIV陽性率15.51/萬人，2014年以后抗-HIV初篩陽性率略有降低趨勢(shì)，可能與我們中心在提高ELISA試劑檢測(cè)水平的同時(shí)加強(qiáng)無償獻(xiàn)血人群招募技巧、采供血人員培訓(xùn)教育等相關(guān)管理有關(guān)。本次調(diào)查顯示，近6年146 983人次的無償獻(xiàn)血者中，經(jīng)本市疾病預(yù)防控制中心艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)HIV陽性獻(xiàn)血員共83例，平均確認(rèn)率5.65/萬人。本地區(qū)HIV確認(rèn)陽性率明顯高于全國獻(xiàn)血人群HIV確認(rèn)陽性率0.018%。提示本地區(qū)血液安全仍面臨著相當(dāng)嚴(yán)峻的局面。

本調(diào)查結(jié)果顯示，初篩呈ELISA反應(yīng)雙陽性標(biāo)本共84例，其中83例被確證為HIV陽性，占98.8%，提示抗HIV檢測(cè)ELISA法雙陽反應(yīng)結(jié)果與確證陽性結(jié)果高度吻合。我們將不同方法篩查單陽性反應(yīng)結(jié)果和雙陽性反應(yīng)結(jié)果與確證檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果提示“ELISA雙陽”與WB確證結(jié)果間相關(guān)性分析r=1，P=0.000，兩者之間呈高度相關(guān)性。確證試驗(yàn)與“EILSA雙陽、單陽、進(jìn)口-單陽、國產(chǎn)-單陽”間的吻合性評(píng)價(jià)，亦呈現(xiàn)出“ELISA雙陽”與WB確證結(jié)果間的高度吻合性，而初篩抗-HIV ELISA法檢測(cè)“單陽”結(jié)果與WB確證結(jié)果間吻合度較差。此結(jié)果與國內(nèi)同行報(bào)道結(jié)果相似。

鑒于當(dāng)前采供血機(jī)構(gòu)面臨的嚴(yán)峻的血液安全形勢(shì)，我中心采取積極的應(yīng)對(duì)措施阻斷HIV及其他血源傳播的病原體。首先，加強(qiáng)獻(xiàn)血者招募環(huán)節(jié)的管理、艾滋病相關(guān)知識(shí)的宣傳，同時(shí)對(duì)獻(xiàn)血不合格人群，尤其是存在高危行為、職業(yè)的人群盡量勸其放棄獻(xiàn)血；其次，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)及質(zhì)量管理，積極改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法以確保血液安全。

綜上所述，抗-HIV初篩“國產(chǎn)、進(jìn)口”ELIS試劑雙陽性結(jié)果與確證陽性實(shí)驗(yàn)高度吻合。為確保血液安全，我們從獻(xiàn)血源頭、各級(jí)管理等方面著手，為有效保障臨床用血安全保駕護(hù)航。

[1] 蘇武錦,陳 悅,黃 茜.南寧地區(qū)2006～2015年無償獻(xiàn)血者HIV陽性的分布特征[J].重慶醫(yī)學(xué),2016,45(29):4110-4112.

[2] 唐衛(wèi)國,廖紅文,段恒英,等.重慶市無償獻(xiàn)血人群HIV感染情況的調(diào)查分析[J].重慶醫(yī)學(xué),2011,40(23):2343-2345.

[3] 郭 菲,臧 艷,郭慧軍,等.上海市楊浦區(qū)無償獻(xiàn)血人群HIV感染狀況調(diào)查及分析[J].中國輸血雜志,2015,28(8):884-885.