原發(fā)性干燥綜合征相關間質性肺病患者血清ROS水平變化及意義

白淑榮　沈　樂　吳　源　段學波　楊　朝　楊　靜　王　艷

(寧夏回族自治區(qū)人民醫(yī)院　西北民族大學第一附屬醫(yī)院呼吸內科，寧夏　銀川　750002)

1寧夏回族自治區(qū)人民醫(yī)院西北民族大學第一附屬醫(yī)院心血管內科

原發(fā)性干燥綜合征(PSS)為自身免疫性疾病中最常見的類型，主要累及淚腺、唾液腺等外分泌腺體，容易出現肺臟受累，表現為間質性肺疾病(ILD)，PSS-ILD早期呼吸癥狀不明顯，一旦發(fā)生肺纖維化，病情逆轉困難，是導致該病高致殘率和高死亡率的主要原因〔1〕，目前對PSS-ILD的發(fā)病過程尚未完全闡明?；钚匝?ROS)是機體內重要的信號轉導分子，在肺間質纖維化的發(fā)病及形成過程中有重要作用，有研究顯示博來霉素誘導的肺纖維化模型大鼠的肺組織內ROS水平明顯升高，而用抗氧化藥物N乙酰半胱氨酸干預能明顯降低ROS水平，減輕肺上皮細胞損傷及肺纖維化程度〔2〕。前期研究結果顯示〔3〕核轉錄因子(NF)-κB及轉化生長因子(TGF)-β1可能參與了PSS-ILD的發(fā)病過程。本研究擬分析血清ROS水平與PSS-ILD臨床指標的相關性。

1　資料與方法

1.1臨床資料選擇2015年6月至2016年12月醫(yī)院收治的94例PSS患者，其中單純PSS組46例〔單純涎腺和(或)淚腺受累PSS患者〕，PSS-ILD組48例(僅伴肺間質損害PSS患者)，均符合2010年中華醫(yī)學會風濕病學分會制定的干燥綜合征診斷及治療指南〔4〕，均為初治患者；排除標準：既往肺結核患者，接受過免疫抑制劑和糖皮質激素等藥物治療，不符合診斷標準者，慢性支氣管炎、肺氣腫、支氣管哮喘、支氣管擴張、肺部腫瘤等呼吸系統(tǒng)疾病患者，慢性心、肝、腎功能不全者，長期吸煙者。94例患者均為女性，年齡60～70〔平均(65.4±3.2)〕歲，單純PSS組平均年齡(64.7±3.3)歲，PSS-ILD組平均年齡(66.0±3.5)歲。另外選取醫(yī)院同期健康體檢者50人為對照組，平均年齡(65.7±3.4)歲。各組基本臨床資料差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法患者入院后次日采集5 ml肘靜脈血液置于5 ml分離膠-促凝管中(操作過程中避免溶血)，室溫靜置30 min，3 000 r/min離心15 min，將上層血清裝入1.5 ml EP管中，每個EP管中分裝200 μl血清，做好標記后，行酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定。對照組：采集符合入組條件的健康志愿者5 ml肘靜脈血液，置于5 ml分離膠-促凝管中，后續(xù)處理同上。ELISA測定血清中ROS水平，結果以3次均值計算，與450 nm處測定吸光度計算ROS水平，并分析血清ROS水平與PSS-ILD臨床指標的相關性。記錄指標包括：免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM，C反應蛋白(CRP)，紅細胞沉降率(ESR)，補體C3、C4，類風濕因子(RF)，用力肺活量(FVC)，一口氣彌散量(TLCOSB)，動脈氧分壓PaO2，二氧化碳分壓(PaCO2)。

1.3統(tǒng)計學方法應用SPSS19.0軟件進行單因素方差分析、LSD檢驗、t檢驗和Pearson相關分析。

2　結　果

2.1單純PSS組及PSS-ILD組臨床指標比較PSS-ILD組血清CRP、FVC、TLCOSB、PaO2水平〔(14.5±4.7)mg/L、(1.45±0.95)L、(7.11±1.12)mmol·min-1·kPa-1、(81.21±5.87)mmHg〕明顯高于單純PSS組〔(7.8±3.6)mg/L、(0.96±0.35)L、(5.61±1.34)mmol·min-1·kPa-1、(55.12±4.19)mmHg，P<0.05〕，其余指標差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1　單純PSS組及PSS-ILD組臨床指標比較

與單純PSS組比較：1)P<0.05

2.2各組血清ROS水平比較單純PSS組及PSS-ILD組血清ROS水平〔(768.59±117.89.69)pg/ml，(1 136.89±174.35) pg/ml〕均顯著高于對照組〔(420.56±87.69) pg/ml，P<0.05〕，PSS-ILD組顯著高于單純PSS組(P<0.05)。

2.3血清ROS水平與臨床指標的相關性分析單純PSS組及PSS-ILD組血清ROS水平與CRP水平呈正相關(r=0.44,0.55,P<0.05)；PSS-ILD組血清ROS與PaO2、FVC、TLCOB呈負相關(r=-0.54,-0.51,-0.48；均P<0.05)，與其余指標無相關性(P>0.05)。

3　討　論

生理條件機體抗氧化系統(tǒng)與ROS產生保持動態(tài)平衡，病理條件狀態(tài)下，機體抗氧化能力下降，自由基產生過多，導致氧化應激損傷〔5〕。ROS可由細胞正常代謝產生，也可由外源因素誘導產生，生理范圍內ROS在調節(jié)人體的正常生理功能如細胞凋亡、基因表達、信號轉導等方面起重要作用，但當ROS持續(xù)高濃度存在，極易與周圍生物大分子物質產生氧化反應，損害細胞的結構和功能，導致肺纖維化、癲癇、高血壓等發(fā)生〔6，7〕。研究發(fā)現〔8〕，ROS在博來霉素誘導的大鼠中肺組織內水平明顯升高，ROS可能參與了肺纖維化的形成過程，促進肺纖維化的發(fā)展，ROS水平在矽肺患者血清及其肺泡巨噬細胞中明顯增高。研究發(fā)現〔9〕，肺纖維化過程中可能存在ROS通過激活NF-κB途徑上調纖溶酶原激活物抑制劑基因表達，引起特發(fā)性肺間質纖維化患者肺組織中纖溶酶原激活物抑制劑活性增高，抑制纖溶蛋白酶的活性，導致細胞外膠原物質降解不及時，出現細胞外基質沉積，導致肺纖維化發(fā)生，提示ROS在矽肺及特發(fā)性肺間質纖維化等ILD的肺纖維化過程中發(fā)揮重要作用。

本研究結果提示ROS可能在PSS-TLD的發(fā)生發(fā)展中可能起重要作用，血清ROS水平與PSS繼發(fā)的ILD相關。另外，ROS可能與肺間質性炎癥密切相關，且血清ROS水平對于評估PSS患者肺間質嚴重程度有一定參考價值。

目前ROS-NF-κB-TGF-β1信號通路在人PSS-ILD的肺間質病變過程中是否起作用在國內未見報道，NF-κB在炎癥性疾病的病理過程中起信號轉導作用，當被激活后進入胞核中,在受到氧自由基、內毒素及紫外線等刺激時NF-κB可被激活,活化的NF-κB又可誘導細胞因子、生長因子如TGF-β1從而導致一些疾病的發(fā)生，有研究顯示〔10〕ROS可能通過激活NF-κB，活化的NF-κB誘導TGF-β1釋放，進而導致肺間質纖維化的形成，而TGF-β1是一種致纖維化的效應因子，它在組織損傷早期和組織修復期都促進肺纖維化的發(fā)生。本研究結果結合前期研究結果推測ROS-NF-κB-TGF-β1信號通路可能在人PSS-ILD的肺間質病變過程中具有重要作用，關于其具體的作用機制尚有待于深入研究。

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3白淑榮,王艷,楊靜,等.原發(fā)性干燥綜合征伴間質性肺病患者血清NF-κB和TGF-β1水平及其臨床意義的研究〔J〕.重慶醫(yī)學,2016;45(29):4056-8.

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6劉理靜,錢紅,尹輝明，等.中華獼猴桃果仁非飽和脂肪酸通過激活Keap1/Nrf2信號通路增強肺纖維化大鼠抗氧化能力〔J〕.細胞與分子免疫學雜志,2016;32(4):479-83.

7趙立雙,魏中秋,楊方，等.活性氧在轉化生長因子-β1促肺成纖維細胞增殖和膠原合成中的作用〔J〕.中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志,2015;33(1):15-9.

8何艷玲,姚三巧,張林，等.肌醇需求激酶1抑制劑對染矽塵大鼠肺纖維化干預作用研究〔J〕.中國職業(yè)醫(yī)學,2015;42(2):147-52.

9董潤,劉敏,黃驍舾，等.富勒烯C60對博來霉素誘導的小鼠肺纖維化的影響〔J〕.中華醫(yī)學雜志,2017;97(22):1740-4.

10張芮君,何菁.2015年歐洲抗風濕聯(lián)盟關于原發(fā)性干燥綜合征腺外系統(tǒng)累及的專家建議〔J〕.中華風濕病學雜志,2016;20(2):144.