腦卒中后癲癇患者血清腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、S100B和神經(jīng)元特異性烯醇化酶表達及相關(guān)性

張艷麗　楊曉華　臧兆萍　王海鵬　李志茹　李美娜　齊寶奎

(齊齊哈爾醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，黑龍江　齊齊哈爾　161041)

腦卒中包括缺血性腦卒中和出血性腦卒中，腦卒中后癲癇是指腦卒中發(fā)病后繼發(fā)出現(xiàn)的癲癇，目前研究顯示腦梗死后癲癇發(fā)病率隨年齡增加有明顯增長趨勢〔1，2〕。病變形成和進展過程中，血清中相關(guān)蛋白可以出現(xiàn)明顯變化，腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、S100B蛋白(S100B)和神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)是與神經(jīng)細胞生長、損傷和修復相關(guān)的蛋白，其表達量可以在一定條件下提示神經(jīng)系統(tǒng)病變的損傷程度〔3～5〕。本實驗應用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測腦卒中后老年癲癇患者血清中BDNF、S100B和NSE表達特征，分析其臨床意義。

1　資料與方法

1.1臨床資料2016年1～12月齊齊哈爾醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院診斷為腦卒中并繼發(fā)癲癇的老年患者68例為觀察組。納入標準：①經(jīng)磁共振成像確診為腦卒中；②腦卒中后出現(xiàn)2次及以上的癲癇發(fā)作。排除標準：①有神經(jīng)系統(tǒng)手術(shù)史、腦梗死病史及癲癇病史；②嚴重內(nèi)臟器官疾病。其中男39例，女29例，年齡60～88(平均69.7)歲。其中腦梗死28例，腦出血30例，蛛網(wǎng)膜下腔出血10例。同期腦卒中無繼發(fā)癲癇的老年患者30例為對照組，其中男15例，女15例，年齡70～84(平均68.6)歲。同期體檢證實無明顯器質(zhì)性疾病及神經(jīng)系統(tǒng)病史的成年人血清標本30例為正常對照組，其中男15例，女15例，年齡50～62(平均55.3)歲。3組一般資料差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2BDNF、S100B和NSE蛋白的檢測觀察組于確診后清晨抽取空腹靜脈血，對照組于腦卒中復查時(發(fā)病后4～8 w)抽取空腹靜脈血，正常對照組常規(guī)抽取清晨空腹靜脈血，均為3 ml，3 000 r/min離心15 min將血清分清并置于-20℃冰箱中凍存待檢。樣本均于3 w內(nèi)集中進行檢測，BDNF、S100B和NSE的檢測均應用酶聯(lián)免疫吸附實驗，均由同一技師操作，做好質(zhì)控工作，減少人為誤差。

1.3統(tǒng)計學方法應用SAS6.12統(tǒng)計軟件進行t、χ2檢驗，方差分析及線性相關(guān)分析。

2　結(jié)　果

2.13組BDNF、S100B和NSE表達比較BDNF在正常對照組、對照組和觀察組中表達有下降趨勢，S100B和NSE在正常對照組、對照組和觀察組中表達有升高趨勢(P<0.05)。見表1。

2.2BDNF、S100B和NSE表達在觀察組不同臨床特征中的比較觀察組BDNF、S100B和NSE表達量均與病變類型有關(guān)，S100B表達與腦卒中類型有關(guān)。見表2。

表1　3組BDNF、S100B和NSE表達比較

表2　BDNF、S100B和NSE表達在觀察組不同臨床特征中的比較

2.3觀察組BDNF、S100B和NSE相關(guān)性BDNF和NSE表達呈負相關(guān)(r=-0.46，P=0.042 1)，BDNF和S100B、S100B和NSE表達均無明顯相關(guān)性(P>0.05)。

3　討　論

癲癇是大腦神經(jīng)元突發(fā)性異常放電，引起短暫性大腦功能障礙的慢性疾病，繼發(fā)性癲癇多發(fā)生于多種腦部血管病損和代謝異?！?〕。腦卒中是一種嚴重的血液循環(huán)障礙疾病，患者病變常繼發(fā)癲癇，引起并加重患者的腦損害。神經(jīng)系統(tǒng)損傷與血清中相關(guān)蛋白表達失調(diào)有關(guān)系，其繼發(fā)的癲癇也與細胞因子有關(guān)〔7〕。BDNF是與神經(jīng)細胞再生相關(guān)的一種蛋白，由119個氨基酸構(gòu)成，分子量為13 kD，以非共價鍵形式組成。正常情況下中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)細胞及膠質(zhì)細胞均可以有BDNF形成，其常以旁分泌形式分泌，也有自分泌生成的，并與神經(jīng)細胞的順行軸突運輸有關(guān)〔8〕。BDNF在機體中可以通過調(diào)控細胞膜上鈣離子通道蛋白發(fā)揮作用，主要作用是保護神經(jīng)細胞，其機制與BDNF抗自由基損傷及抗氧化有關(guān)。還有觀點認為BDNF可以減少神經(jīng)細胞凋亡的形成〔9〕。S100B在機體中是分子量較小的蛋白，常與鈣離子有關(guān)，正常情況下在神經(jīng)細胞中表達量較低〔10〕。在缺血性腦病、腦血管疾病等病變時，S100B生成增加，其可以促進局部細胞增殖，對神經(jīng)細胞起保護功能，但是其過度表達可以損傷神經(jīng)細胞，不利于病變修復〔11〕。也有研究認為S100B在體內(nèi)有促進神經(jīng)細胞損傷后的級聯(lián)反應作用，可以有效調(diào)控神經(jīng)細胞的活性〔12〕。NSE在體內(nèi)以酶的形式存在，也被認為在2-磷酸甘油轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸時具有限速作用，當神經(jīng)細胞損傷和脫髓鞘病變發(fā)生后，神經(jīng)元中NSE可以進入血清中，其量的大小與神經(jīng)細胞的損傷情況有關(guān)，但是在神經(jīng)元修復期，NSE表達下調(diào)的也較慢，可以在一定時間內(nèi)作為評價神經(jīng)系統(tǒng)損傷的因子〔13〕。近年也有學者將NSE作為一個敏感的反映神經(jīng)元損傷的指標，但是其表達并不特異。有研究認為NSE可以在神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中高表達〔14〕。

本研究結(jié)果提示BDNF、S100B和NSE 3種蛋白異常表達對腦卒中形成有一定促進作用，也對腦卒中后癲癇形成具有明顯作用，癲癇與神經(jīng)細胞異常放電有關(guān)，在此過程中常伴隨著神經(jīng)元修復性改變和神經(jīng)細胞結(jié)構(gòu)的異常，3種蛋白可能在一定程度上對這些改變有提示作用。BDNF、S100B和NSE 3種蛋白表達量檢測可能對觀察病變的恢復及進展有一定意義。蛛網(wǎng)膜下腔出患者形成的癲癇病變可能更重，臨床中應當關(guān)注，并在治療中密切隨診觀察。S100B在病變鑒別中可能也區(qū)別于其他兩個因子而有一定價值。本文提示BDNF和NSE二者在病變形成中具有一定的負向協(xié)同效應，臨床中可以將二者聯(lián)系起來觀察病變的發(fā)展，研究認為BDNF和NSE在神經(jīng)系統(tǒng)損傷中是相互拮抗的因素，其動態(tài)平衡對于觀察病變的進展可能有一定價值〔15，16〕。

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