聯(lián)用血清糖類抗原19-9和人端粒酶RNA基因檢測(cè)法診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變的效果研討

張 娟

（平?jīng)鍪械谌嗣襻t(yī)院檢驗(yàn)科，甘肅 平?jīng)?744000）

血清糖類抗原19-9（CA19-9）和人端粒酶RNA（hT ERC）基因都是反映機(jī)體是否存在腫瘤細(xì)胞的可靠指標(biāo)[1]。對(duì)腫瘤患者進(jìn)行血清CA19-9檢測(cè)和hT ERC基因檢測(cè)，不僅可以確定其體內(nèi)腫瘤的性質(zhì)，還能明確惡性腫瘤細(xì)胞的分化情況及功能，進(jìn)而為制定治療方案、評(píng)估患者的預(yù)后提供參考[2]。本次研究主要探討聯(lián)用血清CA19-9和hT ERC基因檢測(cè)法診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變的效果?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究的對(duì)象是2014年1月至2017年3月期間平?jīng)鍪械谌嗣襻t(yī)院收治的283例宮頸上皮內(nèi)瘤變患者。這些患者的年齡為30～60歲，平均年齡為（42.7±8.7）歲；其孕次為0～4次，平均孕次為（2.1±0.6）次；其產(chǎn)次為0～3次，平均產(chǎn)次為（1.2±0.2）次。本次研究對(duì)象的納入標(biāo)準(zhǔn)是：1）其既往無(wú)子宮切除手術(shù)史或其他的宮頸手術(shù)史；2）經(jīng)病理檢查確診患有宮頸上皮內(nèi)瘤變；3）既往無(wú)放療史或化療史；4）未處于妊娠期或哺乳期；5）自愿參加本次研究。

1.2 檢測(cè)方法

對(duì)這些患者均進(jìn)行血清CA19-9檢測(cè)和hT ERC基因檢測(cè)。進(jìn)行血清CA19-9檢測(cè)的方法是：在患者空腹的狀態(tài)下抽取其3 ml的靜脈血。使用離心機(jī)對(duì)抽取的血液標(biāo)本進(jìn)行離心處理，以獲得血清。使用全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀對(duì)血清標(biāo)本進(jìn)行CA19-9水平的測(cè)定。檢測(cè)儀器和試劑均由美國(guó)Abbott公司提供。評(píng)定此檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)是：血清CA19-9的水平＞37 kU/L。使用熒光原位雜交法進(jìn)行hT ERC基因檢測(cè)。具體的檢測(cè)方法是：在患者的宮頸處采集細(xì)胞樣本，將細(xì)胞樣本放到載玻片上。用甲醛對(duì)細(xì)胞樣本進(jìn)行固定、脫水及變性處理。在避光的環(huán)境中配置探針混合液。將此混合液滴在細(xì)胞樣本上。24 h后，對(duì)細(xì)胞樣本進(jìn)行漂洗、脫水及風(fēng)干處理。使用DAPI對(duì)細(xì)胞樣本進(jìn)行復(fù)染后，蓋上蓋玻片，并孵育20 min。在熒光顯微鏡下觀察間期細(xì)胞核中的雜交信號(hào)。在正常細(xì)胞的單個(gè)間期細(xì)胞核中，紅色信號(hào)和綠色信號(hào)各有2個(gè)。在hT ERC基因出現(xiàn)擴(kuò)增細(xì)胞的單個(gè)間期細(xì)胞核中，紅色信號(hào)＞2個(gè)，綠色信號(hào)≥2個(gè)。在每個(gè)細(xì)胞樣本中選取100個(gè)細(xì)胞，選取其中清晰、可辨、孤立、雜交信號(hào)明顯的間期細(xì)胞核，據(jù)此計(jì)算hT ERC基因出現(xiàn)擴(kuò)增的異常細(xì)胞所占的比例，以11.10%作為此次計(jì)算的閥值。評(píng)定此檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)是：細(xì)胞樣本中hT ERC基因出現(xiàn)擴(kuò)增的異常細(xì)胞所占的比例大于閥值。

1.3 觀察指標(biāo)

分別計(jì)算單用血清CA19-9檢測(cè)法、hT ERC基因檢測(cè)法及聯(lián)用這兩種檢測(cè)法診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變的靈敏度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)本次研究中的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用X2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在這些患者中，進(jìn)行血清CA19-9檢測(cè)的結(jié)果為陽(yáng)性的患者有204例，為陰性的患者有79例。用血清CA19-9檢測(cè)法診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變的靈敏度為72.08%。進(jìn)行hT ERC基因檢測(cè)的結(jié)果為陽(yáng)性的患者有187例，為陰性的患者有96例。用hT ERC基因檢測(cè)法診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變的靈敏度為66.08%。進(jìn)行血清CA19-9和hT ERC基因聯(lián)合檢測(cè)的結(jié)果為陽(yáng)性的患者有263例，為陰性的患者有20例。聯(lián)用血清CA19-9和hT ERC基因檢測(cè)法診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變的靈敏度為92.93%。與單用血清CA19-9檢測(cè)法、hT ERC基因檢測(cè)法診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變的靈敏度相比，聯(lián)用血清CA19-9和hT ERC基因檢測(cè)法診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變的靈敏度較高（P＜0.05）。詳情見(jiàn)表1。

表1 單用血清CA19-9檢測(cè)法、hT ERC基因檢測(cè)法及聯(lián)用這兩種檢測(cè)法診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變靈敏度的比較

3 討論

宮頸上皮內(nèi)瘤變是一組與宮頸浸潤(rùn)癌密切相關(guān)的癌前病變的統(tǒng)稱。此病包括宮頸不典型增生和宮頸原位癌。宮頸上皮內(nèi)瘤變可反映宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的過(guò)程，即從宮頸不典型增生逐漸發(fā)展至宮頸原位癌、宮頸早期侵潤(rùn)癌、宮頸侵潤(rùn)癌。據(jù)調(diào)查資料顯示[3-4]，在宮頸上皮內(nèi)瘤變患者發(fā)病的早期，對(duì)其病情進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷、為其采取有效的方法進(jìn)行治療，其治愈率高達(dá)90%，其治療后5年的生存率超過(guò)99%。因此，早期診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變對(duì)改善此病患者的預(yù)后具有重要的臨床意義。

CA19-9是一種糖類抗原。血清CA19-9水平的升高與惡性腫瘤的發(fā)生具有密切的聯(lián)系。研究發(fā)現(xiàn)，有85%～95%的胰腺癌患者血清CA19-9的水平＞37 kU/L。此外，肝癌、直腸癌、胃癌等消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者血清CA19-9的水平也高于此數(shù)值。近年來(lái)，血清CA19-9檢測(cè)法被廣泛地應(yīng)用于對(duì)宮頸癌的診斷中。有研究指出，在化療后，宮頸癌患者血清CA19-9的水平可明顯降低。說(shuō)明該指標(biāo)的水平與癌灶的大小有關(guān)。

hT ERC位于人體細(xì)胞中3號(hào)染色體長(zhǎng)臂2區(qū)6帶。研究發(fā)現(xiàn)，宮頸的病變組織在由非典型增生逐漸發(fā)展為癌灶的過(guò)程中，其細(xì)胞內(nèi)3號(hào)染色體長(zhǎng)臂可出現(xiàn)擴(kuò)增，其中涉及到的最重要的基因?yàn)閔T ERC基因，這使該基因成為診斷宮頸癌的重要指標(biāo)。

本次研究的結(jié)果證實(shí)，聯(lián)用血清CA19-9和hT ERC基因檢測(cè)法診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變的效果較為理想。

[1]韓玲,薛月珍.宮頸上皮內(nèi)瘤變進(jìn)展及消退的預(yù)測(cè)[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2008,15(12):949-951.

[2]宋妮娜,瞿全新.宮頸上皮內(nèi)瘤變分子生物學(xué)指標(biāo)的研究進(jìn)展[J].國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志,2016,35(5):524-527.

[3]蔣燕明,李力.宮頸上皮內(nèi)瘤變進(jìn)展相關(guān)基因的生物信息學(xué)分析[J].中國(guó)腫瘤臨床,2016,19(19):840-844.

[4]黃錦成.宮頸上皮內(nèi)瘤樣變病因及診斷研究進(jìn)展[J].內(nèi)科,2016,21(4):546-548,569.