桑 銳,于逸凡,李金霞,徐 璐,張雪梅
(延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院動物醫(yī)學(xué)系,吉林延吉 133002)
弓形蟲(Toxoplasma)是一種能引起人獸共患的機會致病性原蟲,多寄生于人及多種哺乳動物體內(nèi)[1],可侵犯機體各個器官而引起相應(yīng)的臨床病癥,如弓形蟲腦病、弓形蟲眼病、妊娠期流產(chǎn)和胎兒畸形等[2]。弓形蟲病分布遍及全球,嚴重威脅著人類健康和畜牧業(yè)的發(fā)展。目前仍沒有明確的“金標準”治療方法,常用的治療藥物主要以阿奇霉素、螺旋霉素、乙胺嘧啶、磺胺嘧啶等西藥為主;中藥如樺褐孔菌、黃芪、黃芩、青蒿等[3]。經(jīng)過多年的研究發(fā)現(xiàn),西藥見效快,但長期使用易產(chǎn)生耐藥性,易復(fù)發(fā),對宿主的毒副作用較大;中藥毒副作用小,具有獨特療效,但見效慢,治療期長,不利于迅速控制病情。聯(lián)合用藥對于弓形蟲病的療效顯著增強[4],在試驗研究和在臨床治療上應(yīng)用甚廣。本文對近年來聯(lián)合用藥抗弓形蟲效果的研究進行如下綜述。
樺褐孔菌是調(diào)節(jié)機體免疫的一味良藥,其提取成份樺褐孔菌多糖亦具有抵抗弓形蟲的作用。王韻篪[5]將樺褐孔菌和馬齒莧中的多糖成分與黃芩和甘草的醇提物組成復(fù)方中藥,發(fā)現(xiàn)此復(fù)方可以減輕感染弓形蟲小鼠機體的炎性變化、提高存活率、延長存活時間,并且能夠調(diào)節(jié)IFN-γ等細胞因子以增強機體免疫力達到治病效果,復(fù)方藥效要好于樺褐孔菌多糖單獨用藥。張步彩等[6]將樺褐孔菌、黃荊葉、黃皮葉、甘草 4 味中藥配制成1 mg/mL濃度的中藥復(fù)方制劑,通過感染弓形蟲小鼠的治療試驗證明了該復(fù)方除了可以抑制弓形蟲速殖子繁殖之外,還可以改善小鼠血清SOD活性,以25 g/kg小鼠體重的用藥劑量效果最佳。
檳榔中的檳榔堿是驅(qū)蟲的有效成分,有殺蟲消積的作用,青蒿素也是目前研究較多的抗蟲中藥。王鵬等[7]將檳榔、黃芩、黃芪、甘草4種中藥制成混合湯劑,灌胃給藥于感染弓形蟲的小鼠后,小鼠脾細胞的IL-2活性水平得以提高,受感染的小鼠最后多半存活。李德華等[8]用青蒿、常山、白頭翁、苦參、烏梅、大黃、甘草等14味中藥組成的抗弓形蟲散臨床治療弓形蟲感染患者后,治愈率高達95.8%,明顯高于阿奇霉素片單獨用藥86.3%的治愈率,表明了抗弓形蟲散臨床治療弓形蟲感染效果顯著。
Zhuo X H等[9]在弓形蟲病小鼠模型中首次評估威靈仙、蕪荑、白術(shù)、劉寄奴和甘草所組復(fù)方對小鼠的保護作用,通過觀察小鼠的存活時間,血液和組織中弓形蟲的積累程度,血液中細胞比例的變化等,發(fā)現(xiàn) 500 mg/d復(fù)方煎劑的藥量能有效減緩弓形蟲的胞內(nèi)增殖速率,延長小鼠的存活時間,證明了該濃度的復(fù)方中藥對弓形蟲病小鼠具有一定的保護效力。
呂江等[10]通過自擬兩種中藥方劑對感染弓形蟲的小鼠模型進行試驗,采用水煎劑灌胃和腹腔注射醇提液兩種途徑同時給藥,結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃芩、甘草、檳榔、黃芪所組方劑對弓形蟲表現(xiàn)出良好的抵抗效果,用藥小鼠便秘現(xiàn)象逐漸減輕,腹水減少,顯微鏡下觀察腹水中蟲體量也明顯減少,顯示了這一方劑對弓形蟲在病體中的繁殖速度具有顯著的抑制作用。
磺胺嘧啶與乙胺嘧啶是目前應(yīng)用廣泛的抗弓形蟲藥物。K?ksal Z S等[11]探究了磺胺嘧啶-乙胺嘧啶-左旋咪唑三重組合對感染弓形蟲小鼠生存率的影響,此試驗選取99只Balb/c小鼠建模,給藥30 d后觀察到磺胺嘧啶-乙胺嘧啶二重組合治療組為33.3%生存率。而添加左旋咪唑的三重組合將小鼠的生存率提高到了88.9%,且給予該組合有效劑量的一半時,生存率為44.4%,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,證明了磺胺嘧啶-乙胺嘧啶-左旋咪唑三重組合可以作為弓形蟲感染的一種治療選擇。
普萘洛爾能競爭性地阻斷β受體,并且具有膜穩(wěn)定作用。Montazeri M等[12-14]首次研究了普萘洛爾在體內(nèi)的抗弓形蟲功效,結(jié)果顯示2 mg/kg和3 mg/kg的藥量不僅能夠明顯抑制小鼠腹腔中弓形蟲的生長繁殖,與乙胺嘧啶聯(lián)用后也具有協(xié)同抗蟲作用。隨后通過定量PCR等方法再次評估了普萘洛爾對急性和慢性弓形蟲病的影響,發(fā)現(xiàn)低劑量組(2 mg/kg)在減少寄生在大腦、眼睛、和脾臟中的弓形蟲數(shù)量上得到了較好結(jié)果,與乙胺嘧啶聯(lián)用效果更佳,表明低劑量的普萘洛爾和乙胺嘧啶聯(lián)合用藥對于急性和慢性小鼠弓形蟲病都可作為有效的治療方案。酮替芬是組胺H1受體拮抗劑,同樣具有穩(wěn)定細胞的作用,作者將其與乙胺嘧啶配伍治療急性弓形蟲病小鼠又一次證明了細胞膜穩(wěn)定劑對于抑制蟲體增殖具有增強效果,從而引入了治療弓形蟲病的一種新療法。
阿奇霉素是國內(nèi)常用的抗菌殺蟲藥物,王衛(wèi)群等[15]設(shè)立阿奇霉素和乙酰螺旋霉素、阿奇霉素和青蒿琥酯、青蒿琥酯和乙酰螺旋霉素3種配伍組對感染弓形蟲的小鼠進行分組治療,其中阿奇霉素和青蒿琥酯采取肌肉注射,乙酰螺旋霉素采取灌胃給藥,結(jié)果通過鏡下觀察到各組小鼠體內(nèi)的蟲體均呈現(xiàn)團縮、皺縮的形態(tài)改變,說明3種藥物均有抗弓形蟲作用,其中阿奇霉素和青蒿琥酯二者聯(lián)合用藥作用效果更強,小鼠平均生存時間更長。阿奇霉素與干擾素聯(lián)合用藥早在幾十年前就有治愈弓形蟲病患者的病例,之后湯俊明等[16]采用阿奇霉素和IFN-γ聯(lián)合治療小鼠弓形蟲感染,小鼠的存活時間明顯延長,驗證了該組合可以調(diào)節(jié)機體T細胞水平,增強細胞免疫功能。
β-葡聚糖可以刺激免疫系統(tǒng)并增加細胞的吞噬活性,已被證明對許多傳染性疾病具有免疫調(diào)節(jié)作用。Büyükbaba B O等[17]首次研究了β-葡聚糖和螺旋霉素聯(lián)合治療小鼠急性弓形蟲病的有效性,經(jīng)過灌胃給藥7 d后,對比觀察小鼠腹腔沖洗液中速殖子數(shù)量,聯(lián)合用藥組顯著低于單獨用藥組和對照組,并從小鼠血清ELISA結(jié)果中發(fā)現(xiàn)聯(lián)合用藥組可以更加有效控制IL-2、IL-12和IFN-γ的水平,表明了β-葡聚糖和螺旋霉素聯(lián)合治療在治療急性弓形蟲病方面可能存在協(xié)同作用。甲硝噠唑作為一種抗滴蟲藥物,Chew W K等[18]將其與螺旋霉素聯(lián)合給藥于慢性弓形蟲病小鼠模型,結(jié)果顯示雖然甲硝噠唑單獨用藥對弓形蟲無明顯抵抗作用,但兩藥聯(lián)用后,通過藥物動力學(xué)發(fā)現(xiàn)甲硝噠唑可以提高小鼠腦內(nèi)螺旋霉素的濃度,螺旋霉素的藥效得以加強,能夠根除速殖子,大大減少腦囊腫。
有研究表明,抗菌藥物也可能對弓形蟲病的治療具有特殊的效果, Martins-Duarte é S等[19]采用抗真菌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)機會性致病菌藥物氟康唑聯(lián)用磺胺嘧啶和乙胺嘧啶對急性弓形蟲病小鼠進行療效評估。3種藥物聯(lián)合治療10 d后,小鼠的存活率明顯高于磺胺嘧啶和乙胺嘧啶組的36%存活率,結(jié)果表明氟康唑與較低劑量的磺胺嘧啶和乙胺嘧啶或僅與乙胺嘧啶聯(lián)用的治療效果相比于不使用氟康唑具有明顯的加強。
Oz H S[20]通過觀察給予不同弓形蟲量孕鼠模型的感染過程,研究了阿托伐醌和地克珠利兩種抗蟲藥物聯(lián)合使用對病程的影響。低蟲量感染時,孕鼠母體產(chǎn)生中度弓形蟲病的并發(fā)癥,兩種藥物單獨治療都具有一定的成效;高蟲量感染時,母體產(chǎn)生腹瀉、胸腔積液、腹水、肝脾腫大等重度并發(fā)癥,聯(lián)合治療能有效地減輕上述病理變化,還可以維持小鼠的疼痛刺激反應(yīng),胎兒的數(shù)量和體重。結(jié)果顯示阿托伐醌聯(lián)合地克珠利可以協(xié)同地保護弓形蟲病感染的孕鼠及其胎兒。
在臨床治療上,乙酰螺旋霉素配伍阿奇霉素是孕期抗弓形蟲感染的安全有效的藥物,暫未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)。Tang H X等[21]對患弓形蟲病的2名孕婦經(jīng)過乙酰螺旋霉素和阿奇霉素的聯(lián)合治療后,血清學(xué)檢測結(jié)果顯示這2名孕婦的血清特異性弓形蟲IgM抗體滴度轉(zhuǎn)陰,PCR檢測羊水中弓形蟲基因轉(zhuǎn)為陰性,之后產(chǎn)婦的臍帶血中弓形蟲基因檢測也為陰性,初步顯示了新生兒沒有感染弓形蟲;魏敏等[22]將多例弓形蟲感染的孕婦給予口服乙酰螺旋霉素片和阿奇霉素注射液靜脈點滴,連用1周后復(fù)查TOX-IgM、TOX-CAg轉(zhuǎn)陰率高達97%以上,治療后出生新生兒也均未發(fā)現(xiàn)異常,證明了乙酰螺旋霉素聯(lián)合阿奇霉素可有效治療妊娠弓形蟲病。
多項研究表明中西藥聯(lián)合使用不僅能夠減少西藥用量,從而減少其副作用,還可以降低病癥復(fù)發(fā)率,越來越多地被人們應(yīng)用于試驗研究和臨床治療。S?nmez N等[23]首次研究黃芪和阿托伐醌聯(lián)合治療急性弓形蟲病的有效性,作者將阿托伐醌和黃芪聯(lián)合給藥于感染弓形蟲的小鼠1周后,發(fā)現(xiàn)小鼠腹水中速殖子數(shù)量明顯少于單獨給藥組和對照組。ELISA試驗結(jié)果顯示聯(lián)合給藥組更能有效地調(diào)節(jié)小鼠血清中IL-2、IL-12和IFN-γ水平,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,得出了黃芪和阿托伐醌在治療急性弓形蟲病方面可能存在協(xié)同作用。
Mady R F等[24]比較了黑種草油和克林霉素分別與乙胺嘧啶聯(lián)用治療弓形蟲病小鼠的效果。通過統(tǒng)計小鼠的生存率,觀察肝臟和脾臟的病理切片,測定肝臟丙二醛水平和總抗氧化能力以及血清ELISA試驗,結(jié)果表明,黑種草油和乙胺嘧啶聯(lián)用能顯著提高患病小鼠的生存率,降低體內(nèi)弓形蟲密度和肝、脾的病理性損傷,療效不亞于克林霉素和乙胺嘧啶聯(lián)用;IFN-γ的顯著增加意味著聯(lián)合用藥可以更大程度地刺激細胞免疫;與克林霉素+乙胺嘧啶組合相比,黑種草油+乙胺嘧啶可以顯著提高弓形蟲感染小鼠的抗氧化能力。
程軍霞等[25]將黃芩和甘草兩種中藥與磺胺氯吡嗪鈉聯(lián)合給藥于弓形蟲病小鼠后,發(fā)現(xiàn)患病小鼠腹腔中的速殖子逐漸被殺滅,體現(xiàn)出顯著的抑制效果。另外,小鼠的生存率和磺胺氯吡嗪鈉高劑量單獨用藥組大致相同,表明了在相同治療效果條件下,中西聯(lián)合用藥具有減少西藥用量的優(yōu)點。證實了這3種藥物配伍治療具有良好的抗弓形蟲作用,并且療效要好于常用的抗弓形蟲藥物磺胺嘧啶鈉。
Bottari N B等[26]探究了白藜蘆醇和復(fù)方新諾明兩種藥物聯(lián)合使用對小鼠慢性弓形蟲感染的協(xié)同作用。治療后進行了小鼠的行為測試(記憶功能、焦慮度、運動能力),觀察肝臟和腦組織的病理變化,腦囊腫計數(shù)等試驗結(jié)果顯示小鼠大腦囊腫數(shù)目減少,肝臟的病灶數(shù)量也有所減少,提示兩種藥物聯(lián)合作用能提高小鼠的抗氧化水平,此外,還能夠阻止感染小鼠發(fā)生運動能力減退等行為變化。同單獨用藥相比,白藜蘆醇和復(fù)方新諾明聯(lián)合給藥具有協(xié)同作用,治療效果增強。劉佩梅等[27]研究發(fā)現(xiàn)將具有免疫功能的天然藥物大蒜素與新諾明同時灌胃給藥于感染弓形蟲的小鼠,可以有效地控制急性弓形蟲病,延緩病情達到治愈,并且較兩種藥物單獨使用還可以降低死亡率,降低復(fù)發(fā)率,減少磺胺類藥物的毒副作用等。
中西聯(lián)合用藥在豬弓形蟲病的臨床治療方面效果顯著。馮偉疆[28]將地丁、黃連、菖蒲、青蒿、使君子、柴胡、苦參、貫眾、常山熬制藥液混入豬飼料中早晚喂服于確診弓形蟲病的豬,并且給予復(fù)方長效磺胺間甲氧嘧啶鈉注射液治療。通過觀察治療20 d后發(fā)現(xiàn)病豬腹水中弓形蟲數(shù)明顯減少,且顯著少于單純西藥治療組,治愈率為88%。胡進等[29]對弓形蟲感染 48 h后的豬給予中藥煎劑進行口腔灌服,并且應(yīng)用復(fù)方長效磺胺間甲嘧啶鈉注射液進行肌肉注射,其中藥方劑處方為甘草、麥芽、六曲、黃芪、當歸、柴胡、陳皮、知母、梔子、連翹、雙花、苦參、貫眾、青蒿、檳郎、常山。經(jīng)過治療5 d后,病豬腹水中滋養(yǎng)體個數(shù)顯著降低,精神沉郁,淤血斑等各項臨床癥狀也逐漸消失,30 d后治療組的豬全部存活且腹水中滋養(yǎng)體達到完全殺滅,獲得了比較滿意的療效。
聯(lián)合用藥在多種疾病的臨床治療及研究中已發(fā)展成為一種趨勢,目的在于增強療效、降低毒性、減少副作用和延緩耐藥性的發(fā)生。選擇合適的藥物聯(lián)用方案更有利于合理控制病情和減少不良反應(yīng)。目前國內(nèi)外尚無治療弓形蟲病的專用特效藥物,針對弓形蟲病單一用藥的局限及不足,近年來聯(lián)合用藥治療弓形蟲病的研究成為熱點。實踐證明,中藥復(fù)方、西藥配伍以及中西聯(lián)合用藥的治療方法對于弓形蟲病都取得了顯著的療效。此外,抗弓形蟲藥物聯(lián)合使用的研究重點在于緊密結(jié)合患病群體的自身特點,既要考慮聯(lián)用藥物各自的特性、副作用,又要考慮到具體藥物配伍方法及用量等,以提高其治療弓形蟲病的有效性和安全性[30]。隨著更深層次的探究,聯(lián)合用藥的發(fā)展方向?qū)τ诠蜗x病的攻克將具有重大意義及推動作用。