羊耳菊醇提物抗炎鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究

海東市樂都區(qū)農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法大隊(duì) 810799

羊耳菊又名羊耳風(fēng)、白牛膽、山白芷、白面風(fēng)和羊耳茶等，屬于菊科，主要生長在亞熱帶和熱帶地區(qū)，味苦微辛。該藥具有行氣止痛和祛風(fēng)消腫的功效，主要治療風(fēng)濕骨痛、跌打損傷和風(fēng)寒感冒等疾病。目前對羊耳菊藥理活性的研究較少，而且多為總提取物或揮發(fā)油的藥理活性的研究。對于某一單體化合物尤其是倍半萜類和三萜類等成分的藥理活性研究尚未開展，目前發(fā)現(xiàn)的藥理活性僅有抗氧化和抗菌活性，與本屬其他藥用植物相比顯得尤為不足。

1 羊耳菊醇提物介紹

據(jù)國內(nèi)外研究報道，到目前為止，已從羊耳菊根、莖葉和皮中分離鑒定出的化學(xué)成分主要包含倍半萜類、肌醇類和三萜類、黃酮類、酚類及揮發(fā)油類等，羊耳菊根、莖和葉的水提物對銅綠假單孢菌抑制作用最強(qiáng)，羊耳菊根、莖、葉的有機(jī)溶劑提取物都具有抑菌作用，并且對革蘭氏陽性菌的抑制效果比革蘭氏陰性菌好。

2 羊耳菊醇提物抗炎鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究方法

羊耳菊藥材取其干燥根打成粗粉，加入藥材10倍量50%的乙醇，提取前浸泡0.5小時，加熱回流提取2次，每次1小時。合并濾液，減壓抽濾并濃縮至無醇味，加水稀釋至2.5g/kg和5g/kg的藥液備用。阿司匹林維C腸溶片，使用時以生理鹽水配制成0.25g/kg藥液。SPF級ICR小鼠，體重(20±2)g，實(shí)驗(yàn)動物飼養(yǎng)環(huán)境為室溫22～25℃，相對濕度45%～50%。

小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組，每組10只。羊耳菊醇提物低、高劑量組以生藥量計(jì)分別為2.5g/kg和5g/kg。陽性組給予0.25g/kg的阿司匹林，空白對照組給予同體積生理鹽水。灌胃給藥，每天1次，連續(xù)給藥1周。末次給藥1小時后，將動物右耳前后兩面涂二甲苯0.02mL/只，左耳不做處理。40分鐘后將小鼠斷椎處死，剪下雙耳，用8nm直徑打孔器分別在同一部位打下圓耳片，電子天平稱重，每鼠右耳質(zhì)量減去左耳質(zhì)量為腫脹度。腫脹抑制率=(空白組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/空白組平均腫脹×100%。對醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)的影響試驗(yàn)，小鼠40只，雌雄各半，分組及給藥方法同上。末次給藥后1小時，小鼠尾iv0.5%，生理鹽水溶液0.01mL/g，再ip0.6%HAC溶液0.01mL/g，20分鐘后將小鼠斷椎處死。剪開腹部皮膚，6mL生理鹽水沖洗腹腔，吸管小心吸出腹腔液，合并，定容至10mL，離心15分鐘，取上清液于590nm比色，測定吸光度。雌性小鼠40只(剔除過敏感及不敏感動物)，體重(20±2)g，雌雄各半，隨機(jī)分為4組，每組10只。羊耳菊醇提物低、高劑量組以生藥量計(jì)分別為2.5g/kg和5g/kg，陽性組給予0.25g/kg的阿司匹林，空白對照組給予同體積生理鹽水。連續(xù)7天，末次給藥1小時后，將小鼠放到(55±0.5)℃的熱板儀上，以接觸熱板至小鼠舔后足或跳躍反應(yīng)所經(jīng)歷的時間為痛閾值，超過60秒者按60秒計(jì)算。給藥前測各鼠痛閾2次，取平均值為基礎(chǔ)痛閾。觀察扭體試驗(yàn)，羊耳菊醇提物低、高劑量組以生藥量計(jì)分別2.5g/kg和5g/kg，陽性組給予0.25g/kg的阿司匹林，空白對照組給予同體積生理鹽水。連續(xù)7天，末次給藥后1小時，各鼠ip0.6%HAC溶液0.01mL/g，觀察20分鐘內(nèi)第一次出現(xiàn)扭體反應(yīng)的時間(潛伏時間)及扭體次數(shù)，并計(jì)算抑制率。抑制率=(空白組扭體次數(shù)-試藥組扭體次數(shù))/空白組扭體次數(shù)×100%。

3 研究結(jié)果分析

對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響，羊耳菊醇提物高劑量組可明顯抑制二甲苯所致小鼠耳廓急性炎性水腫，與空白組比較具有顯著差異(P＜0.05)，其抑制率略低于阿司匹林。表明羊耳菊醇提物5g/kg劑量對二甲苯所致小鼠耳腫脹有顯著抑制作用。對毛細(xì)血管通透性的影響結(jié)果表明，羊耳菊醇提物高劑量組可明顯抑制醋酸所致小鼠毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)，與空白組比較差異極顯著(P＜0.01)，其抑制率略低于阿司匹林。表明羊耳菊醇提物在5g/kg劑量時對醋酸所致小鼠毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)有非常顯著抑制作用。羊耳菊醇提物高劑量組可明顯提高熱致痛小鼠的痛閾值，與空白組比較差異極顯著(P＜0.01),其痛閾值提高率略高于阿司匹林。羊耳菊醇提物高劑量組可明顯減少醋酸所致小鼠扭體次數(shù)，與空白組比較差異極顯著(P＜0.01),且扭體潛伏時間也明顯延長，與空白組比較差異顯著差異(P＜0.05)。

4 討論及結(jié)論

通過對上述實(shí)驗(yàn)進(jìn)行分析，可知羊耳菊醇提物對于風(fēng)濕骨痛和跌打損傷的疼痛具有明顯的抑制作用，可減輕患者的疼痛。本文針對羊耳菊根醇提物抗炎鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，可為臨床用藥提供參考。