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    柑橘中類黃酮的前處理及檢測技術(shù)研究進展

    2018-04-13 00:48:48,,*,,,,,,
    食品工業(yè)科技 2018年4期
    關(guān)鍵詞:分析器類黃酮橙皮

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    (1.西南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,重慶 400715;2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院/西南大學(xué)柑桔研究所,農(nóng)業(yè)部柑桔產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險評估實驗室(重慶),重慶 400712;3.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所,北京 100081;4.農(nóng)業(yè)部柑桔及苗木質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心,重慶 400712 )

    柑橘屬蕓香科柑橘亞科植物,因酸甜多汁,清香爽口,營養(yǎng)豐富,深受人們喜愛[1]。2014年全球柑橘產(chǎn)量已達1.39億噸[2],中國柑橘總產(chǎn)量為3492萬噸[3],是目前最大的小柑橘類水果生產(chǎn)國。研究表明,柑橘中含有的類黃酮活性成分具有增強人體免疫能力、抗癌、抑菌消炎、預(yù)防糖尿病和心腦血管疾病等重要生理作用,可以作為生產(chǎn)食品、保健食品、醫(yī)藥化妝品和動物飼料的來源,如橙皮素就是美國熱銷保健品的主要活性成分,也是多款化妝品晚霜中的添加劑。而且從酸橙中分離出的類黃酮可以抑制A549細(xì)胞(人肺腺癌細(xì)胞)的新陳代謝,誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡,有效預(yù)防和治療非小細(xì)胞肺癌等[4]。Ke等[5]的研究結(jié)果也顯示長期服用添加3%的柚皮素的膳食補充劑,可以提高血漿和組織中的柚皮素含量,降低高血糖,減少腹腔中過多的脂肪,具有明顯的抗肥胖功效。由于柑橘中類黃酮活性物質(zhì)的顯著生理功能以及在食品、醫(yī)藥和化妝品中的廣泛應(yīng)用,柑橘中類黃酮的樣品前處理及檢測技術(shù)一直是國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點和重點。本文綜述了近年來國內(nèi)外有關(guān)柑橘中類黃酮的種類、樣品前處理及檢測技術(shù)方面的研究進展,并對未來的研究開發(fā)提出展望。

    1 柑桔中類黃酮的種類

    黃酮類化合物是指兩個具有酚羥基的苯環(huán)(A-與B-環(huán))通過中央三碳原子相互連結(jié)而成(C環(huán))的一系列化合物[6]。根據(jù)中間三碳鏈的氧化程度、B-環(huán)連接位置(2-或3-位)以及三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀等特點,天然黃酮類化合物可分為:黃酮醇[7]、黃酮[8]、黃烷醇[9]、花青素、黃烷酮[10]以及異黃酮[11]等。它主要以與糖結(jié)合成苷的形式存在,小部分以游離態(tài)(苷元)存在,黃酮基本化學(xué)結(jié)構(gòu)如圖1所示。

    圖1 黃酮化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig.1 Chemical structure of flavonoid

    黃烷酮類是柑桔中含量最多的類黃酮,約占類黃酮總量的80%。黃酮類化合物多為結(jié)晶性固體,少數(shù)(如黃酮苷類)為無定形粉末。黃酮苷元一般難溶或不溶于水,易溶于稀堿液及甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙醚等有機溶劑。黃酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇、醋酸乙酯、吡啶等溶劑,難溶于乙醚、三氯甲烷、苯等有機溶劑。多甲氧基黃酮(PMFs)主要存在于柑橘果皮的油胞層,生理功能顯著,尤其是其抗癌活性,其官能團3、5、6、7、8、2′、3′、4′和5′等位置發(fā)生四個及以上甲氧基取代基則為PMFs,難溶于水,易溶于熱乙醇、苯、乙酸乙酯、石油醚、己烷等有機溶劑[12],黃酮類化合物基本母核結(jié)構(gòu)及代表化合物如表1所示。

    2 黃酮類化合物的前處理技術(shù)

    由于柑橘成分復(fù)雜,試樣一般需要經(jīng)過溶劑提取、分離、純化等處理后才能進行黃酮類化合物的檢測,因此黃酮類活性物質(zhì)前處理技術(shù)的研究是個關(guān)鍵環(huán)節(jié),目前已有固相萃取、閃式提取、超臨界流體萃取等技術(shù)。

    2.1 固相萃取(Solid phase extraction,SPE)

    Wan等[13]以自制的介孔分子篩SBA-15為固相吸附劑,基于小型化固相萃取(SPE),結(jié)合UHPLC-Q-TOF/MS成功處理和測定了柑橘類水果中的六種黃烷酮。SBA-15由于其晶體空腔內(nèi)強烈的極性和庫侖力,對于非飽和的黃烷酮極性化合物具有高效的選擇萃取能力,儀器檢測限和定量限值分別小于4.26和14.29 ng/mL,此法分析時間更短,靈敏度更高,適用于從復(fù)雜的柑橘類水果樣品中純化和富集目標(biāo)黃烷酮。A. ASGHARI等[14]在常規(guī)固相萃取(SPE)的基礎(chǔ)上,去掉了活化和淋洗的步驟,以硅膠為吸附劑,14%的NaCl溶液調(diào)節(jié)離子強度,甲醇直接洗脫橙汁中的待測組分。與常規(guī)SPE及其他技術(shù)的提取率相比,提取效率相似,但提取時間和溶劑大大減少,非常適合作為工業(yè),制藥和監(jiān)管實驗室從各種柑橘汁樣品中提取黃酮的篩選方法。Behruz等[15]開發(fā)了一種微型超聲輔助MSPD法,將經(jīng)過預(yù)處理的C18硅膠基質(zhì)與150 μL橙汁樣品先后放入1 mL注射器中,兩端封閉后室溫超聲6 min,連接真空除去殘留,500 μL甲醇真空洗脫分析物。HPLC分析六種類黃酮化合物的檢測限和定量限為23.3~46.8,74.8~141.5 ng/mL,平均回收率在84.6%~101.5%。首次將此法應(yīng)用在提取液體樣品(人類血漿、尿液)中的黃酮類化合物,可廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和臨床研究,但此法處理量少,不適合工業(yè)化制備。

    2.2 閃式提取法(Flash Extraction)

    閃式提取法是利用閃式提取器高速轉(zhuǎn)動時所產(chǎn)生的機械剪切作用、振動作用和負(fù)壓渦流,迅速將植物細(xì)胞組織粉碎至細(xì)微粒度,從而使組織內(nèi)的有效成分與溶劑充分接觸,達到快速溶解和高效提取,完成一次提取一般在30 s左右,常采用水、乙醇、甲醇、丙酮等作為它們的含水溶劑[16]。閃式提取法是一種快速有效的天然產(chǎn)物提取方法,能最大限度的避免植物有效成分受熱破壞,是最近迅速發(fā)展起來的一種新興的天然產(chǎn)物提取技術(shù)。

    有研究者[17]用此法從陳皮中提取了橙皮苷,最佳工藝條件為乙醇濃度70%,提取時間2.6 min,液固比42.1 mL/g,閃式提取2次,與乙醇熱回流法相比,橙皮苷得率提高了6.35%,提取時間大大縮短。還有研究者以胡柚皮為原料,閃式提取法提取了胡柚皮中黃酮類化合物,僅用95 s,柚皮黃酮提取率4.37%[18]。

    2.3 超臨界流體萃取法(Supercritical fluid extraction,SFE)

    SFE是一種快速、高效的環(huán)境友好型提取技術(shù)?;驹硎强刂瞥R界流體(CO2)在高于臨界溫度(31 ℃)和臨界壓力(7.4 MPa)的條件下,從樣品中提取有效成分。當(dāng)恢復(fù)到常壓和常溫時,溶解在CO2流體中的成分立即以溶于吸收液的液態(tài)與氣態(tài)CO2分開,從而達到提取目的[19]。CO2是非極性溶劑,對極性較強的物質(zhì)溶解能力不足,在提取極性較大的物質(zhì)時,需加入夾帶劑,也叫提攜劑,如甲醇、乙醇和水等[19]。

    表1 黃酮類化合物基本母核結(jié)構(gòu)及代表化合物Table 1 The basic parent nucleus structure of flavonoids and representative compounds

    Lee等[20]以乙醇為夾帶劑,采用SFE法萃取了臺灣香檬中的川皮苷和桔皮素,研究發(fā)現(xiàn),夾帶劑85%的乙醇水溶液在超臨界流體CO2中的比例為9.1%時,川皮苷和桔皮素的產(chǎn)率顯著增加,SFE法得到的產(chǎn)物純度比傳統(tǒng)提取方法的更好。Seorns等[21]采用逆流超臨界流體萃取法(CC-SFE)萃取分離橙汁中的抗氧化活性成分,比較了樣品流速和溶劑流速比(S/F)對萃取效率的影響,結(jié)合HPLC-DAD-MS法檢測出甜橙黃酮、柚皮蕓香苷、橙皮苷、柚皮苷、川皮苷等多種類黃酮。呂凜等[22]也采用CO2超臨界流體萃取了橘皮中的黃酮類化合物,提取率為2.723%。SFE法與其他方法相比,具有提取條件溫和,有效成分不易破環(huán),雜質(zhì)少,節(jié)省時間,所得產(chǎn)物外觀色澤更佳等優(yōu)點,但是生產(chǎn)成本較高。

    2.4 分子印跡技術(shù)(Molecularly imprinted technology,MIT)

    分子印跡技術(shù)是一種以目標(biāo)分子(模板分子或印跡分子)為模板,合成對該分子具有特異性識別功能的聚合物的技術(shù)。在色譜分離、固相萃取、臨床藥物分析、食品檢測等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用,在天然產(chǎn)物,如黃酮、生物堿、多酚等活性成分提取領(lǐng)域中的應(yīng)用逐漸增多[23]。近年來,分子印跡技術(shù)是廣受關(guān)注的新興技術(shù),它集分離與富集于一體,材料廉價,可反復(fù)使用,適合從復(fù)雜基質(zhì)中分離純化痕量目標(biāo)物用以檢測。

    Hui等[24]以橙皮素為模板分子,丙烯酰胺為功能單體,乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑,在甲醇、甲苯和十二烷醇的混合致孔劑中,采用熱聚合法合成了對橙皮素具有特異性識別的分子印跡聚合物(MIP)。將其作為固相吸附劑裝入固相萃取小柱中,形成了分子印跡固相萃取(MISPE)整體柱,來提取橙皮素及與其結(jié)構(gòu)相似的化合物蘆丁混合物,經(jīng)HPLC分析,橙皮素回收率為94%,蘆丁回收率僅為2.7%,結(jié)果說明合成的MIP對橙皮素具有高度的選擇性。此法用于提取茶枝柑干燥果肉中的橙皮素,回收率為90.8%±3.2%,精度較好(RSD=6.48%),線性關(guān)系良好。鄧茜珊等[25]以橙皮素為模板分子,乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑,偶氮二異丁腈為引發(fā)劑,通過本體聚合方式制備了橙皮素分子印跡聚合物。紫外分光光度法對功能單體進行選擇,將該聚合物用作液相色譜固定相,可實現(xiàn)橙皮素與結(jié)構(gòu)類似物染料木素的基線分離。馬秀玲[26]以柚皮苷為印跡分子,在水相中制備了柚皮苷分子印跡殼聚糖膜,有效地從橙皮苷和柚皮苷的混合水液中分離出柚皮苷,透過率為11.16%。

    MIP的各種聚合方法和萃取形式使得該技術(shù)適用于不同來源和性質(zhì)的分析物。該技術(shù)在對復(fù)雜食品基質(zhì)中分析物的凈化和富集時,表現(xiàn)出的選擇性、穩(wěn)定性、重復(fù)利用性等都比傳統(tǒng)固相萃取技術(shù)更具競爭力。但是,分子印跡技術(shù)在其發(fā)展過程中仍然存在一些問題,如水相中分子印跡聚合物(MIP)的不相容性、結(jié)合位點不均勻、模板滲漏、生物大分子的印跡等。

    式中:μm 為混合油黏度,mPa·s;μA、μB為組分油黏度,mPa·s;X A、X B為組分油質(zhì)量分?jǐn)?shù);α為經(jīng)驗常數(shù);δA、δB、△δ分別為組分油 A、B的密度和密度差,kg/m3。

    3 檢測技術(shù)

    3.1 液相色譜

    高效液相色譜法(HPLC)是目前檢測柑橘中酚類物質(zhì)最廣泛的色譜方法,具有樣品預(yù)處理簡單,分辨率高,速度快,重復(fù)率高的優(yōu)點。HPLC通常連接紫外(UV)、二極管矩陣(DAD或PDA)檢測器等[27]。

    表2總結(jié)了最近幾年來液相色譜在檢測柑桔中類黃酮成分方面的應(yīng)用,可以看出,在檢測柑橘中類黃酮數(shù)目較少的情況下,HPLC還是目前主要的分析方法,并且反相梯度洗脫的效果較好。在1993年,鄔安珍等[28]以RP-C8為色譜柱,在55 min內(nèi)分離了植物提取物中18種黃酮類化合物,最佳波長和溫度分別是280 nm和35 ℃。HPLC還可以拆分黃酮類化合物對映體,孫壓男等[29]以正己烷-異丙醇(乙醇)-三氟乙酸(75∶25∶0.1)為流動相,流速0. 5 mL/min,290 nm下,采用直鏈淀粉Chiralpak AD-H與纖維素Chiralcel OZ-H兩種手性柱建立了13種黃酮類化合物對映體的正相HPLC拆分方法,并考察了流動相比例、三氟乙酸的添加和醇的種類對手性識別的影響,直鏈淀粉Chiralpak AD-H柱對于流動相中醇的種類變化更敏感,纖維素Chiralcel OZ-H手性柱對此的差別小,醇的極性不同將導(dǎo)致立體位阻不同,從而影響分離物的選擇因子和分離度。也有采用長波熒光系統(tǒng)檢測橙汁中的類黃酮成分,Alvaro Andreu-Navarro等[30]基于十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)膠束介質(zhì)中的長波熒光體甲苯酚紫(CV)和鈰(IV)與待分析物在585、625 nm時的相互作用會引起熒光強度的減少,減少值與待分析物的濃度成比例,采用柱后LC反應(yīng)系統(tǒng)成功檢測了橙汁中6種類黃酮活性成分,檢測范圍在3.5~4000 ng/mL,LOD是1.0~3.7 ng/mL,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD%)在2.8%~6.2%,此方法避免了樣品前處理和濃縮的步驟,減少了干擾,可用于橙汁中痕量成分的檢測。

    近年來超高效液相色譜(Ultra performance liquid chromatography,UPLC)發(fā)展迅速,應(yīng)用也越來越廣泛?;?.7 μm小顆粒技術(shù)的UPLC與HPLC具有相同的分離原理,不同的是UPLC不僅比傳統(tǒng)HPLC具有更高的分離能力,而且結(jié)束了人們多年來不得不在速度和分離度之間忍痛割舍的歷史。使用UPLC可以在很寬的線速度、流速和高反壓下進行高效的分離工作,并獲得優(yōu)異的結(jié)果。

    Alexander等[31]采用UPLC-DAD法,僅用5.5 min就從三種柑橘水果的提取物中檢測出了11種類黃酮,比HPLC分析快8.2倍,單個分析的溶劑消耗量也減少了近6.2倍。樣品中最豐富的是柚皮苷、蘆丁和槲皮素,11種物質(zhì)的檢測限(LOD)在0.02~0.23 μg/mL,定量限(LOQ)在0.08~0.77 μg/mL。鄭潔等[32]建立了UPLC快速、同時測定柑橘中主要酚酸、黃烷酮、黃酮醇、黃酮類及多甲氧基黃酮組成及含量的方法,以ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm×1.7 μm)為分離柱,0.3%乙酸水溶液-甲醇梯度洗脫,19種物質(zhì)在18 min內(nèi)基線分離,線性范圍為0.01~500 mg/L,LOD為0.001~0.09 mg/kg,結(jié)果顯示黃烷酮(圣枸櫞苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮甙、香蜂草甙、柚皮蕓香甙、柚皮素和橙皮素)是柑橘中主要的類黃酮,通過不同提取劑提取效率的比較,發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯的提取效率最高,而且最大限度地保留了柑橘的抗氧化活性。Cao等[33]采用反相UPLC-PDA法,定量檢測了枳殼中6種類黃酮,分析時間僅為8 min,回收率為95.33%~103.78%。UPLC采用直徑為1.7μm的填料顆粒提高了分離能力,峰數(shù)和峰容量是HPLC的2.5倍,可以同時分離更多的物質(zhì),從而對樣品所能提供的信息達到了一個新的水平,而且又極大地縮短了開發(fā)方法所需的時間。

    表2 近十年來LC法分析檢測柑桔類黃酮成分的部分實例Table 2 Some examples of flavonoids analyzed with LC in past ten years

    3.2 液質(zhì)聯(lián)用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)

    液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)集成了色譜分離和光譜結(jié)構(gòu)鑒定的優(yōu)點,實現(xiàn)了快速分離與快速結(jié)構(gòu)信息測定的同步化,在復(fù)雜組分的分離與鑒定研究方面顯示出了極大的優(yōu)勢[44]。質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將帶電離子根據(jù)其質(zhì)荷比加以分離,用于紀(jì)錄各種離子的質(zhì)量數(shù)和豐度[45-46]。主要分類包括扇形磁場分析器、四極桿分析器、離子阱分析器、飛行時間分析器、傅里葉變換分析器。離子阱分析器、四極桿分析器和飛行時間分析器最為常用,各種質(zhì)量分析器經(jīng)常聯(lián)用以達到更好的分離檢測效果。

    離子阱分析器是由兩個端蓋電極和位于它們之間的類似四極桿的環(huán)電極構(gòu)成,偏重于定性,可得到多級碎片,常用于未知化合物結(jié)構(gòu)推導(dǎo),全掃描靈敏度很高,中等分辨率,正負(fù)離子模式易于切換。Monica等[47]結(jié)合SPE純化技術(shù),采用LCQ離子阱質(zhì)量分析器,建立了高度降解的柑桔汁中甜橙黃酮(SIN)等六種PMFs的HPLC-PDA/ESI-MS/MS檢測法,在保留時間(tR)為61.0~66.8 min之間獲得了六種不同的PMFs。正離子模式下的總離子流圖顯示[M+H]+在m/z=373、403、403、343、433、373,結(jié)合二級質(zhì)譜和保留時間,推斷化合物為甜橙黃酮、3,5,6,7,3′,4′-六甲氧基黃酮、川皮苷、4′,5,6,7-四甲氧基黃酮、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黃酮以及桔皮素。林志燕等[48]以蘆丁、金絲桃苷等8個黃酮類化合物為研究對象,采用超高壓液相色譜-三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜分析8個黃酮類化合物的色譜、質(zhì)譜特性,結(jié)果顯示黃酮苷的保留時間小于相應(yīng)苷元的保留時間,同類化合物苷元的羥基數(shù)目越多,保留時間越小。黃酮苷元的裂解主要以RDA裂解為主,即斷裂主要發(fā)生在C環(huán)的1位與2位和3位與4位,形成特征離子,對于黃酮化合物未知結(jié)構(gòu)的解析具有指導(dǎo)意義。四級桿或三重四級桿偏重于定量,全掃描靈敏度低大約10~100個數(shù)量級,但是在選擇離子掃描模式下靈敏度很高,從而用于已知化合物定量。

    表3 正離子模式臍橙中13 種類黃酮信息Table 3 Peak assignments in positive ion mass spectra of thirteen flavonoids in navel oranges

    飛行時間質(zhì)譜是根據(jù)不同質(zhì)荷比的離子,通過一定長度無場飛行區(qū)時所需時間差異而實現(xiàn)分離的一種質(zhì)量分析器。Eduardo等[49]采用具有高準(zhǔn)確度的混合離子阱TOF質(zhì)譜儀,以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈為流動相梯度洗脫,建立了佛手柑果汁中17種類黃酮的UHPLC-IT-TOF-MS檢測法,僅用5 min,17種物質(zhì)完全分離,比HPLC快十倍,柚皮苷、新橙皮苷、圣草苷在50~300 μg/mL,其他化合物在0.5~100 μg/mL內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。劉賢青[50]等采用高效液相色譜分離、串聯(lián)四極桿-飛行時間質(zhì)譜正離子模式、雙電噴霧離子源檢測了兩種臍橙不同組織中含量較高的甜橙黃酮、川皮苷等13種類黃酮,相關(guān)質(zhì)譜數(shù)據(jù)見表3。由表可知,飛行時間質(zhì)量分析器的優(yōu)點是測定質(zhì)量范圍寬,分辨率高,可以給出物質(zhì)的精確質(zhì)量,將更好的推測未知物結(jié)構(gòu),質(zhì)量誤差小,能在幾至幾十微秒內(nèi)實現(xiàn)全譜分析[44],準(zhǔn)確度高,掃描速度快,靈敏度高,但是價格也偏高。

    總之,LC-MS和LC-MS/MS是目前進行黃酮類成分分析強有力的手段,可避免復(fù)雜、繁瑣、耗時的樣品前處理工作,通過多反應(yīng)監(jiān)測,可大大提高分析的專一性,改善信噪比,提高靈敏度,在痕量檢測樣品中的主成分和未知物方面有很大優(yōu)勢。

    3.3 其他檢測技術(shù)

    除以上分析方法外,柑橘中類黃酮活性成分的檢測技術(shù)還有氣相色譜法(GC)、毛細(xì)管電泳法(CZE)。GC具有高分辨率和低檢出限等優(yōu)點,但容易生成三甲基硅醚(TMS)衍生物,只適用于揮發(fā)性成分的檢測,局限性大,無法廣泛應(yīng)用于檢測類黃酮[27]。CZE分析速度快、分辨率高,特別是對樣品提取、濃縮、純化和衍生等前處理過程無嚴(yán)格要求,但易被進樣量、溫度、鹽的濃度等因素影響,重現(xiàn)性不高。Almas等[51]以PDA為檢測器,首次建立了同時檢測果汁中四種類黃酮活性物質(zhì)的CZE分析法,在10 mmol/L硼酸鹽緩沖液,pH8.5,外加電壓25 kV的最優(yōu)條件下,4種物質(zhì)在10 min內(nèi)完全分離,柚皮苷、柚皮素和槲皮素的線性響應(yīng)范圍為3.12~200 μg/mL,蘆丁的線性響應(yīng)范圍為6.25~200 μg/mL,CZE法分離效率高,分析時間短,前處理過程簡單,適合于果汁中黃酮物質(zhì)的分離分析。

    4 結(jié)語

    近年來,隨著對柑橘活性成分的研究日益深入,發(fā)現(xiàn)類黃酮尤其是多甲氧基黃酮比其他活性成分具有更強的生理活性,已經(jīng)廣泛用于功能性保健食品的開發(fā)、功能性飼料的研制、化妝品添加劑、橙汁質(zhì)量控制等。但對于一些生理功能的作用機理,質(zhì)譜中斷裂機理方面還有待深入研究,至今為止還沒有形成一種標(biāo)準(zhǔn)體系來提取分離檢測柑橘中的活性成分,而且我國還存在水果及制品分析用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)數(shù)量少、種類單一、應(yīng)用范圍窄等問題。核磁共振法廣泛應(yīng)用于有機化合物的結(jié)構(gòu)解析和定性分析,其實它在化合物純度定值和含量測定方面也有很多優(yōu)勢,LC-NMR聯(lián)用技術(shù)將高效的分離手段與NMR聯(lián)用,可以獲得復(fù)雜樣品的信息,是一種新興的重要定量分析技術(shù),但相關(guān)研究文獻較少。因此,我國應(yīng)該加強研發(fā)出快速、準(zhǔn)確、靈敏的標(biāo)準(zhǔn)化檢測方法和高通量、高純度的工業(yè)化制備工藝,以及加大力度研制一些類黃酮純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),促進相關(guān)柑橘產(chǎn)品溯源與真實性檢測,為保健品、化妝品和醫(yī)藥產(chǎn)品等有效成分的質(zhì)量監(jiān)管提供技術(shù)支撐。

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