精漿中性α-葡萄糖苷酶活力水平與男性不育的關(guān)系探討

何韶堅(jiān) 梁愛芬 徐艷霞 鄭練俊 盧耀明 翁光明 羅 嘉▲

1.廣東省東莞康華醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心，廣東東莞 523000；2.廣東省東莞康華醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心，廣東東莞 523000

目前臨床評估男性生育功能主要通過精液常規(guī)分析法，重視精漿生化指標(biāo)的檢查，了解精子質(zhì)量，有利于全面評估男性生殖能力[1]。精子進(jìn)一步成熟后會在附睪中存儲，因此附睪功能狀態(tài)會對精子質(zhì)量產(chǎn)生直接影響，而附睪會分泌生成α-葡萄糖苷酶，此為精液精漿主要成分，并將附睪功能狀態(tài)反映出來，該酶可對糖蛋白或多糖中碳水化合物予以催化向葡萄糖分解，供能于精子代謝與運(yùn)動中，其活性高低也會直接對精液質(zhì)量產(chǎn)生影響，因此有研究稱測定精漿中性α-葡萄糖苷酶有利于診斷男性不育癥[2-3]?，F(xiàn)選取2017年1～6月于我院生殖醫(yī)學(xué)科室就診的176例不育男性患者，詳述其價值。

表1　兩組精液參數(shù)比較（±s ）

表1　兩組精液參數(shù)比較（±s ）

組別　n　　精液量（mL）　　液化時間（min）　　精子密度（×106/mL）　　精子存活率（%）　　精子活力（PR）（%）正常精子組　124　4.02±0.45　13.02±3.46　58.21±6.41　70.81±9.64　56.97±7.55梗阻性無精子癥組　60　-　-　-　-　-少精子癥組　116　3.20±0.32　14.51±4.25　6.57±1.07　40.28±8.56　23.11±3.59

1　資料與方法

1.1　一般資料

本次研究對象來源于2017年1～6月于我院生殖醫(yī)學(xué)科室就診的176例不育男性患者，其中梗阻性無精子癥組60例，少精子癥組116例，婚后時間不低于1年，性生活正常，且未采取任何避孕措施，生殖系統(tǒng)經(jīng)檢查后排除外傷史、器質(zhì)性病變及遺傳病史，行血清衣原體抗體、精液細(xì)菌培養(yǎng)及精漿與血清抗精子抗體檢查結(jié)果為陰性，女方接受檢查排除不孕可能；少精子癥組精子密度低于15×106/mL，年齡22～46歲，平均（30.7±6.5）歲，結(jié)婚時間2～12年，平均（5.2±2.0）年；無精子癥即精液射出經(jīng)離心沉淀后于顯微鏡下持續(xù)觀察3次均無檢出精子，年齡23～44歲，平均年齡為（29.3±5.2）歲，結(jié)婚時間1.5～11年，平均（5.0±1.8）年。另選取同期于我院檢查精子質(zhì)量結(jié)果正常的124例作為正常精子組，年齡20～43歲，平均（29.4±5.8）歲，結(jié)婚時間為6個月～14年，平均（6.5±1.0）年；其精液量在1.5mL以上，pH值在7.2～8.0范圍內(nèi)，精子密度不低于15×106/mL，前向運(yùn)動（PR）32%，精子正常形態(tài)率≥4%。

1.2　方法

患者精液標(biāo)本采集，要求禁欲時間為3～5d，通過手淫法把精液收集在無菌帶蓋容器中，置于37℃水浴箱，待精液標(biāo)本液化后，吸取10μL加到計數(shù)板中，參照WHO《人類精液及精子-宮頸黏液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)手冊》標(biāo)準(zhǔn)，用北京偉力WLJY-9000精子分析儀進(jìn)行分析精子質(zhì)量。精子形態(tài)學(xué)分析，將精液涂片制定在干燥空氣下固定后使用深圳華康快速精子染色液進(jìn)行染色，使用顯微鏡進(jìn)行觀察精子形態(tài)學(xué)計數(shù)。同時對其活力、密度、正常形態(tài)精子比例及活率等予以記錄，并統(tǒng)計精液量與液化時間。而后將精液標(biāo)本離心處理留取上清精漿，使用深圳華康精漿中性α-葡萄糖苷酶檢測試劑盒（葡糖糖氧化酶法）進(jìn)行中性α-葡萄糖苷酶檢測，使用吲哚法檢測精漿果糖水平。

1.3　統(tǒng)計學(xué)方法

采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS18.0版對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料采用（x±s）表示，兩均數(shù)比較采用LSD-t檢驗(yàn)，計數(shù)資料采用百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1　兩組精液參數(shù)比較

兩組精液量與液化時間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；不育組中少精子癥組精子密度、精子存活率及精子活力（a+b級）均明顯低于正常組，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2　精漿生化結(jié)果比較

梗阻性無精子癥組、少精子癥組、正常精子組的精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率不相同，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=51.827，P＜0.001），其中少精子癥組異常發(fā)生率高于正常精子組（χ2=6.579，P＜0.05），梗阻性無精子癥組異常發(fā)生率高于少精子癥組（χ2=24.331，P＜ 0.001）。見表 2。

表2　各組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率比較

3　討論

WHO（世界衛(wèi)生組織）定義育齡夫妻同居時間超過1年、性生活史正常、未采取任何避孕措施，女方無異常，因男方原因?qū)е屡圆辉姓呒礊槟行圆挥Y[4]。調(diào)查結(jié)果表明育齡婦女無法生育，8%～22%為男方因素，25%為女方因素，21%～38%為雙方共同因素[5]，已經(jīng)成為全球性社會學(xué)與醫(yī)學(xué)重點(diǎn)問題。男性不育近年來發(fā)生率不斷提升，其原因可能關(guān)聯(lián)于生理性疾病、環(huán)境、心理及生活習(xí)慣等因素。少弱精子癥為男性不育主要類型。一般而言少弱精子癥組有明顯異常的精漿生化結(jié)果，且其誘因不同，因精漿組成成分中包含前列腺、附睪及精囊腺等分泌物，因此需結(jié)合患者實(shí)際開展生化項(xiàng)目檢查，以深入檢查男性附屬性腺病變原因，為臨床針對性指導(dǎo)用藥提供指導(dǎo)，確?；颊咧委煾佑行6]。

精液中生精細(xì)胞包含精子細(xì)胞、精母細(xì)胞（初級與次級精母細(xì)胞）與精原細(xì)胞，正常情況下精液中僅有少量生精細(xì)胞跟隨成熟精子進(jìn)入，睪丸遭受損傷或被有害因素影響時睪丸生精小管會表現(xiàn)出程度不一的病理變化，精液中精子質(zhì)量與數(shù)量異常且生精細(xì)胞也會異常脫落[7-8]。生精細(xì)胞脫落形態(tài)與數(shù)量直接將睪丸生殖功能損傷程度反映出來，在睪丸病理性損傷中為主要指標(biāo)之一。精液中無精子的現(xiàn)象被稱作無精子癥，相對而言治療難度更大。一般而言精液若完全正常則其各成分也要處于正常狀態(tài)，但臨床在對男性生育能力予以評估時多過度關(guān)注精子，而在一定程度上忽略精漿成分，實(shí)際上精漿各成分狀況可將男性生殖系統(tǒng)功能狀態(tài)直接反映出來，便于臨床評估患者病情并制定治療方案。

精液包含精子與精漿，而精漿組成上文已經(jīng)提及，正常狀態(tài)下7.2～8.0為其pH值，一次射精精液量在1.5mL以上，中性α-葡萄糖苷酶不低于20mU[9]。正常男性射精時生殖道內(nèi)會有副性腺分泌物排入，因此無論何種副性腺功能異?；蛉比?、或精子輸出管道被阻塞均會改變精漿中某些化學(xué)成分。臨床分析精漿生化后可據(jù)此鑒定或推測生殖系統(tǒng)解剖存在何種缺陷或疾病，而男性精液的葡糖苷酶共有6種，其中α-葡萄糖苷酶主要將附睪功能反映出來，臨床將其作為附睪特異性酶。附睪后輸精管阻塞，α-葡萄糖苷酶有極低含量，附睪頭體及尾部均α-葡萄糖苷酶均會分泌。上文已經(jīng)提及精液檢查異常主要為少弱精子癥，其常見病因之一為生殖道感染，對附睪產(chǎn)生影響后誘發(fā)慢性附睪炎。慢性附睪炎病變多在附睪尾部局限，形成纖維組織后會增加附睪硬度，還會形成局灶性硬結(jié)等，光鏡下瘢痕組織明顯，小管阻塞，淋巴細(xì)胞與漿細(xì)胞處于浸潤狀態(tài)；此外，慢性附睪炎還會對附睪分泌功能產(chǎn)生影響，降低α-葡萄糖苷酶含量，而該成分含量越低則一次射精量越少，精子總數(shù)也越少，這可能關(guān)聯(lián)于附睪小管變硬及附睪功能變化等[10-12]。

此外，試驗(yàn)表明哺乳動物多個種屬附睪不同部分均會大量分泌α-葡萄糖苷酶，精子受精、成熟及獲能過程均有活躍度較高的糖基反應(yīng)伴隨，其關(guān)聯(lián)于此酶活性，且其活性高低直接對精液質(zhì)量產(chǎn)生影響[13-15]。本組結(jié)果表明不育組精子密度、精子存活率及精子活力（PR）均明顯低于正常精子組，不育組中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率顯著高于正常精子組，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）。

綜上所述，精漿生化中性α-葡萄糖苷酶活力水平與男性不育的附性腺功能不全所致的梗阻性無精子癥和少精子癥有密切關(guān)系，對臨床診斷具有一定的臨床應(yīng)用價值。

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