寧夏某豬場(chǎng)豬流行性腹瀉緊急流行病學(xué)調(diào)查

王楷宬，王玉梅，李知新，宋權(quán)儒，李　杰，王曉亮，劉華雷

（1. 中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島　266032；2. 寧夏回族自治區(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心，寧夏銀川　750011）

豬腹瀉是由多個(gè)病因引起的疾病，臨床主要表現(xiàn)為嘔吐、腹瀉、脫水等癥狀[1]，發(fā)病率高。腹瀉病是威脅養(yǎng)豬業(yè)的重要疾病之一，約占豬病總量的35%～45%[2]。引起豬場(chǎng)流行性腹瀉的病原繁多，如大腸桿菌[3]、輪狀病毒（RV）[4]、傳染性胃腸炎病毒（TGEV）[5]、豬流行性腹瀉病毒（PEDV）[6]、偽狂犬病毒[7]、豬德?tīng)査跔畈《綶8]等，都可引起豬場(chǎng)出現(xiàn)大量腹瀉病例。豬病毒性腹瀉病原在我國(guó)各地廣泛流行，不同地區(qū)的感染率差別較大。朱子健等[9]對(duì)2015—2016年?yáng)|北地區(qū)的88個(gè)疑似病毒性腹瀉豬場(chǎng)進(jìn)行基本情況調(diào)查，對(duì)送檢的264份疑似病毒性腹瀉仔豬糞便或腸道內(nèi)容物樣品進(jìn)行病原檢測(cè)。調(diào)查結(jié)果顯示，疫情多發(fā)生在冬春寒冷季節(jié)；病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，PEDV、RV和TGEV陽(yáng)性率分別為74.62%、25.76%和6.06%。秦谷雨等[10]對(duì)安徽省37個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)的186份樣品進(jìn)行PEDV、TGEV、RV等病毒的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)PEDV、TGEV、RV陽(yáng)性率分別為59.10%、5.49%、2.70%。劉云波等[11]對(duì)2011—2012年我國(guó)13個(gè)省市的豬腹瀉樣品進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)PEDV、RV、TGEV陽(yáng)性率分別為24.49%、3.20%、2.65%。上述資料表明，TGEV、PEDV和RV 3種豬病毒性腹瀉病毒在我國(guó)具有較高的感染率，呈全國(guó)性散發(fā)流行，且不同地域間感染情況差異較大，尤其是PEDV，感染率最高。

2017年5月10日，寧夏青銅峽市某規(guī)?；i場(chǎng)報(bào)告發(fā)生大規(guī)模豬群腹瀉疫情，累計(jì)發(fā)病200余頭。為了解疫情發(fā)生的原因及主要風(fēng)險(xiǎn)因素，開(kāi)展了緊急流行病學(xué)調(diào)查。

1　方法

1.1　病例定義

1.1.1疑似病例 2017年4—5月青銅峽市某規(guī)?；i場(chǎng)出現(xiàn)腹瀉臨床表現(xiàn)的死亡病例。

1.1.2確診病例 經(jīng)實(shí)驗(yàn)室診斷為PEDV病原學(xué)陽(yáng)性的疑似病例。

1.2　抽樣檢測(cè)

按照基于風(fēng)險(xiǎn)的抽樣策略，對(duì)4頭病死豬，采集腸系膜淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)、頜下淋巴結(jié)、腸管、嘔吐物或糞便等，共30份樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查，綜合發(fā)病豬臨床癥狀和剖檢病變，推測(cè)TGEV、PEDV和RV是導(dǎo)致本次疫情發(fā)生的原因，故針對(duì)這3種病原開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室PCR檢測(cè)。

1.3　現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查

與養(yǎng)殖場(chǎng)主、駐場(chǎng)獸醫(yī)、當(dāng)?shù)孬F醫(yī)站專業(yè)人員、獸藥銷售人員等進(jìn)行座談交流，詳細(xì)了解疫病發(fā)生過(guò)程、周邊養(yǎng)殖狀況、豬調(diào)運(yùn)情況、飼料來(lái)源、人員進(jìn)出情況、發(fā)病后采取的主要措施等；查閱養(yǎng)殖戶免疫檔案和獸醫(yī)對(duì)豬群發(fā)病前后的診斷和用藥情況。同時(shí)，通過(guò)網(wǎng)絡(luò)搜索該地區(qū)2017年4月和5月的氣溫變化情況，分析氣溫對(duì)疫病發(fā)生可能造成的影響。

1.4　數(shù)據(jù)分析

對(duì)該起豬腹瀉疫情的特征進(jìn)行時(shí)間和空間描述，采取干預(yù)措施，驗(yàn)證病因假設(shè)，并提出針對(duì)性防控建議。對(duì)收集到的數(shù)據(jù)，利用Excel進(jìn)行整理和分析。

2　結(jié)果

2.1　確認(rèn)暴發(fā)

2017年5月10日，寧夏回族自治區(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心接到青銅峽市某規(guī)模化豬場(chǎng)發(fā)生大規(guī)模腹瀉的報(bào)告?，F(xiàn)場(chǎng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，部分發(fā)病豬出現(xiàn)嘔吐、腹瀉、嚴(yán)重脫水，甚至死亡等臨床癥狀；剖檢發(fā)現(xiàn)，病死豬腸道脹氣，腸壁變薄、透明、出血，胃明顯增大，胃內(nèi)有乳塊，全身性淋巴結(jié)出血?，F(xiàn)場(chǎng)采集30份臨床樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)PEDV均為陽(yáng)性，TGEV和RV均為陰性。結(jié)合發(fā)病豬臨床癥狀（圖1），確定引起該豬場(chǎng)腹瀉疫情的病原為PEDV。

2.2　疫病分布

2.2.1地理分布 該規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)位于青銅峽市峽口鎮(zhèn)（106?4'39.25''E，37?49'36.80'' N），海拔1 120 m。養(yǎng)殖場(chǎng)周邊空曠，西側(cè)有一片公墓，周邊無(wú)居民區(qū)和養(yǎng)殖場(chǎng)（戶），距離最近居民區(qū)3 km，距大門口100 m以外有一條旅游干線（圖2）。周邊3 km范圍內(nèi)無(wú)其他養(yǎng)豬場(chǎng)（戶），駐場(chǎng)周圍偶爾見(jiàn)野生獾出沒(méi)。場(chǎng)區(qū)面積50畝（1畝約為666.67 m2），有豬舍15棟（圖3），豬舍間距為14 m，每棟豬舍面積300 m2。

2.2.2發(fā)病經(jīng)過(guò) 經(jīng)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查，自2017年4月17日開(kāi)始，該場(chǎng)保育豬出現(xiàn)腹瀉、嘔吐、食欲不振和精神沉郁等癥狀，4月19日開(kāi)始出現(xiàn)新生仔豬死亡病例（圖4）。最先發(fā)病的是j舍，隨后d、i、n舍相繼發(fā)病，最后蔓延至全群（圖3）。發(fā)病高峰出現(xiàn)在4月21日（48個(gè)疑似病例），累計(jì)病例225個(gè)（圖4），確診病例4個(gè)。最先發(fā)病的4個(gè)舍由不同的飼養(yǎng)人員管理?，F(xiàn)場(chǎng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，這4位飼養(yǎng)人員吃住均在一起，且經(jīng)常不及時(shí)換衣與消毒。該豬場(chǎng)自繁自養(yǎng)，由場(chǎng)內(nèi)技術(shù)人員負(fù)責(zé)人工配種，最后一次引種為2012年從北京育種中心引入40頭豬，其中公豬5頭。但調(diào)出頻繁，在發(fā)病前的4月9日售出育肥豬，10日和17日售出仔豬。4月1日與4月17日從銀川正大集團(tuán)購(gòu)入母豬飼料（圖4）。該豬場(chǎng)在此次疫情暴發(fā)之前，沒(méi)有免疫過(guò)流行性腹瀉二聯(lián)苗。自4月18日開(kāi)始免疫流行性腹瀉二聯(lián)苗，同時(shí)配合黃芪多糖、硫酸新霉素、安普霉素進(jìn)行干預(yù)治療，4月27日后不再出現(xiàn)死亡病例。

圖1　發(fā)病豬臨床癥狀

圖2　該發(fā)病豬場(chǎng)GIS地圖

圖3　發(fā)病豬場(chǎng)場(chǎng)舍分布示意圖

圖4　該養(yǎng)殖場(chǎng)疫情流行曲線

2.3　吳忠地區(qū)4—5月氣溫變化情況

因豬腹瀉常與氣溫突然變化有關(guān)，所以分析豬場(chǎng)所在的吳忠地區(qū)2017年4—5月豬場(chǎng)發(fā)病時(shí)的氣溫變化情況。分析發(fā)現(xiàn)，該地區(qū)2017年4—5月氣溫升高緩慢，沒(méi)有出現(xiàn)明顯波動(dòng)，最低氣溫均在10 ℃以上（圖5），故排除了氣溫對(duì)疫病發(fā)生造成的影響。

圖5　吳忠地區(qū)2017年4—5月氣溫變化情況

3　病因假設(shè)與分析

3.1　病因假設(shè)

根據(jù)調(diào)查結(jié)果，綜合發(fā)病癥狀、病理剖檢、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和流行病學(xué)特征，認(rèn)為引起該起豬腹瀉疫情的病原為PEDV。本次疫情單獨(dú)使用抗生素治療無(wú)效，流行性腹瀉二聯(lián)苗免疫配合抗生素治療有效，符合PEDV感染特征。

3.2　病因分析

該場(chǎng)自繁自養(yǎng)，飼料較新鮮，不存在霉變可能；發(fā)病時(shí)當(dāng)?shù)貧夂驘o(wú)異常；飼養(yǎng)人員均駐場(chǎng)，且家中沒(méi)有飼養(yǎng)豬；生物安全管理不到位，人員和物料進(jìn)出養(yǎng)殖區(qū)時(shí)未進(jìn)行徹底消毒。因此，推測(cè)物料輸入是引進(jìn)病原的途徑。PEDV感染的潛伏期一般為5～8 d，從發(fā)病首日（4月17日）向前推算，4月9日售出育肥豬和10日售出仔豬時(shí)引入病原的可能性極大。為避免引入感染病原，豬場(chǎng)通常對(duì)運(yùn)仔豬車消毒較好，而對(duì)收育肥豬的車消毒較差，且收豬車到當(dāng)?shù)夭煌酿B(yǎng)豬場(chǎng)收豬并運(yùn)往屠宰場(chǎng)，因而運(yùn)輸車輛存在與不同來(lái)源宿主接觸的機(jī)會(huì)，況且附近其它豬場(chǎng)在此疫情發(fā)生之前也確有相似疾病發(fā)生。雖然運(yùn)輸車輛不直接進(jìn)入飼養(yǎng)區(qū)，而由養(yǎng)殖人員通過(guò)自己的運(yùn)輸工具轉(zhuǎn)運(yùn)，但運(yùn)輸過(guò)程中人員與器具均能攜帶病原進(jìn)入飼養(yǎng)區(qū)，又因?yàn)橐鹭i群發(fā)生PEDV感染的病毒量極低，使得未免疫豬場(chǎng)感染概率加大。因而，4月9日售出育肥豬時(shí)帶入病原的可能性最大。

從場(chǎng)舍內(nèi)的發(fā)病順序來(lái)看，最先發(fā)病的4個(gè)豬舍分別由4位飼養(yǎng)人員管理，但卻先后發(fā)病，可能是由于養(yǎng)殖人員同吃同住，出入飼養(yǎng)區(qū)也沒(méi)有嚴(yán)格消毒，以及飼養(yǎng)器具混用等原因造成的。

4　結(jié)論和建議

通過(guò)本次調(diào)查，確定該起疫情的病原為PEDV。暴發(fā)原因?yàn)檫\(yùn)輸車輛或人員帶入病毒，導(dǎo)致疫情擴(kuò)散至全群。建議豬場(chǎng)運(yùn)出或運(yùn)入豬或物料時(shí)，加強(qiáng)消毒，并強(qiáng)化飼養(yǎng)人員的消毒意識(shí)，進(jìn)出飼養(yǎng)區(qū)時(shí)更換運(yùn)輸工具，及時(shí)更換衣物并徹底消毒；飼養(yǎng)區(qū)內(nèi)定期采取切實(shí)可靠的消毒措施，不同豬舍的飼養(yǎng)器具要分開(kāi)，飼養(yǎng)人員盡可能不互相串舍；發(fā)生疫情后，及時(shí)對(duì)病豬進(jìn)行隔離，并送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，以便及早針對(duì)病因進(jìn)行治療，將損失降到最小。場(chǎng)主采納了此次調(diào)查的建議，改造了養(yǎng)殖場(chǎng)的入場(chǎng)消毒間和清洗消毒設(shè)施；新設(shè)立了人員進(jìn)出消毒緩沖間，要求人員進(jìn)出時(shí)更換衣物；將場(chǎng)內(nèi)外運(yùn)輸器具分開(kāi)使用。采取該措施后，該場(chǎng)未再發(fā)生大規(guī)模豬腹瀉疫情。

參考文獻(xiàn)：

[1] 孫振釗，趙偉男，王靖飛. 豬腹瀉病例中PEDV、TGEV及PRV的感染調(diào)查[J]. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2014（5）：132-135.

[2] 孫宏偉，王澤巖，任少敏，等. 豬主要腹瀉病的發(fā)病機(jī)制綜述[J]. 中國(guó)動(dòng)物檢疫，2016，33（3）：63-70.

[3] ZHANG W，ZHAO M，RUESCH L，et al. Prevalence of virulence genes in Escherichia coli strains recently isolated from young pigs with diarrhea in the US[J].Veterinary microbiology，2007，123（1/2/3）：145.

[4] BOHL E H. Rotaviral diarrhea in pigs：brief review[J].Journal of the American veterinary medical association，1979，174（6）：613.

[5] GUNN H M. Elimination of transmissible gastroenteritis virus from a pig farm by culling and serological surveillance[J]. Veterinary record，1996，138（9）：196-198.

[6] ALVAREZ J，SARRADELL J，MORRISON R，et al.Impact of porcine epidemic diarrhea on performance of growing pigs[J]. Plos one，2015，10（3）：e0120532.

[7] LIU H，LI X T，HU B，et al. Outbreak of severe pseudorabies virus infection in pig-offal-fed farmed mink in Liaoning Province，China.[J]. Archives of virology，2016，162（3）：863-866.

[8] HU H，JUNG K，VLASOVA A N，et al. Isolation and characterization ofporcine deltacoronavirus from pigs with diarrhea in the United States[J]. Journal of clinical microbiology，2015，53：537-548.

[9] 朱子健，閆麗輝，鞠妍，等. 2015—2016年我國(guó)東北地區(qū)豬病毒性腹瀉流行病學(xué)調(diào)查[J]. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2017，39（5）：356-360.

[10] 劉云波，趙洪翠，王志成，等. 豬病毒性腹瀉分子流行病學(xué)調(diào)查[J]. 中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2013，40（2）：204-207.

[11] 秦谷雨，楊勇，李郁，等. 安徽省仔豬腹瀉5種病毒感染情況的調(diào)查研究[J]. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2012，33（12）：59-63.