一起豬藍(lán)耳病與偽狂犬病混合感染的緊急流行病學(xué)調(diào)查

董雅琴，劉林青，李　艷，趙桂華，李　印，李曉成，蘭鄒然

（1. 中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島　266032；2. 中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，北京　100125；3. 莒南縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，山東莒南　276600；4. 山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，山東濟(jì)南　250022）

豬藍(lán)耳病，學(xué)名豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS），是目前豬場(chǎng)常發(fā)病毒性免疫抑制性疾病。其病原為豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV），不同品種、年齡、性別的豬只均可感染，臨床表現(xiàn)為母豬繁殖障礙與生長(zhǎng)豬呼吸道癥狀[1-2]。2012年，我國(guó)學(xué)者分離到與美國(guó)PRRSV變異株NADC30毒株基因同源性較高的毒株[3]，統(tǒng)稱為類NADC30毒株（NADC30-like毒株）。此類毒株逐漸成為繼高致病性藍(lán)耳病后我國(guó)又一田間優(yōu)勢(shì)流行毒株[4]，臨床上主要導(dǎo)致母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或弱仔等繁殖障礙，流產(chǎn)率高達(dá)30%～40%，保育及生長(zhǎng)育肥豬嚴(yán)重的呼吸道癥狀，易繼發(fā)細(xì)菌感染，死淘率可達(dá)15%～20%[4-5]。研究表明，現(xiàn)有PRRS疫苗不能有效保護(hù)豬只免受此類毒株的侵害[6-7]。

偽狂犬?。≒esudorabies，PR），又稱奧耶茲氏病，是由偽狂犬病毒（Pesudorabies virus，PRV）引起的以癢、腦脊髓炎為主要特征的多種動(dòng)物傳染病[8]。豬是PRV的天然宿主和儲(chǔ)存宿主。PRV感染主要引起母豬流產(chǎn)、產(chǎn)木乃伊胎等繁殖障礙，成年豬輕微呼吸和消化系統(tǒng)癥狀，幼年豬神經(jīng)癥狀和腹瀉等。PRV也會(huì)侵害仔豬的免疫系統(tǒng)，造成仔豬免疫力低下，從而繼發(fā)感染其他病原，給豬場(chǎng)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失[9]。

2017年11月初，山東省某豬場(chǎng)育肥豬、哺乳仔豬、保育豬陸續(xù)出現(xiàn)咳嗽、氣喘、發(fā)燒等癥狀，隨后1周左右死亡，其間還有個(gè)別母豬發(fā)生流產(chǎn)。11月中旬，經(jīng)該地動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心初步治療，疫情未見(jiàn)好轉(zhuǎn)。截至11月底，累計(jì)發(fā)病豬只近200頭，病死50余頭。12月2日，調(diào)查組了解情況后立即趕赴現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行了調(diào)查。

1　方法

1.1　病例定義

1.1.1可疑病例 2017年11月4日至12月20日，該養(yǎng)殖場(chǎng)出現(xiàn)咳嗽、氣喘、發(fā)燒癥狀之一的豬，以及出現(xiàn)流產(chǎn)的妊娠母豬。

1.1.2死亡病例 2017年11月4日至12月20日，死亡的可疑病例。

1.1.3確診病例 可疑病例的淋巴結(jié)、肺、脾、扁桃體、腎等組織樣品，經(jīng)PCR/RT-PCR檢測(cè)，結(jié)合擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序分析，PRRSV野毒與PRV野毒均為陽(yáng)性的。

1.2　調(diào)查方式

1.2.1現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查 到發(fā)病養(yǎng)殖場(chǎng)戶實(shí)地調(diào)查，察看生產(chǎn)記錄；與養(yǎng)殖場(chǎng)管理人員座談，了解發(fā)病經(jīng)過(guò)、免疫、治療、日常飼養(yǎng)管理以及豬只調(diào)運(yùn)等信息；進(jìn)入豬場(chǎng)生產(chǎn)區(qū)，觀察養(yǎng)殖環(huán)境、圈舍衛(wèi)生狀況；同時(shí)搜索可疑病例，進(jìn)行臨床診斷及病理剖檢。

1.2.2抽樣檢測(cè) 結(jié)合臨床診斷和病理剖檢得出初步結(jié)論后，分別采集1頭發(fā)病仔豬及1頭死亡仔豬的淋巴結(jié)、扁桃體、肺、脾、腎等病變組織樣品，進(jìn)行PRRSV、豬瘟病毒（CSFV）、PRV、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）等高熱類病原的PCR/RT-PCR檢測(cè)；將陽(yáng)性樣品的擴(kuò)增產(chǎn)物送上海生工生物工程有限公司測(cè)序，以判定是否為野毒感染。

1.2.3數(shù)據(jù)收集、整理和分析 用Excel整理收集到的有關(guān)豬只發(fā)病和死亡信息，并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，對(duì)疫情分布情況進(jìn)行描述性分析。

2　結(jié)果

2.1　現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查

2.1.1養(yǎng)殖場(chǎng)基本情況 該場(chǎng)2011年開(kāi)始啟用，為某飼料企業(yè)合作豬場(chǎng)，且為該公司明星示范場(chǎng)。該場(chǎng)養(yǎng)殖規(guī)模中等，現(xiàn)有員工8人，包括場(chǎng)主1人、技術(shù)員1人、飼養(yǎng)員6人?，F(xiàn)有豬舍6棟，每個(gè)飼養(yǎng)員負(fù)責(zé)1棟。存欄生豬約2 150頭，其中能繁母豬120頭，采取自繁自養(yǎng)的連續(xù)飼養(yǎng)模式。該場(chǎng)還混養(yǎng)雞、鵝數(shù)十只。養(yǎng)殖場(chǎng)毗鄰鄉(xiāng)村小路，與另外兩家小規(guī)模豬場(chǎng)（A、B）僅一路之隔，距居民區(qū)約300 m。該場(chǎng)對(duì)主要豬病均進(jìn)行常規(guī)免疫。2017年初至此次疫情暴發(fā)前，豬群比較健康，僅有正常的零星發(fā)病和死淘現(xiàn)象。養(yǎng)殖場(chǎng)地理位置及功能區(qū)劃見(jiàn)圖1。

圖1　疫點(diǎn)地理位置（左）與功能區(qū)域布局（右）

2.1.2疫病經(jīng)過(guò)及防控情況 11月4日起，該豬場(chǎng)育肥豬出現(xiàn)咳嗽、氣喘、發(fā)低燒（40℃）等癥狀；7日起，3頭妊娠中期母豬先后發(fā)生流產(chǎn)；8—9日，哺乳仔豬、保育豬也陸續(xù)出現(xiàn)與育肥豬類似的癥狀。11月13日，該縣疫控中心專業(yè)人員到現(xiàn)場(chǎng)，根據(jù)臨診表現(xiàn)初步診斷為PRV與PRRSV的混合感染，并建議緊急免疫偽狂犬病疫苗，配合使用泰萬(wàn)菌素、替米考星進(jìn)行治療。17—20日，養(yǎng)殖戶采取了相應(yīng)措施，但未能控制住疫情。12月2日，調(diào)查組進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查，此時(shí)場(chǎng)中累計(jì)發(fā)病豬只約200頭，病死50余頭。12月11日，養(yǎng)殖戶采取新的控制措施，21日以后再無(wú)病死豬出現(xiàn)，疫情得到有效控制。

2.1.3疫病分布

2.1.3.1時(shí)間分布 由于疫情過(guò)程較長(zhǎng)，并未詳細(xì)記錄每日發(fā)病數(shù)，只根據(jù)死亡病例繪制流行曲線（圖2）。11月4日，育肥豬開(kāi)始發(fā)?。?1月10日，開(kāi)始出現(xiàn)死亡；11月13—20日，進(jìn)行初步診療；12月2日，調(diào)查組介入調(diào)查；12月11日起，逐步采取相應(yīng)干預(yù)措施；12月21日后，不再有病死豬出現(xiàn)，疫情得到有效控制。整個(gè)疫情暴發(fā)過(guò)程持續(xù)約1個(gè)半月。

圖2　疫病流行曲線

2.1.3.2空間分布 據(jù)調(diào)查，11月4日，2#舍中的育肥豬先出現(xiàn)咳嗽、氣喘、發(fā)燒等現(xiàn)象；5日，4#、6#舍幾乎同時(shí)出現(xiàn)有類似上述癥狀的育肥豬；7日，1#舍中的3頭妊娠中期母豬先后流產(chǎn)；8日，3#舍哺乳仔豬開(kāi)始發(fā)??；10日，5#舍保育豬開(kāi)始發(fā)病。各舍發(fā)病順序?yàn)椋?#→4#+6#→1#→3#→5#。各豬舍豬群發(fā)病情況各不相同（圖3）：發(fā)病死亡最嚴(yán)重的為5#舍，發(fā)病率達(dá)0.46例/豬-月，死亡率為0.13例/豬-月；其他豬舍發(fā)病率均不超過(guò)0.07例/豬-月，死亡率均在0.05例/豬-月以下；1#舍無(wú)豬只死亡。發(fā)病率、死亡率計(jì)算公式如下[10]：

圖3　不同豬舍發(fā)病、死亡情況的比較

2.1.3.3群間分布 此次疫情暴發(fā)過(guò)程中，各生長(zhǎng)階段豬群均有發(fā)病。其中，母豬表現(xiàn)為流產(chǎn)，仔豬與育肥豬表現(xiàn)為咳嗽、氣喘、發(fā)燒等癥狀。各豬群發(fā)病順序?yàn)橛守i→母豬→哺乳仔豬→保育豬。比較而言，保育仔豬發(fā)病最為嚴(yán)重，發(fā)病率達(dá)到0.46例/豬-月，死亡率為0.13例/豬-月；其他豬群發(fā)病率均不超過(guò)0.08，且死亡率均在0.06以下，母豬無(wú)死亡（圖4）。

圖4　不同生長(zhǎng)階段豬群發(fā)病、死亡情況比較

2.1.4臨床診斷及病理剖檢 臨床診斷發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)房哺乳仔豬有咳嗽、發(fā)低燒（40 ℃）等癥狀；保育舍仔豬有咳嗽、氣喘、發(fā)低燒（40 ℃）等癥狀；此時(shí)育肥豬和母豬均無(wú)發(fā)病現(xiàn)象?，F(xiàn)場(chǎng)剖檢1頭20日齡左右的發(fā)病哺乳仔豬，發(fā)現(xiàn)腹股溝淋巴結(jié)邊緣出血，切面有壞死點(diǎn)；扁桃體有壞死灶。剖檢1頭前1日死亡的保育仔豬，發(fā)現(xiàn)脾臟有大面積出血斑；下頜淋巴結(jié)腫大，切面有壞死灶；扁桃體有壞死斑；氣管粘膜出血。病理剖檢變化見(jiàn)圖5。

圖5　仔豬剖檢病變

2.2　實(shí)驗(yàn)室診斷

此次疫情中，豬只發(fā)病后僅6～7 d即死亡，符合病毒類疫病特征；對(duì)采集的淋巴結(jié)、肺、脾、扁桃體、腎等組織樣品，用PCR/RT-PCR方法對(duì)臨床上導(dǎo)致高熱呼吸征候群的相關(guān)病毒性病原進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)陽(yáng)性樣品進(jìn)行測(cè)序。結(jié)果表明：2頭仔豬PRRSV核酸均為陽(yáng)性，測(cè)序結(jié)果為類NADC30毒株；PRV核酸均為陽(yáng)性，測(cè)序結(jié)果為野毒（表1）。

表1　樣品病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果

3　干預(yù)措施

針對(duì)該場(chǎng)情況，建議全群緊急免疫偽狂犬病疫苗，并提高劑量；對(duì)母豬使用泰萬(wàn)菌素和中藥制劑，對(duì)仔豬注射干擾素和長(zhǎng)效土霉素以控制豬藍(lán)耳病，同時(shí)緩解呼吸道癥狀并抑制細(xì)菌感染。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，采取必要的生物安全措施：在場(chǎng)區(qū)入口及豬舍入口設(shè)立消毒池及人員噴淋設(shè)施；轉(zhuǎn)舍時(shí)務(wù)必對(duì)空欄舍進(jìn)行徹底消毒；發(fā)病豬及時(shí)隔離治療。養(yǎng)殖戶接受了建議，并于12月11日起逐步采取了相應(yīng)措施，疫情逐漸平息，12月21日后再無(wú)病死豬出現(xiàn)。

4　討論

4.1　病因分析

綜合臨床診斷、病理剖檢、實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果，判定此次疫情系PRRSV與PRV混合感染引發(fā)的。經(jīng)調(diào)查認(rèn)為，鄰場(chǎng)發(fā)病以及人員傳播、寒冷應(yīng)激、斷奶應(yīng)激可能是此次疫情暴發(fā)的誘因。相關(guān)事件發(fā)生順序見(jiàn)圖6。

圖6　事件發(fā)生的時(shí)間順序

4.1.1鄰場(chǎng)發(fā)病與人員傳播 據(jù)了解，與該發(fā)病場(chǎng)僅一路之隔有兩個(gè)小規(guī)模豬場(chǎng)（圖1右），3個(gè)豬場(chǎng)距離非常近，給疫病傳播提供了極為便利的條件。另外，這兩個(gè)小規(guī)模豬場(chǎng)系該場(chǎng)主的兄弟姐妹所有。這3個(gè)豬場(chǎng)的管理人員常穿梭于3場(chǎng)之間。10月25日，豬場(chǎng)A暴發(fā)與該場(chǎng)類似的仔豬高熱疫情，但未采取任何措施，約1個(gè)月后，疫情平息，共損失近100頭仔豬。因豬場(chǎng)A發(fā)病時(shí)間早于并接近該調(diào)查場(chǎng)發(fā)病時(shí)間，且豬群發(fā)病癥狀類似，認(rèn)為豬場(chǎng)A發(fā)病與管理飼養(yǎng)人員攜帶傳播是此次疫情暴發(fā)的原因之一。此外，疫病在該場(chǎng)各棟舍之間的傳播與飼養(yǎng)人員的交叉污染也有關(guān)系。雖然6位飼養(yǎng)員各自負(fù)責(zé)1棟豬舍，但吃飯、休息都在一起，且進(jìn)出豬舍沒(méi)有消毒或更衣，因此飼養(yǎng)員的相互接觸加速了場(chǎng)內(nèi)疫病的傳播。

4.1.2寒冷應(yīng)激 10—11月，正值初冬時(shí)節(jié)，該縣氣溫波動(dòng)較為明顯。11月3—4日氣溫連續(xù)驟降，最高氣溫、最低氣溫分別下降了9 ℃、8 ℃（圖7）。4日，該場(chǎng)豬只便開(kāi)始出現(xiàn)病癥，因此懷疑與氣溫驟降所致的寒冷應(yīng)激有關(guān)。

圖7　2017年10月16日－11月30日該縣氣溫變化

4.1.3斷奶應(yīng)激 據(jù)了解，該場(chǎng)保育豬大多在斷奶后開(kāi)始發(fā)病。斷奶后，飼料的轉(zhuǎn)變對(duì)生長(zhǎng)發(fā)育旺盛期的仔豬造成強(qiáng)烈應(yīng)激，再由于缺少了母源抗體的保護(hù)，使得抵抗力急劇下降。因此，認(rèn)為斷奶應(yīng)激是保育仔豬發(fā)病的主要誘因。

4.1.4其他誘因 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該場(chǎng)生物安全措施不健全，具體表現(xiàn)為：進(jìn)場(chǎng)沒(méi)有任何人員或車輛消毒設(shè)施；場(chǎng)內(nèi)衛(wèi)生條件較差；發(fā)病豬沒(méi)有隔離飼養(yǎng)，7#舍雖設(shè)計(jì)為病豬舍，但目前已成為雞、鵝舍，在場(chǎng)區(qū)中亂跑的雞、鵝也可能是病原傳播的重要媒介。此外，11月13日初步診斷后，養(yǎng)殖戶分別于11月17日和20日進(jìn)行了偽狂犬病緊急注射免疫和頭孢類抗生素注射治療，結(jié)果引起20余頭發(fā)病哺乳仔豬死亡，可見(jiàn)注射應(yīng)激是引起部分發(fā)病哺乳仔豬死亡的原因。

4.2　局限性分析

此次調(diào)查時(shí)間較滯后，如能盡早介入并控制住疫情，便可減少不必要損失。由于此次疫情持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，約1個(gè)半月，仔豬生長(zhǎng)階段變化較大，因此無(wú)法計(jì)算襲擊率，故只能以發(fā)病率和死亡率來(lái)評(píng)估疫情的嚴(yán)重程度。此外，由于該場(chǎng)缺乏詳盡的生產(chǎn)記錄、用藥記錄和發(fā)病記錄，故調(diào)查組獲得的數(shù)據(jù)均是場(chǎng)主和技術(shù)人員回憶的大概數(shù)字，無(wú)法進(jìn)行深入的數(shù)據(jù)分析，且存在一定的回憶性信息偏倚。

5　結(jié)論

通過(guò)流行病學(xué)調(diào)查，確認(rèn)此次疫情系PRRSV與PRV混合感染所引起的母豬流產(chǎn)和生長(zhǎng)豬呼吸道癥狀及死亡，鄰場(chǎng)發(fā)病以及人員傳播、寒冷應(yīng)激、斷奶應(yīng)激等均可能是導(dǎo)致疫情暴發(fā)的原因。

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