2017年安徽省豬群高致病性豬藍(lán)耳病的定點(diǎn)監(jiān)測(cè)

沈　艷，費(fèi)保祥，李少炎，占松鶴，何長生，周迎春，王　倩，王　軍，王　維，劉　華，王　立，朱良強(qiáng)

（1. 安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，安徽合肥　230091；2. 全椒縣動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，安徽全椒　239500；3. 望江縣動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，安徽望江　246200）

高致病性豬藍(lán)耳?。℉igh pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome，HP-PRRS）由高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒（HP-PRRSV）引起，是我國的一類動(dòng)物疫病，主要引起母豬流產(chǎn)和產(chǎn)死胎，以及仔豬的高死亡率等，是目前影響?zhàn)B豬業(yè)的重要疫病之一[1]。為了解HP-PRRS在安徽省固定監(jiān)測(cè)點(diǎn)豬群的流行及分布情況，根據(jù)農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局和安徽省動(dòng)物疫病定點(diǎn)監(jiān)測(cè)方案，2017年在5個(gè)縣（區(qū)）開展了HP-PRRS定點(diǎn)監(jiān)測(cè)。

1　材料與方法

1.1　監(jiān)測(cè)點(diǎn)選擇

根據(jù)安徽省地理環(huán)境，在全椒縣、望江縣和六安市裕安區(qū)，各選擇2個(gè)中型規(guī)?；i場(chǎng)（存欄1 000～5 000頭）、2個(gè)小型規(guī)模豬場(chǎng)（存欄量＜1 000頭），在六安市金安區(qū)和阜陽市臨泉縣各選擇1個(gè)生豬屠宰場(chǎng)作為監(jiān)測(cè)點(diǎn)。共計(jì)12個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)和2個(gè)生豬屠宰場(chǎng)。

1.2　樣品采集

每個(gè)采樣點(diǎn)采集血清和對(duì)應(yīng)組織樣品（扁桃體），其中中型規(guī)模化豬場(chǎng)采集30～40份，小型豬場(chǎng)15份，生豬屠宰場(chǎng)10～20份。共采集樣品638份，其中血清319份、扁桃體319份。

1.3　檢測(cè)試劑

高致病性豬藍(lán)耳病抗體ELISA試劑盒（批號(hào)99-40959H201，美國IDEXX公司）；高致病性豬藍(lán)耳?。ㄗ儺愔辏晒釸T-PCR檢測(cè)試劑盒（批號(hào)PRRS20161027P，北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司）；磁珠法病毒DNA/RNA 提取試劑盒（批號(hào)422410，北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司）。

1.4　檢測(cè)方法

采用ELISA方法，檢測(cè)PRRSV抗體，抗體陽性即判定為免疫合格或者陽性，抗體陽性率≥70%的場(chǎng)點(diǎn)判定為抗體陽性場(chǎng)點(diǎn)；用豬藍(lán)耳病病毒熒光RT-PCR，檢測(cè)PRRSV核酸（變異株），陽性的即判定為病原學(xué)陽性，群體中檢測(cè)出1份及以上病毒核酸陽性樣品，即判為病毒核酸陽性場(chǎng)點(diǎn)。

2　結(jié)果與分析

2.1　血清學(xué)監(jiān)測(cè)

2.1.1不同免疫狀況 共檢測(cè)14個(gè)場(chǎng)點(diǎn)的319份血清樣品，檢出抗體陽性232份，平均抗體陽性率為72.7%，陽性場(chǎng)點(diǎn)10個(gè)，場(chǎng)點(diǎn)陽性率為92.9%。免疫、未免疫、免疫不詳豬群的抗體陽性率分別是84.7%、44.1%、83.3%，場(chǎng)點(diǎn)陽性率分別為77.8%、33.3%、100%，抗體全陰性場(chǎng)點(diǎn)只有1個(gè)（表1）。免疫豬群抗體陽性率明顯高于未免疫的，差異極顯著（P＜0.01）。

表1　不同免疫狀況豬群的HP-PRRSV抗體檢測(cè)結(jié)果

2.1.2不同生產(chǎn)階段 生產(chǎn)母豬、后備母豬、保育豬、育肥豬、屠宰豬的抗體陽性率分別為100%、74.1%、80.6%、62.7%、83.3%；場(chǎng)點(diǎn)陽性率分別為100%、87.5%、71.4%、75.0%、100%（表2）。不同生長階段的抗體陽性率差異極顯著（P＜0.01）。其中：保育豬與育肥豬、生產(chǎn)母豬與保育豬兩兩比較，差異極顯著（P＜0.01）；生產(chǎn)母豬與后備母豬、育肥豬與屠宰豬兩兩比較，差異顯著（0.05＜P＜0.01）；后備母豬與保育豬、生產(chǎn)母豬與保育豬、后備母豬與育肥豬、保育豬與屠宰豬、后備母豬與屠宰豬、生產(chǎn)母豬與屠宰豬兩兩相比較，差異不顯著（P＞0.05）。

表2　不同生產(chǎn)階段HP-PRRSV抗體檢測(cè)結(jié)果

2.1.3不同場(chǎng)點(diǎn)類型 中型場(chǎng)、小型場(chǎng)、屠宰場(chǎng)的抗體陽性率分別為74.5%、65.6%、83.3%，場(chǎng)點(diǎn)陽性率分別為66.7%、66.7%、100%（表3）。不同類型場(chǎng)點(diǎn)的抗體陽性率差異不顯著（P＞0.05）。

表3　不同采樣點(diǎn)HP-PRRSV抗體檢測(cè)結(jié)果

2.1.4不同場(chǎng)點(diǎn)區(qū)域 全椒縣、望江縣、裕安區(qū)、金安區(qū)、臨泉縣的陽性率分別為67.8%、54.1%、100%、80.0%、90.0%，場(chǎng)點(diǎn)陽性率分別為50.0%、50.0%、100%、100%、100%（表4）。不同區(qū)域的抗體陽性率差異極顯著（P＜0.01）。其中：全椒縣與裕安區(qū)、望江縣與裕安區(qū)、金安區(qū)與裕安區(qū)、金安區(qū)與臨泉縣、裕安區(qū)與臨泉縣兩兩相比較，均差異極顯著（P＜0.01）；望江縣與臨泉縣、望江縣與金安區(qū)、全椒縣與望江縣兩兩相比較，均差異顯著（0.05＜P＜0.01）；全椒縣與臨泉縣、全椒縣與金安區(qū)兩兩相比較，差異不顯著（P＞0.05）。

表4　 不同區(qū)域HP-PRRSV抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2　病原學(xué)監(jiān)測(cè)

2.2.1不同免疫狀況 共檢測(cè)14個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)的319份豬扁桃體樣本，在7個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)檢出PRRSV（變異株）核酸陽性56份，病毒核酸陽性率為17.6%，場(chǎng)點(diǎn)陽性率為50.0%。免疫、未免疫、免疫不詳豬群檢出的病毒核酸陽性率分別是14.8%、25.8%、10.0%，場(chǎng)點(diǎn)陽性率分別為44.4%、33.3%、100%（表5）。免疫與未免疫比較，差異顯著（0.01＜P＜0.05）。

表5　不同免疫狀況HP-PRRSV核酸檢測(cè)結(jié)果

2.2.2不同生產(chǎn)階段 生產(chǎn)母豬、后備母豬、保育豬、育肥豬、屠宰豬檢出核酸陽性率分別為0、5.2%、26.4%、21.8%、10.0%，場(chǎng)點(diǎn)陽性點(diǎn)率分別為0、12.5%、57.1%、37.5%、100%（表6）。生產(chǎn)母豬和后備母豬的病毒核酸陽性率明顯低于保育豬和育肥豬，差異極顯著（P＜0.01）。其中：后備母豬與保育豬、后備母豬與育肥豬兩兩相比，均差異極顯著（P＜0.01）；生產(chǎn)母豬與保育豬、生產(chǎn)母豬與育肥豬兩兩相比，均差異顯著（0.05＜P＜0.01）；生產(chǎn)母豬與后備母豬、保育豬與育肥豬、育肥豬與屠宰豬、保育豬與屠宰豬、后備母豬與屠宰豬、生產(chǎn)母豬與屠宰豬兩兩之間比較，均差異不顯著（P＞0.05）。

表6　不同生產(chǎn)階段HP-PRRSV核酸檢測(cè)結(jié)果

2.2.3不同場(chǎng)點(diǎn)類型 14個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)中，檢出病毒核酸陽性點(diǎn)7個(gè)，其中規(guī)模場(chǎng)5個(gè)、屠宰場(chǎng)2個(gè)。中型規(guī)模場(chǎng)、小型規(guī)模場(chǎng)，屠宰場(chǎng)的病毒核酸陽性率分別是25.0%、4.3%、10.0%，場(chǎng)點(diǎn)陽性率分別為50.0%、33.3%、100%（表7）。中型規(guī)模場(chǎng)病毒核酸陽性率明顯高于小型規(guī)模場(chǎng)和屠宰場(chǎng)，差異極顯著（P＜0.01）。其中：中型規(guī)模場(chǎng)與小型規(guī)模場(chǎng)相比，差異極顯著（P＜0.01）；中型規(guī)模場(chǎng)與屠宰場(chǎng)相比，差異極顯著（P＜0.01）；小型規(guī)模場(chǎng)與屠宰場(chǎng)相比，差異不顯著（P＞0.05）。

表7　不同采樣點(diǎn)HP-PRRSV核酸檢測(cè)結(jié)果

2.2.4不同場(chǎng)點(diǎn)區(qū)域 全椒縣、望江縣、六安市裕安區(qū)、六安市金安區(qū)、臨泉縣檢出的病毒核酸陽性率分別是1.1%、22.0%、31.1%、5.0%、20.0%，場(chǎng)點(diǎn)陽性率分別為25.0%、25.0%、75.0%、100%、100%（表8）。各區(qū)域之間總體比較，差異極顯著（P＜0.01）。其中：全椒縣與望江縣、全椒縣與裕安區(qū)、全椒縣與臨泉縣兩兩相比較，均差異極顯著（P＜0.01）；裕安區(qū)與金安區(qū)相比較，差異顯著（0.05＜P＜0.01）；望江縣與裕安區(qū)、望江縣與金安區(qū)、裕安區(qū)與臨泉縣、金安區(qū)與臨泉縣、全椒縣與臨泉縣、全椒縣與金安區(qū)兩兩相比較，均差異不顯著（P＞0.05）。

表8　 不同區(qū)域采樣點(diǎn)HP-PRRSV核酸檢測(cè)結(jié)果

3　討論

本次定點(diǎn)監(jiān)測(cè)顯示，免疫豬群的HP-PRRSV抗體陽性率明顯偏高，且病毒核酸陽性率低于未免疫豬群，兩者均存在顯著差異，說明疫苗免疫對(duì)于HP-PRRS具有一定的保護(hù)作用。此次檢測(cè)發(fā)現(xiàn)部分免疫豬群的病毒核酸也呈陽性。這可能是由于藍(lán)耳病活疫苗的普遍、頻繁、無序使用，導(dǎo)致該病復(fù)雜程度隨著毒株的增多而加劇，成為豬場(chǎng)的“常在性”疫病[1]。

通過對(duì)不同階段豬群監(jiān)測(cè)結(jié)果的比較，可以看出保育豬及育肥豬是該病防控的短板。保育階段的仔豬，受斷奶、轉(zhuǎn)圈、換料等應(yīng)激因素以及母源抗體降低等影響，即使不發(fā)病，也容易在此階段感染PRRSV；育肥階段豬群對(duì)疫病的抵抗力較保育豬強(qiáng)，但是此階段感染豬多在保育期間感染，因此在外界環(huán)境變化、免疫抗體水平下降時(shí)，仍有發(fā)生此病的風(fēng)險(xiǎn)[3]。

根據(jù)不通場(chǎng)點(diǎn)監(jiān)測(cè)結(jié)果分析，中型規(guī)模場(chǎng)發(fā)生此病的風(fēng)險(xiǎn)較高。此次中型豬場(chǎng)檢出49份病毒核酸陽性樣品，免疫與未免疫豬群約各占50%（25/24），保育豬、育肥豬、后備母豬間的比例為15:31:3，其抗體檢測(cè)結(jié)果均為陽性。中型豬場(chǎng)與小型豬場(chǎng)以及中型豬場(chǎng)與屠宰場(chǎng)的病毒核酸陽性率差異性分析結(jié)果，表明此病毒在中型豬場(chǎng)的感染程度明顯高于小型規(guī)模場(chǎng)以及屠宰場(chǎng)。因此，中小型規(guī)模豬場(chǎng)應(yīng)做好嚴(yán)格的引種控制，以及人員和運(yùn)輸工具出入控制，切斷病毒傳播；同時(shí)內(nèi)部做好全進(jìn)全出、衛(wèi)生消毒，降低/清除場(chǎng)內(nèi)污染源，阻斷病毒在豬場(chǎng)與豬群間的循環(huán)與傳播[1]。

根據(jù)不同區(qū)域的場(chǎng)點(diǎn)監(jiān)測(cè)結(jié)果可以看出，病毒感染呈現(xiàn)皖西南、西北比皖東部嚴(yán)重的趨勢(shì)。通過抗體檢測(cè)結(jié)果與病毒核酸檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)學(xué)驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，安徽省東部的全椒縣與安徽省西南的望江縣、西部的裕安區(qū)以及西北部的臨泉縣差異極顯著。因此，應(yīng)加強(qiáng)皖西南與皖西北部生豬養(yǎng)殖及運(yùn)輸環(huán)節(jié)的衛(wèi)生防疫，動(dòng)物防疫機(jī)構(gòu)應(yīng)做好相應(yīng)的檢疫監(jiān)督以及技術(shù)支持。

我國的HP-PRRS疫情這幾年相對(duì)平穩(wěn)，但豬場(chǎng)帶毒現(xiàn)象依然存在。由于該病毒在機(jī)體內(nèi)的持續(xù)感染，使機(jī)體免疫水平降低，易導(dǎo)致豬瘟、豬圓環(huán)病毒病等免疫失敗、繼發(fā)或混合感染，使得豬病預(yù)防、診斷和控制更加困難[8]。養(yǎng)殖場(chǎng)戶要根據(jù)不同防控階段，制定相應(yīng)的免疫方案，逐步實(shí)現(xiàn)從免疫控制到免疫退出[5]。動(dòng)物疫病防控部門應(yīng)加強(qiáng)此病的監(jiān)測(cè)，持續(xù)跟蹤病原分布和變異情況。

4　結(jié)論

本次豬群定點(diǎn)HP-PRRS監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)：免疫豬群的HP-PRRSV抗體陽性率明顯偏高，且病毒核酸陽性率低于未免疫豬群，說明疫苗免疫具有一定的保護(hù)作用；保育豬群及育肥豬群感染率較高，是該病防控的短板；中型豬場(chǎng)感染程度明顯高于小型規(guī)模場(chǎng)以及屠宰場(chǎng)，提示中型規(guī)模豬場(chǎng)應(yīng)做好嚴(yán)格的引種控制，以及人員和運(yùn)輸工具出入控制；皖西南和西北地區(qū)的感染情況較為嚴(yán)重，提示應(yīng)加強(qiáng)這些地區(qū)生豬養(yǎng)殖及運(yùn)輸環(huán)節(jié)的衛(wèi)生防疫。

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