微小RNA對(duì)口腔鱗狀細(xì)胞癌調(diào)控機(jī)制的研究進(jìn)展

陳 祺(綜述) 魏魁杰(審校)

(復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院口腔科 上海 201700)

口腔鱗狀細(xì)胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是口腔頜面部最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。其發(fā)生發(fā)展過(guò)程是一系列遺傳因素、內(nèi)部穩(wěn)態(tài)和外部環(huán)境綜合作用的結(jié)果,表現(xiàn)為癌基因激活或抑癌基因失活兩方面,從而誘發(fā)腫瘤形成。同時(shí),在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中,細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲、轉(zhuǎn)移、腫瘤血管生成等一系列生物學(xué)行為均會(huì)發(fā)生改變。

微小RNA(microRNA,miRNA)是一種內(nèi)源性非編碼蛋白質(zhì)的小分子RNA,與靶mRNA分子結(jié)合后可以使mRNA降解并抑制蛋白質(zhì)翻譯,進(jìn)而調(diào)控靶基因的表達(dá),在細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為中起重要作用。前期研究證實(shí)miRNA對(duì)多種腫瘤的生物學(xué)行為發(fā)揮重要的調(diào)控作用。在OSCC中,miRNA的異常表達(dá)同樣可影響腫瘤細(xì)胞多種生物學(xué)功能。miRNA種類(lèi)繁多,對(duì)OSCC的發(fā)生發(fā)展參與過(guò)程主要可以概括為以下3點(diǎn):調(diào)控癌基因的表達(dá),細(xì)胞周期、增殖、凋亡、侵襲與轉(zhuǎn)移,血管增生和細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)。

調(diào)控OSCC基因的表達(dá)miRNA是一類(lèi)長(zhǎng)度為18～24個(gè)核糖核苷酸的小分子RNA,其初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為pri-miRNA,在細(xì)胞質(zhì)加工后成為短發(fā)夾 RNA(short hairpin RNA,shRNA),再通過(guò)核酸酶的剪切修飾成為成熟的miRNA。前期研究顯示:在人類(lèi)腫瘤中大約有50%的miRNA基因定位于相關(guān)腫瘤的基因位點(diǎn)上,表明與多種人類(lèi)疾病的發(fā)生發(fā)展關(guān)聯(lián),而其異常轉(zhuǎn)錄和表達(dá)同樣在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。miRNA調(diào)控癌基因作用包括兩方面:當(dāng)激活癌基因時(shí),可引起癌基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的過(guò)量表達(dá),促進(jìn)癌變過(guò)程。當(dāng)抑制癌基因時(shí),可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡,從而達(dá)到抑制腫瘤的目的。同樣,當(dāng)miRNA靶分子是某些腫瘤抑制性基因或控制細(xì)胞分化、凋亡的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物時(shí),miRNA表達(dá)增加會(huì)抑制靶基因功能,引發(fā)癌變。不同類(lèi)型miRNA通過(guò)其不同的途徑調(diào)控OSCC基因的表達(dá)來(lái)發(fā)揮重要功能。

早期研究證明:miR-125b作為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的致癌基因,通過(guò)p53和p38MAPK非依賴(lài)性途徑抑制細(xì)胞凋亡,而在OSCC中miR-125b具有特異性表達(dá),Yan等[1]實(shí)驗(yàn)顯示:hsa-miR-125b在OSCC樣品中表達(dá)下調(diào),誘導(dǎo)各種過(guò)程和途徑的變化,并且提供進(jìn)一步誘導(dǎo)OSCC的機(jī)制水平,通過(guò)發(fā)揮對(duì)p35基因表達(dá)的負(fù)調(diào)控和其下游大分子生物過(guò)程(長(zhǎng)期增強(qiáng)和黏附連接途徑)來(lái)實(shí)現(xiàn)。總而言之,miR-125b在OSCC的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有重要作用,是對(duì)其癌基因的調(diào)控而發(fā)揮作用。

miR-26是一種對(duì)腫瘤具有抑制性作用的miRNA,發(fā)揮抑癌基因作用,其表達(dá)降低可促進(jìn)腫瘤發(fā)生。相關(guān)免疫學(xué)檢測(cè)證實(shí)Wnt5a mRNA是miR-26a的直接靶分子,miR-26a可以作用于 Wnt5a mRNA而抑制OSCC。研究還表明:miR-26a的下游靶分子還包括EZH2、PTEN、MCL-1和 MTDH的mRNA等,均可能在OSCC中作為抑癌基因來(lái)抑制腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。

miR-211是腫瘤中最常見(jiàn)的miRNA之一,在OSCC形成過(guò)程中同樣發(fā)揮癌基因作用,可以作用于多個(gè)參與腫瘤血管形成、癌細(xì)胞凋亡的基因。Chen等[2]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在轉(zhuǎn)基因小鼠中使用4-硝基喹啉1-氧化物(4NQO)可誘導(dǎo)口腔致癌作用,在OSCC細(xì)胞中,4NQO和arecoline可誘導(dǎo)miR-211表達(dá)上調(diào),miR-211作為癌基因通過(guò)抑制TCF12和增加抗氧化活性來(lái)增強(qiáng)致癌性,從而誘導(dǎo)OSCC的發(fā)生。

Christopher等[3]在miRNA-mRNA調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中分析了炎癥細(xì)胞和其調(diào)節(jié)基因的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,參與信號(hào)通路的相互作用基因,發(fā)現(xiàn)miR-19a/b在OSCC中的控制炎癥反應(yīng)中顯示出重要的的影響。同時(shí),微管蛋白作為miR-19a/b的靶分子和失調(diào)的基因在炎癥中可識(shí)別miRNA-mRNA,對(duì)于OSCC的診治可能具有重要應(yīng)用。

miR-494-3p在OSCC中的重要作用已被證實(shí)。Weng等[4]研究發(fā)現(xiàn)miR-494-3p在OSCC中起抑制靶基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)作用。Bmi1 mRNA作為miR-494-3p的靶分子,在SAS細(xì)胞中低表達(dá),從而抑制p16INK4a和視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤1(RB1)的表達(dá)。在OSCC組織中觀察到Bmi1和miR-494-3p表達(dá)之間的逆相關(guān)性,miR-494-3p可以通過(guò)誘導(dǎo)由Bmi1基因表達(dá)下調(diào)引起OSCC細(xì)胞衰老和增加其放射敏感性。

Cheng等[5]調(diào)查了40對(duì)OSCC標(biāo)本和匹配的非腫瘤上皮組織中miRNA的表達(dá)譜,數(shù)據(jù)顯示腫瘤組織中的miR-455-5p表達(dá)高于正常組織。此外,通過(guò)免疫分析發(fā)現(xiàn)泛素綴合酶E2B(UBE2B)的mRNA作為miR-455-5p的靶分子,其mRNA水平可促進(jìn)OSCC的發(fā)生,而這一表達(dá)受TGF-β依賴(lài)性途徑的調(diào)節(jié),其隨后導(dǎo)致UBE2B基因表達(dá)下調(diào)并促進(jìn)OSCC發(fā)生。

調(diào)控OSCC細(xì)胞周期、增殖、凋亡、侵襲、轉(zhuǎn)移和腫瘤血管增生miRNA在OSCC中除了通過(guò)調(diào)控腫瘤相關(guān)基因,發(fā)揮促癌基因和抑癌基因作用,還可以通過(guò)直接調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、增殖、凋亡、腫瘤血管增生、侵襲和轉(zhuǎn)移等發(fā)揮相應(yīng)功能。

調(diào)控OSCC細(xì)胞周期 正常細(xì)胞周期的穩(wěn)定性由細(xì)胞周期蛋白和細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶 (cyclin dependent kinase,CDK)的共同作用產(chǎn)生。主要包括4個(gè)時(shí)期:G1/S 轉(zhuǎn)換期、G1 期、S 期、G2/M 轉(zhuǎn)換期,在每個(gè)期都會(huì)有對(duì)應(yīng)miRNA調(diào)控蛋白發(fā)揮作用,特別是在G1/S 期,起主要作用的蛋白主要包括BCL6、細(xì)胞周期蛋白D2、CyclinD1和Bcl-2、CDK6等。眾多miRNA在調(diào)控腫瘤細(xì)胞周期中具有重要作用,而在OSCC中,主要包括以下類(lèi)型miRNA。

miR-34具有多種家族成員,其中miR-34a和miR-34b/c最為重要,前期研究證實(shí):在OSCC中,作為P53的靶基因,miR-34a和miR-34b/c可以抑制 MET、CDK4、CCNE2和MYC等細(xì)胞周期相關(guān)基因表達(dá),從而抑制細(xì)胞周期,發(fā)揮抑制腫瘤作用。

Zeng等[6]在研究中分析了miR-155對(duì)其靶基因B細(xì)胞CLL /淋巴瘤6(BCL6)和下游基因細(xì)胞周期蛋白D2(CCND2)的調(diào)節(jié)作用。研究發(fā)現(xiàn)miR-155在OSCC細(xì)胞和腫瘤組織中的表達(dá)明顯高于對(duì)照組,miR-155模擬物可以下調(diào)BCL6水平和增加細(xì)胞周期蛋白D2表達(dá)。而且,用miR-155引物可以上調(diào)BCL6和減少細(xì)胞周期蛋白D2表達(dá)。這些結(jié)果表明miR-155通過(guò)調(diào)節(jié)BCL6 /細(xì)胞周期蛋白D2軸在OSCC中起腫瘤促進(jìn)作用。

Wang等[7]研究顯示miR-182在OSCC組織表達(dá)明顯增高,相關(guān)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)表明其與RASA1和SPRED1的蛋白質(zhì)表達(dá)負(fù)相關(guān),miR-182的過(guò)表達(dá)維持了Ras-MEK-ERK信號(hào)通路活化,促進(jìn)了細(xì)胞周期的進(jìn)展,表明miR-182通過(guò)直接靶向和抑制RASA1和SPRED1發(fā)揮其致癌作用。

miR-143作為腫瘤抑制劑為人所知。Sun等[8]最新研究發(fā)現(xiàn)定己糖激酶2(HK2)是OSCC細(xì)胞中miR-143的直接靶分子,其3′非翻譯區(qū)(UTR)可與miR-143互相配對(duì),誘發(fā)體內(nèi)外糖酵解的抑制,其中很重要的效應(yīng)便是顯著引起G1期的細(xì)胞周期停滯,從而達(dá)到抑制OSCC的作用。

調(diào)控OSCC細(xì)胞增殖、凋亡 腫瘤細(xì)胞增殖過(guò)程由促進(jìn)細(xì)胞分裂增殖的信號(hào)分子和抑制細(xì)胞分裂增殖的信號(hào)分子共同調(diào)節(jié)來(lái)達(dá)到平衡狀態(tài)。有很多miRNA可直接調(diào)控細(xì)胞增殖相關(guān)的調(diào)節(jié)蛋白,這些調(diào)節(jié)蛋白如K-ras、MTSS1、PTGS2、LAMC1、HDAC7、PAX6、PRKC、CDC73、CD71,TfR-1等。正常細(xì)胞中細(xì)胞的增殖和凋亡通常處于相對(duì)平衡狀態(tài),如果這種狀態(tài)被打破,則可發(fā)生細(xì)胞凋亡。miRNA可以通過(guò)直接靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡調(diào)控相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄,參與到腫瘤細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)過(guò)程中。不同類(lèi)型的miRNA在OSCC中通過(guò)上述原理發(fā)揮調(diào)控腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡的作用。典型的miRNA包括以下幾種:

在許多類(lèi)型腫瘤中miR-218通常呈低表達(dá)狀態(tài),可以抑制癌細(xì)胞的增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。而在OSCC中,miR-218主要通過(guò)降低雷帕霉素不敏感復(fù)合體 Rictor的表達(dá)水平,抑制Akt S473的磷酸化促進(jìn)OSCC的發(fā)生。

多種miRNA在舌鱗狀細(xì)胞癌中發(fā)揮重要作用。Jia等[9]研究表明通過(guò)miR-29b/Sp1/PTEN/AKT 這一信號(hào)軸來(lái)調(diào)控舌鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展。Guo等[10]證實(shí)miR-96通過(guò)靶基因轉(zhuǎn)移抑制基因1( metastasis suppressor-1,MTSS1)發(fā)揮對(duì)MTSS1的表達(dá)的調(diào)節(jié),從而促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖和凋亡。Cao等[11]發(fā)現(xiàn)在舌鱗狀細(xì)胞癌中miR-26b的靶分子是前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合成酶-2 ( prostaglandin-endoperoxide synthase-2,PTGS2) 的mRNA,表達(dá)生成COX-2,并通過(guò)此調(diào)控機(jī)制抑制了舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的增殖和凋亡能力。

Du等[12]研究顯示miR-98在OSCC組織和細(xì)胞系中下調(diào)。miR-98的過(guò)表達(dá)抑制OSCC細(xì)胞的增殖,集落形成。免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)表明IGF1R為miR-98的潛在靶標(biāo),IGF1R的恢復(fù)顯著促進(jìn)miR-98對(duì)OSCC細(xì)胞的腫瘤抑制作用。 此外,miR-98表達(dá)與OSCC病例中的IGF1R表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。這些結(jié)果表明miR-98通過(guò)直接靶向IGF1R抑制癌細(xì)胞增殖和生長(zhǎng)。

Jin等[13]研究表明:在OSCC細(xì)胞中,淫羊藿素(icaritin)誘發(fā)線粒體凋亡途徑包括對(duì)線粒體膜電位的丟失影響和促進(jìn)細(xì)胞色素C的釋放,而miR-124的上調(diào)表達(dá)可以促進(jìn)icaritin以劑量和時(shí)間依賴(lài)的方式抑制腫瘤細(xì)胞活力,從而通過(guò)內(nèi)源性線粒體途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,而icaritin對(duì)miR-124發(fā)揮調(diào)節(jié)作用主要通過(guò)抑制Sp1 / DNMT1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路產(chǎn)生的。

調(diào)控口腔鱗狀癌細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移 前期研究表明,miRNA可介導(dǎo)多種腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的過(guò)程。而在OSCC中,很多miRNA發(fā)揮這種功能。

miR-204-5通常被認(rèn)為是腫瘤抑制劑之一,Wang等[14]研究發(fā)現(xiàn),在OSCC中miR-204-5p是CXCR4的調(diào)節(jié)性miRNA,其表達(dá)在癌組織或細(xì)胞中較低,可以增強(qiáng)OSCC細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移。并且數(shù)據(jù)分析表明,在OSCC組織中miR-204-5p和CXCR4表達(dá)之間存在負(fù)相關(guān)。提示我們:miR-204-5p可能通過(guò)抑制OSCC中的CXCR4表達(dá)來(lái)調(diào)節(jié)癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移。

Liu等[15]研究顯示:miR-338在OSCC組織和細(xì)胞系中顯著下調(diào)。miR-338的過(guò)表達(dá)顯著抑制OSCC細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲。 此外,神經(jīng)黏蛋白1(NRP1)被確定為miR-338在OSCC細(xì)胞中的靶標(biāo),并與miR-338在OSCC組織中逆相關(guān)。 此外,NRP1的恢復(fù)削弱了miR-338的腫瘤抑制作用?？傊?miR-338可能通過(guò)靶向NRP1抑制OSCC細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。

miR-101在OSCC中顯著下調(diào)。Hui等[16]實(shí)驗(yàn)表明miR-101在OSCC組織和細(xì)胞系中呈低表達(dá)。作為腫瘤發(fā)生發(fā)展的啟動(dòng)子,miR-101可能潛在靶向作用CX趨化因子受體7(CXCR7),減弱OSCC進(jìn)展。過(guò)度表達(dá)miR-101的OSCC細(xì)胞中可出現(xiàn)CXCR7的異位表達(dá),從而消除miR-101的增殖和運(yùn)動(dòng)能力。而CXCR7表達(dá)在OSCC組織中上調(diào)?？傊?miR-101通過(guò)靶向CXCR7發(fā)揮腫瘤抑制功能,可抑制OSCC細(xì)胞生長(zhǎng),侵襲和遷移。

前期研究指出,miR-21在OSCC發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有重要作用,通過(guò)調(diào)控 Bcl-2、 PTEN、TPM1 等分子參與腫瘤形成、浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移。Li等[17]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)缺氧是實(shí)體瘤的常見(jiàn)特征,且與侵襲性相關(guān),miR-21是在缺氧條件下最顯著上調(diào)的miRNA之一。缺氧OSCC細(xì)胞中miR-21耗盡導(dǎo)致外來(lái)體中miR-21水平降低,并顯著降低細(xì)胞遷移和侵襲。相反,HIF-1α和HIF-2α耗盡了外來(lái)體中miR-21,從而使其表達(dá)恢復(fù),促進(jìn)了OSCC細(xì)胞遷移和侵襲。此外,外來(lái)體miR-21顯著增強(qiáng)蝸牛和波形蛋白的表達(dá),同時(shí)在體外和體內(nèi)顯著降低OSCC細(xì)胞中的E-鈣粘蛋白水平,miR-21水平與HIF-1α/HIF-2α表達(dá)密切相關(guān)。總之,缺氧微環(huán)境可能刺激腫瘤細(xì)胞生成包含miR-21的豐富外來(lái)體,并被送到正常細(xì)胞,促進(jìn)侵襲行為。

相關(guān)研究表明,miR-196b在許多類(lèi)型的癌癥中具有致癌或腫瘤抑制功能,在OSCC中的生物學(xué)作用也具有重要參考意義。Hou等[18]在OSCC患者的癌組織和相鄰正常組織中使用免疫學(xué)檢查miR-196b的表達(dá)水平得出:與相鄰正常組織樣本相比,miR-196b在癌組織中顯著過(guò)表達(dá),而且癌組織中位于miR-196b基因上游的CpG島比鄰近正常組織中更多的低甲基化,和甲基化狀態(tài)的miR-196b與其表達(dá)水平成反比,功能分析顯示異位miR-196b表達(dá)促進(jìn)口腔癌細(xì)胞遷移和侵襲能力,并且沉默miR-196b可以消除OSCC細(xì)胞的體外遷移和侵襲。

Lin等[19]研究顯示miR-187可增加OSCC細(xì)胞的致癌性,特別是遷移功能。此外發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移性人類(lèi)OSCC具有比非轉(zhuǎn)移性腫瘤更高的miR-187表達(dá)。篩選檢測(cè)證實(shí)BarHomeobox2(BARX2)基因作為miR-187靶目標(biāo)。BARX2表達(dá)在大多數(shù)OSCC下調(diào),而且可以抑制OSCC細(xì)胞遷移、入侵。總之,相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明miR-187對(duì)OSCC細(xì)胞的遷移功能發(fā)揮重要作用。

miR-1254是最新腫瘤機(jī)制研究的眾多成果之一,其中Lu等[20]實(shí)驗(yàn)證實(shí)了miR-1254在OSCC中的重要影響,即減弱OSCC轉(zhuǎn)移侵襲,其基本機(jī)理是:miR-1254可以顯著下調(diào)MAP3K3,伴隨著MAPK信號(hào)通路的失活和抑制上皮 - 間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)。在OSCC細(xì)胞中,miR-1254被c-Myc轉(zhuǎn)錄抑制,通過(guò)MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)形成正反饋環(huán),減弱OSCC的轉(zhuǎn)移侵襲功能。

Peng等[21]研究表明miR-1在OSCC細(xì)胞中明顯下調(diào)表達(dá),其過(guò)度表達(dá)可以降低OSCC細(xì)胞的侵襲和遷移能力,同時(shí),也降低了癌癥干細(xì)胞特性,而其基本原理是miR-1能夠靶向Slug,抑制OSCC細(xì)胞的表達(dá),從而發(fā)揮對(duì)OSCC的抑制功能。

調(diào)控口腔鱗狀細(xì)胞癌血管增生 前期研究結(jié)果顯示:miRNA可通過(guò)調(diào)控VEGF-A、Drosha、HIF等相關(guān)蛋白的表達(dá)來(lái)參與調(diào)節(jié)血管增生過(guò)程。其中一部分miRNA被發(fā)現(xiàn)能促進(jìn)腫瘤內(nèi)的血管增生,另外一部分miRNA 能夠抑制腫瘤內(nèi)的血管增生,而在OSCC中,部分miRNA發(fā)揮上述作用。

Sasahira等[22]研究發(fā)現(xiàn)miR-126在OSCC中的表達(dá)下調(diào),對(duì)微血管生成因子(VEGF)-A 的表達(dá)具有抑制作用,促進(jìn)腫瘤血管及淋巴管形成,從而導(dǎo)致OSCC的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移等過(guò)程。具有相似作用的還有miR-31,在OSCC細(xì)胞中的作用主要體現(xiàn)在促進(jìn)缺氧誘導(dǎo)因子HIF的表達(dá),激活 HIF信號(hào)通路,促進(jìn)腫瘤血管生成。

口腔鱗癌中miRNA的EMTEMT在腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為中發(fā)揮重要作用,其基本原理是:腫瘤上皮細(xì)胞失去細(xì)胞間的黏附和接觸,細(xì)胞中上皮細(xì)胞鈣黏蛋白表達(dá)下降并獲得間質(zhì)細(xì)胞特征,波形蛋白表達(dá)增加,細(xì)胞凋亡受到抑制,從而導(dǎo)致細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和侵襲能力增強(qiáng)。前期研究證據(jù)表明EMT對(duì)多種腫瘤發(fā)生發(fā)展、轉(zhuǎn)移和侵襲起到重要作用。在腫瘤微環(huán)境中炎癥因子能促發(fā)并激活轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá),包括 SDF1、Snail、Slug、YAP1、Twist、ZEB1 和 ZEB2等相關(guān)因子和蛋白,這些因子均能誘發(fā)EMT的發(fā)生。在OSCC中miRNA主要通過(guò)兩種方式發(fā)揮作用:直接參與EMT的基因調(diào)節(jié)EMT過(guò)程,也可以調(diào)節(jié)能夠促進(jìn)或抑制EMT的蛋白含量,間接參與調(diào)節(jié)EMT過(guò)程。

相關(guān)研究顯示miR-320在OSCC中作用機(jī)制主要為:Rac1作為miR-320的靶分子,具有調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)、細(xì)胞間黏附及細(xì)胞基質(zhì)降解等功能。而miR-320直接靶向Rac1可抑制腫瘤細(xì)胞EMT等過(guò)程。

Zeng等[23]通過(guò)相關(guān)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)YAP1(YES相關(guān)蛋白-1)是miR-27a-3p的靶基因。增加miR-27a-3p的表達(dá)可以顯著降低YAP1以及OSCC細(xì)胞系(包括Twist和Snail)中的幾種EMT相關(guān)分子的表達(dá)水平。隨后研究表明,miR-27a-3p表達(dá)能夠有效下調(diào)EMT相關(guān)分子,這可能通過(guò)YAP1-OCT4-Sox2信號(hào)軸參與Sox2的調(diào)節(jié)。同時(shí),miR-27a-3p可通過(guò)轉(zhuǎn)錄后沉默直接抑制YAP1,并可能抑制EMT過(guò)程,表明miR-27a-3p可能通過(guò)EMT抑制在OSCC細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移中起重要作用。

Ghosh等[24]研究顯示:miRNA在順鉑耐藥的發(fā)展中起重要作用,主要是通過(guò)調(diào)節(jié)EMT型特性。相關(guān)蛋白包括P-糖蛋白(ABCB1)、c-Myc、存活素和β-聯(lián)蛋白,這些蛋白在順鉑抗性O(shè)SCC細(xì)胞系中顯著上調(diào),同時(shí)CD44表達(dá)增加,而損失的E-鈣黏蛋白信號(hào)同樣可以誘導(dǎo)EMT表型?？傊?miRNA可以通過(guò)調(diào)節(jié)OSCC中EMT轉(zhuǎn)換型性質(zhì),在順鉑抗性口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系中起重要作用。

Yu等[25]相關(guān)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):miRNA是癌癥相關(guān)標(biāo)志的關(guān)鍵參與者,特別是在EMT過(guò)程中。本實(shí)驗(yàn)中顯示miR-204過(guò)度表達(dá)可以抑制癌癥干細(xì)胞和OSCC-CSCs。miR-204是通過(guò)結(jié)合其Slug和Sox4的3’-UTR區(qū)并抑制其在OSCC-CSCs中的表達(dá)。此外,sh-Slug和sh-Sox4的共同敲低可以促進(jìn)miR-204 EMT性質(zhì)的能力。結(jié)合相關(guān)臨床結(jié)果可證實(shí):miR-204介導(dǎo)的EMT特性可以抑制OSCC細(xì)胞的生物學(xué)行為。

Hu等[26]研究顯示:在OSCC中,對(duì)比相鄰非腫瘤組織miR-497的水平顯著提高。SMAD7是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGFβ)受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的關(guān)鍵抑制劑,其通過(guò)EMT細(xì)胞轉(zhuǎn)化調(diào)節(jié)癌細(xì)胞侵襲的改變。此外,miR-497和SMAD7在OSCC標(biāo)本中呈負(fù)相關(guān)。生物信息學(xué)分析表明,miR-497靶向SMAD7 mRNA的3’-UTR以抑制其翻譯。此外,miR-497表達(dá)增加可以抑制SMAD7的表達(dá)。總之,數(shù)據(jù)表明miR-497在OSCC細(xì)胞可以通過(guò)EMT調(diào)節(jié)SMAD7低表達(dá)從而促進(jìn)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移。

結(jié)語(yǔ)綜上所述,miRNA在OSCC中具有重要作用,參與腫瘤發(fā)生發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移等過(guò)程,不同種類(lèi)的miRNA通過(guò)不同調(diào)控機(jī)制來(lái)發(fā)揮功能,在口腔癌的進(jìn)展過(guò)程中miRNA的表達(dá)水平隨之變化。最新研究發(fā)現(xiàn),不同種類(lèi)的miRNA在OSCC具有不同的潛信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,通路之間的差異,也給未來(lái)miRNA的研究思路提供了參考價(jià)值,對(duì)這些通路的阻斷可以提示miRNA的內(nèi)在調(diào)控機(jī)制。隨著對(duì)miRNA調(diào)控機(jī)制不斷深入的研究,將會(huì)有更多miRNA的功能得以發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用,在OSCC中,或者其他腫瘤中,都會(huì)有很好的參考價(jià)值和應(yīng)用。