兒童嚴(yán)重膿毒癥溶酶體膜蛋白分子變化及意義

常海霞，張麗波，張中馥

(1.河北省兒童醫(yī)院急診科，河北 石家莊 050031；2.河北省軍區(qū)門診部內(nèi)科，河北 石家莊 050081)

膿毒癥目前可作為導(dǎo)致小兒死亡的最常見的一種危重疾病，對患兒的身心健康造成了較大的影響。據(jù)調(diào)查研究資料顯示，該病的病死率可高達(dá)30%～50%之間，總結(jié)其發(fā)病機(jī)制主要是因炎癥反應(yīng)、凝血活化及纖維抑制等相互作用所形成的級聯(lián)反應(yīng)，同時凝血系統(tǒng)的活化在膿毒癥發(fā)生發(fā)展過程中占有重要的環(huán)節(jié)與地位[1-2]。另外，血小板(platelet,PLT)在炎癥與凝血之間存在的復(fù)雜過程也可作為血小板活化的標(biāo)志，而溶酶體膜蛋白分子可作為一類用于活化血小板的膜糖蛋白[3]。CD63又被稱為溶酶體相關(guān)膜蛋白3(LAMP3)，屬于四次跨膜蛋白超家族成員，存在于許多類型細(xì)胞的表面，可能與諸多疾病的發(fā)生發(fā)展具有一定的相關(guān)性。本文針對嚴(yán)重膿毒癥患兒的溶酶體膜蛋白分子水平進(jìn)行相關(guān)研究，結(jié)果報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取河北省兒童醫(yī)院2015年3月至2016年3月收治的小兒膿毒癥患兒90例，均接受了血液、尿液、痰液等標(biāo)本檢測，并進(jìn)行了胸部X線、超聲及CT檢查來判斷感染的部位。按照2008年國際嚴(yán)重膿毒癥、膿毒癥休克治療指南[4]診斷。排除了合并腫瘤性疾病、先天性疾病、接受器官移植或長時間服用免疫功能類藥物者。按照患兒病情嚴(yán)重程度分為一般膿毒癥組(符合膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)，但仍未達(dá)到嚴(yán)重膿毒癥標(biāo)準(zhǔn))及嚴(yán)重膿毒癥組(膿毒癥合并臟器功能不全及組織低灌注壓)，每組各45例，一般膿毒癥組中男25例，女20例，年齡在5個月至2歲之間，平均年齡為(1.25±0.02)歲；嚴(yán)重膿毒癥組中男24例，女21例，年齡在4個月至3歲之間，平均年齡為(1.27±0.04)歲；另選擇健康體檢兒童40例作為對照組，其中男24例，女21例，年齡在4個月至3歲之間，平均年齡為(1.29±0.04)歲。三組的一般資料均無明顯差異(均P>0.05)，具有可比性。全部患兒家屬均簽署了知情權(quán)同意書，本研究通過醫(yī)院倫理委員會核對批準(zhǔn)。

1.2方法

患兒入院后2h內(nèi)，在未接受抗生素治療前第1天、接受抗感染治療后的第7天，采用流式細(xì)胞術(shù)對其外周血溶酶體膜蛋白分子水平進(jìn)行檢測。將收集到的3mL空腹靜脈血放置在3.8%的枸櫞酸鈉試管中，采用流式細(xì)胞儀對溶酶體膜蛋白分子水平進(jìn)行檢測[5]，采用全自動血球分析儀對血小板的參數(shù)進(jìn)行測量。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(χ±S)表示，均值比較采用t檢驗，組間比較采用方差分析，P<0.05為差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1三組兒童入院后外周血CD63及血小板水平情況

三組的外周血CD63水平和PLT水平比較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)；一般膿毒癥組、嚴(yán)重膿毒癥組分別與對照組比較，外周血CD63水平均較高(t值分別為4.346、3.902，均P<0.05)，PLT水平均較低(t值分別為5.123、4.773，均P<0.05)；嚴(yán)重膿毒癥組與一般膿毒癥組比較，外周血CD63水平較高(t=5.464，P<0.05)，PLT水平較低(t=6.021，P<0.05)，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

表1三組外周血CD63和PLT水平的比較結(jié)果(χ±S)

Table 1 Comparison of CD63 and PLT levels of peripheral blood among three groups(χ±S)

組別例數(shù)(n)CD63(%)PLT(×109/L)對照組401．62±0．36212．36±42．56一般膿毒癥組455．78±0．45110．25±35．24嚴(yán)重膿毒癥組4511．52±1．7680．57±34．78F7．0215．362P<0．05<0．05

2.2嚴(yán)重膿毒癥組患兒治療前后外周血CD63及血小板水平對比

嚴(yán)重膿毒癥組在入院治療前、入院后第1天、入院后第7天的CD63和血小板水平比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)，見表2。

嚴(yán)重膿毒癥組患兒在入院后第1天與入院治療前和入院后第7天相比CD63水平均較高(t=3.457，P=0.022；t=4.126，P=0.022，PLT水平均較低(t=4.012，P=0.018；t=5.945，P=0.139)；嚴(yán)重膿毒癥組患兒在入院后第7天與入院治療前相比CD63水平較低(t=3.982，P=0.019)，PLT水平較高(t=4.452，P=0.015)，見表2。

表2嚴(yán)重膿毒癥組患兒治療前后外周血CD63及PLT水平比較結(jié)果(χ±S)

Table 2Comparison of CD63 and PLT levels of peripheral blood in patients with severe sepsis before and after treatment(χ±S)

治療時間例數(shù)(n)CD63(%)PLT(×109/L)入院治療前4510．98±1．6780．55±40．67入院后第1天4514．23±1．5074．23±24．11入院后第7天452．89±0．53197．23±46．25F7．7835．214P<0．05<0．05

3討論

3.1兒童膿毒癥的發(fā)病原因

膿毒癥作為一種能夠引起多臟器功能障礙綜合征的常見病，是重癥監(jiān)護(hù)室(intensive care unit，ICU)內(nèi)導(dǎo)致患者死亡的最常見原因。據(jù)近年來的研究報道指出，能夠引起膿毒癥的細(xì)胞及其分析機(jī)制可總結(jié)為，患者在抵制炎癥并有效維持自穩(wěn)方面的天然生理機(jī)制尚不清楚，因此，目前尚無有效的治療方法[6]。有研究報道指出，膿毒癥時可產(chǎn)生較為嚴(yán)重的炎性反應(yīng)及凝血方面的障礙，均可導(dǎo)致多器官功能衰竭的發(fā)生與發(fā)展。另外，作為疾病發(fā)生發(fā)展的生理基礎(chǔ)，發(fā)生活化的血小板正巧能夠作為連接炎性反應(yīng)及凝血反應(yīng)之間的有效橋梁，有效地促進(jìn)了疾病的進(jìn)展[7]。有臨床資料顯示，嚴(yán)重的膿毒癥及發(fā)生了膿毒性休克的患者，其體內(nèi)存在著異常改變的血液流變及血小板功能，且血小板數(shù)與膿毒癥的嚴(yán)重程度可呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，而膿毒癥患者正是因為遭受著不同程度的缺氧、酸中毒、內(nèi)毒素及休克等因素的影響，使得血管內(nèi)皮受損、血小板過度聚集及全身感染等一系列情況[8-9]。結(jié)合以往研究發(fā)現(xiàn)，血小板在膿毒癥的發(fā)生發(fā)展中可能起著重要的作用，一方面能夠?qū)ψ陨砉δ苓M(jìn)行有效的調(diào)節(jié)，同時還可能對周圍的血細(xì)胞功能進(jìn)行有效的調(diào)節(jié)，血小板的重要功能與作用是參與著血栓形成的發(fā)生與發(fā)展，而其功能的發(fā)揮與其表面的CD63具有密切的相關(guān)性[10]。

3.2兒童嚴(yán)重膿毒癥溶酶體膜蛋白分子水平變化及其臨床意義

CD63作為溶酶體顆粒膜蛋白的一種，在靜止的血小板表面不會具有較高的表達(dá)水平，但在血小板發(fā)生活化后，CD63分子則能夠迅速的表達(dá)，并對血小板及中性粒細(xì)胞的黏附與連接過程產(chǎn)生有效的促進(jìn)誘導(dǎo)作用，同時還與血小板的聚集及血栓形成具有密切的相關(guān)性[11]。因此，對CD63水平進(jìn)行檢測可作為判斷膿毒癥發(fā)生發(fā)展及治療的一項重要指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，一般膿毒癥與嚴(yán)重膿毒癥與對照組相比外周血CD63水平較高，PLT水平較低，嚴(yán)重膿毒癥組與一般膿毒癥組相比外周血CD63水平較高，PLT水平較低，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。結(jié)果提示，膿毒癥患兒的血小板激活程度與疾病的嚴(yán)重程度存在一定的關(guān)系，通常可體現(xiàn)為病情越嚴(yán)重，血小板激活程度越高，臟器功能損傷就越嚴(yán)重[12]。而經(jīng)過規(guī)范的治療后，嚴(yán)重膿毒癥組患兒入院后第1天與入院治療前相比CD63水平較高，PLT水平較低，入院后第7天與入院時治療前、入院后第1天相比CD63較低，PLT較高，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。結(jié)果提示，在經(jīng)過治療后，膿毒癥患兒的感染得到了有效的控制，而對CD63的監(jiān)測不僅能夠有效地反應(yīng)出疾病的嚴(yán)重程度，同時可用于觀察判斷療效，為臨床用藥給予有效的指導(dǎo)，具有重要意義。

綜上所述，溶酶體膜蛋白分子在兒童嚴(yán)重膿毒癥中具有較高的水平，促進(jìn)了血小板參數(shù)水平的降低，可能加重了膿毒癥的病情。由于本次研究樣本量有限，且未能長期隨訪，因此期望通過進(jìn)一步深入研究以獲得更加精確的結(jié)論。

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