外源激素、溫度和親本規(guī)格對大刺鰍人工催產(chǎn)及孵化的影響

薛凌展

(福建省淡水水產(chǎn)研究所, 福州 350002)

大刺鰍(Mastacembelus armatus)隸屬鱸形目刺鰍亞目刺鰍科刺鰍屬, 國內(nèi)主要分布在長江流域以及福建、廣東、廣西、云南和海南等地區(qū)。成年個(gè)體全長15.5—41.0 cm, 最大體重可達(dá)0.5 kg以上[1]。大刺鰍肉質(zhì)鮮美, 營養(yǎng)豐富[2], 具有很高市場經(jīng)濟(jì)價(jià)值和發(fā)展前景。近年來由于過度捕撈和環(huán)境惡化,導(dǎo)致野生大刺鰍種群資源銳減, 各地區(qū)紛紛將大刺鰍列入野生水生動(dòng)物重點(diǎn)保護(hù)名錄。因此加快大刺鰍人工繁育技術(shù)研究, 促進(jìn)其種質(zhì)資源保護(hù)和利用迫在眉睫。

魚類性腺發(fā)育是一個(gè)復(fù)雜而系統(tǒng)的過程, 人工養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境單一, 較難實(shí)現(xiàn)自然繁殖。需要借助于外源激素及環(huán)境因子的誘導(dǎo)和刺激, 才能實(shí)現(xiàn)人工繁殖[3]。水溫作為魚類繁育過程中重要的環(huán)境因子, 直接影響性腺及胚胎發(fā)育情況[4]。水溫過高或過低會(huì)降低催產(chǎn)激素藥效, 影響催產(chǎn)效果和胚胎發(fā)育, 甚至導(dǎo)致難產(chǎn)死亡[5,6]; 魚類親本規(guī)格決定了性腺成熟度和精/卵質(zhì)量[7], 進(jìn)而影響催產(chǎn)和胚胎發(fā)育。因此, 探索大刺鰍親本最佳繁殖規(guī)格、外源激素最優(yōu)組合和催產(chǎn)孵化最適水溫, 是掌握大刺鰍人工繁育技術(shù)的生物學(xué)基礎(chǔ)。

大刺鰍現(xiàn)有的研究主要集中在性腺發(fā)育觀察及營養(yǎng)成分分析[2,8]、消化系統(tǒng)組織學(xué)研究[9]、食性及繁殖生物學(xué)[10]、胚胎發(fā)育觀察[11]、地理種群差異及資源保護(hù)等方面[12,13]。目前針對大刺鰍人工催產(chǎn)和孵化條件的研究只有零星報(bào)道[14—16], 尚未形成系統(tǒng)規(guī)范的繁育技術(shù), 催產(chǎn)率、受精率和孵化率低等問題制約著該品種的規(guī)?；a(chǎn)。本文分別研究了外源激素、環(huán)境溫度和親本規(guī)格對大刺鰍人工催產(chǎn)及孵化效果的影響, 旨在優(yōu)化催產(chǎn)及孵化條件, 為該品種規(guī)?；庇峁┮罁?jù)。

1　材料與方法

1.1　試驗(yàn)材料來源

試驗(yàn)所用大刺鰍均來自于汀江流域3齡以上親本, 根據(jù)汀江不同河段水溫和大刺鰍性腺發(fā)育情況,采取分時(shí)分段取樣。即5月取汀江上游長汀縣河段野生親本, 6月份取汀江中游上杭縣河段野生親本,7月份取汀江下游永定縣河段野生親本, 所有野生親本經(jīng)過1周暫養(yǎng), 選擇性腺成熟度相近、體質(zhì)健壯的個(gè)體作為試驗(yàn)用魚。試驗(yàn)所用的DOM、HCG和LRH-A2三種激素均購自寧波第二激素廠。

1.2　試驗(yàn)方法

催產(chǎn)前準(zhǔn)備催產(chǎn)容器為1.0 m×0.6 m×0.8 m(480 L)玻璃缸, 每個(gè)容器中放2節(jié)PVC管, 供親本躲藏, 上方蓋上一層遮陽網(wǎng), 防止親魚跳出。整個(gè)催產(chǎn)過程保持環(huán)境安靜, 減少親魚應(yīng)激反應(yīng)。每組配備微孔增氧盤、加熱棒和制冷機(jī)(低溫組使用), 溶氧維持在5—6 mg/L, 水溫控制在試驗(yàn)所設(shè)溫度, 誤差為(±1)℃。

親魚選擇大刺鰍雌性親本選擇標(biāo)準(zhǔn)： 體色呈黃褐色體型粗短, 腹部膨大柔軟, 生殖孔微紅且凸起; 雄性親本選擇標(biāo)準(zhǔn)： 體色呈灰褐色體型修長,腹部較硬, 擠壓腹部生殖孔有乳白色精液流出, 雌雄比按1∶1.2配置, 選擇性腺發(fā)育成熟度相近的親本進(jìn)行試驗(yàn)。

人工催產(chǎn)外源激素組合及劑量設(shè)置見表1, 每種配方設(shè)3個(gè)平行組, 每組催產(chǎn)10尾以上的雌魚和12尾以上的雄魚。催產(chǎn)時(shí)3種激素用0.7%的生理鹽水按比例稀釋, 以1 kg魚體重注射1 mL的劑量進(jìn)行配置激素母液。催產(chǎn)水溫控制在(25±1)℃, 采用背部肌肉注射法, 分2針注射。第1針注射激素總量的20%, 第2針注射激素總量的80%, 2針間隔24h。

催產(chǎn)溫度試驗(yàn)共設(shè)6個(gè)溫度, 分別為22℃、24℃、26℃、28℃、30℃和32℃, 每個(gè)溫度設(shè)3個(gè)平行組, 每組催產(chǎn)10尾雌魚和12尾雄魚。

不同規(guī)格大刺鰍人工催產(chǎn)試驗(yàn)設(shè)置見表 2, 將雌性大刺鰍(3齡)分為4種規(guī)格, 與之配對的雄性大刺鰍(3齡), 體重約100 g的成熟個(gè)體, 催產(chǎn)水溫為(25±1)℃。

人工授精試驗(yàn)采取干法授精, 當(dāng)效應(yīng)期到時(shí), 用紗布將雌魚包住, 生殖孔朝下, 擠壓腹部, 使卵子流入干凈的瓷碗中。采取同樣方法將雄魚的精液擠入卵子上方, 用羽毛輕輕攪動(dòng)30s, 使精卵充分接觸, 完成授精。精卵比例按30 g卵子采用1.5 mL精液的比例進(jìn)行授精。授精后將卵子均勻布置在孵化網(wǎng)片上, 放入孵化缸進(jìn)行試驗(yàn)觀察。

孵化孵化容器為1.0 m×0.6 m×0.8 m (480 L)玻璃缸, 每個(gè)孵化缸配6個(gè)孵化網(wǎng)片, 通過支架固定,將其直立于孵化缸中。每個(gè)玻璃缸配備微孔增氧盤、加熱棒和制冷機(jī)(低溫組使用), 溶氧維持在5—6 mg/L, 水溫控制在(±1)℃誤差范圍內(nèi)。孵化過程每12h換50%水體, 保持水體清潔, 換水溫差不超過1℃, 孵化水溫與催產(chǎn)水溫保持一致。

計(jì)算試驗(yàn)過程記錄各組催產(chǎn)效應(yīng)期、催產(chǎn)率、平均產(chǎn)卵量、受精率、孵化率和孵化歷時(shí)等數(shù)據(jù), 統(tǒng)計(jì)大刺鰍胚胎發(fā)育生物學(xué)零度、有效積溫、發(fā)育速率和溫度系數(shù)值Q10等數(shù)據(jù)。具體計(jì)算公式(1—9)如下：

表 1　外源激素組合及劑量Tab. 1　Combination and dosage of exogenous hormones[(25±1)℃]

表 2　不同規(guī)格親本人工催產(chǎn)試驗(yàn)Tab. 2　The test of artifical induced spawning in different parental weight [(25±1)℃]

生物學(xué)零度[18]：

式(7)中C表示胚胎發(fā)育生物學(xué)零度(℃); n表示溫度梯度個(gè)數(shù); T表示胎發(fā)育平均溫度; N表示大刺鰍完成胚胎發(fā)育所需要時(shí)間; V表示胚胎發(fā)育所需要時(shí)間倒數(shù)(1/N)即發(fā)育速率。

Q10為胚胎發(fā)育速度的溫度系數(shù)值, 其計(jì)算公式為：式(8)中Q10表示溫差10℃時(shí)魚類胚胎發(fā)育速度加快的倍數(shù); Ho和Ha分別表示溫度t0和ta時(shí)胚胎發(fā)育持續(xù)的時(shí)間[19]。

所有數(shù)據(jù)由Excel軟件制成圖或表, 再用SPSS軟件進(jìn)行ANOVA和LSD分析, 采用字母標(biāo)記法標(biāo)注數(shù)值間的差異顯著性。

2　結(jié)果

試驗(yàn)從2014年5月到2016年7月累計(jì)開展大刺鰍人工繁育試驗(yàn)25批次, 其中2014年催產(chǎn)8批次,2015年催產(chǎn)7批次, 2016年催產(chǎn)10批次, 3年共計(jì)催產(chǎn)大刺鰍親本489組, 具體情況見表 3。

2.1　不同外源激素組合對大刺鰍催產(chǎn)效果的影響

如圖 1—3所示, B組合的催產(chǎn)效果較差, 效應(yīng)期為68h—81h, 只有3組劑量成功催產(chǎn), 高劑量和低劑量組的大刺鰍均出現(xiàn)難產(chǎn), 平均催產(chǎn)率均在40%以下, 顯著低于A組合和C組合(P＜0.05)。最高產(chǎn)卵量出現(xiàn)在B3組, 平均每尾達(dá)到(510±71) 粒/尾。B2組的效應(yīng)期最長, 達(dá)到(77.7±2.7)h。A組合中5組劑量均可產(chǎn)卵, 效應(yīng)期為50—70h, 其中A3平均催產(chǎn)率為(73.33±5.16)%, 平均產(chǎn)卵量為(1129±142) 粒/尾, 二者均顯著高于同一激素組合中的其他劑量組(P＜0.05), 效應(yīng)期也最短, 僅為(51.7±1.9)h。當(dāng)HCG劑量高于1500 IU/kg(A3)時(shí), 親本對激素的敏感性顯著下降, 達(dá)到2500 IU/kg (A5)時(shí), 親本難產(chǎn)的比例逐漸上升。C組合5個(gè)劑量組合中有3組的催產(chǎn)率超過50%, 產(chǎn)卵量超過1000 粒/尾, 效應(yīng)期為48—70.2h。其中C4催產(chǎn)效果最佳, 催產(chǎn)率為(76.67±5.16)%, 產(chǎn)卵量為(1773±71) 粒/尾, 顯著高于其他14個(gè)劑量組(P＜0.05), 且C4的效應(yīng)期最短,僅為(48.4±0.6)h。

表 3　大刺鰍人工催產(chǎn)情況表Tab. 3　The artificial induced spawning of Mastacembelus armatus

圖 1　不同外源激素組合對大刺鰍催產(chǎn)率的影響Fig. 1　The effect of different combinations of exogenous hormones on induced rate of Mastacembelus armatus

圖 2　不同外源激素組合對大刺鰍產(chǎn)卵量的影響Fig. 2　The effect of different combinations of exogenous hormones on fecundity of Mastacembelue armatus

圖 3　不同外源激素組合對大刺鰍催產(chǎn)效應(yīng)期的影響Fig. 3　The effect of different combinations of exogenous hormones on ovulation time of Mastacembelus armatus

2.2　不同外源激素組合對大刺鰍受精及孵化結(jié)果的影響

如圖 4、圖 5所示, 經(jīng)不同激素配方催產(chǎn)獲得的卵子質(zhì)量差異較大, 繼而影響其受精和孵化。B組除了B1和B5未產(chǎn)卵外, 其他3組獲得的卵子質(zhì)量均較差, 受精率僅為9.0%—34.58%, 孵化率僅為6.78%—31.75%。A組合中5個(gè)劑量組之間的受精率和孵化率均差異顯著(P＜0.05), 其中A3受精率最高為(75.27±3.56)%, 孵化率達(dá)到(68.70±2.21)%, 顯著高于同組合中的其他4組(P＜0.05)。當(dāng)HCG劑量高于2000 IU/kg(A4), 受精率和孵化率均顯著下降;C組除C1外, 其他4個(gè)劑量組的催產(chǎn)效果比較理想,所產(chǎn)的卵子質(zhì)量較好, 其中C4的平均受精率達(dá)到(80.02±1.42)%, 孵化率達(dá)到(77.70±1.91)%, 顯著高于其他組(P＜0.05)

2.3　不同規(guī)格大刺鰍的催產(chǎn)及孵化結(jié)果

不同規(guī)格大刺鰍的催產(chǎn)及孵化結(jié)果見表 4, 4種規(guī)格大刺鰍親本其產(chǎn)卵量差異顯著(P＜0.05), 親本規(guī)格與產(chǎn)卵量之間的線性回歸方程為y=19.96x-461.47 (R2=0.9695), 二者呈正相關(guān), 產(chǎn)卵量隨親本體重增加而升高, W4產(chǎn)卵量最高, 達(dá)到(2410±157)粒/尾(P＜0.05); 親本規(guī)格與效應(yīng)期呈負(fù)相關(guān), 規(guī)格越大, 效應(yīng)期越長, 其中W4效應(yīng)期最長, 達(dá)到(56.3±2.1)h, 顯著高于其他組(P＜0.05); 催產(chǎn)率、受精率和孵化率三者與親本性腺成熟度密切相關(guān), 親本規(guī)格越大, 性腺成熟度越高, 所產(chǎn)的卵子質(zhì)量越好, 三者與親本規(guī)格呈正相關(guān)。其中W4組的催產(chǎn)及孵化效果最好, 催產(chǎn)率達(dá)到100%, 受精率達(dá)到(90.33±1.57)%, 孵化率達(dá)到(86.77±1.35)%, 均高于其他組。

圖 4　不同外源激素組合對大刺鰍受精率的影響Fig. 4　The effect of different combinations of exogenous hormones on fertilization rate of Mastacembelus armatus

圖 5　不同外源激素組合對大刺鰍孵化率的影響Fig. 5　The effect of different combinations of exogenous hormones on hatch rate of Mastacembelus armatus

2.4　不同溫度對大刺鰍人工催產(chǎn)及孵化的影響

在不同溫度下大刺鰍的催產(chǎn)及孵化結(jié)果見表5, 各組的產(chǎn)卵量、效應(yīng)期、催產(chǎn)率、受精率和孵化率差異顯著, 其中低溫對大刺鰍催產(chǎn)影響較大,T1親本由于積溫不夠, 性腺無法成熟, 導(dǎo)致全部難產(chǎn); T3、T4和T5三組的催產(chǎn)及孵化效果較好, 平均催產(chǎn)率高于(73.33±5.16)%, 平均產(chǎn)卵量高于(1549.00±93.00)粒/尾。當(dāng)水溫高于30℃(T5)時(shí), 激素藥效減弱, 催產(chǎn)受抑制, 難產(chǎn)比例增加; 水溫達(dá)到32℃(T6), 其催產(chǎn)率和產(chǎn)卵量下降至(50.00±8.94)%和(746.00±81.00) 粒/尾。水溫與效應(yīng)期呈正相關(guān),當(dāng)水溫升高, 性腺成熟度加快, 效應(yīng)期逐漸縮短, 水溫上升至32℃(T6)時(shí), 其效應(yīng)期最短(P＜0.05), 僅為(39.43±2.87)h, T2的效應(yīng)期最長, 為(58.43±1.25)h。低溫T2和高溫T6組的受精率和孵化率均較低, 分別為(50.25±4.49)%、(44.98±4.93)%和(62.49±3.87)%、(57.51±5.28)%, 顯著低于其他3個(gè)溫度組(P＜0.05)。T4的催產(chǎn)率、受精率和孵化率均最高, 分別為(86.67±5.16)%、(82.68±1.72)%和(80.26±1.78)%。

溫度對大刺鰍胚胎發(fā)育速度影響顯著(表 6),水溫與胚胎發(fā)育歷時(shí)呈負(fù)相關(guān), 水溫越高, 胚胎發(fā)育歷時(shí)越短, 且各組之間差異顯著(P＜0.05)。當(dāng)孵化水溫為22℃時(shí), 胚胎發(fā)育歷時(shí)最長, 達(dá)到(140.49±1.74)h, 當(dāng)水溫上升至32℃時(shí), 胚胎發(fā)育歷時(shí)最短, 僅為(44.35±0.50)h, 32℃比22℃縮短了68.43%。表 8中“器官分化-出膜”占胚胎發(fā)育總歷時(shí)的比例最大, 為44.56%—51.09%; 其次是“原腸胚-神經(jīng)胚”, 該階段占胚胎發(fā)育總歷時(shí)的18.33%—22.39%; “桑椹胚-囊胚”歷時(shí)最短, 僅占胚胎發(fā)育總歷時(shí)的4.14%—6.23%。當(dāng)胚胎發(fā)育至原腸胚后, 溫度對胚胎發(fā)育的影響越來越顯著, 溫度越高胚胎發(fā)育速率越快。孵化水溫為32℃時(shí), 胚胎發(fā)育速率達(dá)到0.023±0.0003, 顯著快于其他組(P＜0.05), 所需的有效積溫最短, 僅為(1419.307±15.916)℃·h, 顯著低于其他溫度組(P＜0.05)。當(dāng)水溫為22℃時(shí), 胚胎發(fā)育速率最慢, 僅為0.007±0.0001,所需的有效積溫也最長, 達(dá)到(3090.707±38.223)℃·h, 顯著高于其他溫度組(P＜0.05)。由公式統(tǒng)計(jì)分析得出大刺鰍的生物學(xué)零度為(16.185±0.173)℃。

胚胎發(fā)育速度的溫度系數(shù)值Q10如表 7所示, 該系數(shù)代表某一溫度范圍內(nèi)水溫變化對魚類胚胎發(fā)育的影響, 即溫差10℃時(shí)魚類胚胎發(fā)育速度加快的倍數(shù)。當(dāng)溫度系數(shù)值Q10值在2附近時(shí), 這一溫度范圍即可確定為魚類胚胎發(fā)育的最適溫度[19]。表 7列出22℃—32℃不同溫度帶內(nèi)的溫度系數(shù)Q10值,Q10值的變化范圍為(1.40±0.02)—(22.05±2.28), 說明水溫變化對胚胎發(fā)育的影響較大, 其中24—32℃溫度帶內(nèi)的溫度系數(shù)Q10值最接近于2, 為1.95±0.01,表明該溫度帶為適合大刺鰍孵化的水溫范圍。

3　討論

3.1　外源激素對大刺鰍人工催產(chǎn)及孵化的影響

當(dāng)大刺鰍的性腺發(fā)育至Ⅳ期末時(shí), 可接受外源激素作用的時(shí)間僅為30d左右, 因此抓住最佳催產(chǎn)時(shí)機(jī)是提高人工繁育效率的關(guān)鍵。目前大刺鰍人工催產(chǎn)所用的激素組合、劑量和方法尚未規(guī)范, 催產(chǎn)效果參差不齊[14—16,20]。2014年開始, 我們選擇了HCG、DOM和LRH-A2三種外源激素15種激素組合進(jìn)行催產(chǎn)試驗(yàn), 分析比較了單一激素和混合激素配伍的催產(chǎn)及孵化效果, 結(jié)果顯示： 在適宜的劑量范圍內(nèi)3種激素組合均能使大刺鰍產(chǎn)卵和排精, 其中單獨(dú)注射HCG和3種激素混合(HCG+DOM+LRHA2)配方的綜合催產(chǎn)及孵化效果明顯好于2種激素混合(DOM+LRH-A2)的配方, 且含有HCG的激素組合其效應(yīng)期比不含有HCG的激素組合短, 可見HCG是大刺鰍人工催產(chǎn)不可或缺的激素種類, 這一結(jié)果和張建銘等[15]和宓國強(qiáng)等[21]的研究一致。試驗(yàn)結(jié)果顯示3種激素混合使用的結(jié)果好于單獨(dú)注射HCG, 這是因?yàn)?種激素混合使用時(shí), 其藥效的疊加效應(yīng)[22], HCG在其他2種激素之前先作用于性腺, 使其分泌甾類激素, 產(chǎn)生正反饋?zhàn)饔? 加速LRH-A2與垂體細(xì)胞的受體結(jié)合, 釋放GtH, 提高激素的效價(jià)。此外, 3種激素混合使用時(shí), DOM可大幅增加LRH-A2誘導(dǎo)魚類腦垂體分泌GTH和排卵綜合效果, 縮短效應(yīng)時(shí)間[23]。

表 4　不同規(guī)格大刺鰍其催產(chǎn)及孵化結(jié)果Tab. 4　The oxytocin and incubation in different parental weight of Mastacembelus armatus

表 5　不同溫度對大刺鰍人工催產(chǎn)及孵化的影響Tab. 5　The effect of temperature on artificial induced spawning and incubation of Mastacembelus armatus

表 6　在不同溫度下大刺鰍胚胎發(fā)育時(shí)間、發(fā)育速率和積溫值的變化情況Tab. 6　The development time, development speed and accumulated temperature of embryonic of Mastacembelus armatus under different temperature

表 7　大刺鰍胚胎在不同溫度帶的Q10值Tab. 7　The Q10 of embryonic of Mastacembelus armatus under different temperature regime

本文3種外源激素組合中劑量的變化直接影響到催產(chǎn)效果, 劑量過低或者過高其催產(chǎn)效果均不佳,且影響到孵化效果。當(dāng)外源激素注射劑量過低時(shí),魚體血液中的GtH濃度不足, 無法啟動(dòng)性腺產(chǎn)卵/排精活動(dòng)或者延長效應(yīng)時(shí)間, 容易出現(xiàn)滯產(chǎn)。當(dāng)外源激素注射過量時(shí)反而降低了GtH細(xì)胞分泌作用的敏感性, 往往催產(chǎn)效果不佳。一次注射外源激素也能實(shí)現(xiàn)人工催產(chǎn)[15,20], 但是效果不如多次注射, 分次注射可以使魚體內(nèi)GtH作用于性腺的時(shí)間延長, 可以更好地催熟性腺[24]。由于大刺鰍生性膽小, 應(yīng)激反應(yīng)大, 多次注射間隔時(shí)間太短, 操作頻率太高容易導(dǎo)致親魚造成生殖脅迫[25], 影響了催產(chǎn)效果, 產(chǎn)后恢復(fù)慢且死亡率高。因此, 本文采取提高注射劑量同時(shí)延長兩針注射間隔(24h)的方法, 將人工操作對親魚造成的生殖脅迫降到最低。

3.2　溫度對大刺鰍人工催產(chǎn)及孵化的影響

溫度是影響魚類生殖至關(guān)重要的因素之一[26—28],魚類通過感覺器官感受環(huán)境溫度, 將信號傳遞至腦,使下丘腦分泌促性腺激素釋放激素(GnRH), 激發(fā)垂體分泌GtH作用于性腺, 促使其分泌性類固醇激素, 誘導(dǎo)性腺發(fā)育成熟排卵/精, 這是水溫調(diào)控性腺發(fā)育成熟的機(jī)理[24]。適宜的水溫有助于外源激素啟動(dòng)腦垂體分泌GtH和性腺分泌類固醇激素, 水溫過高或者過低均會(huì)阻礙該機(jī)制的啟動(dòng), 影響催產(chǎn)效果, 甚至出現(xiàn)難產(chǎn)等現(xiàn)象[23]。魚類胚胎發(fā)育主要靠孵化酶的作用才能完成[29,30], 此時(shí)水溫的變化將直接影響孵化酶活性, 導(dǎo)致胚胎發(fā)育紊亂或者滯育。因此, 探索大刺鰍催產(chǎn)及孵化所需的適宜水溫, 是提高人工繁育效率的關(guān)鍵。從本文設(shè)置了6個(gè)溫度梯度, 綜合分析了催產(chǎn)及孵化過程各項(xiàng)指標(biāo)的變化情況, 結(jié)果顯示： 24—32℃是大刺鰍適宜催產(chǎn)及孵化的水溫范圍, 該溫度范圍內(nèi)大刺鰍催產(chǎn)的效應(yīng)期為(39.43±2.87)—(58.43±1.25)h, 與水溫變化呈負(fù)相關(guān); 受精卵孵化歷時(shí)為(44.35±0.5)—(75.74±0.63),與水溫變化呈負(fù)相關(guān), 這與尹家勝等[28]、胡振禧等[31]、董根等[32]和韋正道等[33]研究結(jié)果一致, 隨著水溫升高, 效應(yīng)期和孵化歷時(shí)逐漸縮短, 高溫環(huán)境導(dǎo)致魚體對外源激素的敏感性下降, 不利于GtH的分泌, 阻礙了性腺成熟, 同時(shí)也降低了孵化酶的活性, 影響卵裂和器官形成, 容易導(dǎo)致難產(chǎn)和胚胎畸形或滯育。

3.3　親本規(guī)格對大刺鰍人工催產(chǎn)及孵化的影響

在外源激素的誘導(dǎo)下規(guī)格小的親本比規(guī)格大的親本性腺更早成熟, 催產(chǎn)效應(yīng)期更短, 大規(guī)格親本對外源激素的誘導(dǎo)反應(yīng)需要更長的時(shí)間啟動(dòng)排卵/精活動(dòng)。此外, 大刺鰍產(chǎn)卵量與親本的規(guī)格呈正相關(guān), 規(guī)格越大產(chǎn)卵量越高, 這與劉霆等[8]和黃永春[10]開展的大刺鰍生物學(xué)性狀研究結(jié)果相一致。規(guī)格較小的成年大刺鰍親本一般在繁殖季節(jié)的前期即成熟, 而較大規(guī)格的親本則需要更長的發(fā)育時(shí)間, 一般在繁殖季節(jié)的中后期成熟。從孵化的相關(guān)指標(biāo)分析, 大刺鰍親本的規(guī)格決定了卵子質(zhì)量, 規(guī)格越大, 卵子質(zhì)量越好, 產(chǎn)卵率、受精率和孵化率均較高。因此在人工繁育過程中, 如果碰到規(guī)格差異較大時(shí), 大規(guī)格個(gè)體應(yīng)適當(dāng)提高激素注射劑量,方可確保人工催產(chǎn)同步性。

4　結(jié)論

綜上所述, 開展大刺鰍人工催產(chǎn)時(shí)應(yīng)將親本按規(guī)格進(jìn)行分批次催產(chǎn), 有利于正確掌握人工授精時(shí)機(jī), 提高生產(chǎn)效率。親本篩選時(shí)應(yīng)盡量選擇大規(guī)格的魚種進(jìn)行催產(chǎn), 雌性親本選80 g/尾以上, 雄性親本選100 g/尾以上, 確保精卵質(zhì)量。大刺鰍人工催產(chǎn)及孵化的適宜溫度為24—32℃, 最佳溫度為28℃。人工催產(chǎn)最佳外源激素組合為HCG+DOM+LRH-A2, 建議使用劑量為1000 IU+5 mg+6 μg。在生產(chǎn)過程中, 應(yīng)根據(jù)大刺鰍親本規(guī)格, 性腺成熟度,水溫條件等實(shí)際情況調(diào)整外源激素劑量, 才能提高大刺鰍的繁育效率。

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