大腸癌的病理類型與KRAS基因突變的關(guān)系

李紅 張偉斌 陸明實

（廣東藥科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 廣東 廣州 510080 ）

大腸癌目前在我國的發(fā)病率呈上升趨勢，于惡性腫瘤中位居第三位，對患者身心健康的影響較大，且死亡率較高，應(yīng)引起高度重視[1]。近幾年，隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，分子靶向藥物治療在大腸癌臨床治療中獲得了廣泛運用。相關(guān)研究也表明，表皮生長因子受體在大腸癌中出現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，KRAS作為表皮生長因子信號通路中的重要作用基因，參與了該病的發(fā)生與進(jìn)展[2]?；诖?，本研究為了進(jìn)一步探討大腸癌的病理類型與KRAS基因突變的關(guān)系，選取本院2016年8月~2017年8月期間診治的62例大腸癌患者的臨床資料展開回顧性分析，總結(jié)匯報如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取在本院外科手術(shù)治療的62例大腸癌患者作為研究對象，均符合以下標(biāo)準(zhǔn)：（1）滿足大腸癌臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）臨床資料完整且有效；均排除以下患者：（1）合并其他腫瘤或組織病變者；（2）意識障礙無法正常溝通?；颊撸耗?4例，女28例；年齡26～81歲，平均（50.7±11.3）歲；原發(fā)部位：直腸48例，左半結(jié)腸5例，右半結(jié)腸9例；浸潤深度：淺肌層以內(nèi)3例，深肌層6例，全層53例；臨床分期：I期12例，II期38例，III期24例，IV期10例；病理類型：高分化腺癌9例，中分化腺癌27例，低分化腺癌15例，黏液性腺癌11例；出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移13例，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移10例。

1.2 方法

所有患者均行手術(shù)切除大腸癌組織標(biāo)本，經(jīng)10%的中性緩沖福爾馬林固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋。進(jìn)行HE染色，于顯微鏡下觀察腫瘤病理學(xué)特征。選取腫瘤組織豐富的蠟塊，切片，運用Maxwell系統(tǒng)提取人類基因組DNA，濃度運用Nanodrop 1000 spectroptometer檢測，運用液相芯片技術(shù)平臺檢測KRAS基因突變情況，包括KRAS外顯子2、3，檢測系統(tǒng)為Luminex 200，檢測過程分為多重PCR擴(kuò)增目的的基因片段、多余核苷酸及引物去除、等位基因特意引物延伸、雜交反應(yīng)、數(shù)據(jù)讀取五個步驟。KRAS目的基因Ct值小于38且其差值的絕對值小于8，則視為基因突變，列入KRAS突變型組，否則為KRAS野生型組[3]。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

運用SPSS19.0軟件統(tǒng)計數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以（%）表示，組間對比采用χ2檢驗，P＜0.05提示差異顯著。

2.結(jié)果

62例大腸癌標(biāo)本中，共檢出22例KRAS基因突變，突發(fā)發(fā)生率為35.5%。不同病理類型患者的KRAS基因突變發(fā)生率對比，差異不顯著（P＞0.05）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者的KRAS基因突變發(fā)生率明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者，對比差異顯著（P＜0.05）。見表。

表 大腸癌的臨床病理與KRAS基因突變的關(guān)系[n（%）]

3.討論

RAS基因家族與人類腫瘤相關(guān)的基因有三種——HRAS、KRAS和 NRAS，其中KRAS基因?qū)θ祟惏┌Y影響最大，它好像分子開關(guān)：當(dāng)正常時，能調(diào)控細(xì)胞生長的路徑；當(dāng)發(fā)生突變時，則導(dǎo)致細(xì)胞持續(xù)生長，削弱細(xì)胞的分化功能，細(xì)胞增殖失控而癌變，并使癌細(xì)胞在脫離表皮生長因子受體信號通路的控制下生長，進(jìn)而促使癌細(xì)胞的擴(kuò)散[4]。美國的一項研究表明，對于KRAS基因突變的癌癥患者，給予表皮生長因子受體抑制劑治療難以見效[5]。由此可見，檢測KRAS基因突變對癌癥患者的臨床治療具有重要的意義。

相關(guān)研究報道顯示，我國大腸癌患者出現(xiàn)KRAS基因突變的概率約為36.7%[6]。本研究組共檢出22例KRAS基因突變，發(fā)生率為35.5%，與文獻(xiàn)報道相近。本研究結(jié)果還顯示，不同病理類型患者的KRAS基因突變發(fā)生率無明顯差異，但有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者的KRAS基因突變發(fā)生率明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者，由此分析，大腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與KRAS基因突變密切相關(guān)。

綜上所述，大腸癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與KRAS基因突變具有一定的相關(guān)性，檢測KRAS基因突變有助于評估患者疾病的預(yù)后及指導(dǎo)治療。以上所做基因突變分析均在益善測試中心完成。

[1]孫屏,萬佳藝,吳靚驊,等.結(jié)直腸癌KRAS、NRAS和BRAF基因突變及其與臨床病理相關(guān)性研究[J].中華普通外科雜志,2016,31(1):50-54.

[2]代云,鄭國華,李青.結(jié)直腸癌患者BRAF,KRAS,NRAS和PIK3CA基因突變與其病理正的關(guān)系[J].臨床與病理雜志,2017,37(5):875-880.

[3]姚凡保,鄺倩儀,付汐,等.大腸癌組織中KRAS和PIK3CA基因突變關(guān)系的研究[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2016,22(9):836-840.

[4]張煥,趙峰,曹艷珍,等.結(jié)直腸癌KRAS基因突變與臨床病理特征的關(guān)系[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2016(a01):428-429.

[5]凌云,胡海燕,邱田,等.結(jié)直腸癌患者KRAS和BRAF基因突變檢測及其臨床意義[J].中國腫瘤臨床與康復(fù),2016(6):645-649.

[6]常江,王穎.結(jié)直腸癌KRAS BRAF及PIK3CA基因突變與臨床病理的關(guān)系[J].山西醫(yī)藥雜志,2015(5):562-565.