GeneXpert檢測(cè)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用

曹鷗婕

[摘要]目的評(píng)價(jià)GenXpert檢測(cè)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法方便選取2014年2月-2017年3月云南省曲靖市第一人民醫(yī)院感染科接收308例對(duì)象進(jìn)行檢查，以培養(yǎng)法作為診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”。結(jié)果GeneXpert診斷敏感性、特異性、陰性預(yù)測(cè)值、符合率高于PPD皮試、T-SPOT.TB，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。GeneXpert對(duì)結(jié)核病的診斷敏感性96.20%、特異度99.33%、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值99.35%、陰性預(yù)測(cè)值96.13%、符合率97.73%。相較于比例法，GeneXpert對(duì)利福平耐藥的敏感性、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、符合率分別為66.67%、92.47%、42.11%、97.12%、90.51%。結(jié)論Gen-eXpert檢測(cè)診斷結(jié)核病效果較好，可作為初始診斷的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。

[關(guān)鍵詞]結(jié)核??；GenXpert檢測(cè)；診斷

[中圖分類號(hào)]R521 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]1674-0742（2017）10（a）-0028-03

我國(guó)結(jié)核病年死亡率13萬(wàn)例，是其他傳染性疾病死亡的2倍還要多。約80%結(jié)核病為肺結(jié)核，篩查、診斷困難是導(dǎo)致結(jié)核病進(jìn)展、耐藥的重要原因之一，以骨關(guān)節(jié)結(jié)核病為例，涂片法敏感性不足15%，傳統(tǒng)的PCR法污染風(fēng)險(xiǎn)較高，同時(shí)這些檢查的操作復(fù)雜，難度大。培養(yǎng)為基礎(chǔ)的鑒定以及藥敏試驗(yàn)需要超過(guò)2個(gè)月，結(jié)核菌素試驗(yàn)存在不良反應(yīng)，禁忌證多。GeneXpert檢測(cè)是一種全自動(dòng)病原體快速檢測(cè)系統(tǒng)，可當(dāng)日獲得試驗(yàn)結(jié)果，進(jìn)行耐藥性分析，指導(dǎo)臨床治療。該次研究試以2014年2月-2017年3月該院收治的308例懷疑為結(jié)核病的對(duì)象進(jìn)行結(jié)核病作為對(duì)象，評(píng)價(jià)GenXpert檢測(cè)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

方便選取該院308例懷疑為結(jié)核病的對(duì)象進(jìn)行結(jié)核病診斷，其中男250例、女158例，年齡10-79歲，平均（45.6±11.8）歲。最終診斷為結(jié)核病患者158例，其中肺結(jié)核148例、肺外結(jié)核10例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①懷疑為結(jié)核病，有發(fā)熱、咳痰等重典型癥狀，或出現(xiàn)發(fā)熱、關(guān)節(jié)痛等關(guān)節(jié)結(jié)核病典型癥狀；②采用GeneXpert等結(jié)核病診斷技術(shù)；③臨床資料完整。結(jié)核病診斷標(biāo)準(zhǔn)：①肺結(jié)核，2份痰液進(jìn)行圖片鏡檢，或1份痰做Xpert MTB/RIF檢測(cè)，當(dāng)患者有耐藥結(jié)核風(fēng)險(xiǎn)，或合并HIV感染，或病情嚴(yán)重，需要采用XpeIt MTB/RIF初始診斷，對(duì)于涂陰疑似肺結(jié)核者，采用Xpert MTB/RIF檢測(cè)或培養(yǎng)診斷，基于血標(biāo)本的血清學(xué)或γ-干擾素釋放試驗(yàn)無(wú)法診斷活動(dòng)性結(jié)合者；②肺外結(jié)核，所有患者懷疑肺外結(jié)核，采用相應(yīng)的樣本，進(jìn)行微生物、組織學(xué)價(jià)差，采用XpertMTB/RIF檢測(cè)作為初始診斷。

1.2方法

所有患者進(jìn)行PPD皮試、結(jié)核感染T細(xì)胞免疫斑點(diǎn)法（T-SPOT.TB）、Xpert MTB/RIF診斷，肺結(jié)核患者痰液進(jìn)行圖片鏡檢，同時(shí)采集痰液、或組織樣本，進(jìn)行培養(yǎng)。（1）PPD皮試：PPD5u在前臂掌側(cè)皮內(nèi)注射，注射后72h后檢查皮膚反應(yīng)，游標(biāo)卡尺測(cè)量皮膚硬結(jié)，若硬結(jié)直徑<5mm則為陰性，否則為陽(yáng)性，若出現(xiàn)潰瘍、破裂也視為陽(yáng)性。（2）結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)，肝素鋰抗凝真空采血管采集待測(cè)對(duì)象的左臂外周靜脈血5mL，酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)（ELISA），以酶聯(lián)斑點(diǎn)讀取分析儀測(cè)算斑點(diǎn)數(shù)，依次作為診斷標(biāo)準(zhǔn)。判斷標(biāo)準(zhǔn)：①若陰性對(duì)照孔點(diǎn)數(shù)<6，抗原A孔或B孔斑點(diǎn)數(shù)一陰性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)≥6，則為陽(yáng)性，否則為陰性；②若陰性對(duì)照孔點(diǎn)數(shù)>6，抗原A孔或B孔斑點(diǎn)數(shù)≥2×陰性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)，則為陽(yáng)性，否則為陰性。（3）GeneXpert檢測(cè)：懷疑非肺結(jié)核者，取痰液標(biāo)檢測(cè)，肺外結(jié)核取組織液進(jìn)行監(jiān)測(cè)，采用堿處理一中和離心沉淀法處理，提取DNA轉(zhuǎn)移到新管，進(jìn)行PCR擴(kuò)增、雜交，進(jìn)行結(jié)果判斷，采用試劑盒附帶的評(píng)估表，根據(jù)顯影的膜條貼，結(jié)合對(duì)照帶、擴(kuò)增對(duì)照，測(cè)定陽(yáng)性情況，判斷耐藥情況。

1.3觀察指標(biāo)

PPD皮試、T-SPOT.TB、GeneXpert診斷的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、符合率對(duì)比。XpertMTB/RIF診斷利福平耐藥性結(jié)果（以比例法作為金標(biāo)準(zhǔn)）。

1.4統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行計(jì)算，敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、符合率采用x²檢驗(yàn)比較，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1診斷結(jié)果

PPD皮試.T-SPOT.TB.GeneXpert檢測(cè)結(jié)果如下表1。

GeneXpert診斷敏感性、特異性、陰性預(yù)測(cè)值、符合率高于PPD皮試、T-SPOT.TB，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.2利福平耐藥分析

相較于比例法，GeneXpert對(duì)利福平耐藥的敏感性、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、符合率分別為66.67%、92.47%、42.11%、97.12%、90.51%。

3討論

該次研究顯示，GeneXpert對(duì)結(jié)核病的診斷敏感性96.20%、特異度99.33%、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值99.35%、陰性預(yù)測(cè)值96.13%、符合率97.73%，達(dá)到較高水平。其他學(xué)者調(diào)查顯示，GeneXpert對(duì)結(jié)核病診斷敏感性、特異性均在95%以上，特異度在99%以上，故被世界衛(wèi)生組織推薦作為結(jié)核病的首選快速診斷技術(shù)。當(dāng)然需注意的是，對(duì)于肺外結(jié)核，GeneXpert需要獲得組織樣本，限制了其在肺外結(jié)核病診斷中的應(yīng)用。GeneXpert不僅可用于定性診斷，還可進(jìn)行藥敏性分析，指導(dǎo)治療，研究中相較于比例法，GeneXpert對(duì)利福平耐藥的敏感性、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、符合率分別為66.67%、92.47%、42.11%、97.12%、90.51%，特異性、陰性預(yù)測(cè)值達(dá)到較高水平，即若診斷為利福平敏感，則出現(xiàn)耐藥的風(fēng)險(xiǎn)較低。不同學(xué)者調(diào)查研究的GeneXpert對(duì)利福平耐藥的敏感性存在較大的差異，在40%～70%不等，這可能與流行病學(xué)特征差異有關(guān)。

GeneXpert檢測(cè)計(jì)數(shù)，具有以下優(yōu)勢(shì)：①工作流程簡(jiǎn)單，直接監(jiān)測(cè)痰液以及痰沉淀；②操作簡(jiǎn)單，僅需要1個(gè)步驟準(zhǔn)備工作；③整個(gè)流程僅需要110min，可進(jìn)行快速檢測(cè)；④無(wú)需生物安全柜，安全性好，污染率低；⑤對(duì)結(jié)核分枝桿菌特異性敏感性與培養(yǎng)相近，本組對(duì)象敏感性、特異性均在99%以上；⑥還可同時(shí)進(jìn)行利福平耐藥；⑦培訓(xùn)所需的時(shí)間短，即使是非結(jié)核試驗(yàn)室的專業(yè)人員，也能夠快速掌握。GeneXpert因具有以上優(yōu)勢(shì)，相較于其他血清學(xué)診斷計(jì)數(shù)，具有高特異性、陰性預(yù)測(cè)值。需注意的是，對(duì)于痰涂片為陰的標(biāo)本，GeneXpert的敏感性為60%～80%rn，但仍高于其他監(jiān)測(cè)方法，對(duì)于肺外結(jié)核淋巴結(jié)組織、腦脊液等其他組織樣本，敏感性也在8%～92%之間，該次研究出現(xiàn)的6例假陰性，均為肺外結(jié)核，肺外結(jié)核敏感性為40%。

GeneXpert檢測(cè)診斷結(jié)核病效果較好，可作為初始診斷的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，特異性、陰性預(yù)測(cè)值較高。

（收稿日期：2017-07-09）