延胡索酸對(duì)夏季幼兔生長(zhǎng)性能、空腸發(fā)育及血清抗氧化和免疫指標(biāo)的影響

秦 楓 潘孝青 邵 樂 楊 杰 翟 頻 李 晟 李 健

(農(nóng)業(yè)部種養(yǎng)結(jié)合重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)毛兔種質(zhì)資源平臺(tái)，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所，南京 210014)

幼兔飼養(yǎng)是家兔生產(chǎn)中的重要環(huán)節(jié)，斷奶后生產(chǎn)力低是影響兔業(yè)發(fā)展的瓶頸問題。幼兔斷奶后，腸道機(jī)能尚未發(fā)育完全，胃酸分泌不足，特別是夏季，加之營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境應(yīng)激，胃腸道損傷，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率低，產(chǎn)生腹瀉等癥狀，影響幼兔生產(chǎn)。傳統(tǒng)養(yǎng)兔生產(chǎn)一般采用抗生素預(yù)防和治療，有一定效果，但耐藥性、抗生素殘留等問題隨之而來。有研究表明，酸化劑可以改善幼畜生長(zhǎng)性能和健康狀況。畜禽飼糧中添加適量的酸化劑可以彌補(bǔ)其生理性產(chǎn)酸不足，酸化劑能夠調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道微生物平衡，增殖有益菌、抑制有害菌，提高動(dòng)物抗應(yīng)激和免疫力，降低腸道pH，增強(qiáng)消化酶活性，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率，從而提高生長(zhǎng)性能[1-6]。酸化劑對(duì)幼畜健康有積極的影響，但由于試驗(yàn)動(dòng)物品種、年齡、試驗(yàn)條件、添加量等不同，試驗(yàn)的結(jié)果變異很大，特別是仔幼兔方面，類型、添加量方面的研究相對(duì)較少。前期，我們研究了蘋果酸對(duì)獺兔生長(zhǎng)性能的影響及其適宜添加量[7]，而本試驗(yàn)旨在夏季幼兔飼糧中添加有機(jī)酸化劑——延胡索酸，探討其對(duì)夏季幼兔生長(zhǎng)性能、空腸發(fā)育、血清抗氧化和免疫指標(biāo)的影響，為酸化劑在幼兔生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

延胡索酸購(gòu)于蘇州優(yōu)合科技有限公司，復(fù)合酸化劑(酸賜寶)購(gòu)于廣東綠生源飼料科技有限公司。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選擇90只體況良好、體重[(919.00±8.92) g]相近的56日齡獺幼兔作為試驗(yàn)動(dòng)物，試驗(yàn)前統(tǒng)一免疫，隨機(jī)分為3組，每組10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3只。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，延胡索酸組在基礎(chǔ)飼糧中添加0.05%延胡索酸，復(fù)合酸化劑組在基礎(chǔ)飼糧中添加0.10%復(fù)合酸化劑。預(yù)試期7 d，正試期35 d。試驗(yàn)地點(diǎn)在江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院六合試驗(yàn)兔場(chǎng)。

1.3 試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)飼糧配制參照NRC(1977)家兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)[8]和谷子林[9]推薦的獺兔營(yíng)養(yǎng)需要。消化能供給量為1.2倍的維持需要。延胡索酸和復(fù)合酸化劑先預(yù)混合后添加至飼糧中制成顆粒飼喂，添加量根據(jù)前期其他酸化劑試驗(yàn)結(jié)果確定?；A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成(風(fēng)干基礎(chǔ))及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1)每千克預(yù)混料含 One kg of premix contained：FeSO4·H2O 5 320 mg，CuSO4·5H2O 1 080 mg，MnSO4·H2O 560 mg, ZnSO4·H2O 3 652 mg，CoCl2·6H2O 1 000 mg，VA 180 000 IU，VD 18 000 IU，VE 900 000 IU。

2)實(shí)測(cè)值 Measured values。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)前對(duì)兔舍兔籠進(jìn)行徹底清掃、消毒。試驗(yàn)兔3只為1籠，每天飼喂2次，分別在08:30和15:30，試驗(yàn)幼兔飼喂配合飼料，顆粒料，長(zhǎng)度為2～3 cm，自由飲水，每天清掃衛(wèi)生，并做好各種記錄。預(yù)試期內(nèi)進(jìn)行分組、打耳號(hào)。

1.5 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定

試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)對(duì)試驗(yàn)兔稱重，記錄初始體重和終末體重，計(jì)算平均日增重；記錄試驗(yàn)兔的死亡數(shù)量并計(jì)算死亡率。

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率測(cè)定采用全收糞法，在試驗(yàn)第21天，連續(xù)收糞5 d，記錄采食量，糞量。飼糧及糞中干物質(zhì)(DM)、粗蛋白質(zhì)(CP)、粗纖維(CF)、鈣(Ca)、磷(P)含量采用AOAC[10]規(guī)定方法進(jìn)行測(cè)定。

在試驗(yàn)期第35天采血，分離血清，-20 ℃保存用于血清抗氧化和免疫指標(biāo)的測(cè)定，按照檢測(cè)試劑盒(南京建成生物工程研究所)規(guī)定的方法進(jìn)行檢測(cè)。

在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，幼兔稱重，每組各隨機(jī)抽取體重相近獺兔5只，空腹24 h后進(jìn)行屠宰，取空腸中段組織，4%多聚甲醛固定，制成石蠟切片，蘇木精-伊紅(HE)染色。使用倒置顯微鏡(附帶相機(jī))，目鏡為10倍、物鏡為4倍條件下觀察，每張切片隨機(jī)觀察10個(gè)視野。應(yīng)用Q-capture Pro 6.0軟件獲得組織切片照片，Image-pro plus 6.0圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析，測(cè)量腸壁厚度、絨毛高度、隱窩深度，計(jì)算絨毛高度/隱窩深度值。

1.6 數(shù)據(jù)分析

運(yùn)用Excel 2007整理數(shù)據(jù)，采用SPSS 17.0進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANVOA)，Duncan氏法多重比較，P<0.05為顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 延胡索酸對(duì)夏季幼兔生長(zhǎng)性能及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加延胡索酸和復(fù)合酸化劑均提高了夏季幼兔終末體重和平均日增重(P>0.05)，降低了死亡率(P>0.05)。與對(duì)照組相比，延胡索酸組終末體重提高了6.05%，平均日增重提高了13.40%，但無顯著差異(P>0.05)。由此可見，飼糧添加延胡索酸可提高夏季幼兔的生長(zhǎng)性能。

表2 延胡索酸對(duì)夏季幼兔生長(zhǎng)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

由表3可知，延胡索酸組、復(fù)合酸化劑組粗蛋白質(zhì)表觀消化率均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，而延胡索酸組、復(fù)合酸化劑組磷表觀消化率均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。延胡索酸組、復(fù)合酸化劑組粗纖維表觀消化率均高于對(duì)照組(P>0.05)。由此可見，飼糧中添加延胡索酸和復(fù)合酸化劑均有利于促進(jìn)蛋白質(zhì)的消化。

表3 延胡索酸對(duì)夏季幼兔營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

2.2 延胡索酸對(duì)夏季幼兔空腸發(fā)育的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加延胡索酸能夠提高空腸腸壁厚度、絨毛高度和絨毛高度/隱窩深度(P>0.05)，分別提高了20.7%、9.83%和18.6%，同時(shí)也降低了空腸隱窩深度(P>0.05)。

表4 延胡索酸對(duì)夏季幼兔空腸發(fā)育的影響

2.3 延胡索酸對(duì)幼兔血清抗氧化和免疫指標(biāo)的影響

由表5可知，延胡索酸組血清總抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均高于對(duì)照組，且血清丙二醛(MDA)含量低于對(duì)照組，但均無顯著差異(P>0.05)。

表5 延胡索酸對(duì)夏季幼兔血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表6可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加延胡索酸、復(fù)合酸化劑對(duì)血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、補(bǔ)體3(C3)、補(bǔ)體4(C4)含量及堿性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LZM)活性均無顯著影響(P>0.05)，但血清LZM活性有提高的趨勢(shì)。

表6 延胡索酸對(duì)夏季幼兔血清免疫指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 延胡索酸對(duì)夏季幼兔生長(zhǎng)性能及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

延胡索酸又叫富馬酸，廣泛應(yīng)用于食品生產(chǎn)加工工藝中，作為食品酸味劑，具有抑菌、防腐的功效；對(duì)于單胃動(dòng)物，作為酸化劑和飼料保存劑，延胡索酸可以通過降低胃腸道pH、抑制飼料霉變而促進(jìn)動(dòng)物的健康，提高生長(zhǎng)性能。王杰等[11]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加復(fù)合酸化劑可以顯著提高斷奶仔豬的平均日增重，降低腹瀉率，蛋白質(zhì)、干物質(zhì)表觀消化率也有所提高。Palamidi等[12]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加酸化劑可以提高肉雞生長(zhǎng)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率及能量沉積。Zhu等[13]研究發(fā)現(xiàn)，生長(zhǎng)兔飲用有機(jī)酸酸性水可以部分改善生長(zhǎng)性能，補(bǔ)償胃酸酸度，影響盲腸微生物群落結(jié)構(gòu)，其中飲水最適宜pH為4.3。本試驗(yàn)中，飼糧添加延胡索酸能夠提高夏季幼兔粗蛋白質(zhì)、粗纖維的表觀消化率，提高終末體重和平均日增重。李春華等[14]研究報(bào)道，飼糧添加不同濃度延胡索酸能夠不同程度提高奶牛粗蛋白質(zhì)、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維的表觀消化率。飼糧中添加延胡索酸也可以顯著提高斷奶仔豬平均日增重，降低料重比和腹瀉率[15]。其他酸化劑研究中也得到相似的結(jié)果，潘孝青等[7]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加適宜的蘋果酸可以提高獺兔的生長(zhǎng)性能和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率，與本次試驗(yàn)結(jié)果相一致。王凱英等[16]研究發(fā)現(xiàn)，水貂飼糧中添加1.5%乳酸，能調(diào)節(jié)飼料和胃腸道pH，進(jìn)而獲得最佳生長(zhǎng)性能。近年，檸檬酸研究報(bào)道也較多，Zhang等[17]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加0.8%～1.6%檸檬酸可以提高飼喂高植物蛋白質(zhì)飼糧大黃魚的生長(zhǎng)性能，因?yàn)樗峄瘎┛梢蕴岣叩V物質(zhì)生物學(xué)利用率，增強(qiáng)腸道抗氧化能力及腸道恢復(fù)能力。Liu等[18]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加檸檬酸對(duì)妊娠后期和哺乳期母豬生產(chǎn)性能和窩產(chǎn)性能無顯著影響，但飼糧添加10和15 mg/kg檸檬酸可以增強(qiáng)母豬鈣、磷、蛋白質(zhì)的吸收，改善體液免疫功能，通過初乳和母乳使仔豬獲益。因此，生產(chǎn)中，飼糧添加適宜的酸化劑可以改善幼畜的健康，提高生長(zhǎng)性能。

3.2 延胡索酸對(duì)夏季幼兔空腸發(fā)育的影響

腸道形態(tài)發(fā)育是影響幼兔生長(zhǎng)健康的重要因素，仔兔斷奶后由吮吸母乳過渡到采食固體飼料的過程中，容易導(dǎo)致小腸絨毛萎縮和隱窩加深，影響幼兔腸道發(fā)育，從而影響生長(zhǎng)及健康。晏家友等[19]研究發(fā)現(xiàn)，仔豬飼糧添加緩釋復(fù)合酸化劑極顯著提高了空腸絨毛高度/隱窩深度值，改善了腸道發(fā)育，與林映才等[20]研究早期斷奶仔豬飼糧添加復(fù)合酸化劑得到的結(jié)果基本一致。李鵬等[21]研究發(fā)現(xiàn)，斷奶仔豬飼糧中添加2種復(fù)合酸化劑都可以顯著增加小腸絨毛的高度，降低隱窩深度。肉雞生產(chǎn)中，飼糧添加復(fù)合酸化劑可以提高肉雞21日齡十二指腸絨毛高度，降低隱窩深度，同時(shí)提高21和42日齡空腸的絨毛高度[22]。本次試驗(yàn)研究也得到相似的結(jié)果，飼糧添加延胡索酸能夠提高空腸腸壁厚度、絨毛高度、絨毛高度/隱窩深度值，降低了隱窩深度。由此可見，飼糧添加適宜的延胡索酸可以改善幼畜腸道發(fā)育及健康，改善腸道的消化吸收，從而提高生長(zhǎng)性能。

3.3 延胡索酸對(duì)夏季幼兔血清抗氧化和免疫指標(biāo)的影響

本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，飼糧添加延胡索酸能夠提高血清T-AOC和SOD活性，降低血清MDA含量，但對(duì)血清IgG、IgA、IgM等指標(biāo)含量無顯著影響，僅血清LZM活性有提高的趨勢(shì)，因此延胡索酸有可能提高幼兔的抗氧化性能，但對(duì)免疫效果不顯著。李鵬等[21]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加復(fù)合酸化劑可以顯著提高仔豬血清中IgA、IgG的含量，提高仔豬的免疫水平。郭驥[23]研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)合酸化劑能夠提高仔豬平均日增重與母豬泌乳期采食量，提高母豬乳中抗氧化能力，對(duì)母豬乳常規(guī)成分、免疫功能無顯著影響。張德成等[24]報(bào)道，飼糧添加檸檬酸可提高哺乳仔豬細(xì)胞免疫功能。但張秀文等[15]研究表明，飼糧添加1%延胡索酸對(duì)提高斷奶仔豬的免疫性能效果不明顯，但并無負(fù)面的反應(yīng)，這與本次試驗(yàn)的研究結(jié)果相一致。李建平等[25]研究報(bào)道，飼糧添加酸化劑對(duì)斷奶仔豬的免疫功能沒有顯著影響，且檸檬酸顯著提高了早期斷奶仔豬的抗氧化能力，機(jī)體清除自由基的能力增強(qiáng)，有助于提高斷奶仔豬的抗應(yīng)激能力。周嶺等[26]研究報(bào)道，飼糧添加復(fù)合酸化劑能顯著降低雞蛋臟蛋率，降低輸卵管中MDA的產(chǎn)生，緩解脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，且能顯著抑制輸卵管沙門氏菌的生長(zhǎng)。沈家鯤等[27]研究發(fā)現(xiàn)，生長(zhǎng)期蛋雛雞飼糧中添加復(fù)合酸化劑，對(duì)改善雛雞的免疫性能及血液中抗氧化指標(biāo)具有一定的促進(jìn)作用。由此可見，飼糧添加酸化劑能夠改善機(jī)體的抗氧化能力，對(duì)免疫性能影響還需進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

飼糧中添加延胡索酸可以提高夏季幼兔生長(zhǎng)性能，降低死亡率，改善腸道發(fā)育，提高腸道消化吸收能力，提高粗蛋白質(zhì)表觀消化率，增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力，促進(jìn)機(jī)體健康。

[1] TSILOYIANNIS V K,KYRIAKIS S C,VLEMMAS J,et al.The effect of organic acids on the control of porcine post-weaning diarrhoea[J].Research in Veterinary Science,2001,70(3):287-293.

[2] HENRY R W,PICKARD D W,HUGHES P E.Citric acid and fumaric acid as food additives for early-weaned piglets[J].Animal Production,1985,40(3):505-509.

[3] MROZ Z.Some developments on Dutch nutritional approaches to protect piglets against post-weaning gastrointestinal disorders in the absence of in-feed antibiotics[J].Journal of Animal and Feed Sciences,2001,10(1S):153-167.

[4] MROZ Z.Organic acids as potential alternatives to antibiotic growth promoters for pig[J].Advances in Pork Production,2005,16:169-182.

[5] ROTH F X,KIRCHGESSNER M.Organic acids as feed additives for young pigs:nutritional and gastrointestinal effects[J].Journal of Animal and Feed Sciences,1998,7(1S):25-33.

[6] KLUGE H,BROZ J,EDER K.Effect of benzoic acid on growth performance,nutrient digestibility,nitrogen balance,gastrointestinal microflora and parameters of microbial metabolism in piglets[J].Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition,2006,90(7/8):316-324.

[7] 潘孝青,楊杰,邵樂,等.蘋果酸對(duì)斷奶獺兔生產(chǎn)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率及血清生化指標(biāo)的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2013,29(1):136-139.

[8] NRC.Nutrition requirements of rabbits[S].Washington D.C.:National Academy Press,1977.

[9] 谷子林.斷乳仔兔腹瀉發(fā)生機(jī)制及生物活性物質(zhì)的調(diào)控研究[D].博士學(xué)位論文.哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學(xué),2004.

[10] AOAC.Official methods of analysis[M].15th ed.Arlington,Virginia:Association of official Analytical Chemists,1990:40-90.

[11] 王杰,陳玉林.復(fù)合酸化劑對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能和飼料表觀消化率的影響[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2010(13):77-79.

[12] PALAMIDI I,PARASKEUAS V,THEODOROU G,et al.Effects of dietary acidifier supplementation on broiler growth performance,digestive and immune function indices[J].Animal Production Science,2016,57(2):271-281.

[13] ZHU K H,XU X R,SUN D F,et al.Effects of drinking water acidification by organic acidifier on growth performance,digestive enzyme activity and caecal bacteria in growing rabbits[J].Animal Feed Science and Technology,2014,190:87-94.

[14] 李春華,高艷霞,曹玉鳳,等.日糧中添加不同濃度的延胡索酸對(duì)奶牛生產(chǎn)性能及消化代謝率的影響[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2011(5):64-66.

[15] 張秀文,齊遵利,任曉慧,等.延胡索酸和芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能及免疫機(jī)能的影響[J].飼料工業(yè),2008,29(2):12-14.

[16] 王凱英,鮑坤,徐超,等.飼料酸化劑對(duì)冬毛期水貂生產(chǎn)性能和血清生化指標(biāo)的影響[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2012,43(12):78-85.

[17] ZHANG H L,YI L N,SUN R J,et al.Effects of dietary citric acid on growth performance,mineral status and intestinal digestive enzyme activities of large yellow croakerLarimichthyscrocea(Richardson,1846) fed high plant protein diets[J].Aquaculture,2016,453:147-153.

[18] LIU S T,HOU W X,CHENG S Y,et al.Effects of dietary citric acid on performance,digestibility of calcium and phosphorus,milk composition and immunoglobulin in sows during late gestation and lactation[J].Animal Feed Science and Technology,2014,191:67-75.

[19] 晏家友,賈剛,王康寧,等.緩釋復(fù)合酸化劑對(duì)斷奶仔豬消化道酸度及腸道功能的影響[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),2009,40(12):1747-1754.

[20] 林映才,陳建新,蔣宗勇,等.復(fù)合酸化劑對(duì)早期斷奶仔豬生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)、腸道形態(tài)和微生物區(qū)系的影響[J].養(yǎng)豬,2001(1):13-16.

[21] 李鵬,武書庚,張海軍,等.復(fù)合酸化劑對(duì)斷奶仔豬腸黏膜形態(tài)和腸道微生物區(qū)系及免疫功能的影響[J].中國(guó)畜牧雜志,2009,45(9):28-32.

[22] 羅四維.復(fù)合酸化劑對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能和消化道內(nèi)環(huán)境的影響[D].碩士學(xué)位論文.揚(yáng)州:揚(yáng)州大學(xué),2010.

[23] 郭驥.不同豬舍環(huán)境與飼糧添加復(fù)合酸化劑對(duì)母豬生產(chǎn)性能及抗氧化能力的影響[D].碩士學(xué)位論文.廣州:華南農(nóng)業(yè)大學(xué),2016.

[24] 張德成,吳潤(rùn)培,陳思義,等.哺乳仔豬胃內(nèi)酸度的變化對(duì)紅細(xì)胞免疫功能的影響[J].飼料工業(yè),1994,15(7):28-29.

[25] 李建平,單安山,徐奇友.不同類型酸化劑對(duì)早期斷奶仔豬胃酸分泌、免疫功能和抗氧化機(jī)能的影響[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2009,40(4):69-73.

[26] 周嶺,丁雪梅,羅玉衡,等.復(fù)合酸化劑和微生態(tài)制劑對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)、抗氧化指標(biāo)及沙門氏菌感染的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(8):2571-2580.

[27] 沈家鯤,曹巖峰,梁先偉,等.復(fù)合酸化劑對(duì)海蘭褐蛋雛雞生長(zhǎng)、免疫性能和血清抗氧化能力的影響[J].中國(guó)家禽,2017,39(8):48-51.