• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    水飛薊油的體外抗氧化活性及對(duì)氧化損傷小鼠的保護(hù)作用

    2018-03-20 03:30:07朱淑云朱勝虎
    食品科學(xué) 2018年5期
    關(guān)鍵詞:水飛橄欖油肝細(xì)胞

    朱淑云,周 越,肖 香,董 英,朱勝虎

    (1.江蘇大學(xué)食品與生物工程學(xué)院,江蘇 鎮(zhèn)江 212013;2.江蘇恒順集團(tuán)有限公司,江蘇 鎮(zhèn)江 212143)

    水飛薊(Silybum marianum L. Gaertn.)為菊科水飛薊屬草本植物,原產(chǎn)于地中海沿岸,現(xiàn)亞洲、歐洲、南北美洲等地均有種植。水飛薊是一種優(yōu)良的藥用植物和油料植物。其藥用有效成分水飛薊素主要在水飛薊籽殼中[1],籽仁中蛋白質(zhì)和油的含量較高,水飛薊籽的含油率一般在20%~30%左右。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)水飛薊的研究主要集中在水飛薊素的提取、純化及其生物活性的研究上,而對(duì)其副產(chǎn)物水飛薊油的研究較少,致使水飛薊油的開發(fā)利用相對(duì)滯后[2-4]。研究發(fā)現(xiàn),水飛薊油中不飽和脂肪酸含量高達(dá)75%以上(以亞油酸為主),且富含VE,此外還含有β-谷甾醇、豆甾醇等固醇類成分,具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[5-6]。研究表明水飛薊油具有較好的降血脂、抗肝中毒和預(yù)防肝病的作用[7-9]。安全性實(shí)驗(yàn)表明,水飛薊油無(wú)致突變、致畸作用,無(wú)明顯亞慢性毒性[10-11],且被國(guó)家衛(wèi)生部在2014年第6號(hào)公告中批準(zhǔn)為新資源食品。

    大量研究證明,自由基的氧化損傷與許多疾病有關(guān),人體通過(guò)適當(dāng)攝入抗氧化物質(zhì)可以降低體內(nèi)自由基水平,防止脂質(zhì)過(guò)氧化的發(fā)生,從而幫助機(jī)體抵御疾病。但目前應(yīng)用于食品中的人工合成抗氧化劑二丁基羥基甲苯(butylated hydroxytoluene,BHT)、叔丁基羥基茴香醚(butylated hydroxy anisol,BHA)等被發(fā)現(xiàn)有不同程度的副作用,因此人們迫切希望從自然界中尋找高效安全的天然抗氧化劑,而水飛薊油中含有許多抗氧化活性很強(qiáng)的物質(zhì),如VE和固醇類物質(zhì),但現(xiàn)有關(guān)水飛薊油抗氧化活性的研究鮮有報(bào)道;因此本實(shí)驗(yàn)研究了水飛薊油的體外抗氧化活性,并進(jìn)一步研究了水飛薊油對(duì)氧化損傷小鼠的保護(hù)作用,以期為水飛薊油的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 動(dòng)物、材料與試劑

    3 月齡ICR小鼠40 只,購(gòu)于江蘇大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,許可證號(hào):SCXK(蘇)2013-0011,所有小鼠均飼養(yǎng)于江蘇大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心動(dòng)物房?jī)?nèi)。

    水飛薊油由水飛薊籽仁通過(guò)低溫加壓溶劑萃取技術(shù)(0.2 MPa壓力),以液化丁烷為溶劑常溫制得;橄欖油市售。

    1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH) 美國(guó)Sigma公司;D-半乳糖美國(guó)Amresco公司產(chǎn)品;總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)等試劑盒 南京建成生物工程研究所;其他試劑均為分析純。

    1.2 儀器與設(shè)備

    加壓溶劑萃取裝置 江南集團(tuán)與江蘇大學(xué)聯(lián)合研制;FC-160型錘式粉碎機(jī) 上海中藥機(jī)械廠;L500離心機(jī) 長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司;T8電動(dòng)均漿器德國(guó)IKA公司。

    1.3 方法

    1.3.1 清除DPPH自由基能力的測(cè)定

    清除DPPH自由基能力的測(cè)定參照文獻(xiàn)[12-13],用無(wú)水乙醇配制質(zhì)量濃度分別為10、15、20、25、30、50 mg/mL的水飛薊油作為待測(cè)樣品備用。取2 mL待測(cè)樣品加入2 mL 0.04 g/L的DPPH無(wú)水乙醇溶液,混合均勻,反應(yīng)20 min,測(cè)其在517 nm波長(zhǎng)處吸光度,記為A1;另取2 mL待測(cè)樣品加入無(wú)水乙醇2 mL,反應(yīng)20 min,測(cè)其在517 nm波長(zhǎng)處吸光度,記為A2;再測(cè)定2 mL 0.04 g/L DPPH無(wú)水乙醇溶液和2 mL無(wú)水乙醇在517 nm波長(zhǎng)處吸光度A0。所有測(cè)定平行進(jìn)行3 次,取平均值。按照式(1)計(jì)算水飛薊油對(duì)DPPH自由基的清除率。

    1.3.2 清除羥自由基能力的測(cè)定

    清除羥自由基能力的測(cè)定參照文獻(xiàn)[14],將水飛薊油用無(wú)水乙醇配制成質(zhì)量濃度分別為5、10、15、20、25 mg/mL的樣品備用。取2 mL水飛薊油,依次加入2 mL 6 mmol/L的FeSO4和H2O2,混勻后靜置10 min,再加入2 mL 6 mmol/L水楊酸,混勻,靜置30 min,測(cè)其510 nm波長(zhǎng)處吸光度記為Ai,用蒸餾水代替水楊酸的吸光度記為Aj。以蒸餾水代替水飛薊油的吸光度記為A0。每個(gè)樣品測(cè)定3 次,取平均值。按照式(2)計(jì)算水飛薊油對(duì)羥自由基的清除率。

    1.3.3 T-AOC的測(cè)定

    [15-16]的方法,將水飛薊油用無(wú)水乙醇配制成質(zhì)量濃度分別為0.5、1.5、2.0、4.0、6.0 mg/mL的樣品備用。取0.4 mL水飛薊油,加入4 mL磷鉬酸試劑(28 mmol/L磷酸鈉、0.6 mol/L濃硫酸和4 mmol/L鉬酸銨),95 ℃恒溫水浴90 min,測(cè)定695 nm波長(zhǎng)處吸光度。每個(gè)樣品測(cè)定3 次,取平均值。

    1.3.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組

    將小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為4 組(正常組、模型組、水飛薊油組、橄欖油組),每組10 只,經(jīng)1 周適應(yīng)性飼養(yǎng)后,正常組小鼠腹腔注射生理鹽水,其他組小鼠均腹腔注射D-半乳糖500 mg/(kg·d)(以體質(zhì)量計(jì),下同),第3、4組小鼠分別灌胃10 mL/(kg·d)劑量的水飛薊油和橄欖油,正常組和模型組灌胃等量蒸餾水。實(shí)驗(yàn)期間小鼠自由飲水、自由采食,每天固定時(shí)間注射和灌胃,連續(xù)飼喂7 周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,采血,引頸處死小鼠,迅速取肝組織,用生理鹽水沖洗干凈,濾紙吸去水分后,以電子天平準(zhǔn)確稱取質(zhì)量,置潔凈塑料袋中密封,超低溫保存。

    1.3.5 血清中抗氧化酶活力和T-AOC的測(cè)定

    小鼠血1 500 r/min離心15 min,取上層血清按試劑盒要求測(cè)定SOD、GSH-Px、T-AOC水平。

    1.3.6 組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)

    1.3.6.1 光學(xué)顯微鏡下觀察組織形態(tài)

    取小鼠肝組織用10%中性福爾馬林溶液固定,經(jīng)乙醇梯度脫水,二甲苯透明處理,石蠟包埋,連續(xù)切片,蘇木精-伊紅染色,光學(xué)顯微鏡下觀察。

    1.3.6.2 肝組織細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察

    取小鼠肝組織切割成1 mm3的組織塊,立即投入2.5%戊二醛溶液進(jìn)行前固定,然后用磷酸鹽緩沖溶液清洗數(shù)次,再經(jīng)過(guò)1%鋨酸溶液后固定,丙酮系列脫水,環(huán)氧樹脂包埋,切片后用醋酸鈾和檸檬酸鉛雙重染色,透射電子顯微鏡下觀察。

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

    2 結(jié)果與分析

    2.1 水飛薊油對(duì)DPPH自由基的清除能力

    圖1 水飛薊油對(duì)DPPH自由基的清除率Fig.1 Scavenging effect of Silybum marianum seed oil on DPPH radicals

    由圖1可看出,在10~50 mg/mL的質(zhì)量濃度范圍內(nèi),水飛薊油對(duì)DPPH自由基的清除率隨著質(zhì)量濃度升高而逐漸增大,幾乎呈線性關(guān)系,表現(xiàn)出良好的量效關(guān)系。其IC50為33.68 mg/mL,比蓮子胚芽油(IC50=48.90 mg/mL)[17]和甜橙油(IC50=66.10 mg/mL)[18]等植物油的低,與山茶油相近(IC50=35.13 mg/mL)[19],表明其具有較強(qiáng)的清除DPPH自由基的能力。

    2.2 水飛薊油對(duì)羥自由基的清除能力

    圖2 水飛薊油對(duì)羥自由基的清除率Fig.2 Scavenging effect of Silybum marianum seed oil of hydroxyl radicals

    羥自由基是破壞性極強(qiáng)的自由基,它可以與活細(xì)胞中許多分子反應(yīng),且速度極快,從而引發(fā)各種病變,是導(dǎo)致疾病和衰老的主要因素[20-21]。由圖2可以看出,在5~25 mg/mL范圍內(nèi),水飛薊油對(duì)羥自由基的清除率呈上升趨勢(shì),當(dāng)其質(zhì)量濃度為25 mg/mL時(shí)清除率達(dá)54.04%,遠(yuǎn)高于蓮子胚芽油(IC50=3.13 mg/mL)[17],但遠(yuǎn)低于南瓜籽油(IC50=121 mg/mL)[22],體現(xiàn)了較好的羥自由基清除活性。

    2.3 水飛薊油的T-AOC

    圖3 水飛薊油的T-AOCFig.3 Total antioxidant capacity of Silybum marianum seed oil

    由圖3可見,樣品液的吸光度隨質(zhì)量濃度的增加而逐漸升高,表明其抗氧化活性逐漸增強(qiáng),當(dāng)質(zhì)量濃度為6 mg/mL時(shí)其吸光度達(dá)到0.383,略低于歐李仁油和橄欖油[23],但也說(shuō)明其在體外的T-AOC較強(qiáng)。

    2.4 水飛薊油對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響

    表1 水飛薊油對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響(n=10)Table1 Effect of Silybum marianum seed oil on body weight of mice (n= 10)

    由表1可知,實(shí)驗(yàn)期間各組小鼠的體質(zhì)量都有增加,但無(wú)顯著性差異(P>0.05),說(shuō)明水飛薊油和橄欖油的添加對(duì)小鼠的生長(zhǎng)、食欲、消化及其物質(zhì)代謝不存在顯著影響。

    2.5 水飛薊油對(duì)小鼠血清中SOD、GSH-Px活力和T-AOC的影響

    SOD是體內(nèi)最有效的抗氧化劑,能清除體內(nèi)超氧陰離子和各種過(guò)氧化物,防止活性氧的生成和蓄積,對(duì)機(jī)體的抗氧化水平起著非常重要的作用[24-25]。GSH-Px是體內(nèi)重要的催化過(guò)氧化氫分解的酶,其能催化GSH還原過(guò)氧化氫,使過(guò)氧化氫被還原成水,從而穩(wěn)定含巰基的酶,防止血紅蛋白及其他輔助因子受到氧化損傷,從而減輕過(guò)氧化物對(duì)機(jī)體的損傷,保護(hù)生物體不受氧化損害[26]。而T-AOC的作用主要是維持內(nèi)環(huán)境活性氧的動(dòng)態(tài)平衡,清除過(guò)高的活性氧,使機(jī)體處于氧化還原相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài),T-AOC水平的下降是造成體內(nèi)活性氧水平升高的原因之一[27]。因此SOD、GSH-Px、T-AOC水平的變化可反映機(jī)體抗氧化能力的變化。水飛薊油對(duì)小鼠SOD和GSH-Px的活力及T-AOC的影響見表2。

    表2 水飛薊油對(duì)小鼠血清中SOD、GSH-Px、T-AOC的影響(n= 10)Table2 Effect of Silybum marianum seed oil on SOD, GSH-Px and T-AOC in serum of mice (n= 10)

    表2顯示,模型組小鼠的SOD和GSH-Px活力及T-AOC顯著低于正常組(P<0.05),說(shuō)明D-半乳糖可引起小鼠體內(nèi)抗氧化能力的下降。水飛薊油和橄欖油可顯著提高小鼠血清中SOD和GSH-Px的活力,并能提高其T-AOC,使其達(dá)到正常組水平。說(shuō)明水飛薊油和橄欖油可提高小鼠的抗氧化能力,降低D-半乳糖對(duì)小鼠的氧化損傷,從而達(dá)到抗氧化的目的。研究發(fā)現(xiàn),植物油中的VE和甾醇類物質(zhì)具有很強(qiáng)的生物活性[28-31],而水飛薊油含有豐富的VE和β-谷甾醇,這也是其具有抗氧化活性的物質(zhì)基礎(chǔ)。

    2.6 水飛薊油對(duì)小鼠肝組織形態(tài)的影響

    肝臟是生物體內(nèi)物質(zhì)代謝的重要器官,具有物質(zhì)儲(chǔ)存、代謝、解毒等多種功能,肝組織的形態(tài)變化是研究機(jī)體氧化損傷的重要指標(biāo)之一。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:正常組小鼠肝組織細(xì)胞排列整齊,細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰,細(xì)胞無(wú)明顯腫脹;模型組小鼠肝細(xì)胞形態(tài)發(fā)生了明顯的變化,細(xì)胞排列不整齊,肝細(xì)胞間沒(méi)有明顯的界限,細(xì)胞之間連接比較松散;水飛薊油和橄欖油組小鼠的肝細(xì)胞形態(tài)基本與正常組一樣,細(xì)胞排列整齊,無(wú)明顯的腫脹(圖4)。說(shuō)明水飛薊油可以對(duì)小鼠肝細(xì)胞的氧化損傷起到保護(hù)作用,這與其抗氧化活性有密切關(guān)系。

    圖4 水飛薊油對(duì)小鼠肝組織形態(tài)的影響(400×)Fig.4 Effect of Silybum marianum seed oil on liver tissue morphology in mice (400 ×)

    2.7 水飛薊油對(duì)小鼠肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響

    圖5 水飛薊油對(duì)小鼠肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響Fig.5 Effect of Silybum marianum seed oil on ultrastructure of mouse liver cells

    如圖5所示,正常組小鼠肝細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)正常,細(xì)胞核呈圓形或卵圓形,核膜完整,細(xì)胞中線粒體數(shù)量多,形態(tài)正常,線粒體嵴清晰,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富;模型組細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯改變,部分細(xì)胞器結(jié)構(gòu)不清或變形,線粒體膜損傷,結(jié)構(gòu)不完整,出現(xiàn)腫脹變形,部分線粒體出現(xiàn)空泡,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相對(duì)減少;水飛薊油和橄欖油組小鼠的肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)均接近正常組,可見細(xì)胞核膜完整,線粒體清晰,形態(tài)規(guī)則,線粒體腫脹不明顯,無(wú)空泡現(xiàn)象。由此可見,D-半乳糖對(duì)肝細(xì)胞造成了氧化損傷,引起了線粒體結(jié)構(gòu)的改變,水飛薊油可以減輕小鼠肝細(xì)胞氧化損傷的程度,從而維持細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的完整性,具有很好的抗氧化作用。水飛薊油的抗氧化活性與其含有大量的不飽和脂肪酸和VE,以及β-谷甾醇、豆甾醇等固醇類成分密切相關(guān),但具體的作用機(jī)理還有待于進(jìn)一步研究。

    3 結(jié) 論

    水飛薊油的體外抗氧化結(jié)果表明其具有一定的抗氧化活性,其抗氧化能力與質(zhì)量濃度有較好的量效關(guān)系。水飛薊油清除羥自由基的能力高于DPPH自由基,其總抗氧化能力較強(qiáng)。

    水飛薊油的體內(nèi)抗氧化結(jié)果表明,水飛薊油的抗氧化活性與橄欖油相當(dāng),可以顯著提高小鼠血清中SOD、GSH-Px和T-AOC水平,說(shuō)明水飛薊油可以提高D-半乳糖氧化損傷小鼠的抗氧化能力。通過(guò)光學(xué)顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)水飛薊油可以改善氧化損傷小鼠肝細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),保護(hù)小鼠肝細(xì)胞形態(tài)的完整性,維持細(xì)胞正常功能的發(fā)揮。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 袁丹, 張國(guó)峰, 王瑞杰. 水飛薊果實(shí)、果皮及其提取物質(zhì)量評(píng)價(jià)法的研究[J]. 沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 2003, 20(2): 119-122; 131.DOI:10.3969/j.issn.1006-2858.2003.02.012.

    [2] 徐德峰, 張衛(wèi)明, 史勁松, 等. 國(guó)內(nèi)水飛薊資源利用現(xiàn)狀與展望[J]. 食品研究與開發(fā), 2007, 28(2): 157-160. DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2007.02.047.

    [3] LOGUERCIO C, FESTI D. Silybin and the liver: from basic research to clinical practice[J]. World Journal of Gastroenterology, 2011,17(18): 2288-2301. DOI:10.3748/wjg.v17.i18.2288.

    [4] BHATTACHARYA S. Phytotherapeutic properties of milk thistle seeds: an overview[J]. Journal of Advanced Pharmacy Education &Research, 2011, 1: 69-79.

    [5] 劉婷, 王艷龍. 水飛薊油提取及應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 安徽農(nóng)學(xué)通報(bào),2012, 18(17): 57-59. DOI:10.3969/j.issn.1007-7731.2012.17.028.

    [6] 錢學(xué)射, 張衛(wèi)明, 顧龔平, 等. 值得開發(fā)與利用的水飛薊油[J].中國(guó)野生植物資源, 2006, 25(5): 13-16. DOI:10.3969/j.issn.1006-9690.2006.05.004.

    [7] BEN R N, BARBA F J, BARTH D, et al. Supercritical CO2extraction of oil, fatty acids and flavonolignans from milk thistle seeds: evaluation of their antioxidant and cytotoxic activities in Caco-2 cells[J]. Food and Chemical Toxicology, 2015, 83: 275-282.DOI:10.1016/j.fct.2015.07.006.

    [8] BATAKOV E A. Effect of Silybum marianum oil and legalon on lipid peroxidation and liver antioxidant systems in rats intoxicated with carbon tetrachloride[J]. Eksperimental’ naia i Klinicheskaia Farmakologiia, 2001, 64(4): 53-57.

    [9] HERMENEAN A, STAN M, ARDELEAN A, et al. Antioxidant and hepatoprotective activity of milk thistle (Silybum marianum L. Gaertn.)seed oil[J]. Open Life Sciences, 2015, 10: 225-236. DOI:10.1515/biol-2015-0017.

    [10] 楊鴻武, 謝韜, 牛璐, 等. 水飛薊籽油的亞慢性毒性研究[J]. 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2014, 24(1): 55-57.

    [11] 范文今, 謝韜, 牛璐, 等. 水飛薊籽油致突變和致畸作用的研究[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2015, 25(15): 2477-2479; 2482.

    [12] 朱淑云, 董英, 張海暉, 等. 水飛薊粕蛋白的酶解及其酶解物抗氧化活性研究[J]. 中國(guó)糧油學(xué)報(bào), 2011, 26(2): 68-72.

    [13] GOLMOHAMADI A, MOLLER G, POWERS J, et al. Effect of ultrasound frequency on antioxidant activity, total phenolic and anthocyanin content of red raspberry puree[J]. Ultrasonics Sonochemistry, 2013, 20(5): 1316-1323. DOI:10.1016/j.ultsonch.2013.01.020.

    [14] 賈俊強(qiáng), 馬海樂(lè), 曲文娟, 等. 超聲預(yù)處理大米蛋白制備抗氧化肽[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào), 2008, 24(8): 288-293. DOI:10.3321/j.issn:1002-6819.2008.08.064.

    [15] OZKAN G, SIMSEK B, KULEASAN H. Antioxidant activities of Satureja cilicica essential oil in butter and in vitro[J]. Journal of Food Engineering, 2007, 79(4): 1391-1396. DOI:10.1016/j.jfoodeng.2006.04.020.

    [16] 朱璐, 董福, 馮敘橋, 等. 浸提法、超聲波法和微波法提取紫薯花色苷的抗氧化性比較研究[J]. 食品科學(xué), 2015, 36(19): 83-88.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201519015.

    [17] 姜存波, 鄭鐵松. 蓮子胚芽油體外抗氧化能力的研究[J]. 食品工業(yè)科技, 2011, 32(8): 143-146. DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2011.08.009.

    [18] 龔文靜, 王磊, 邱玥, 等. 甜橙油抗氧化活性研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2011, 39(35): 21783-21784; 22131. DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.35.032.

    [19] 張志英. 山茶油抗氧化防輻射活性成分及其機(jī)理的研究[D]. 杭州:浙江大學(xué), 2006: 17.

    [20] 肖軍霞, 黃國(guó)清, 仇宏偉, 等. 紅樹莓花色苷的提取及抗氧化活性研究[J]. 食品科學(xué), 2011, 32(8): 15-18.

    [21] 余凡, 楊恒拓, 葛亞龍, 等. 紫薯色素的微波提取及其穩(wěn)定性和抗氧化活性的研究[J]. 食品工業(yè)科技, 2013, 34(4): 322-326.DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2013.04.033.

    [22] 毛強(qiáng)強(qiáng). 發(fā)芽南瓜籽油的提取及其抗氧化研究[D]. 太原: 山西大學(xué),2013: 33.

    [23] 林海. 歐李仁油抗氧化活性的研究[J]. 食品工業(yè)科技, 2012, 33(15):105-107; 111. DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2012.15.010.

    [24] YANG X J, CHEN J, ZHANG C X, et al. Evaluation of antioxidant activity of fermented soybean meal extract[J]. African Journal of Pharmacy and Pharmacology, 2012, 6(24): 1774-1781. DOI:10.5897/AJPP12.392.

    [25] LIU A J, MA Y H, ZHU Z Y. Protective effect of selenoarginine against oxidative stress in D-galactose- induced aging mice[J]. Bioscience Biotechnology Biochemistry, 2009, 73(7): 1461-1464. DOI:10.1271/bbb.80558.

    [26] WANG D L, LIU M X,CAO J C, et al. Effect of Colla corii asini (E’jiao) on D-galactose induced aging mice[J]. Biological &Pharmaceutical Bulletin, 2012, 35(12): 2128-2132.

    [27] JIN S L, YIN Y G. In vivo antioxidant activity of total fl avonoids from indocalamus leaves in aging mice caused by D-galactose[J]. Food and Chemical Toxicology, 2012, 50(10): 3814-3818. DOI:10.1016/j.fct.2012.07.046.

    [28] KIM D Y, KIM J, HAM H J, et al. Effects of d-α-tocopherol supplements on lipid metabolism in a high-fat diet-fed animal model[J]. Nutrition Research and Practice 2013, 7(6): 481-487.DOI:10.4162/nrp.2013.7.6.481.

    [29] 蔡俊, 陳季旺, 王茹, 等. 多肽體外抗氧化活性測(cè)定方法的比較[J]. 食品科學(xué), 2016, 37(11): 52-57. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201611010.

    [30] AWAD A B, FINK C S, TRAUTWEIN E A, et al. β-Sitosterol stimulates ceramide metabolism in differentiated Caco2cells[J].Journal of Nutritional Biochemistry, 2005, 16(11): 650-655.DOI:10.1016/j.jnutbio.2005.04.004.

    [31] 左玉, 張彩鳳, 賈澤慧, 等. 豆甾醇在葵花油水包油乳狀液中抗氧化作用的研究[J]. 中國(guó)糧油學(xué)報(bào), 2016, 31(1): 36-42.

    猜你喜歡
    水飛橄欖油肝細(xì)胞
    外泌體miRNA在肝細(xì)胞癌中的研究進(jìn)展
    水飛薊油的提取及應(yīng)用
    優(yōu)質(zhì)橄欖油如何購(gòu)買
    水飛薊素固體分散體的制備及5種成分的溶出度
    中成藥(2018年1期)2018-02-02 07:19:55
    水飛薊賓處方前研究
    特級(jí)初榨橄欖油巧鑒別
    肝細(xì)胞程序性壞死的研究進(jìn)展
    肝細(xì)胞癌診斷中CT灌注成像的應(yīng)用探析
    兩個(gè)方法幫你測(cè)橄欖油純不純
    中老年健康(2014年5期)2014-07-24 17:39:57
    SIAh2與Sprouty2在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義
    咕卡用的链子| 中文字幕制服av| 国产精品一区二区免费欧美 | 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 老司机靠b影院| 精品国产国语对白av| e午夜精品久久久久久久| 欧美日韩视频精品一区| 九草在线视频观看| 国产又爽黄色视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 日本午夜av视频| 日韩人妻精品一区2区三区| 人成视频在线观看免费观看| 最近中文字幕2019免费版| 成年人免费黄色播放视频| 久久久欧美国产精品| av欧美777| 国产xxxxx性猛交| 老汉色∧v一级毛片| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 黄色a级毛片大全视频| 国产成人欧美在线观看 | 欧美激情 高清一区二区三区| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 免费在线观看影片大全网站 | 搡老岳熟女国产| 嫩草影视91久久| 午夜视频精品福利| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 免费在线观看影片大全网站 | 久久久久精品人妻al黑| 欧美日本中文国产一区发布| 精品一区二区三卡| 亚洲国产毛片av蜜桃av| tube8黄色片| 午夜福利视频在线观看免费| 性色av一级| 婷婷色av中文字幕| 亚洲中文字幕日韩| 欧美成人午夜精品| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 国产男女超爽视频在线观看| 人妻 亚洲 视频| 成人午夜精彩视频在线观看| 久久亚洲国产成人精品v| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 日韩伦理黄色片| 亚洲美女黄色视频免费看| 婷婷色麻豆天堂久久| 美女大奶头黄色视频| 天堂中文最新版在线下载| 一区福利在线观看| 国产深夜福利视频在线观看| 亚洲av片天天在线观看| 9191精品国产免费久久| 亚洲精品国产av成人精品| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 美国免费a级毛片| 天堂8中文在线网| 欧美大码av| 久久久久精品国产欧美久久久 | 电影成人av| 久久免费观看电影| 又大又爽又粗| 老鸭窝网址在线观看| 伊人亚洲综合成人网| 一级片免费观看大全| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲av欧美aⅴ国产| 日韩人妻精品一区2区三区| 亚洲人成电影观看| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国产福利在线免费观看视频| 黄频高清免费视频| 久久久久久久久久久久大奶| 欧美日韩成人在线一区二区| 日韩av在线免费看完整版不卡| 老鸭窝网址在线观看| 51午夜福利影视在线观看| 在线看a的网站| 日韩av不卡免费在线播放| 十八禁人妻一区二区| 一级,二级,三级黄色视频| 十八禁人妻一区二区| 亚洲天堂av无毛| 美女主播在线视频| 日韩大片免费观看网站| 久久久久视频综合| 国产国语露脸激情在线看| av福利片在线| 一区二区av电影网| 两人在一起打扑克的视频| 一边亲一边摸免费视频| 久久久久视频综合| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲精品国产一区二区精华液| 最新在线观看一区二区三区 | 国产国语露脸激情在线看| 亚洲国产av新网站| 狂野欧美激情性xxxx| 一级片'在线观看视频| 久久综合国产亚洲精品| 丁香六月欧美| 亚洲av片天天在线观看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 久久久久网色| 国产精品久久久久久精品电影小说| 97精品久久久久久久久久精品| 一级黄色大片毛片| 日韩 亚洲 欧美在线| 午夜两性在线视频| 嫩草影视91久久| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 乱人伦中国视频| 91成人精品电影| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久鲁丝午夜福利片| 国产精品.久久久| 香蕉丝袜av| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 美女主播在线视频| 亚洲成国产人片在线观看| 国产高清videossex| 久久影院123| 脱女人内裤的视频| 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲色图综合在线观看| 中文字幕av电影在线播放| 99国产精品99久久久久| 国产成人av激情在线播放| 真人做人爱边吃奶动态| 咕卡用的链子| 一二三四在线观看免费中文在| 一边摸一边做爽爽视频免费| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产精品国产三级国产专区5o| 男人舔女人的私密视频| 国产野战对白在线观看| 国产淫语在线视频| 亚洲,欧美精品.| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产午夜精品一二区理论片| 高清视频免费观看一区二区| 天天添夜夜摸| 国产av精品麻豆| 中国美女看黄片| 国产麻豆69| 久久久精品94久久精品| 免费在线观看日本一区| 中文字幕av电影在线播放| 婷婷色综合www| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 少妇粗大呻吟视频| 欧美精品高潮呻吟av久久| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 成年美女黄网站色视频大全免费| 美女大奶头黄色视频| 成年人黄色毛片网站| 婷婷丁香在线五月| 成人影院久久| 啦啦啦在线观看免费高清www| av在线老鸭窝| 欧美变态另类bdsm刘玥| 久久久久久久国产电影| 黄色毛片三级朝国网站| 大码成人一级视频| 久久久国产一区二区| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 欧美xxⅹ黑人| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产精品亚洲av一区麻豆| 一级毛片女人18水好多 | 免费观看av网站的网址| 青草久久国产| 大片电影免费在线观看免费| 一级毛片电影观看| 亚洲国产欧美网| 国产亚洲一区二区精品| 久久久国产欧美日韩av| 熟女av电影| cao死你这个sao货| 国产精品一国产av| 亚洲综合色网址| 精品少妇久久久久久888优播| 老司机亚洲免费影院| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产精品一区二区在线观看99| 免费高清在线观看视频在线观看| 日韩中文字幕视频在线看片| 精品少妇内射三级| 欧美成人午夜精品| 在线观看人妻少妇| 久热爱精品视频在线9| 丰满少妇做爰视频| 免费日韩欧美在线观看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 少妇被粗大的猛进出69影院| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 观看av在线不卡| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 在现免费观看毛片| 国产野战对白在线观看| 国产一区二区激情短视频 | 美女大奶头黄色视频| 成年女人毛片免费观看观看9 | 久久热在线av| 男人爽女人下面视频在线观看| 乱人伦中国视频| 日本黄色日本黄色录像| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 七月丁香在线播放| 啦啦啦在线免费观看视频4| 我要看黄色一级片免费的| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 日本91视频免费播放| 亚洲精品美女久久av网站| 老鸭窝网址在线观看| 成年女人毛片免费观看观看9 | 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 少妇人妻久久综合中文| 国产高清国产精品国产三级| 中文字幕av电影在线播放| 狂野欧美激情性bbbbbb| 999久久久国产精品视频| 国产91精品成人一区二区三区 | 热re99久久国产66热| 亚洲三区欧美一区| 午夜免费成人在线视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 国产成人精品无人区| 性少妇av在线| 欧美久久黑人一区二区| 免费日韩欧美在线观看| 美女视频免费永久观看网站| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产在线免费精品| 亚洲国产欧美一区二区综合| 一区二区av电影网| 国产精品一区二区免费欧美 | www.熟女人妻精品国产| 99九九在线精品视频| 韩国高清视频一区二区三区| 国产淫语在线视频| 男女之事视频高清在线观看 | 黑人欧美特级aaaaaa片| 2021少妇久久久久久久久久久| 乱人伦中国视频| 亚洲男人天堂网一区| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 桃花免费在线播放| xxxhd国产人妻xxx| 亚洲成人免费电影在线观看 | 精品国产乱码久久久久久小说| 久久久久国产一级毛片高清牌| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| xxxhd国产人妻xxx| 激情视频va一区二区三区| avwww免费| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 精品国产一区二区久久| av在线播放精品| 亚洲精品中文字幕在线视频| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产成人精品久久久久久| 日本wwww免费看| av天堂久久9| 一级a爱视频在线免费观看| 免费少妇av软件| 国产熟女欧美一区二区| 极品人妻少妇av视频| 91老司机精品| 又紧又爽又黄一区二区| 午夜影院在线不卡| 欧美日韩综合久久久久久| 在线观看免费午夜福利视频| 制服人妻中文乱码| 久久国产精品影院| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 婷婷色综合www| 天天影视国产精品| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产精品国产三级专区第一集| 91麻豆av在线| 下体分泌物呈黄色| 一本久久精品| 亚洲欧美色中文字幕在线| 亚洲九九香蕉| 亚洲伊人久久精品综合| 一区二区三区乱码不卡18| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 1024视频免费在线观看| 高清av免费在线| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲国产av新网站| 国产男人的电影天堂91| 亚洲一码二码三码区别大吗| 中文字幕色久视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| tube8黄色片| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲成国产人片在线观看| 在现免费观看毛片| 国产又爽黄色视频| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国产精品偷伦视频观看了| 国产一区二区 视频在线| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 黄片小视频在线播放| 午夜av观看不卡| 国产99久久九九免费精品| 黄色 视频免费看| 久久鲁丝午夜福利片| 国产一区二区在线观看av| 美国免费a级毛片| 国产在线观看jvid| 精品福利永久在线观看| 男女高潮啪啪啪动态图| 热re99久久精品国产66热6| 黄色视频不卡| 亚洲av成人精品一二三区| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲少妇的诱惑av| 欧美xxⅹ黑人| 国产激情久久老熟女| 亚洲欧美激情在线| 91精品三级在线观看| 国产国语露脸激情在线看| 日本欧美国产在线视频| 另类亚洲欧美激情| 美女主播在线视频| 99九九在线精品视频| 国产精品久久久av美女十八| 天天操日日干夜夜撸| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 99精国产麻豆久久婷婷| av网站在线播放免费| 国产精品一二三区在线看| 欧美黑人欧美精品刺激| 黄色片一级片一级黄色片| 午夜福利影视在线免费观看| 久热这里只有精品99| 两性夫妻黄色片| 99久久综合免费| 亚洲第一av免费看| 久久精品成人免费网站| 亚洲情色 制服丝袜| 欧美+亚洲+日韩+国产| 中文字幕人妻丝袜制服| 午夜久久久在线观看| 国产一级毛片在线| 人体艺术视频欧美日本| 成人三级做爰电影| 秋霞在线观看毛片| 亚洲国产日韩一区二区| 久久久久视频综合| 99热全是精品| 看十八女毛片水多多多| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲成人免费电影在线观看 | 日日爽夜夜爽网站| av在线老鸭窝| 国产成人欧美| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 啦啦啦在线观看免费高清www| a 毛片基地| www.999成人在线观看| 少妇人妻 视频| 五月天丁香电影| 国产精品国产av在线观看| 人人妻人人澡人人看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 人妻一区二区av| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 成年人午夜在线观看视频| 欧美变态另类bdsm刘玥| 在线观看免费午夜福利视频| 一本综合久久免费| 少妇被粗大的猛进出69影院| 中文字幕人妻熟女乱码| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲第一av免费看| 制服诱惑二区| 一本久久精品| 国产午夜精品一二区理论片| 观看av在线不卡| 国产精品熟女久久久久浪| 宅男免费午夜| 最黄视频免费看| 老司机深夜福利视频在线观看 | 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 另类精品久久| 大陆偷拍与自拍| 伦理电影免费视频| 久久久久久久大尺度免费视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 午夜两性在线视频| 人体艺术视频欧美日本| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 新久久久久国产一级毛片| 天天操日日干夜夜撸| 啦啦啦在线免费观看视频4| av欧美777| 在线观看免费日韩欧美大片| 精品高清国产在线一区| 精品国产一区二区三区四区第35| 在线看a的网站| 91老司机精品| 新久久久久国产一级毛片| 国产精品国产三级专区第一集| 咕卡用的链子| 精品视频人人做人人爽| 国产精品一国产av| 我要看黄色一级片免费的| a级片在线免费高清观看视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 亚洲国产精品成人久久小说| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产精品久久久久久精品古装| 欧美激情高清一区二区三区| 黄色a级毛片大全视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 最新的欧美精品一区二区| 午夜福利视频精品| 一区福利在线观看| 69精品国产乱码久久久| 日韩大码丰满熟妇| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 激情五月婷婷亚洲| 国产高清视频在线播放一区 | 亚洲欧美一区二区三区黑人| 久久青草综合色| 久久亚洲精品不卡| 国产成人91sexporn| 亚洲三区欧美一区| 久久人妻熟女aⅴ| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 搡老岳熟女国产| 日本av免费视频播放| 日韩 亚洲 欧美在线| 天天添夜夜摸| 精品第一国产精品| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲欧洲国产日韩| 久久久精品区二区三区| 大话2 男鬼变身卡| 丰满少妇做爰视频| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 久久久欧美国产精品| 国产在线免费精品| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 自线自在国产av| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 中文字幕精品免费在线观看视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 成人国产一区最新在线观看 | 国产精品一区二区精品视频观看| 99精国产麻豆久久婷婷| 日本av手机在线免费观看| 午夜福利一区二区在线看| e午夜精品久久久久久久| 亚洲精品中文字幕在线视频| 电影成人av| 精品久久久精品久久久| 91精品三级在线观看| 中文字幕最新亚洲高清| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲天堂av无毛| 一级a爱视频在线免费观看| 丝袜美腿诱惑在线| 热re99久久国产66热| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚洲综合色网址| 国产在线观看jvid| 性少妇av在线| 自线自在国产av| 黄色片一级片一级黄色片| 韩国高清视频一区二区三区| 免费看十八禁软件| 免费日韩欧美在线观看| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 丁香六月欧美| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产精品一区二区在线不卡| 搡老岳熟女国产| 亚洲av男天堂| 亚洲精品国产av蜜桃| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲精品中文字幕在线视频| 这个男人来自地球电影免费观看| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 国产一区有黄有色的免费视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲人成网站在线观看播放| 99香蕉大伊视频| 亚洲欧美激情在线| 女性生殖器流出的白浆| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 欧美xxⅹ黑人| 亚洲国产欧美网| 亚洲av美国av| 久久久久久久久免费视频了| 欧美激情 高清一区二区三区| 免费av中文字幕在线| 精品国产一区二区三区四区第35| 十分钟在线观看高清视频www| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 制服诱惑二区| 免费在线观看影片大全网站 | 亚洲精品久久午夜乱码| 精品人妻在线不人妻| 2018国产大陆天天弄谢| 国产又爽黄色视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 欧美 日韩 精品 国产| 婷婷色麻豆天堂久久| 国产日韩欧美视频二区| 电影成人av| 午夜激情av网站| 性色av乱码一区二区三区2| 又黄又粗又硬又大视频| 男女之事视频高清在线观看 | 美女中出高潮动态图| 精品欧美一区二区三区在线| 国产一区有黄有色的免费视频| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲图色成人| 久久这里只有精品19| www.自偷自拍.com| 一区二区av电影网| 精品人妻1区二区| 精品久久久久久电影网| 999久久久国产精品视频| 在线观看免费午夜福利视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 成人手机av| 蜜桃国产av成人99| 制服诱惑二区| 美女视频免费永久观看网站| 99精品久久久久人妻精品| 午夜精品国产一区二区电影| 中文字幕人妻熟女乱码| 999久久久国产精品视频| 99精品久久久久人妻精品| 成年av动漫网址| 欧美日韩福利视频一区二区| 999久久久国产精品视频| 少妇人妻 视频| 亚洲伊人色综图| 99热网站在线观看| 精品亚洲成国产av| 中文字幕色久视频| 男人添女人高潮全过程视频| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 无遮挡黄片免费观看| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 日韩视频在线欧美| 国产精品免费大片| 久热这里只有精品99| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产91精品成人一区二区三区 | 黄色一级大片看看| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产三级黄色录像| 热re99久久国产66热| 色网站视频免费| 五月天丁香电影| a级毛片在线看网站| 欧美成人午夜精品| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 中文字幕制服av| 天堂8中文在线网| 老汉色∧v一级毛片| 免费看十八禁软件| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 香蕉国产在线看| 好男人电影高清在线观看| 日本wwww免费看| tube8黄色片| 久久久国产一区二区| 国产免费又黄又爽又色| 大片电影免费在线观看免费| 男女无遮挡免费网站观看| 一级毛片电影观看| 亚洲,欧美精品.| 国产99久久九九免费精品| 国产成人精品在线电影| 国产在视频线精品| 交换朋友夫妻互换小说| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 日韩大码丰满熟妇| 欧美亚洲日本最大视频资源| 亚洲av成人精品一二三区| 国产亚洲精品第一综合不卡| 亚洲综合色网址| 18禁国产床啪视频网站| 91老司机精品| 色94色欧美一区二区| 最近手机中文字幕大全| 国产亚洲精品久久久久5区| 真人做人爱边吃奶动态| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产精品免费视频内射|