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    花椒麻素對(duì)SD雄性大鼠骨骼肌蛋白質(zhì)代謝的影響及機(jī)理

    2018-03-20 03:30:01任廷遠(yuǎn)闞建全
    食品科學(xué) 2018年5期
    關(guān)鍵詞:骨骼肌花椒沉積

    任廷遠(yuǎn),闞建全*

    (西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院,重慶 400715)

    花椒(Zanthoxylum bungeanum Maxim.)是蕓香科(Rutaceae)花椒屬(Zanthoxylum)植物,其果實(shí)是我國(guó)傳統(tǒng)的“八大調(diào)味品”之一,也是我國(guó)傳統(tǒng)中藥?;ń吩谌澜缂s有250 種,主要分布在非洲、亞洲、美洲及大洋洲的熱帶和亞熱帶地區(qū)[1]?,F(xiàn)在研究報(bào)道的花椒麻素主要有山椒素等14 種[2],主要包括α-山椒素、β-山椒素、γ-山椒素以及它們?cè)诎被糠趾幸粋€(gè)羥基的同系物[3-4]。

    目前關(guān)于花椒麻素對(duì)機(jī)體功能的研究主要集中在減肥、降脂、抗氧化、降血糖等方面[5-7]。其中關(guān)于花椒麻素促進(jìn)體內(nèi)脂肪的氧化,減少脂肪沉積和血漿中甘油三酯濃度的效果的研究較多。2014年,陳朝軍等[8]發(fā)現(xiàn)灌胃不同配比的花椒麻素與辣椒素能延緩大鼠的體質(zhì)量增加,降低大鼠的血脂和肝脂水平,減輕大鼠的脂肪肝癥狀,對(duì)膽固醇代謝循環(huán)有較好效果;2014年,呂嬌[9]研究表明,麻味麻素可升高高脂血癥大鼠回腸膽汁酸代謝基因表達(dá)和降低高脂血癥大鼠肝臟內(nèi)膽固醇代謝基因表達(dá),降低其體內(nèi)血脂、肝脂含量,從而調(diào)節(jié)膽固醇在體內(nèi)的代謝循環(huán)作用;2014年,任文瑾[10]研究表明,花椒精、花椒揮發(fā)油和花椒麻素均有調(diào)節(jié)血脂的作用,作用效果花椒麻素>花椒精>花椒揮發(fā)油,花椒麻素與花椒精調(diào)節(jié)肝臟膽固醇代謝的效果相近,但花椒麻素降低甘油三酯的效果優(yōu)于花椒精。然而花椒麻素降脂過(guò)程中如何促進(jìn)蛋白沉積并不明確,嚴(yán)重防礙了花椒麻素生理功能的全面評(píng)價(jià),因此有必要研究花椒麻素對(duì)機(jī)體蛋白質(zhì)代謝的影響及機(jī)理,為花椒麻素在醫(yī)藥上的應(yīng)用提供科學(xué)的理論參考。肝臟是哺乳動(dòng)物蛋白質(zhì)代謝最活躍的器官,蛋白質(zhì)代謝的許多重要反應(yīng)都是在肝臟中進(jìn)行的;肌肉是貯存氨基酸的主要場(chǎng)所,其氨基酸含量占氨基酸代謝庫(kù)的50%~75%[11]。現(xiàn)已研究證實(shí),胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)是主要由肝臟分泌的調(diào)控動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)鍵因子,對(duì)蛋白質(zhì)代謝具有重要的調(diào)節(jié)作用[12]。肌肉質(zhì)量的增長(zhǎng)是蛋白質(zhì)沉積的最直觀表現(xiàn)之一,而肌肉的發(fā)育受到肌細(xì)胞生成素(myogenin,MyoG)等肌肉生長(zhǎng)調(diào)控因子的調(diào)節(jié)[13]。前期的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)花椒麻素可以增加SD大鼠相對(duì)骨骼肌的質(zhì)量,但具體機(jī)理十分不清楚。因此,本實(shí)驗(yàn)以健康SD雄性大鼠為動(dòng)物模型,采用熒光實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)方法,研究花椒麻素對(duì)機(jī)體蛋白質(zhì)代謝相關(guān)基因的影響,初步探討花椒麻素對(duì)SD大鼠蛋白質(zhì)代謝的機(jī)理。

    1 材料與方法

    1.1 動(dòng)物、材料與試劑

    SD雄性大鼠(動(dòng)物許可證號(hào):SCXK(渝)20120008,體質(zhì)量120~140 g,40 只) 重慶騰鑫生物技術(shù)有限公司。

    花椒麻素由實(shí)驗(yàn)室自制,純度為95.7%。

    大鼠基礎(chǔ)飼料 重慶騰鑫生物技術(shù)有限公司;總蛋白質(zhì)(total protein,TP)、血尿素氮(blood urine nitrogen,BUN)、肌酐(creatinine,Cr)等指標(biāo)測(cè)定試劑盒 南京建成生物工程研究所;IGF-Ⅰ的測(cè)定試劑盒美國(guó)ADL公司;[14C]-苯丙氨酸 中國(guó)原子能科學(xué)研究院。

    1.2 儀器與設(shè)備

    3-18K冷凍離心機(jī) 德國(guó)Sigma公司;7020全自動(dòng)生化分析儀、L-8800全自動(dòng)氨基酸分析儀 日本日立公司;H1MG酶標(biāo)儀 美國(guó)基因有限公司;UV-2450紫外分光光度計(jì) 日本島津公司;NanoDrop 1000微量紫外分光光度計(jì) 美國(guó)Thermo公司;S1000梯度PCR儀美國(guó)Bio-Rad公司;Light Cycler Nano qPCR儀 美國(guó)羅氏公司。

    1.3 方法

    1.3.1 動(dòng)物飼養(yǎng)與樣品采集

    動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程遵循現(xiàn)行的經(jīng)西南大學(xué)動(dòng)物保護(hù)委員會(huì)批準(zhǔn)的動(dòng)物保護(hù)法。將40 只SD雄性大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為空白對(duì)照組、花椒麻素高劑量組(8 mg/(kg·d))、中劑量組(4 mg/(kg·d))和低劑量組(2 mg/(kg·d)),各組10 只。每只大鼠分別飼養(yǎng)在不銹鋼籠里(25 cm×15 cm×15 cm),控制恒溫恒濕的房間,溫度保持在(25±1)℃,相對(duì)濕度55%,從早上7點(diǎn)開始12 h為周期循環(huán)晝夜。每天15:00對(duì)實(shí)驗(yàn)組灌胃花椒麻素,花椒麻素需溶于大豆油中配成溶液。灌胃劑量均為0.1 mL/100 g(以體質(zhì)量計(jì)),空白對(duì)照組灌胃等劑量的大豆油。飼養(yǎng)期間自由采食基礎(chǔ)飼料和飲水,每3 d稱量一次大鼠體質(zhì)量,同時(shí)調(diào)整灌胃量,每天記錄大鼠采食量。喂養(yǎng)28 d,禁食12 h后稱體質(zhì)量。頸椎脫臼法處死大鼠。采集大鼠的血液于離心管中進(jìn)行離心后采集血清。取肝臟、左側(cè)骨骼肌、腎臟等,樣品稱質(zhì)量后用液氮冷凍于-80 ℃?zhèn)溆谩?/p>

    3天后,王敬凱等開車去山上查看情況。他們看到第一棵松樹下土面上的記號(hào)沒被破壞,說(shuō)明瓶子沒動(dòng),第二棵松樹下的土壤變松,表面記號(hào)已不在。王敬凱從土中摳出了一個(gè)小瓶。

    1.3.2 腹脂率、組織相對(duì)質(zhì)量和飼料效率的測(cè)定

    腹脂率、組織相對(duì)質(zhì)量和飼料效率分別根據(jù)公式(1)~(3)計(jì)算。

    1.3.3 生理生化指標(biāo)分析

    飼料和糞便TP的測(cè)定采用凱氏定氮法測(cè)定。血清和骨骼肌中TP、BUN、Cr水平采用試劑盒測(cè)定,血清中胰島素和IGF-Ⅰ的含量根據(jù)試劑盒,采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定,血清及組織中氨基酸分析采用全自動(dòng)氨基酸分析儀進(jìn)行。

    1.3.4 花椒麻素對(duì)大鼠骨骼肌蛋白質(zhì)合成代謝與分解代謝的分析

    蛋白質(zhì)合成代謝采用離體培養(yǎng)骨骼肌肉,檢測(cè)單位時(shí)間內(nèi)摻入[14C]-苯丙氨酸(0.05 μCi/mL)的放射性含量[14]。新鮮的左測(cè)骨骼肌稱質(zhì)量后,置于5 mL DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基中37 ℃充氧孵育30 min,然后在含有[14C]-苯丙氨酸的DMEM中繼續(xù)孵育1 h。磷酸鹽緩沖液洗3 次,肌肉進(jìn)行勻漿,加入10%三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)沉淀蛋白質(zhì),吸棄上清液,加入0.5 mol/L NaOH溶解沉淀的蛋白,取90%加入閃爍液進(jìn)行液閃計(jì)數(shù)據(jù),取10%采用BCA法測(cè)蛋白質(zhì)量濃度。

    采用檢測(cè)量培養(yǎng)液中酪氨酸釋放率分析骨骼蛋白質(zhì)分解代謝[15]。左則骨骼肌稱質(zhì)量后,浸沒在Basal-Krebs-Ringer緩沖液中,37 ℃充氧孵育2 h,取培養(yǎng)液用TCA沉淀后,取0.5 mL上清液于2 mL離心管中,然后加入1.0 mL 5% TCA混勻后,依次加入0.75 mL硝酸、0.75 mL 1-亞硝基-2-萘酚,混勻,55 ℃溫育30 min,加入二氯乙烷萃取,提取上清液200 μL進(jìn)行測(cè)定。

    1.3.5 肝臟和骨骼肌中關(guān)鍵基因qPCR的分析

    利用試劑盒提取和反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,紫外分光光度計(jì)測(cè)定RNA濃度和純度(OD260nm/OD280nm)。采用qPCR分析肝臟和骨骼肌中關(guān)鍵基因;內(nèi)參基因?yàn)棣?肌動(dòng)蛋白基因(β-actin);qPCR引物序列見表1。10 μL qPCR反應(yīng)體系包含:4.2 μL SYBR Green Supermix,4.2 μL DEPC水,100 ng/μL cDNA模板1.0 μL,20 μmol/L上、下游引物各0.3 μL。qPCR反應(yīng)條件:95 ℃預(yù)變性30 s;95 ℃ 5 s,60 ℃ 30 s,65 ℃ 5 s,40 次循環(huán);95 ℃ 5 s。每個(gè)樣品均設(shè)置3 次重復(fù)。

    表1 qPCR引物序列Table1 Primers used for qPCR analysis

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

    2 結(jié)果與分析

    2.1 花椒麻素對(duì)SD大鼠生長(zhǎng)的影響

    表2 花椒麻素對(duì)大鼠生長(zhǎng)率的影響Table2 Effect of alkylamides on the growth rate of rats

    由表2可知,與空白對(duì)照組相比,3 個(gè)劑量花椒麻素均顯著降低實(shí)驗(yàn)大鼠體質(zhì)量(P<0.05);花椒麻素顯著增加大鼠飼料效率(P<0.05);花椒麻素對(duì)大鼠的氮表觀消化率均沒有顯著影響。花椒麻素中可顯著提高大鼠骨骼肌相對(duì)質(zhì)量(P<0.05),對(duì)其他臟器的相對(duì)質(zhì)量沒有明顯影響。花椒麻素有降低腹脂率的趨勢(shì),但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)的顯著水平。

    2.2 生理生化指標(biāo)

    表3 花椒麻素對(duì)大鼠血清生理生化及組織氨基酸的影響Table3 Effect of alkylamides on plasma parameters in serum and amino acids in muscle

    由表3可知,與空白對(duì)照組相比,花椒麻素顯著升高血清和骨骼肌中TP水平(P<0.05);顯著升高血清中IGF-Ⅰ的質(zhì)量濃度(P<0.05);顯著降低BUN濃度(P<0.05);對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠血清Cr濃度影響不顯著。推測(cè)花椒麻素有降低機(jī)體蛋白分解,增加蛋白質(zhì)沉積的可能。

    另外與空白對(duì)照組比,花椒麻素顯著上調(diào)血清中天冬酰胺(Asn)和丙氨酸(Ala)濃度,顯著下調(diào)谷氨酰胺(Gln)的濃度(P<0.05);顯著上調(diào)大鼠骨骼肌中多數(shù)生糖氨基酸含量,其中,高劑量顯著上調(diào)天冬氨酸(Asp)、Asn、色氨酸(Ser)、Ala、Gln、谷氨酸(Glu)、蘇氨酸(Thr)、酪氨酸(Tyr)、精氨酸(Arg)的含量(P<0.05);中劑量顯著上調(diào)Asp、Glu、Sre、Tyr、Arg、Ala、Asn、Thr、Gln的含量(P<0.05);低劑量顯著上調(diào)Glu、Asp、Asn、Sre、Ala、Thr、Tyr、Arg、Gln的含量(P<0.05);3 個(gè)劑量花椒麻素均顯著降低甲硫氨酸(Met)的含量(P<0.05)。與生糖氨基酸有所不同,灌胃花椒麻素對(duì)大鼠骨骼肌中兼生氨基酸、生酮氨基酸和支鏈氨基酸的影響主要表現(xiàn)在下調(diào)其含量。對(duì)大鼠血清和骨骼肌中其他各種檢測(cè)到的氨基酸含量無(wú)顯著影響。

    2.3 花椒麻素對(duì)骨骼蛋白質(zhì)合成與分解代謝的影響

    圖1 花椒麻素對(duì)骨骼蛋白質(zhì)合成(A)與分解代謝(B)的影響(n= 10)Fig.1 Effect of alkylamides on protein synthesis (A) and degradation (B) (n = 10)

    由圖1可知,與空白對(duì)照組相比,經(jīng)過(guò)28 d花椒麻素灌胃后,高劑量組、中劑量組、低劑量組大鼠骨骼肌中蛋白質(zhì)合成率分別增加了23.06%、26.39%、13.41%(P<0.05);而蛋白質(zhì)分解代謝分別降低了10.44%、10.99%、3.46%。體外實(shí)驗(yàn)同樣說(shuō)明花椒麻素使大鼠骨骼肌中蛋白質(zhì)合成代謝增加,分解代謝降低。

    2.4 花椒麻素對(duì)肝臟及骨骼中IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR mRNA相對(duì)表達(dá)量的影響

    圖2 花椒麻素對(duì)肝臟(A)及骨骼組織(B)中IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR的mRNA相對(duì)表達(dá)量的影響Fig.2 Effect of alkylamides on mRNA expression of IGF-I and IGF-IR in liver (A) and muscle (B) of healthy SD rats

    與空白對(duì)照組比較,3 個(gè)劑量的花椒麻素顯著上調(diào)大鼠肝臟中IGF-Ⅰ基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量(P<0.05);花椒麻素對(duì)大鼠肝臟胰島素樣生長(zhǎng)因子受體-Ⅰ(insulin growth factor receptor,IGF-ⅠR)基因mRNA相對(duì)表達(dá)量有上調(diào)趨勢(shì),但不顯著(圖2A)。另外花椒麻素顯著上調(diào)大鼠骨骼肌中的IGF-Ⅰ mRNA相對(duì)表達(dá)量(P<0.05);高劑量的花椒麻素顯著上調(diào)大鼠骨骼肌中IGF-ⅠR mRNA相對(duì)表達(dá)量(P<0.05),中劑量和低劑量影響不顯著(圖2B)。

    2.5 花椒麻素對(duì)健康SD大鼠骨骼肌中關(guān)鍵生長(zhǎng)因子基因mRNA相對(duì)表達(dá)量的影響

    圖3 花椒麻素對(duì)健康SD大鼠骨骼肌中關(guān)鍵生長(zhǎng)因子mRNA表達(dá)量的影響Fig.3 Effect of alkylamides on mRNA expression of critical growth factor genes in skeletal muscle tissue of healthy SD rats

    由圖3可知,3 個(gè)劑量的花椒麻素顯著上調(diào)大鼠骨骼肌中MyoG和鈣蛋白酶抑制蛋白(calpastatin,CAST)mRNA相對(duì)表達(dá)量(P<0.05);顯著下調(diào)大鼠骨骼肌中肌肉生長(zhǎng)抑制素(myostatin,MSTN)mRNA相對(duì)表達(dá)量(P<0.05);3 個(gè)劑量的花椒麻素均上調(diào)鈣蛋白酶-1(μ-calpain,CAPN-1)基因mRNA表達(dá)量,其中,高劑量組和中劑量組上調(diào)顯著(P<0.05),低劑量組有上調(diào)趨勢(shì),但不顯著。

    3 討 論

    花椒麻素對(duì)大鼠生長(zhǎng)性能的影響主要體現(xiàn)在兩個(gè)方面:一是能夠降低大鼠體內(nèi)脂肪的沉積;二是顯著地提高實(shí)驗(yàn)組大鼠骨骼肌相對(duì)質(zhì)量。大鼠體質(zhì)量的降低可能是由于脂肪沉積的減少所致,說(shuō)明花椒麻素具有降低脂肪含量、增強(qiáng)蛋白質(zhì)沉積作用。另外灌胃花椒麻素對(duì)大鼠主要臟器相對(duì)質(zhì)量沒有顯著影響(表2),這也間接說(shuō)明實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的花椒麻素劑量不影響大鼠正常的生理機(jī)能。該結(jié)果從表觀水平上說(shuō)明花椒麻素對(duì)大鼠蛋白質(zhì)代謝具有積極的調(diào)節(jié)作用。

    BUN的水平可反映動(dòng)物蛋白質(zhì)代謝狀況,并可作為機(jī)體氮利用和蛋白質(zhì)沉積的指標(biāo),BUN水平降低可增加氮沉積,提高蛋白質(zhì)合成量[17]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,3 個(gè)劑量的花椒麻素對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠BUN水平均有顯著降低的影響(P<0.05)(表3);Cr是肌細(xì)胞中磷酸肌酸的代謝終產(chǎn)物,正常情況下,機(jī)體內(nèi)血清Cr水平保持基本穩(wěn)定[18]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,3 個(gè)劑量的花椒麻素對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠血清Cr水平影響不顯著(表3),表明實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)劑量不影響大鼠的腎小球排泄。血清TP作為動(dòng)物重要的生化指標(biāo),其水平在一定程度上反映了體內(nèi)蛋白沉積的水平[19]。以上結(jié)果表明,花椒麻素可以顯著升高大鼠血清TP水平,說(shuō)明其蛋白質(zhì)沉積增強(qiáng)(表3)。

    灌胃花椒麻素可顯著升高大鼠血清中(Asn、Ala)濃度和骨骼肌中(Asp、Glu、Ser、Tyr、Arg、Ala、Asn、Thr、Gln)的含量,這些氨基酸多為非必需性氨基酸,其來(lái)源主要是機(jī)體蛋白質(zhì)的分解或者利用相應(yīng)α-酮酸自身合成,結(jié)合表觀水平的蛋白質(zhì)合成增加,推測(cè)花椒麻素對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠生糖氨基酸含量的升高主要是由于自身合成增加。α-酮酸是機(jī)體糖代謝的中間產(chǎn)物,是機(jī)體供能充足的情況下,氨基酸通常不參與或很少參與供能[20],而是作為合成蛋白質(zhì)的原料,最終導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成增加。同時(shí)實(shí)驗(yàn)組大鼠血清中Gln含量顯著降低、骨骼肌中Gln含量顯著升高,提示蛋白質(zhì)分解減弱、在骨骼肌中沉積增強(qiáng),最終表現(xiàn)為骨骼肌相對(duì)質(zhì)量的增加。另外,體外實(shí)驗(yàn)同樣說(shuō)明花椒麻素可顯著增加大鼠蛋白質(zhì)合成代謝,降低蛋白質(zhì)分解代謝(圖2A、B)。

    血清中的IGF-Ⅰ主要由肝臟產(chǎn)生,之后分泌進(jìn)入血液,與血液中胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白結(jié)合后,被運(yùn)輸?shù)街苓吔M織發(fā)揮作用[21-22]。IGF-Ⅰ能促進(jìn)骨骼肌中蛋白質(zhì)的合成,刺激衛(wèi)星細(xì)胞分化與增殖,有增強(qiáng)骨骼肌創(chuàng)傷后再生的作用[23]。IGF-Ⅰ能增進(jìn)鳥氨酸脫羧酶的活性,促進(jìn)DNA、RNA和蛋白質(zhì)合成,最終導(dǎo)致細(xì)胞增殖[24]?;ń仿樗乜娠@著上調(diào)肝臟和骨骼肌中IGF-ⅠmRNA的表達(dá)量,并對(duì)肝臟和骨骼肌IGF-ⅠR mRNA表達(dá)量有上調(diào)趨勢(shì)(圖2A、B)。結(jié)合血清中IGF-Ⅰ的含量顯著增加(表3),由此推測(cè),花椒麻素生物作用的發(fā)揮可能由IGF-Ⅰ介導(dǎo)。

    MyoG在肌肉的萎縮、生長(zhǎng)發(fā)育以及肌肉的再生中起作重要作用,并在肌肉分化過(guò)程中起中心調(diào)節(jié)作用[25-26]。由圖3可知,與空白對(duì)照組比較,3 個(gè)劑量的花椒麻素顯著(P<0.05)上調(diào)大鼠骨骼肌中MyoG mRNA表達(dá)量。說(shuō)明花椒麻素對(duì)肌細(xì)胞的生長(zhǎng)具有一定的促進(jìn)作用。而MSTN具有抑制肌肉生長(zhǎng)的功能,其表達(dá)量與肌肉質(zhì)量呈負(fù)相關(guān)[27]?;ń仿樗貙?duì)大鼠骨骼肌中MSTN mRNA表達(dá)量有顯著(P<0.05)下調(diào)作用。MyoG的上調(diào)有利于肌肉的生長(zhǎng)發(fā)育,而MSTN的下調(diào)有利于MyoG作用的發(fā)揮。因此,花椒麻素促進(jìn)大鼠骨骼肌蛋白質(zhì)沉積的作用與MyoG/MSTN系統(tǒng)有關(guān)。

    CAPN-1對(duì)骨骼肌蛋白沉積有重要的調(diào)節(jié)作用,它能降解大量的肌原纖維和細(xì)胞的骨架蛋白,這一特性對(duì)肌肉蛋白質(zhì)代謝更新起重要的作用[28]。由圖3可知,花椒麻素均上調(diào)CAPN-1基因mRNA表達(dá)量,其中高劑量組和中劑量組上調(diào)顯著(P<0.05),低劑量組有上調(diào)趨勢(shì),但不顯著。CAST可調(diào)節(jié)骨骼肌中鈣蛋白酶系統(tǒng)的活性[29]。CAST大量表達(dá)會(huì)抑制肌細(xì)胞的分解,減慢蛋白質(zhì)的降解速率,有利于骨骼肌的生長(zhǎng)[30]。從圖3可知,與空白對(duì)照組相比較,3 個(gè)劑量組的花椒麻素均顯著上調(diào)節(jié)CAST基因mRNA表達(dá)量(P<0.05)。CAPN-1基因的mRNA轉(zhuǎn)錄水平提示高、中劑量組大鼠的蛋白質(zhì)代謝更新旺盛,CAST的顯著上調(diào)說(shuō)明對(duì)肌細(xì)胞分解減弱,蛋白質(zhì)沉積作用加強(qiáng),與骨骼肌相對(duì)質(zhì)量的增加相吻合。因此,花椒麻素可能由CAPN-1/CAST系統(tǒng)加強(qiáng)骨骼肌蛋白質(zhì)的更新,促進(jìn)蛋白質(zhì)的沉積。

    4 結(jié) 論

    灌胃花椒麻素可顯著增加實(shí)驗(yàn)大鼠的骨骼肌相對(duì)質(zhì)量,減少腹脂的沉積;顯著提高實(shí)驗(yàn)大鼠血清和骨骼肌中TP水平,表明實(shí)驗(yàn)大鼠骨骼肌相對(duì)質(zhì)量的增加是由蛋白質(zhì)沉積所致。另外,花椒麻素可增加大鼠機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成速率,減少蛋白質(zhì)的分解速率,骨骼肌蛋白質(zhì)的增加是機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)合成與分解的綜合結(jié)果。花椒麻素促進(jìn)實(shí)驗(yàn)大鼠骨骼肌蛋白質(zhì)沉積的機(jī)理是由IGF-Ⅰ介導(dǎo)的,MyoG/MSTN系統(tǒng)和CAPN-1/CAST系統(tǒng)參與的最終結(jié)果。

    此外,本研究發(fā)現(xiàn)花椒麻素對(duì)大鼠血清和骨骼肌中氨基酸組成有一定的影響,花椒麻素以何種細(xì)胞刺激信號(hào)來(lái)影響蛋白質(zhì)合成與分解的機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。

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