威靈仙化學(xué)成分及其藥理活性最新研究進(jìn)展

付　強(qiáng)，王　萍，杜宇鳳，程小玲，唐婷婷，邱　露，袁海梅，史社坡

(1.成都大學(xué) 藥學(xué)與生物工程學(xué)院，四川 成都　610106；2.北京中醫(yī)藥大學(xué) 中藥現(xiàn)代研究中心，北京　100029)

0　引　言

據(jù)《中國藥典》2015版一部記載，威靈仙為毛茛科植物威靈仙(Clematis chinensis Osbeck)、棉團(tuán)鐵線蓮(Clematis hexapetala Pall.)或東北鐵線蓮(Clematis manshurica Rupr.)的干燥根和根莖，具有祛風(fēng)濕、通經(jīng)絡(luò)之功效，臨床上常用于治療風(fēng)濕痹痛、肢體麻木、筋脈拘攣與屈伸不利等癥[1].

相關(guān)的化學(xué)成分研究表明，威靈仙和東北鐵線蓮主要含皂苷類成分，棉團(tuán)鐵線蓮主要含黃酮類成分；而藥理研究表明，威靈仙和東北鐵線蓮主要具有抗炎鎮(zhèn)痛和抗腫瘤等藥理作用.對此，本研究就近十多年威靈仙的化學(xué)成分和藥理作用的相關(guān)報道進(jìn)行綜述，擬為威靈仙的進(jìn)一步研究和開發(fā)提供參考.

1　化學(xué)成分

1.1　皂苷類

針對托苷類，Shi等[2]從東北鐵線蓮的根和根莖中提取分離出4種新三萜皂苷clematomandshurica saponins A～D.Dong等[3]從東北鐵線蓮根和根莖中分離得到一個新的三萜皂苷clematomandshuric saponins E.He等[4]從東北鐵線蓮根和根莖中分離得到2個新的三萜皂苷mandshunosides A～B.Gong等[5]從東北鐵線蓮根和根莖中分離得到6個新的三萜皂苷clematomandshurica saponins F～K.Liu等[6]從東北鐵線蓮根和根莖中分離得到3個新的三萜皂苷mandshunosides C～E.Fu等[7-8]先后從威靈仙根和根莖中分離得到10個新的三萜皂苷clematochi-nenosides A～G和clematochinenosides H～J.Liu等[9]從威靈仙中分離得到一個新的三萜皂苷clematichinenoside AR2.

1.2　黃酮類

對于黃酮類，Dong等[10]首次從棉團(tuán)鐵線蓮中分離得到12個黃酮類成分，即linarin、hesperetion、liquiritigenin、liquiritigenin-7-O-β-D-glucopyranoside、nanringenin、3,5,6,7,8,3′,4′-heptamethoxy flavone、nobiletin、daidzein、formononetin、genistein、6-hydroxybiochan A和tectoridin.Dong等[11]從棉團(tuán)鐵線蓮的根和根莖中分離出isoliquiritigenin.張昌浩[12]從東北鐵線蓮的乙酸乙酯提取物中得到quercitin.王威等[13]首次從東北鐵線蓮中分離出4個黃酮類成分，分別為luteolin、3′′-O-(2′′-methybutyryl) isoswertisin、2′′-O-(2′′-methybutyryl) isoswertisin、6′′-O-(2′′-methybutyryl) isoswertisin.

1.3　木脂素類

關(guān)于木脂素類，王威等[13]從東北鐵線蓮地上部位的乙醇提取物中分離得到(+)-pinoresinol、(+)-pinoresinol-4-O-β-D-glucopyranoside、(+)-syringaresinol-4-O-β-D-glucopyrano-side、(+)-episyrin-garesinol-4-O-β-D-glucopyranoside、matairesinol、(+)-lyoniresi-nol、(+)-isolariciresinol、(7R,8R)-4,7,9,9′-tetrahydroxy-3,3′-diethoxy-8-O-4′-neolig-nan、(7R,8S)-4,7,9,9′-tetrahydro-

xy-3,3′-diethoxy-8-O-4′-neolignan.董彩霞等[14]從棉團(tuán)鐵線蓮中分離得到(+)-clemomanshurinane B.Shi等[15]從東北鐵線蓮的根和根莖中分離得到(+)-clemomanshurinane A、(+)-pinoresinol-4,4′-O-β-D-glucopy-ranoside、(+)-pinoresinol-4,4′-O-β-D-glucoside、5′-methoxyisodecanol 9′-O-β-D-glucoside、(+)-lyoniresinol 9′-O-β-D-glucopyranoside、(+)-(7′S,8R,8′S)-4,4′,9-tri-hydroxy-3,3′,5-trimethoxy-2,7′lignans-9′-O-β-D-glucoside、(7R,8S)-4,9,9′-trihydro-xy-3,3′-dimethoxy-1′-propanol-neolignan、lariciresinol-4,4′-di-O-β-D-glucoside、lariciresinol-4′-O-β-D-glucoside.Fu等[16]從東北鐵線蓮根的醇提取物分離得到clemomanshurinane C和clemomanshurinane D.

1.4　酚　類

對于酚類，Dong等[11]從棉團(tuán)鐵線蓮的根和根莖中分離得到2,6-dimethoxy-4-(3-hydroxy-propen-1-yl) phenyl-4-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosi-de、3-O-β-D-glucopyranosyl-2-hydroxymethyl-D-ribono-γ-lactone、syringin、2-hy-droxymethyl-D-ribono-γ-lactone、protocatechuic acid、n-dotriacontane acid.張昌浩[12]從東北鐵線蓮中分離得到肉豆蔻酸.董彩霞等[14]首次從棉團(tuán)鐵線蓮的50%乙醇提取物中分離得到棕櫚酸、香草酸與白頭翁素.史社坡等[17]從東北鐵線蓮中首次分離得到正二十六烷酸、5R-5-hydroxylmethyl-2(3H)-furanone和5R-5-hydroxylmethyl-2(5H)-furanone.Shi等[18]首次從東北鐵線蓮的根和根莖中分離得到clemomandshuricoside A～C、5-O-feruloyl-2-deoxy-D-ribono-γ-lacton和5-O-feruloyl-3-O-(β-D-glucopyranosyl)-2-deoxy-D-ribono-γ-lactone，還分離出2個已知化合物ferulic acid和calophymembranside B.Shi等[19]從棉團(tuán)鐵線蓮的根和根莖中分離得到3個大環(huán)苷化合物，即clemahexapetoside A～B和clemochi-nenoside A.Shi等[20]從東北鐵線蓮中分離得到clemochinenoside B和syringic acid.Dong等[21]從棉團(tuán)鐵線蓮的根莖中分離得到一個葡萄糖基萘類化合物5,8-dihydro-6-methyl-1,4-β-D-digluco-pyranosyl naphthalene.Dilshara等[22]從東北鐵線蓮中分離得到5-O-isoferuloyl-2-deoxy-D-ribono-γ-lactone.Fu等[23]從東北鐵線蓮的根和根莖中分離得到酚苷9-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl isoferuloyl ester和ibotanolide B.劉建宇等[24]首次從東北鐵線蓮中分離得到3,5-dihydroxyl-4-valerolactone.崔勇等[25]首次從東北鐵線蓮二氯甲烷提取物中分離得到2-(hydroxymethyl)-3,4-pyridinediol.

1.5　生物堿類

針對生物堿類，F(xiàn)u等[23]從東北鐵線蓮的根和根莖中分離得到5-O-3-carboxy-indole-2-deoxy-D-ribono-γ-lactone和5-O-3-carboxy-indole-3-O-(β-D-glucopyranosyl)-2-deoxy-D-ribono-γ-lactone.Shi等[26]從東北鐵線蓮根的乙酸乙酯提取物中分離得到methyl 7-methoxy-3-indolecarbonate、methyl 7-ethoxy-3-indolecarbonate，從其正丁醇提取物中分離出methyl 7-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl 3-indolecarbonate、α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl 3-indolecarbo-nate和magnoflorine，其中，methyl 7-methoxy-3-indolecarbonate是首次從天然產(chǎn)物中分離得到.

1.6　其　他

崔勇等[25]從東北鐵線蓮二氯甲烷提取物中分離得到香豆素.董彩霞等[14]從棉團(tuán)鐵線蓮中分離得到胡蘿卜苷.李佳[27]從東北鐵線蓮干燥根的95%乙醇提取物中分離、純化和鑒定出β-谷甾醇與豆甾醇.

2　藥理作用

2.1　抗炎鎮(zhèn)痛作用

就抗炎鎮(zhèn)痛作用而言，Shi等[2]研究發(fā)現(xiàn)，clematomandshurica saponins A～B對環(huán)氧合酶-2(COX-2)有顯著的抑制作用，IC50值分別為2.66和2.58 μM.Fu等[7]報道威靈仙中的三萜皂苷clematochinenosides A、C～G對環(huán)氧合酶-1(COX-1)和COX-2表現(xiàn)出抑制作用，IC50為5.9～9.0 μM.Dilshara等[22]用脂多糖(LPS)誘導(dǎo)BV2小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，5-O-isoferuloyl-2-deoxy-D-ribono-γ-lacton能通過抑制NF-κB激活和刺激紅系衍生的核因子相關(guān)因子2與血紅素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信號通路，抑制促炎性介質(zhì)如一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)的產(chǎn)生.Fu等[23]用LPS誘導(dǎo)的RAW246.7巨噬細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，5-O-feruloyl-2-deoxy-D-ribono-γ-lactone、5-O-isoferuloyl-2-deoxy-D-ribono-γ-lactone、9-O-α-L-rhamnopyrano-syl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl isoferuloyl ester和ibotanolide B在用量為50 μM時，對NO的產(chǎn)生表現(xiàn)出中等抑制作用，其抑制率分別為36.2%、35.1%、29.3%、38.7%，然而，5-O-3-carboxy-indole-2-deoxy-D-ribono-γ-lactone、 5-O-3-carbox-yindole-3-O-(β-D-glucopyranosyl)-2-deoxy-D-ribono-γ-lactone、methyl 7-O-α-L-rhamnopyra-nosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl 3-indolecarbonate和α-L-rhamnopy-ranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl 3-indolecarbonate則表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制活性，其IC50值分別為12.4、8.3、9.1、7.7 μM.Peng等[28]通過研究口服AR-6在膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(CIA)大鼠體內(nèi)的作用發(fā)現(xiàn)，AR-6可使小鼠中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)的水平均顯著降低；在CIA大鼠的滑膜中，AR-6治療組中的抑制細(xì)胞核因子-κB(NF-κB)p65亞單位、TNF-α和COX-2的表達(dá)明顯被抑制.Han等[29]發(fā)現(xiàn)分別灌胃給予膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎大鼠32、16、8 mg/kg AR-6可以抑制后肢腫脹，其中32 mg/kg效果最顯著(p<0.01).此外，AR-6通過免疫組織化學(xué)能顯著減少TNF-α的產(chǎn)生和胞內(nèi)磷脂酰肌醇激酶(PI3K)以及磷酸化蛋白激酶(p-Akt)的表達(dá)，并降低CIA大鼠滑膜中的TNF-α mRNA、PI3K mRNA、p-Akt mRNA(p<0.01)的含量.Hsieh等[30]通過建立LPS誘導(dǎo)人原代軟骨細(xì)胞模型發(fā)現(xiàn)，威靈仙丙酮提取物對PGE2、基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)、基質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)和COX-2的產(chǎn)生表現(xiàn)出顯著的和劑量依賴性的抑制作用.Lee等[31]通過建立LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞模型發(fā)現(xiàn)，東北鐵線蓮中的常春藤皂苷元成分通過抑制NF-κB通路，減少RAW264.7細(xì)胞中NO、PGE2、TNF-α、IL-1β、白細(xì)胞介素-6(IL-6)的表達(dá)，從而表現(xiàn)出抗炎活性.Li等[32]發(fā)現(xiàn)威靈仙根的乙醇提取物對COX-1表現(xiàn)出抑制活性，并呈現(xiàn)出劑量依賴性.周效思等[33]用小鼠熱板法、小鼠扭體法、耳腫脹法、足跖腫脹法及小鼠毛細(xì)血管通透性實驗等方法研究證實，威靈仙水提液有顯著的鎮(zhèn)痛抗炎作用.徐先祥等[34]對威靈仙總皂苷進(jìn)行提取研究，結(jié)果表明威靈仙總皂苷具有顯著的鎮(zhèn)痛抗炎作用，并認(rèn)為威靈仙皂苷類成分可能為其鎮(zhèn)痛抗炎作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ).Suh等[35]通過分別給予佐劑型關(guān)節(jié)炎小鼠皮下注射2、5、10 mg/kg發(fā)現(xiàn)，東北鐵線蓮根的水提物對小鼠的炎癥有抑制作用，還可顯著減少其滑膜細(xì)胞上清液中TNF-α和IL-1的水平，在蛋白和轉(zhuǎn)錄水平明顯增加滑膜細(xì)胞中的白細(xì)胞介素-10(IL-10).Park等[36]通過建立LPS或干擾素-γ(IFN-γ)誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞模型發(fā)現(xiàn)，東北鐵線蓮根的乙醇提取物(100 μg/mL)可以顯著阻斷該細(xì)胞中NO和PGE2的產(chǎn)生，最高抑制率分別為77%和59%.Hartog等[37]通過建立IL-1β和LPS刺激牛軟骨外植體和人外周血單核細(xì)胞(PBMC)模型發(fā)現(xiàn)，SKI306X(東北鐵線蓮的干燥根、栝樓的干燥根和夏枯草的干燥花和莖按1∶2∶1的體重比混合所得的乙醇提取物)可以劑量依賴性地抑制軟骨中IL-1β所引起的多糖的釋放和NO的產(chǎn)生，還可抑制PGE2、TNF-α和IL-1β的產(chǎn)生.楊林等[38]分別采用小鼠熱板法、小鼠醋酸扭體法及二甲苯致小鼠耳廓腫脹法觀察棉團(tuán)鐵線蓮不同化學(xué)部位的鎮(zhèn)痛抗炎效果發(fā)現(xiàn)，芳香水、總多糖及總黃酮能顯著提高小鼠痛域值，并能顯著減少小鼠的扭體次數(shù)且能明顯延長小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)的時間，而總生物堿、芳香水和總黃酮能顯著降低小鼠耳腫脹度，其高劑量組的抑制率分別高達(dá)84.40%、64.63%、54.12%，各提取部位的鎮(zhèn)痛抗炎效果均表現(xiàn)出明顯的劑量依賴關(guān)系.李特等[39]利用刀豆蛋白A(ConA)誘導(dǎo)小鼠T淋巴細(xì)胞增殖模型發(fā)現(xiàn)，威靈仙總皂苷可能是通過抑制T淋巴細(xì)胞的過度增殖、抑制細(xì)胞因子和PEG2來發(fā)揮抗類風(fēng)濕性關(guān)炎作用.

此外，夏倫祝等[40]通過威靈仙總皂苷對角叉菜膠致炎大鼠的抗炎作用發(fā)現(xiàn)，威靈仙總皂苷50 mg/kg能顯著降低致炎鼠血清NO、溶菌酶和丙二醛(MDA)含量，升高抗超氧陰離子自由基、超氧化物歧化酶活力，并能抑制一氧化氮合酶的活力.陳飛雁等[41]通過建立骨關(guān)節(jié)炎動物模型和體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞模型發(fā)現(xiàn)，威靈仙射液可以通過抑制IL-1β的水平來對骨關(guān)節(jié)炎起預(yù)防作用.徐先祥等[42]的研究發(fā)現(xiàn)，威靈仙總皂苷38、75、150 mg/kg能明顯延長小鼠熱板痛閾時間，減少醋酸致小鼠扭體次數(shù)，減輕二甲苯致小鼠耳腫脹程度，威靈仙總皂苷25、50、100 mg/kg對大鼠雞蛋清誘導(dǎo)的足腫脹及棉球誘導(dǎo)的大鼠肉芽腫均有顯著的抑制作用.

2.2　抗腫瘤作用

對于抗腫瘤作用，He等[4]發(fā)現(xiàn)從東北鐵線蓮分離的三萜皂苷mandshunosides A～B對2種結(jié)直腸癌細(xì)胞HCT 116(IC50分別為2.1和2.5 μM)和HT-29(IC50分別為3.7和3.3 μM)有抑制活性.Li等[6]發(fā)現(xiàn)，從東北鐵線蓮根和根莖中分離得到的mandshunosides C～E對2種人類結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29(IC50分別為2.8、0.6、2.7 μM)和HCT-116(IC50分別為3、0.9、4.2 μM)有明顯抑制作用.張昌浩[12，43]對部分從東北鐵線蓮中分離得到的單體化合物進(jìn)行細(xì)胞毒性試驗結(jié)果表明，β-谷甾醇對宮預(yù)癌細(xì)泡沒有細(xì)胞毒性作用，齊墩果酸和槲皮素具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，其中，隨著槲皮素給藥量的增加，細(xì)胞毒性也增強(qiáng)，且宮頸癌細(xì)胞對槲皮素的細(xì)胞毒性敏感程度大于齊墩果酸，并通過建立S180肉瘤小鼠動物模型發(fā)現(xiàn)，東北鐵線蓮的乙酸乙酯提取物對小鼠S180肉瘤的生長具有抑制作用.邱光清等[44]通過研究威靈仙不同部位的抗癌活性發(fā)現(xiàn)，總皂苷對體外培養(yǎng)的艾氏腹水癌、肉瘤S180(腹水型)、肝癌腹水型(Hep A)細(xì)胞的IC50分別為242、193、130 μg/mL，體內(nèi)實驗顯示，總苷0.25、0.5、1.0 g/kg ig對小鼠S180瘤重抑制率分別為40.3%、55.1%、53.0%，總苷0.2、0.4、0.8 g/kg對小鼠S180A生存期無影響.楊林等[45-46]以MTT法和移植性H22實體荷瘤小鼠建立模型研究棉團(tuán)鐵線蓮的總皂苷抗腫瘤活性發(fā)現(xiàn)，當(dāng)質(zhì)量濃度為0.1～1 mg/mL時，其對體外培養(yǎng)的3株人腫瘤細(xì)胞Hep-G2、SMMC-7721和Hela的增殖表現(xiàn)出顯著的抑制作用，其IC50值分別為0.5298、0.2047、0.2877 mg/mL，體內(nèi)實驗表明，棉團(tuán)鐵線蓮總皂苷高(1.5 g/kg)、中(0.75 g/kg)、低(0.375 g/kg)劑量組也可較好地抑制荷瘤小鼠瘤塊的生長，抑瘤率分別為41.55%、34.96%、32.37%，其隨后的研究發(fā)現(xiàn)，棉團(tuán)鐵線蓮總皂苷不同濃度的乙醇梯度洗脫物對Hep-G2均有不同程度的抑制作用，棉團(tuán)鐵線蓮皂苷的抗腫瘤活性主要集中在55%～95%乙醇洗脫部分，其中乙醇濃度范圍為55%～95%的洗脫物對Hep-G2的抑制率均大于60%.

2.3　抗菌作用

針對威靈仙的抗菌作用，鄒承淑等[47]研究發(fā)現(xiàn)，威靈仙具有廣譜抗菌作用，與常用抗生素聯(lián)合藥敏試驗結(jié)果表現(xiàn)出明顯的協(xié)同作用.威靈仙抗菌抑菌活性成分主要是白頭翁素和原白頭翁素，原白頭翁素不穩(wěn)定，易聚合為白頭翁素，而白頭翁素具有顯著的抗菌作用，對葡萄球菌、鏈球菌、白喉桿菌的抑菌濃度為1∶12 500，對結(jié)核桿菌為1∶50 000，對大腸桿菌也有類似抑菌作用，對革蘭氏陰性菌有效，與鏈霉素有協(xié)調(diào)作用，且有顯著殺真菌作用[48].徐小云等[49]通過文獻(xiàn)調(diào)研總結(jié)認(rèn)為，100%威靈仙水煎液可有效防治由金黃色葡萄球菌、志賀疾桿菌感染引起的各種疾病，同樣能夠抑制瘧原蟲引起的瘧疾.高春俠等[50]研究發(fā)現(xiàn)，100%威靈仙水煎液可以治療由淋球菌引起的淋病尿道狹窄.潘曉茹[51]通過建立細(xì)菌生長模型發(fā)現(xiàn)，威靈仙提取液及威靈仙總皂苷液對大腸桿菌有抑制作用，大腸桿菌在威靈仙提取液中臨界生長濃度為0.9800 g/mL，在三萜皂苷液中臨界生長濃度為0.0207 g/mL，說明威靈仙的三萜皂苷比威靈仙提取液的抑菌效果好.

2.4　利膽作用

科研人員在臨床實踐中觀察到，威靈仙對膽石癥、急性黃疸性肝炎有較好的療效.耿寶岑等[52]通過研究威靈仙水煎劑和醇提物對動物膽道系統(tǒng)功能的影響發(fā)現(xiàn)，威靈仙的水煎劑及醇提取物能促進(jìn)大鼠肝膽汁分泌，給麻醉犬靜注威靈仙的醇提取液可以促使犬體內(nèi)膽紅素和總膽管灌流量增加，并可以使膽總括約肌松弛，且醇提液利膽作用發(fā)生快，優(yōu)于水煎液.陸煥清[53]通過用威靈仙注射液對家兔進(jìn)行實驗發(fā)現(xiàn)，威靈仙注射液能明顯促進(jìn)肝內(nèi)膽汁分泌量增加，有效促進(jìn)肝膽管的泥沙樣結(jié)石及膽囊內(nèi)的小結(jié)石排出，利膽作用良好.徐繼紅等[54]研究表明，威靈仙可通過降低血清膽固醇濃度預(yù)防膽結(jié)石形成.陳紅梅等[55]與何柏森等[56-57]通過臨床采用威靈仙治療尿路結(jié)石，發(fā)現(xiàn)其具有良好的療效.

2.5　保護(hù)軟骨作用

對于保護(hù)軟骨作用，陳飛雁等[41]通過對骨關(guān)節(jié)炎模型動物進(jìn)行體內(nèi)和體外實驗發(fā)現(xiàn)，威靈仙注射液能夠降低骨關(guān)節(jié)炎動物關(guān)節(jié)液與體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞分泌IL-1β的水平，表明威靈仙注射液可以通過抑制IL-1β的水平對骨關(guān)節(jié)炎起防治作用.華英匯等[58]通過建立大鼠骨關(guān)節(jié)炎模型發(fā)現(xiàn)，威靈仙注射劑可延緩木瓜蛋白酶所致的骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)展，其作用機(jī)制可能是通過保護(hù)軟骨細(xì)胞來延緩關(guān)節(jié)軟骨的退變，而對正常關(guān)節(jié)無明顯影響.Wu等[59]研究發(fā)現(xiàn)，威靈仙的皂苷部分(SFC，50、100、200 mg/kg)可劑量依賴性地減少由碘乙酸鈉引起的軟骨損傷和蛋白聚糖降解；SFC同時可以阻止硝普酸鈉和碘乙酸鈉誘導(dǎo)的兔軟骨損傷.馬勇等[60]在以往研究基礎(chǔ)上，觀察中藥威靈仙對體外培養(yǎng)兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)化生長因子β1 mRNA基因表達(dá)的影響發(fā)現(xiàn)，不同濃度的威靈仙(0.01、0.05、0.1、0.5、1.0 g/L)均能促進(jìn)軟骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長因子β1 mRNA表達(dá)，4組組間比較差異無顯著性意義(P>0.05)，但作用的高峰為0.5 g/L組，提示這可能是其治療骨關(guān)節(jié)炎的作用及可能機(jī)制之一.

2.6　免疫抑制作用

針對免疫抑制作用，石強(qiáng)[61]通過小鼠碳粒廓清法和腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞法考察威靈仙和棉團(tuán)鐵線蓮水煎液對非特異性免疫的影響發(fā)現(xiàn)，其能抑制小鼠單核巨噬細(xì)胞和腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬作用，從而降低機(jī)體非特異性免疫力.夏倫祝等[62]研究發(fā)現(xiàn)，威靈仙總皂苷37.5、75、150 mg/kg 3種劑量可減輕二硝基氟苯致敏小鼠耳片腫脹程度，降低免疫器官指數(shù)，抑制雞紅細(xì)胞致小鼠溶血素的生成，從而說明威靈仙總皂苷具有顯著的免疫抑制作用.

2.7　解痙作用

相關(guān)研究表明，威靈仙注射液能直接松弛豚鼠離體回腸平滑肌，并對抗組胺和乙酰膽堿引起的回腸收縮反應(yīng)[63].楊掌利[64]通過對威靈仙臨床用于治療梅核氣的病例進(jìn)行總結(jié)發(fā)現(xiàn)，威靈仙中的白頭翁素等成分具有抗組胺，松弛局部肌肉作用，可有效緩解舌咽、迷走神經(jīng)末梢受到的刺激或激惹，從而阻止神經(jīng)中樞傳至大腦所引起的咽部不適感.

2.8　其他作用

2.8.1對泌尿系統(tǒng)的作用.

研究發(fā)現(xiàn)，威靈仙制劑對小鼠、大鼠、豚鼠均有顯著抗利尿作用[65].楊永剛等[66]研究發(fā)現(xiàn)，0.2 mL的50%煎劑相當(dāng)于0.1單位腦垂體后葉素的抗利尿作用，且作用時間較長，其作用機(jī)制可能與血壓下降、腎血管收縮作用有關(guān).鄒新蓉等[67]利用大鼠ip鏈脲佐菌素(STZ)制備成糖尿病大鼠模型發(fā)現(xiàn)，威靈仙95%乙醇提取物能明顯降低糖尿病模型大鼠血清尿素氮、尿白蛋白、尿白蛋白排泄率、腎肥大指數(shù)和空腹血糖的水平(P<0.05)，降低腎臟MDA的含量(P<0.05)，同時顯著減輕了糖尿病大鼠腎小球基膜和腎小管增厚和膨脹的程度，結(jié)果表明威靈仙95%乙醇提取物對糖尿病、腎病引起的腎損傷有顯著的抑制作用.林鳳平等[68]通過建立尿酸性腎病大鼠模型發(fā)現(xiàn)，威靈仙生產(chǎn)的免煎藥對腎小管間質(zhì)有保護(hù)作用，可以明顯改善尿酸性腎病大鼠的腎臟損害，其作用可能與其降低血清尿酸、減少腎小管間質(zhì)尿酸鹽結(jié)晶沉積和炎性細(xì)胞浸潤有關(guān).

2.8.2抑制黑色素作用.

鐘少敏等[69]研究認(rèn)為，威靈仙95%乙醇提取物可以通過抑制對melan-a小鼠黑色素細(xì)胞酪氨酸酶(Tyr)及酪氨酸酶相關(guān)蛋白TRP-1、TRP-2的基因表達(dá)及蛋白合成和Tyr的多巴氧化活性這三方面實現(xiàn)其抑制黑色素產(chǎn)生的作用.

2.8.3對循環(huán)系統(tǒng)和血液系統(tǒng)的作用.

相關(guān)研究表明，ig給予金黃地鼠威靈仙大劑量組(0.5 mL 20%煎劑)，能降低血清膽固醇的水平[63].周效思等[70]研究發(fā)現(xiàn)，威靈仙水提取物具有改善小鼠耳廓微循環(huán)的作用.方文賢[71]報道，威靈仙浸劑對正常大鼠有明顯增強(qiáng)葡萄糖同化的作用，顯示其可能有降血糖的作用.

3　結(jié)　語

威靈仙和東北鐵線蓮主要含皂苷類成分，而棉團(tuán)鐵線蓮主要含黃酮類成分，后者與前兩者是否具有相同的藥理活性還值得深入研究.威靈仙具有諸多藥理活性，包括抗炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗菌、利膽、保護(hù)軟骨、免疫抑制作用等，與其含有多種化學(xué)成分如皂苷類、黃酮類、木脂素類、酚類等密切相關(guān).在近十多年中，威靈仙的化學(xué)成分和藥理活性研究已有較多文獻(xiàn)報道，相關(guān)研究初步闡明了其發(fā)揮抗炎作用的藥效物質(zhì)，但威靈仙發(fā)揮關(guān)節(jié)軟骨保護(hù)等藥理作用的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制仍值得深入研究.此外，目前的研究多集中在威靈仙傳統(tǒng)主治功效方面，而針對文獻(xiàn)記載威靈仙有“小毒"的副作用或毒性研究相對較少，對此需要引起更多的關(guān)注.