EDTA依賴性血小板假性減少的分析與處理探討

楊婷

【摘要】目的：分析EDTA依賴性血小板假性減少的原因，總結(jié)處理經(jīng)驗(yàn)。方法：回顧性分析93198例患者，其中56例確診為EDTA依賴性PTCP。對(duì)診斷為EDTA-PTCP的患者重新抽取外周血，分別采用EDTA抗凝、檸檬酸鈉抗凝，在采血后重復(fù)計(jì)數(shù)。并檢測(cè)ALT、AST、ALP、UA等指標(biāo)，進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果：EDTA、檸檬酸鈉抗凝檢測(cè)，0、15、30、60、120、18 0min血小板計(jì)數(shù)呈逐漸下降趨勢(shì)，下降速度減緩，最后趨于平穩(wěn)。15、30、60、120、180min，EDTA抗凝血小板計(jì)數(shù)低于檸檬酸鈉抗凝患者。EDTA-PTCP的患者采用EDTA抗凝后，鏡下有明顯的聚集，隨著時(shí)間的推移，可見的聚集明顯增多。男性的EDTA-PTCP檢出率高于女性，不同年齡EDTA-PTCP檢出率存在差異（P<0.05）。相關(guān)性分析顯示，PLT與ALT、AST、ALP、UA存在相關(guān)性（r=0.451、0.530、0.384、0.508，P

【關(guān)鍵詞】血小板假性減少;EDTA抗凝劑;檢驗(yàn)質(zhì)量管理

血小板檢測(cè)被廣泛用于血栓性疾病、血液病等疾病的診斷和療效評(píng)估。傳統(tǒng)的血小板手工計(jì)數(shù)法己被分析儀代替，儀器檢測(cè)具有快速、準(zhǔn)確、隨機(jī)誤差小、測(cè)試項(xiàng)目多等優(yōu)點(diǎn)。但是儀器檢測(cè)常會(huì)出現(xiàn)假性血小板減少（PTCP）的現(xiàn)象。導(dǎo)致PTCP發(fā)生的影響因素較多，包括EDTA-K2、冷凝集素、衛(wèi)星現(xiàn)象、藥物以及采血操作不當(dāng)?shù)萚1]。本文采用實(shí)驗(yàn)研究和回顧性分析相結(jié)合的方法，分析在2016年1月～2017年12月期間診斷為EDTA依賴性血小板假性減少的56例患者，討論EDTA對(duì)血小板計(jì)數(shù)的影響，并總結(jié)處理對(duì)策。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2016年1月～2017年12月期間93198例門診、住院患者，其中56例確診為EDTA依賴性PTCP，男性40例、女性16例，年齡分布在24～71歲，平均年齡（50.3±8.4）歲。

1.2 儀器與試劑

主要包括貝克曼LH750全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、日立7600全自動(dòng)生化分析儀、奧林巴斯顯微鏡、檸檬酸鈉抗凝管與EDTA-K2抗凝管，所有試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品等均為原裝配套試劑。

1.3 方法

對(duì)診斷為EDTA-PTCP的患者重新抽取外周血，分別采用EDTA和檸檬酸鈉抗凝。分別在采血后O、15、30、60、120、180min重復(fù)計(jì)數(shù)，同時(shí)進(jìn)行手工瑞氏染色血涂片檢查，顯微鏡下觀察是否出現(xiàn)聚集，記錄未校正以及校正后的指標(biāo)。

對(duì)于EDTA-PTCP的患者，同時(shí)進(jìn)行ALT、AST、ALP、UA等常規(guī)生化檢驗(yàn)，并進(jìn)行相關(guān)性分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，血小板計(jì)數(shù)水平不服從正態(tài)分布，采用中位數(shù)與四分位距M（P25-P75）表示，非參數(shù)檢驗(yàn)。性別比、不同年齡EDTA-PTCP檢出率采用X2檢驗(yàn)比較，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性分析，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同抗凝方法不同時(shí)間血小板計(jì)數(shù)以及顯微鏡下表現(xiàn)

EDTA、檸檬酸鈉抗凝血小板計(jì)數(shù)，Omin檢測(cè)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。15、30、60、120、180min血小板計(jì)數(shù)呈逐漸下降趨勢(shì)，下降速度減緩，最后趨于平穩(wěn)。15、30、60、120、180min，EDTA抗凝血小板計(jì)數(shù)EDTA低于檸檬酸鈉抗凝患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（見表1）。EDTA-PTCP的患者采用EDTA抗凝后，鏡下有明顯的聚集，隨著時(shí)間的推移，可見的聚集明顯增多，至120min后幾乎覆蓋在整個(gè)顯微鏡視野內(nèi)。

2.2 因素分析

男性的EDTA-PTCP檢出率高于女性，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），不同年齡EDTA-PTCP檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

2.3 相關(guān)性分析

相關(guān)性分析顯示，PLT與ALT、AST、ALP、UA存在相關(guān)性（r=0.451、0.530、0.3 84、0.508，P<0.05）。

3 討論

本次研究中，2016-2017年的ED TA-PTCP檢出率約為0.06%，處于正常水平，與其它文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果基本相符.發(fā)生率約為0.05%～0.2%不等[2-3]。本次研究顯示，EDTA-PTCP采用檸檬酸鈉抗凝可以有效的避免PLT因EDTA作用下降。同時(shí)研究顯示隨著時(shí)間的推移，兩種抗凝結(jié)果都會(huì)顯著下降，所以無論采用何種抗凝，都提倡及早送檢，避免因等待時(shí)間過長(zhǎng)，導(dǎo)致PLT假性偏低。在實(shí)際檢測(cè)過程中，PLT偏低與送檢時(shí)間過長(zhǎng)等原因有關(guān)，可能會(huì)掩蓋EDTA-PTCP，實(shí)際上EDTA-PTCP高于統(tǒng)計(jì)的結(jié)果。

相關(guān)性分析顯示，PLT與ALT、AST、ALP、UA存在相關(guān)性（r=0.451、0.530、0.3 84、0.508，P<0.05）， 反 映EDTA-PTCP可能與肝功能異常、高尿酸有關(guān)。這可能與機(jī)體在病理狀態(tài)下產(chǎn)生導(dǎo)致EDTA-PTCP的特殊蛋白、纖維蛋白原受體、糖蛋白（glycoprotein，GP）a II b、β IIIa有關(guān)。肝功能的變化對(duì)PLT活性影響較大，肝功能受損，患者更容易出現(xiàn)膽汁淤積，誘導(dǎo)肝臟內(nèi)的P選擇素介導(dǎo)血小板聚集與凝集。血尿酸與心血管疾病、糖尿病關(guān)系密切，而這兩種疾病均與血小板假性降低有關(guān)，可能與心血管疾病、糖尿病所致的炎癥引起血小板表面蛋白變化有關(guān)。

有報(bào)道顯示[4]，在某些骨髓增殖性疾病疾病中，異常的功能的PLT在EDTA存在情況下也更容易出現(xiàn)血小板聚集。血小板凝集通常發(fā)生在血標(biāo)本與EDTA抗凝劑接觸的幾分鐘之內(nèi)，血液分析儀難以對(duì)血凝塊進(jìn)行分類鑒別，儀器會(huì)進(jìn)行報(bào)警。但是在實(shí)踐過程中，有部分血凝并不明顯，報(bào)警可能并不準(zhǔn)確，白細(xì)胞直方因?yàn)檠“饽瘓F(tuán)生成一個(gè)特定的信號(hào)，但這種信號(hào)并不完全準(zhǔn)確，有部分患者EDTA-PTCP被忽視。

4 小結(jié)

EDTA依賴性血小板假性減少多見于50歲以上男性;對(duì)于血小板偏低的患者，首先血涂片顯微鏡下鏡檢，發(fā)現(xiàn)凝集者需要采用檸檬酸鈉抗凝重測(cè)，以判斷是否為EDTA依賴性PTCP，并采用多種方法進(jìn)行糾正。

參考文獻(xiàn)

[1]楊江民.XS-5001全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板假性減少原因分析及糾正方法探討[J].青海醫(yī)藥雜志，2017，47 （11）： 41-42.

[2]郭謙，王曉健，曹榮，等.對(duì)EDTA-K2依賴性假性血小板減少不同檢測(cè)方法結(jié)果的比較[J].山西職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2018，28 （01）： 17-20.

[3]羅磊，朱建鋒，王蓓麗，等.震蕩法在糾正EDTA依賴的假性血小板減少中的應(yīng)用[J].中國(guó)臨床醫(yī)學(xué)，2018， 25 （01）： 100-102.

[4]余海濤。淺談EDTA-K2依賴性假性血小板減少癥對(duì)血小板計(jì)數(shù)的影響[J].醫(yī)藥前沿，2017，7 （06）：218-219.