肝細(xì)胞癌病因及發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展

王若帆，孫立眾，張立鑫，楊發(fā)才，謝夢(mèng)憶，李敬東

(1川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，四川南充637000；2川北醫(yī)學(xué)院；3川北醫(yī)學(xué)院肝膽胰腸疾病研究所)

原發(fā)性肝癌(PLC)是以肝臟為原發(fā)灶的惡性腫瘤，它包括多種亞型，其中，成人以肝細(xì)胞癌(HCC)和膽管癌最為常見(jiàn)，兒童則以肝母細(xì)胞瘤多見(jiàn)[1]。HCC是世界范圍內(nèi)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，也是全球第二大因癌癥導(dǎo)致死亡的原因。Bertuccio等[2]通過(guò)對(duì)世界范圍內(nèi)多個(gè)國(guó)家世衛(wèi)組織1990～2014年死于HCC患者的數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，許多國(guó)家HCC病死率近年有所上升，因此，研究HCC相關(guān)的發(fā)生發(fā)展機(jī)制將為該腫瘤的治療及預(yù)后提供臨床參考。在我國(guó)，HCC的病因以乙型肝炎病毒引起的慢性肝損傷為主，其他因素如丙型肝炎病毒感染、乙醇濫用、含黃曲霉毒素食物攝入、非乙醇性脂肪肝損傷[3]。當(dāng)前HCC的治療手段主要有肝切除術(shù)、肝移植術(shù)、介入治療、生物治療、中醫(yī)中藥治療、放療、化療等[4]。早期發(fā)現(xiàn)早期治療HCC最為有效[5]。近年來(lái)對(duì)肝癌分子水平上的相關(guān)研究越來(lái)越多，多項(xiàng)研究從多個(gè)角度證明肝癌的發(fā)生是個(gè)十分復(fù)雜的過(guò)程，目前來(lái)說(shuō)肝癌的發(fā)病機(jī)制還未完全解密。本文將著重從HCC的發(fā)病原因及機(jī)制兩個(gè)方面對(duì)其基礎(chǔ)研究的主要進(jìn)展作一綜述。

1 病因

1.1 肝炎病毒感染 乙肝病毒是全球范圍內(nèi)導(dǎo)致HCC的最常見(jiàn)原因，該病毒經(jīng)由母嬰途徑、性途徑、帶病蚊蟲(chóng)叮咬等方式傳播?；颊叨酁槌錾鷷r(shí)即感染該病毒，其中超過(guò)90%轉(zhuǎn)變?yōu)槁愿腥?；僅有5%～10%的乙肝患者是在成年后獲得感染而成為攜帶者的，而在這其中30%以上的人會(huì)發(fā)展成為慢性肝病，并依次經(jīng)由肝炎、肝纖維化、肝硬化、最后發(fā)展成為肝癌[6]。有研究表明感染乙肝病毒伴丙肝病毒或者丁肝病毒的人，HCC風(fēng)險(xiǎn)性會(huì)增加。高乙型肝炎病毒抗原(HBeAg)和高乙型肝炎病毒(HBV)-DNA水平表明HBV復(fù)制水平較高，此時(shí)HCC風(fēng)險(xiǎn)性亦會(huì)增加。另外，一項(xiàng)來(lái)自亞洲的研究提出，感染乙肝病毒C基因型的人與B基因型相比有更嚴(yán)重的肝臟疾病[7]。目前，早期接種乙肝疫苗已成為預(yù)防乙肝病毒感染最有效的措施，同時(shí)也是預(yù)防HCC、降低成人死亡率最簡(jiǎn)單有效的方法。通過(guò)抗病毒治療病毒性肝炎患者、安全的輸血及注射同樣也可預(yù)防HCC的發(fā)生[8]。

1.2 過(guò)度飲酒 乙醇代謝使得肝細(xì)胞產(chǎn)生活性氧(ROS)，氧化應(yīng)激增加。成人適度飲酒可能對(duì)健康有一定益處，如降低冠心病、Ⅱ型糖尿病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。長(zhǎng)期飲酒導(dǎo)致肝臟疾病，其疾病進(jìn)展速度及嚴(yán)重程度根據(jù)飲酒量的相對(duì)水平不同在個(gè)體之間可出現(xiàn)明顯的差異，這種變異可歸因于乙醇代謝酶(醇脫氫酶、醛脫氫酶)的活性以及在不同個(gè)體的表達(dá)量有差異，除此之外也受乙醇攝入方式、個(gè)體營(yíng)養(yǎng)狀況、性別、吸煙或?yàn)E用其他藥物與否、肥胖、HBV或丙型肝炎病毒(HCV)感染等的影響[9]。Wang等[10]的研究表明在對(duì)于非酒精性脂肪肝炎病人即使適度飲酒也會(huì)加重肝臟炎癥及細(xì)胞凋亡；而對(duì)于大多數(shù)長(zhǎng)期過(guò)度飲酒的人，其肝臟會(huì)經(jīng)歷脂肪變性、脂肪性肝炎、肝纖維化，但只有10%的人會(huì)發(fā)展成為肝硬化，而在肝硬化病人中只有1%～2%的人才會(huì)最終進(jìn)展為HCC[11]。不可忽視過(guò)度飲酒這一病因?qū)е碌母伟┧鶐?lái)的沉重社會(huì)負(fù)擔(dān)，嚴(yán)格控制飲酒量以及提高居民對(duì)乙醇和HCC聯(lián)系的意識(shí)可能對(duì)于預(yù)防居民過(guò)度飲酒引起的HCC具有一定意義。

1.3 黃曲霉毒素中毒 黃曲霉毒素是有黃曲霉和寄生曲霉的代謝產(chǎn)物，易污染水稻、玉米、牛奶等食物。它分為多種類(lèi)型，其中以黃曲霉毒素B1(AFB1)最為常見(jiàn)，它可能導(dǎo)致多種癌癥，如肺癌、乳腺癌、肝癌、結(jié)直腸癌等，其中AFB1導(dǎo)致HCC是毋庸置疑的，其毒性和致癌性也最強(qiáng)。食用被AFB1所污染的食物可以降低細(xì)胞介導(dǎo)的免疫，同時(shí)誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)導(dǎo)致肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞壞死、肝內(nèi)膽管損傷、肝臟出血。慢性HBV攜帶者暴露在AFB1中可能以劑量反應(yīng)方式增加其患肝硬化和HCC的風(fēng)險(xiǎn)[12]。另外，最近有動(dòng)物研究揭示了妊娠可能是母體健康的一個(gè)關(guān)鍵的敏感性窗口，此時(shí)改變了AFB1的代謝并增加小鼠肝臟的DNA損傷，使之可能更易患HCC[13]。AFB1參與肝癌的發(fā)病主要是通過(guò)影響細(xì)胞色素P450的多態(tài)變異體中的CYP3A4酶，從而產(chǎn)生具有基因毒性的2，3-環(huán)氧化物代謝產(chǎn)物[14]。另外Qin等[15]利用AFB1誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生HCC模型，檢測(cè)到HCC ROS水平明顯上升，抗氧化酶活性降低。同時(shí)，促炎細(xì)胞因子、腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素(IL)-1α等表達(dá)水平顯著升高，所以HCC的進(jìn)展可能與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。

1.4 非酒精性脂肪肝病(NAFLD) NAFLD是指除外乙醇、甲亢、藥物等因素引起肝細(xì)胞內(nèi)脂肪過(guò)度沉積所致的代謝綜合征，其危險(xiǎn)因素主要有中心性肥胖、2型糖尿病、血脂異常、胰島素抵抗、香煙等，研究表明NAFLD是患HCC的一易感因素[16]，其機(jī)制在于：衰老相關(guān)分泌表型(SASP)與肥胖相關(guān)HCC的發(fā)展有著至關(guān)重要的作用。飲食或遺傳性肥胖改變腸道菌群，腸道細(xì)菌可以將膽酸代謝成為脫氧膽酸(DCA)，DCA使肝星狀細(xì)胞(HSC)產(chǎn)生SASP，導(dǎo)致HSC分泌各種炎癥和腫瘤促進(jìn)因子從而造成細(xì)胞DNA損傷，進(jìn)而可引發(fā)肝細(xì)胞癌變。阻斷肥胖小鼠腸道脫氧膽酸的合成或減少腸道細(xì)菌的數(shù)量可有效抑制HCC的發(fā)生[3]；另外，Ma等[17]發(fā)現(xiàn)了免疫反應(yīng)在NAFLD導(dǎo)致的HCC中所扮演的重要角色，他們通過(guò)老鼠建模以及收集人類(lèi)標(biāo)本來(lái)進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示NAFLD脂代謝失代償會(huì)選擇性導(dǎo)致肝內(nèi)CD4+淋巴細(xì)胞減少(而非CD8+淋巴細(xì)胞)，從而加速肝細(xì)胞癌變。另外CD4+淋巴細(xì)胞比CD8+淋巴細(xì)胞擁有更大的線粒體質(zhì)量以及更高的ROS水平；通過(guò)長(zhǎng)期積累在肝細(xì)胞中的亞油酸破壞線粒體功能導(dǎo)致比游離脂肪酸更多的氧化傷害。阻斷ROS可以逆轉(zhuǎn)CD4+淋巴細(xì)胞減少，延遲NAFLD對(duì)HCC的促進(jìn)作用。這一研究為今后治療NAFLD所致的HCC提供了新治療思路。

2 發(fā)病機(jī)制

癌基因廣泛存在于生物體中，通常情況下癌基因不表達(dá)，在一定誘因下，癌基因會(huì)發(fā)生活化、掌控細(xì)胞。Bishop等在20世紀(jì)70年代后期首次發(fā)現(xiàn)了c-myc基因后，越來(lái)越多的癌癥相關(guān)基因被發(fā)現(xiàn)?，F(xiàn)代觀點(diǎn)認(rèn)為，癌癥是一種涉及基因組動(dòng)態(tài)變化的疾病，包括原癌基因的激活和抑癌基因的失活，如ras原癌基因的激活和p53抑癌基因的失活[18]。作為人體最易突變癌基因之一的ras基因，廣泛參與15%～20%的人類(lèi)腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程。研究表明，活化的ras蛋白會(huì)激活ras相關(guān)下游信號(hào)通路[19]，此時(shí)細(xì)胞增殖失去控制，不斷地進(jìn)行分裂繁殖，于是就發(fā)生了腫瘤。此外，影響腫瘤發(fā)病的另一機(jī)制自噬，它是抑制腫瘤發(fā)生的關(guān)鍵過(guò)程之一，通過(guò)協(xié)調(diào)炎癥和免疫來(lái)抑制癌癥的發(fā)展[20]。近年來(lái)對(duì)肝癌分子水平上的相關(guān)研究越來(lái)越多，多項(xiàng)研究從多個(gè)角度證明肝癌的發(fā)生是個(gè)十分復(fù)雜的過(guò)程，目前來(lái)說(shuō)肝癌的發(fā)病機(jī)制還未完全解密。下面從肝癌相關(guān)基因、單核苷酸多態(tài)性、全基因組分析、MicroRNAs(miRNAs)四個(gè)方面分別介紹近年來(lái)廣大科研人員對(duì)肝癌機(jī)制的研究所取得的進(jìn)展。

2.1 HCC的相關(guān)基因

2.1.1 TP53與HCC TP53屬于最早發(fā)現(xiàn)的腫瘤抑制基因，在與肝癌發(fā)生相關(guān)的體細(xì)胞突變譜中，TP53和CTNNB1的突變?cè)趤喼迖?guó)家、西方國(guó)家最為常見(jiàn)。研究表明此兩種基因是以共同排斥的方式發(fā)生突變。但最近Friemel等[21]首次對(duì)這一觀點(diǎn)提出了挑戰(zhàn)，在HCV感染相關(guān)肝癌中出現(xiàn)了TP53和CTNNB1的雙突變，這一結(jié)果目前還未得到廣泛認(rèn)可。Guichard等[22]通過(guò)對(duì)125例HCC進(jìn)行高分辨率拷貝數(shù)分析以及對(duì)其中24例全外顯子組序列測(cè)序，發(fā)現(xiàn)新的頻繁突變基因IRF2，相關(guān)功能分析顯示IRF2具有腫瘤抑制物特性，其滅活僅在HBV相關(guān)腫瘤中，導(dǎo)致TP53功能受損。對(duì)于TP53缺陷型的HCC，He等[23]構(gòu)建了能夠編碼反式剪切分子的質(zhì)粒(該質(zhì)粒可以靶向作用于TP53基因的內(nèi)含子6)，之后將此質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到攜帶存在TP53突變的HCC細(xì)胞中，發(fā)現(xiàn)其可以減少突變TP53基因的轉(zhuǎn)錄并且可以產(chǎn)生功能性wt-p53蛋白，這使得HCC細(xì)胞的表型發(fā)生了校正。同時(shí)，在由Tp53突變的HCC細(xì)胞建立的腫瘤異種移植物中，編碼TP53-PTM的腺病毒誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯和凋亡，然后阻斷了小鼠腫瘤的生長(zhǎng)。該實(shí)驗(yàn)首次論證了反式剪切在校正TP53缺陷型HCC細(xì)胞和異種移植物功能的作用，提供了用反式剪切修復(fù)TP53缺陷型癌癥的可行性。

2.1.2 PTEN與HCC PTEN是繼TP53后癌癥中第二位最頻繁突變的腫瘤抑制基因[24]，目前已被證實(shí)與HCC在內(nèi)的多種癌癥相關(guān)，它的缺失會(huì)激活PI3K/AKT信號(hào)通路，導(dǎo)致人類(lèi)多種癌癥的進(jìn)展。PTEN長(zhǎng)蛋白是PTEN的一個(gè)翻譯亞型，以非自主的方式在細(xì)胞內(nèi)起作用，最近有研究表明PTEN長(zhǎng)蛋白主要與HCV病毒核心蛋白相互作用，以劑量依賴(lài)方式抑制HCV病毒的復(fù)制[25]；HBV病毒X蛋白被認(rèn)為主要在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)控病毒的復(fù)制[26]，它抑制了p53介導(dǎo)的PTEN的轉(zhuǎn)錄。以上病毒可能改變了PTEN的調(diào)節(jié)能力和促凋亡能力，從而加快腫瘤形成的進(jìn)程[24]。這為開(kāi)發(fā)更多抗肝炎病毒藥品提供機(jī)會(huì)，從而可能在一定程度上減少肝炎病毒相關(guān)PLC的發(fā)生。Shp2/Ptpn11是造血細(xì)胞中的原癌基因，它可以拮抗腫瘤抑制因子PTEN在白血病發(fā)生中的作用。Luo等[27]的研究向我們展示了Shp2和Pten在抑制PLC發(fā)生中的協(xié)同作用：他們同時(shí)敲除了肝細(xì)胞中的Shp2和PTEN基因，成功誘發(fā)早發(fā)性NASH并促進(jìn)了肝腫瘤起始細(xì)胞的發(fā)生，這可能是cJun表達(dá)/激活增強(qiáng)以及肝微環(huán)境中ROS及炎癥水平升高所致。抑制cJun通路部分抑制NASH驅(qū)動(dòng)的肝臟腫瘤發(fā)生但不改善NASH。他們也在預(yù)后不良的PLC患者中檢測(cè)到SHP2和PTEN的缺陷。這些數(shù)據(jù)描繪了PLC發(fā)生的機(jī)制并提出了潛在的治療策略。

2.1.3 p16與HCC p16基因位于染色體9p21上，是一種周期蛋白依賴(lài)性激酶抑制劑，它是由3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子組成的細(xì)胞周期調(diào)控因子家族的一員，在細(xì)胞周期調(diào)控中起關(guān)鍵作用。最近頻繁報(bào)道在HCC中，p16啟動(dòng)子的甲基化使得p16表達(dá)量發(fā)生了下調(diào)，這可能是由于DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNMT)DNMT1和DNMT3A在p16啟動(dòng)子的甲基化中扮演了重要角色[28]。Lv等[29]的系統(tǒng)評(píng)價(jià)及薈萃分析也顯示肝癌與慢性肝炎及肝硬化相比p16啟動(dòng)子有著更高的甲基化水平、年齡>50歲的病人比<50歲的病人高、攜帶HBV或HCV的HCC比未攜帶肝炎病毒的HCC高，而與性別、肝硬化、腫瘤分化、HCC的臨床分期無(wú)關(guān)。當(dāng)然也有研究表明在HBV相關(guān)HCC中，乙肝病毒X蛋白(HBX)誘導(dǎo)p16啟動(dòng)子區(qū)域的組蛋白H3賴(lài)氨酸9三甲基化(H3K9me3)且抑制特異性作用于H3K9me3的去甲基化酶JMJd2B，從而提高H3K9me3的水平。即HBX通過(guò)JMJd2B通路抑制p16基因的轉(zhuǎn)錄，達(dá)到使腫瘤抑制基因p16沉默的目的[30]。該研究為HBX誘導(dǎo)的p16基因轉(zhuǎn)錄沉默的機(jī)制提供了新的見(jiàn)解，JMJd2B可能是表觀遺傳治療HCC的潛在靶點(diǎn)。

2.1.4 nm23與HCC nm23是結(jié)構(gòu)及功能上保守的核糖核苷二磷酸激酶家族的一員，在人體中存在著兩種nm23基因：nm23-H1和nm23-H2。nm23-H1作為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，它與表達(dá)量與HCC的轉(zhuǎn)移成負(fù)相關(guān)。nm23-H1表達(dá)的喪失與轉(zhuǎn)移的程度相關(guān)，也與幾種人類(lèi)的癌癥的不良臨床預(yù)后相關(guān)。Boissan等[31]通過(guò)在人肝癌細(xì)胞中沉默nm23-H1基因，調(diào)查了其對(duì)與癌癥發(fā)展相關(guān)的細(xì)胞黏附、遷移、侵襲、信號(hào)傳導(dǎo)的影響。該團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)了NM23-H1的沉默破壞了由E-鈣粘蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞與細(xì)胞的黏附，導(dǎo)致了β-連環(huán)蛋白核移位和T細(xì)胞因子/淋巴增強(qiáng)因子-1反式激活。此外，NM23-H1沉默通過(guò)促進(jìn)侵襲偽足形成和上調(diào)幾種基質(zhì)金屬蛋白酶(包括膜型基質(zhì)金屬蛋白酶-1)來(lái)促進(jìn)細(xì)胞擴(kuò)散、提高運(yùn)動(dòng)性和加強(qiáng)細(xì)胞外基質(zhì)入侵。總之，他們的研究揭示了NM23-H1對(duì)于控制上皮癌侵襲性程序早期階段細(xì)胞與細(xì)胞之間的黏附以及細(xì)胞遷移至關(guān)重要，并且可以形成障礙阻止原位癌轉(zhuǎn)化為侵襲性惡性腫瘤。至于NM23-H2，關(guān)于它的研究少于NM23-1，其亞細(xì)胞定位主要在胞質(zhì)中，而在細(xì)胞核內(nèi)較少。Lee等[32]將穩(wěn)定表達(dá)NM23-H2的NIH3T3成纖維細(xì)胞和HLK3肝細(xì)胞種植在無(wú)胸腺的小鼠中，使之產(chǎn)生了腫瘤并顯示c-Myc過(guò)表達(dá)。此外，NM23-H2也增加了NF-κB和cyclin D1的表達(dá)。該實(shí)驗(yàn)組為了達(dá)到沉默NM23-H2基因的目的，通過(guò)構(gòu)建shRNA慢病毒載體抑制了來(lái)自HLK3細(xì)胞且穩(wěn)定表達(dá)NM23-H2的異種移植腫瘤的生長(zhǎng)?？傊?，這些結(jié)果都提示了NM23-H2可能在腫瘤發(fā)生過(guò)程中充當(dāng)原癌基因的角色。

2.1.5 SIRT6與HCC SIRT6是NAD+依賴(lài)的脫乙?；窼irtuin家族的一員，參與調(diào)節(jié)基因組穩(wěn)定性、端粒完整性、轉(zhuǎn)錄和DNA修復(fù)，且與慢性炎癥、糖尿病、肝功能障礙、癌癥等相關(guān)。因?yàn)槠鋸?fù)雜而又對(duì)立的功能角色，SIRT6被認(rèn)為是健康和疾病的雙刃劍。近年來(lái)SIRT6被發(fā)現(xiàn)與多種癌癥的進(jìn)展有關(guān)，一些研究認(rèn)為SIRT6在結(jié)直腸癌、胰腺導(dǎo)管腺癌、頭頸癌中可能是一種腫瘤抑制基因，而另一些研究則表明SIRT6在皮膚癌、前列腺癌中可能是一種原癌基因，但是否與HCC相關(guān)，目前還不清楚。Ran等[33]通過(guò)實(shí)驗(yàn)揭露了SIRT6在HCC中作為原癌基因的角色，SIRT6通過(guò)抑制BCL2相關(guān)的X蛋白(BAX)表達(dá)以及線粒體轉(zhuǎn)位來(lái)加強(qiáng)凋亡逃逸。近期他們進(jìn)一步闡釋了SIRT6在HCC中可以阻斷BAX的線粒體移位，并通過(guò)Ku70的脫乙?；瘉?lái)降低HCC細(xì)胞的凋亡率[34]。同樣，Lee等[35]的研究表明SIRT6通過(guò)防止DNA損傷和細(xì)胞衰老而起到腫瘤啟動(dòng)子的作用。綜上，我們看到了SIRT6作為治療HCC的潛在靶點(diǎn)的希望，不過(guò)其機(jī)制需要更多的研究來(lái)完善。

2.2 單核苷酸多態(tài)性(SNP)與HCC SNP是指基因水平單個(gè)核苷酸變異所引起的DNA序列多態(tài)性，是人類(lèi)最常見(jiàn)的可遺傳基因變異。SNP作為標(biāo)志物廣范圍分布于基因中，我們不僅可以從中反映出不同人種、人口、個(gè)體的基因差異。同樣也可以在疾病的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、早期診斷、預(yù)防、治療等方面發(fā)現(xiàn)它的價(jià)值[36]。RYBP蛋白于1999年被發(fā)現(xiàn)，可抑制基因轉(zhuǎn)錄、調(diào)控胚胎發(fā)育并在表觀遺傳調(diào)控中發(fā)揮作用，之后陸續(xù)有研究提示RYBP與多種癌癥相關(guān)，未見(jiàn)報(bào)道與HCC相關(guān)。最近，一項(xiàng)有關(guān)中國(guó)人的RYBP多態(tài)性研究表明，在HCC的發(fā)病發(fā)面，基因型為rs12956的RYBP起保護(hù)性作用，而rs2118593能夠增加HCC的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)；RYBP多態(tài)性與環(huán)境致病因素之間的相互作用在HCC發(fā)展發(fā)面扮演重要角色；此外，RYBP的SNPs之間的相互作用也可以增加HCC的患病風(fēng)險(xiǎn)。氧化應(yīng)激被認(rèn)為在誘導(dǎo)HBV或HCV感染相關(guān)HCC中扮演關(guān)鍵角色[37,38]，它可以引起DNA損傷，從而引發(fā)細(xì)胞的DNA損傷反應(yīng)(DDR)。DDR基因的單核苷酸多態(tài)性可能影響個(gè)體對(duì)致癌因素的易感性以及影響DNA修復(fù)功效，從而影響患HCC的風(fēng)險(xiǎn)。

2.3 HCC的全基因組分析 基因序列的變異是所有惡性腫瘤發(fā)生密切相關(guān)的重要分子層次上的原因，我國(guó)于數(shù)年前加入了國(guó)際腫瘤基因組協(xié)作聯(lián)盟(ICGC)所倡導(dǎo)的腫瘤基因組研究并取得了多種癌癥相關(guān)進(jìn)展。HCC作為最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一同樣也進(jìn)行了此研究。一項(xiàng)來(lái)自日本的300例PLC患者的全基因組分析確定了編碼區(qū)及非編碼區(qū)的點(diǎn)突變、結(jié)構(gòu)變異(STVs)和病毒的整合。他們發(fā)現(xiàn)了與PLC發(fā)生相關(guān)的突變特征以及經(jīng)常突變的編碼區(qū)和非編碼區(qū)，比如長(zhǎng)基因間區(qū)非編碼RNA基因(NEAT1和MALAT1)、啟動(dòng)子、CTCF結(jié)合位點(diǎn)和調(diào)控區(qū)；分析表明PLC與STVs密切關(guān)聯(lián)，這是因?yàn)镾TVs可反復(fù)影響復(fù)制時(shí)間以及已知PLC相關(guān)基因(CDKN2A、CCND1、APC、TERT)和新發(fā)現(xiàn)的基因(ASH1L、NCOR1、MACROD2)導(dǎo)致這些基因的表達(dá)量發(fā)生改變。該項(xiàng)研究強(qiáng)調(diào)了全基因組測(cè)序在發(fā)現(xiàn)變異驅(qū)動(dòng)癌癥的發(fā)生以及全面了解PLC的分子發(fā)病機(jī)制的方面具有重要意義[39]。

2.4 miRNAs與HCC miRNAs是一類(lèi)大小為18～23nt的短鏈非編碼RNA。自第一個(gè)miRNA在線蟲(chóng)體內(nèi)發(fā)現(xiàn)后，相繼有多種miRNA在不同動(dòng)植物體內(nèi)被發(fā)現(xiàn)，可調(diào)節(jié)生物體發(fā)育、調(diào)控細(xì)胞周期、參與細(xì)胞炎癥、增殖、凋亡等過(guò)程。最近也有多項(xiàng)研究表明一些miRNA可能充當(dāng)抑制腫瘤的功能，而另一些miRNA則可能扮演致癌的作用。抑癌方面，具有組織特異性的miR-122在老鼠和人的總miRNAs中分別占70%和52%，在HCC組織及前臨床實(shí)驗(yàn)研究中，通過(guò)miRNA表達(dá)改變的全基因組分析提示miR-122顯著降低；微陣列分析也比表明miR-122的下調(diào)促進(jìn)了肝細(xì)胞的去分化。miR-122可能通過(guò)多個(gè)作用靶點(diǎn)與肝細(xì)胞炎癥、纖維化以及HCC細(xì)胞的增殖、凋亡、轉(zhuǎn)移發(fā)生聯(lián)系，但這僅僅是推測(cè)，需要更多有關(guān)研究來(lái)證實(shí)。此外，多人最近研究描述了未知的炎癥反饋回路，這一過(guò)程涉及到參與擴(kuò)大PLC致癌信號(hào)的miRNAs和轉(zhuǎn)錄因子。miR-124(單獨(dú)或與miR-7一起)抑制反饋回路中的IL-6R和NF-κB(Rel-A)的活化，從而抑制HCC的發(fā)生。并且miR-124可以由于HNF-4α的喪失而表達(dá)減少，這樣促進(jìn)了HCC的發(fā)生[40]。此外可能與肝癌發(fā)生相關(guān)的miRNAs還有miR-194和miR-370、miR-15、miR-26、miR-29、miR-155、miR-21、miR-224等[41]。

流行病學(xué)及多項(xiàng)研究表明肝癌的發(fā)生是一個(gè)由多種因素相互作用，經(jīng)歷多階段發(fā)展而來(lái)的的腫瘤。眾所周知，HBV和HCV相關(guān)的慢性肝損是導(dǎo)致HCC的最重要的原因，其他病因?qū)τ贖CC的貢獻(xiàn)較少。我們要增強(qiáng)公民黃曲霉素公共衛(wèi)生意識(shí)、加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室及其監(jiān)測(cè)能力、建立早期預(yù)警體系、對(duì)農(nóng)民進(jìn)行種植及管理能力訓(xùn)練等都是至關(guān)重要的。充分理解自噬、炎癥、免疫這三者復(fù)雜的關(guān)系以及他們?nèi)绾伪蛔允稍鰪?qiáng)劑所影響，或許可以改善HCC免疫療法的效果。此外我們應(yīng)該對(duì)發(fā)達(dá)國(guó)家和發(fā)展中國(guó)家日益增長(zhǎng)的肥胖率予以密切關(guān)注，可能會(huì)導(dǎo)致HCC發(fā)病率的意外增加。因?yàn)镠CC惡性程度較高且治療后易復(fù)發(fā)，目前其治療不盡如人意。機(jī)遇與挑戰(zhàn)并存是目前肝癌研究的現(xiàn)狀，需要我們齊心協(xié)力通過(guò)對(duì)其發(fā)病機(jī)制等多方面綜合且深入的研究，找到治療HCC的關(guān)鍵靶點(diǎn)，創(chuàng)新治療方法，相信在不久的將來(lái)HCC必將被人類(lèi)所攻克。

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