肉雞Ⅰ群禽腺病毒與壞死性腸炎混感的病例診斷

姬萬民

（瑞普（天津）生物科技股份有限公司 300308）

2018年2月，河北省正定縣某規(guī)模化雞場地面平養(yǎng)方式飼養(yǎng)的8500只肉雞30日齡出現(xiàn)死亡情況，患病肉雞開始表現(xiàn)為零星死亡，隨后死亡增加，日死亡率達(dá)2%，病雞表現(xiàn)精神沉郁，食欲不振，雞冠蒼白，排黃綠色或暗黑色稀便為主要癥狀。采用雙黃連口服液和環(huán)丙沙星、泰樂菌素和復(fù)方新諾明等藥物進(jìn)行治療，治療效果不佳。該畜主將患雞帶到本處就診，病料無菌采集后送公司診斷實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測。根據(jù)該雞群的發(fā)病情況、臨床癥狀、病理解剖變化并結(jié)合PCR分子生物學(xué)診斷，診斷確定為FAdV-Ⅰ與壞死性腸炎混合感染，現(xiàn)報(bào)告如下：

1 臨床癥狀

雞群突然發(fā)生疾病，臨床表現(xiàn)為精神沉郁，縮頭，采食飼料減少，喝水量增多，羽毛雜亂無光澤，雞冠及肉錘呈現(xiàn)發(fā)白情況，臥地，不愿走動(dòng)，排黃綠色或暗黑色，灰色糞便，一些糞便混合血液或未消化的飼料。病程較長會(huì)產(chǎn)生神經(jīng)癥狀，顫抖，站立不穩(wěn)，癱瘓，觸診檢查時(shí)表現(xiàn)出尖叫現(xiàn)象。

2 病理變化

患病蛋雞心包積液嚴(yán)重，心包中可見到大量的淡黃色的清亮液體，肝臟腫大，出血，質(zhì)地脆弱易破裂，表面凹凸不平，壞死灶和出血交替出現(xiàn)，呈現(xiàn)黃黑相間（見圖1左）。腎臟腫大、蒼白，有尿酸鹽沉積（見圖1右），小腸擴(kuò)張，大小不均增大至正常的2～3倍。腸腔切開，腸表面變黃，腸腔內(nèi)充滿氣體和血液，腸黏膜充血壞死，黏膜附著黃色或綠色假膜。部分腸黏膜增生，腸壁增厚充血，漿液表面有大量針尖大小出血點(diǎn)和灰白色小米粒大小壞死點(diǎn)，腸道中充滿了黑色和紅色的內(nèi)容。

圖1 病雞的眼觀病變

3 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

3.1 病毒的檢測及測序分析

無菌采集病死雞的肝臟和心包積液，分別進(jìn)行組織總DNA和總RNA的提取。以其為模板，分別進(jìn)行FAdV-Ⅰ的常規(guī)PCR和RT-PCR擴(kuò)增，本次試驗(yàn)病料樣品與心包積液PCR擴(kuò)增產(chǎn)物與預(yù)期擴(kuò)增產(chǎn)物片段大小相符，試驗(yàn)擴(kuò)增產(chǎn)物的條帶處于508bp，基因測序結(jié)果與GenBank中的序列比對(duì)，通過DNAStar軟件進(jìn)行同源性分析，結(jié)果顯示，分離株與I群禽腺病毒序列同源性為96.5%，表明被檢病料樣品中含有I群禽腺病毒。

3.2 細(xì)菌藥物敏感性試驗(yàn)

細(xì)菌藥物敏感性試驗(yàn)采用常規(guī)試紙法進(jìn)行。結(jié)果表明，該菌對(duì)新霉素和氟苯尼考具有高度敏感性，對(duì)桿菌肽藥物中度敏感，對(duì)羅紅霉素、氧氟沙星和復(fù)方新諾明表現(xiàn)出耐藥性。

圖3 PCR擴(kuò)增結(jié)果

M：DL1 000 DNA Marker；1：組織樣品；2：心包積液；3：陽性對(duì)照；4：陰性對(duì)照

4 治療措施

發(fā)病雞立即隔離，按照無害化的要求對(duì)病死雞迅速處理、焚燒及深埋，環(huán)境使用生石灰消毒。

緊急注射Ⅰ群禽腺病毒卵黃抗體，同時(shí)根據(jù)抗生素敏感性試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)發(fā)病雞全群上午使用氟苯尼考（立本康）飲水（劑量為每1L水中加75mg），并在飼料中添加電解多維和維生素K3，連用 3～5d。

做好雞舍及周邊環(huán)境的生物安全，及時(shí)清理屋內(nèi)的家禽糞水，對(duì)養(yǎng)殖設(shè)備（如水箱、食槽等）進(jìn)行清洗消毒，同時(shí)做好雞群的消毒。

經(jīng)采取上述措施后，至第3d病雞精神轉(zhuǎn)好，采食量增加，死亡明顯減少，至第5d死亡基本停止，1周后痊愈。

5 討論

I群禽腺病毒主要引起雞包涵體肝炎、心包積水綜合征的特異性病原體，其主要病變特征為心包中有淡黃色水樣或膠脈樣的積液，心臟松弛、柔軟。肝臟呈現(xiàn)淡褐色和黃色，質(zhì)地變脆，出現(xiàn)充血、腫脹，伴有局灶性壞死點(diǎn)和出血點(diǎn)。根據(jù)雞群的臨床癥狀及分子生物學(xué)診斷結(jié)果，確診該雞群為FAdV-Ⅰ與壞死性腸炎混合感染。

I群禽腺病毒一種條件致病性病毒，廣泛存在于家禽的呼吸道和消化道，其發(fā)病往往伴隨著其他不良因素，如通風(fēng)不良、飼料霉菌毒素超標(biāo)；或者其他疾病如IBD、CIAV、H9N2、NDV的發(fā)生。因此，在飼養(yǎng)過程中要注重家禽飼養(yǎng)管理，提高機(jī)體免疫功能，同時(shí)加強(qiáng)禽舍中的環(huán)境衛(wèi)生，加強(qiáng)通風(fēng)，合理消毒，并做好IBD、CIAV等疾病的免疫工作，減少心包積液綜合征。在治療過程中，使用卵黃抗體，并結(jié)合保肝護(hù)腎的藥物進(jìn)行治療，減少家禽的死亡，降低養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)損失。