細胞免疫治療在中晚期肝癌的應用效果觀察

武振明，史素梅，王凌凌，郭 茜，王帥兵，齊秀恒

肝癌是由肝內膽管上皮細胞或肝細胞發(fā)生的惡性腫瘤，具有惡性程度高、發(fā)病隱匿、易復發(fā)、預后差、易轉移等特點，其發(fā)病率高居我國第3位，病死率占全球肝癌死亡人數(shù)的27%～47%[1-3]。其根治方法是手術切除，但因為開腹手術造成的創(chuàng)傷大、臥床時間長，嚴重影響術后康復進程?，F(xiàn)階段不能手術根除的中晚期肝癌首選方法是經(jīng)導管肝動脈化療栓塞術。重組人血管內皮抑制素注射液能特異性地抑制血管內皮細胞遷移及增殖，從而起到抑制腫瘤的轉移及生長作用，于2006年獲批應用于肝癌的治療[4]。細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)是一種殺瘤活性高、體外增殖能力強的廣譜抗腫瘤免疫活性細胞，樹突狀細胞(DC)是抗原遞呈細胞中功能最強的。相關文獻報道，DC-CIK細胞免疫法在臨床得到越來越多的重視，具有提高機體免疫力的同時，對腫瘤細胞具有高效的殺傷能力，可清除體內殘留的微小腫瘤病灶，是治療惡性腫瘤的一種新方法[5]。本研究對2016年2—9月中國石油天然氣集團公司中心醫(yī)院接受治療的中晚期肝癌105例的臨床資料進行回顧性分析，探討DC-CIK細胞免疫治療在重組人血管內皮抑制素注射液聯(lián)合肝動脈栓塞化療治療中晚期肝癌的效果?，F(xiàn)報告如下。

1 資料和方法

1.1臨床資料 本組105例。病例入選標準：①年齡>18歲；②腹部超聲、CT等影像學支持肝腫塊的存在；③甲胎蛋白(AFP)>400 μg/ml；④行穿刺針吸細胞學檢查，明確肝癌的診斷；⑤均為初次接受細胞免疫、重組人血管內皮抑制素注射液聯(lián)合肝動脈栓塞化療治療；⑥血常規(guī)、腎功能、心電圖均在正常范圍；⑦無其他惡性腫瘤。按治療方法分為觀察組54例和對照組51例。兩組性別、年齡、體重指數(shù)、乙型肝炎病史、病程等方面比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。本研究開展前均得到患者的知情同意，并且通過本院醫(yī)學倫理委員會審查批準。

表1 兩組中晚期肝癌患者臨床資料比較

注：對照組采用重組人血管內皮抑制素注射液聯(lián)合肝動脈栓塞化療，觀察組在對照組基礎上加用細胞免疫治療

1.2治療方法

1.2.1對照組：經(jīng)股動脈穿刺插管至肝固有動脈及其分支行造影術，明確肝臟腫瘤的供血動脈位置，先灌注重組人血管內皮抑制素注射液(山東先聲麥得津生物制藥有限公司，國藥準字：20151217)15 mg，再灌注脫氧核苷酸鈉注射液(北京賽升藥業(yè)股份有限公司，國藥準字：20151022)0.5 g，注射用羥喜樹堿[費森尤斯卡比(武漢)醫(yī)藥有限公司，國藥準字：20151114)]20 mg，再將重組人血管內皮抑制素注射液15 mg、注射用鹽酸吡柔比星(浙江海正藥業(yè)股份有限公司，國藥準字：20151006)40 mg、碘化油15 ml充分混勻后緩慢注入供血動脈。少數(shù)患者還需加用吸收性明膠海綿栓塞。

1.2.2觀察組：在對照組治療的基礎上，輔加細胞免疫治療。取患者外周血100 ml，經(jīng)淋巴分離液梯度離心，取界面層單個核細胞，用PBS懸浮細胞，離心洗滌細胞3次，用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)3 h。收集非貼壁細胞(CIK細胞)置于加含有IFNR的AIMV培養(yǎng)基培養(yǎng)；收集貼壁細胞(DC細胞)，置于含有GM-CSF的AIMV培養(yǎng)基培養(yǎng)。觀察2個培養(yǎng)基每日細胞生長情況，期間不定時補充培養(yǎng)基成分及促熟劑。兩個培養(yǎng)基共培養(yǎng)2周，后收集DC-CIK細胞，注入0.9%氯化鈉注射液200 ml中，同時輔加20%人血白蛋白250 ml靜脈滴注。

1.3觀察指標及方法

1.3.1臨床療效判定：治療前與治療半年后患者分別行腹部CT檢查，按照RECIST實體腫瘤評價標準[5]，將患者治療效果分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)、疾病惡化(PD)。治療有效緩解率(ORR)=(CR+PR)/總例數(shù)×100%。

1.3.2生活質量：根據(jù)KPS評分標準[6]評定患者治療前后的生活質量。進步：治療后較治療前提高15分以上；穩(wěn)定：治療后較治療前提高或降低15分以內；惡化：治療后較治療前降低超過15分。有效率=(進步+穩(wěn)定)/總例數(shù)×100%。

1.3.3不良反應：感染、消化道反應、白細胞降低、腎功能損害。

2 結果

2.1兩組患者臨床治療效果比較 觀察組的ORR率為53.70%，對照組的ORR率為31.37%。差異有統(tǒng)計學意義(χ2=5.3409，P<0.05)。見表2。

2.2兩組患者生活質量評分比較 觀察組生活質量評分改善有效率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=10.5019,P<0.01)。見表3。

2.3兩組患者不良反應比較 兩組腎功能損害、白細胞降低、消化道反應、感染發(fā)生情況比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表4。兩組不良反應均予對癥治療后明顯緩解。

表2 兩組中晚期肝癌患者治療效果比較

注：對照組采用重組人血管內皮抑制素注射液聯(lián)合肝動脈栓塞化療，觀察組在對照組基礎上加用細胞免疫治療;aP<0.05

表3 兩組中晚期肝癌患者生活質量評分改善有效率比較

注：對照組采用重組人血管內皮抑制素注射液聯(lián)合肝動脈栓塞化療，觀察組在對照組基礎上加用細胞免疫治療;aP<0.01

表4 兩組中晚期肝癌患者不良反應發(fā)生情況比較

注：對照組采用重組人血管內皮抑制素注射液聯(lián)合肝動脈栓塞化療，觀察組在對照組基礎上加用細胞免疫治療

3 討論

原發(fā)性肝癌是我國較常見的惡性腫瘤之一，約76%的原發(fā)性肝癌合并肝硬化，其治愈率低，3年生存率<19%[8-9]。因其發(fā)病隱匿，臨床癥狀不典型，早期診斷較為困難，大多患者就診時已近中、晚期，喪失了最佳手術時機，生存率顯著下降。目前在無法手術完全切除的肝癌治療中，經(jīng)肝動脈化療栓塞術已經(jīng)成為主要治療方法；但術后腫瘤會發(fā)生缺氧、缺血，產(chǎn)生血管內皮生長因子等，促進腫瘤血管的再生，最終造成腫瘤再次復發(fā)，使該療法的療效降低[10-11]。血管內皮生長因子(VEGF)是目前體內最強的血管生成因子，其不僅與肝癌供血血管的生成有關，也是能客觀反映肝癌復發(fā)和轉移的重要調節(jié)因子。有專家學者發(fā)現(xiàn)[12-13]，重組人血管內皮抑制素注射液是一種新型抗腫瘤血管生成的化療藥物，主要作用于VEGF的受體，直接阻斷VEGF的作用，能夠對血管生成調節(jié)因子有一定的改變，特異性抑制血管內皮細胞遷移及增殖，充分調動自身抗血管生成的作用，同時有效抑制肝腫瘤的再次生長。其在聯(lián)合經(jīng)肝動脈化療栓塞術治療中晚期肝癌療效已經(jīng)得到了肯定。鐘萍等[14]研究認為，該藥聯(lián)合經(jīng)肝動脈化療栓塞術能提高中晚期肝癌的有效率，耐受性較好，毒性更小。因肝癌在啟動免疫應答及免疫應答方面均存在不同程度缺陷，故肝癌屬于一類免疫相關性的腫瘤。相關研究發(fā)現(xiàn)[15-17]，經(jīng)肝動脈化療栓塞術后肝癌患者抗腫瘤免疫功能會顯著下降，更易導致腫瘤再次復發(fā)。

細胞免疫治療法具有清除其體內微小殘留病灶、提高機體免疫力、延長生存期、降低腫瘤復發(fā)率的作用，主要是采集患者的DC-CIK細胞，將其提取、回輸至患者體內，可以有效彌補經(jīng)肝動脈化療栓塞術后的缺陷，已成為了治療中晚期肝癌患者新手段[18-22]。曹亮等[23]研究表明，細胞免疫治療聯(lián)合經(jīng)肝動脈化療栓塞術有助于提高肝癌患者的生存期。本研究中發(fā)現(xiàn)，觀察組ORR率高于對照組，印證了細胞免疫具有對肝腫瘤更好的殺傷能力，顯著改善生存質量，有利于輔助康復進程，且觀察組不良反應與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義，與劉松等[24]研究一致；該研究認為細胞免疫是自體細胞回輸，不會額外增加排斥反應等并發(fā)癥。本次研究中仍存在不足，如未能對患者進行1、3年生存率的統(tǒng)計分析，故會在后續(xù)研究中繼續(xù)與患者保持聯(lián)系，探索兩種治療方法的遠期生存率。

綜上所述，細胞免疫治療聯(lián)合重組人血管內皮抑制素注射液肝動脈栓塞化療治療中晚期肝癌，可顯著提高疾病緩解率，改善生存質量，值得臨床廣泛借鑒使用。但本研究未對遠期生存率深入探究，對此需要進一步跟蹤隨訪。

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