徐 聰 蒙海峰
(1.金華職業(yè)技術(shù)學院 農(nóng)業(yè)與生物工程學院,金華,321017;2.金華市野生動物園,金華,321000)
近年來,一種瀕危至臨近滅絕的野生動物——穿山甲(Manisspp.)在各種媒體的報道中重新出現(xiàn)在人們的視野。穿山甲因其重要的藥用價值和被視為佳肴而遭到嚴重的捕殺以至于它們的數(shù)量急劇減少[1]。據(jù)報道在過去的15 a里由于大量的捕獵導致亞洲穿山甲數(shù)量減少了約80%并且隨著捕獵的繼續(xù)其數(shù)量還將進一步減少[2]。穿山甲的繁殖比較緩慢,每年1胎,每次通常只產(chǎn)1仔,偶產(chǎn)2仔,因此在遭到大肆捕殺后極易滅絕[3]。對此,中國政府及國際社會給予了廣泛的關(guān)注和重視,穿山甲已被列為國家Ⅱ級重點保護野生動物[4],并被《中國瀕危動物紅皮書·獸類》定為易危級,2016年國際自然保護聯(lián)盟(IUCN)將穿山甲所有品種由瀕危野生動植物物種國際貿(mào)易公約(CITES)由之前的附錄Ⅱ上升至附錄Ⅰ。上述條文為挽救穿山甲物種滅絕提供了嚴密的保護措施,然而相比之下穿山甲的科學研究非常有限。保護我國野生穿山甲資源,開展對穿山甲人工飼養(yǎng)的疾病研究,最終實現(xiàn)人工飼養(yǎng),不僅是保護物種多樣性、維持生態(tài)平衡的需要,也是實現(xiàn)我國中藥現(xiàn)代化的需要。
盡管穿山甲在我國允許進行人工養(yǎng)殖,然而由于它們種源稀少,養(yǎng)殖模式技術(shù)不成熟,行為規(guī)律不明等原因,成功養(yǎng)殖的案例捉襟見肘[5]。穿山甲人工養(yǎng)殖主要包括4個方面:棲息環(huán)境、食物、繁殖和疾病控制。本文通過對金華野生動物園人工飼養(yǎng)的穿山甲(相關(guān)林業(yè)部門收繳的種源)跟蹤研究,從疾病治療和預防的角度來闡述在穿山甲人工飼養(yǎng)中所遇到的問題,以期對今后穿山甲人工飼養(yǎng)提供一些基礎(chǔ)依據(jù)。
研究地點為金華市野生動物園,我們于2017年7月中旬開始對林業(yè)部門剛繳獲的穿山甲進行人工圈養(yǎng)條件下的跟蹤研究,圈養(yǎng)場地溫度是25~30℃的空調(diào)房間的籠子、室外培育場所、竹林,環(huán)境濕度為70%。因引入時間正好是高溫的夏季,所以首先在有空調(diào)的觀察室內(nèi)進行籠養(yǎng)觀察,在涼快的天氣或者早上放置于竹林與室外進行行為活動觀察。
2只剛從野外引入的雄性穿山甲,由于種源有限,暫時無雌性穿山甲個體被引入到記錄中。體重分別為2.43 kg(1號)和1.83 kg(2號),根據(jù)體重、體長、鱗片磨損程度確定均為亞成體的雄性中華穿山甲。
在圈養(yǎng)過程中進行24 h實時監(jiān)控,飼養(yǎng)員每天在固定時間喂食并清理穿山甲巢穴。每天記錄穿山甲的體溫、呼吸、心跳、攝食量、排泄量、活動時間等基本情況。在飼養(yǎng)過程中及時發(fā)現(xiàn)動物異常的狀況,如:腹瀉、咳嗽、流鼻涕、寄生蟲感染等情況,并及時針對相應(yīng)問題做出相應(yīng)治療。
穿山甲常見的致病原因有:細菌性的、寄生蟲性的、消化道梗阻性的[6],目前尚未有報道穿山甲感染病毒死亡的案例。在2只穿山甲引進后分別發(fā)生了消化道腹瀉和呼吸道感染等問題,作者對此做了相應(yīng)的治療。同時,參考相關(guān)文獻對穿山甲的不同類型疾病進行整理歸納。對于這些常見的疾病的歸納整理,以期對于之后規(guī)?;B(yǎng)殖穿山甲提供基礎(chǔ)的疾病診斷治療依據(jù)。
在1號穿山甲引入圈養(yǎng)的一個星期后(2017-8-1),出現(xiàn)呼吸道癥狀:精神沉郁、鼻腔有黏液性的分泌物(隨著呼吸呈現(xiàn)吹泡泡狀)、呼吸急促等。相對來說,2號穿山甲也有輕微的呼吸道癥狀,但不明顯。
臨床檢查:體溫33.5℃,呼吸30次/min,心率60次/min。聽診心臟未見明顯異常。由于穿山甲全身均由甲片覆蓋,較難采集血液進行血液學檢查,初期采用嘗試性治療。初步診斷為上呼吸道感染,分析原因可能為空調(diào)房間與外界環(huán)境的變化造成了呼吸道的感染。
治療方案:每天在灌胃的飼料中添加頭孢拉定(0.25 g)、小柴胡顆粒半袋泡水(5 g)、氨溴索(5 mg/kg)、氨茶堿(6 mg/kg)、速尿(0.5 ml)。治療周期為一個星期。之后,穿山甲精神狀態(tài)有所好轉(zhuǎn),但仍有少量鼻液分泌。
上呼吸道感染、細菌性肺炎在圈養(yǎng)的動物中很常見[7]。惡劣的衛(wèi)生條件、營養(yǎng)不良以及環(huán)境溫度和濕度的不適當使它容易受到致病菌的侵襲。感染呼吸道問題的動物通常表現(xiàn)出厭食、嗜睡、張嘴呼吸和呼吸困難。還可以注意到黏液性鼻分泌物。然而,漿液性鼻分泌物可能預示著機體缺乏維生素A,有些可能是季節(jié)性的,特別是春秋季節(jié)。許多從被感染爬行動物中分離到的細菌是革蘭氏陰性菌,且有一部分是健康爬行動物中的正常菌群。在特定的情況下,特別是在免疫系統(tǒng)受損的患者中,正常菌群會成為病原體[7]。呼吸道疾病的病因有支原體、巴斯德氏菌(Pasteurella)、變形桿菌屬(Proteusspp.)、氣單胞菌屬(Aeromonasspp.)、銅綠假單胞菌屬(Pseudomonasaeruginosa)感染等,也有報道由于真菌感染而產(chǎn)生的呼吸道問題[7]。
呼吸道感染的診斷是通過觀察典型的臨床體征、影像學、血液學發(fā)現(xiàn)。對嚴重呼吸道感染的治療需要腸道抗生素的治療,以及一般的支持性護理。治療結(jié)果提示加入霧化療法、利尿劑、支氣管擴張劑和黏液劑對疾病的恢復是有幫助的。
在2號穿山甲引進的初期,穿山甲由于不能自主采食,多以人工灌胃的方式進行飼養(yǎng)。引進不久穿山甲出現(xiàn)精神沉郁,攝食少,排泄物水樣,膠狀(2017-08-07)。
臨床診斷:消化道腹瀉常見的病因有細菌性的、腸道寄生蟲性的、營養(yǎng)性的。對穿山甲腹瀉糞便進行糞檢和細菌培養(yǎng)是確定病因的手段。在對患病穿山甲糞檢中發(fā)現(xiàn)有少量的白細胞,少量的球蟲。
治療方案:每天在飼料中添加蒙脫石散半袋(1.5 g)用水泡開、諾氟沙星(300 mg)、益生菌一袋。用藥治療周期為7 d,之后穿山甲精神狀態(tài)有所好轉(zhuǎn),放入竹林會自主覓食,在籠養(yǎng)環(huán)境下會采食活體的白蟻。在放入竹林活動時表現(xiàn)十分活躍。
穿山甲的消化道問題大多數(shù)是由于飼養(yǎng)過程中飼料問題所引起,在穿山甲人工飼養(yǎng)死亡的報道中,有一些是因為消化道梗阻造成的死亡,有時候也是由于前期人工灌胃造成的應(yīng)激所引起。對腹瀉糞便的分離培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)糞便中有葡萄球菌(Staphylococcusspp.)、沙門氏菌(Salmomellaspp.)
資料顯示,對于爬行動物的腸道感染,沙門氏菌是其主要的致病菌[7]。沙門氏菌是一種革蘭氏陰性細菌,大約有2 000種血清型(包括沙門氏菌),其中一些對人和動物都是致病的??赡軙饎游锸秤徽?、昏睡或腹瀉等臨床癥狀。所以在初期治療過程中加入針對沙門氏菌敏感的抗生素是一個可以考慮的選擇。
針對腹瀉的穿山甲個體取少量腹瀉糞便,進行常規(guī)糞檢,發(fā)現(xiàn)糞便中有少量的球蟲(圖1)。穿山甲的寄生蟲感染是導致穿山甲死亡的重要原因[6],特別對于新引進的穿山甲,由于新的環(huán)境條件對機體的應(yīng)激作用,導致機體免疫能力下降,寄生蟲感染就會造成穿山甲營養(yǎng)衰竭而死亡。常見的寄生蟲感染分為腸道寄生蟲和體表寄生蟲2種。
圖1 糞便中的球蟲Fig.1 The coccidium in the feces
圖2 皮膚細菌感染Fig.2 Bacterial infection of the skin
其中腸道寄生蟲有阿米巴原蟲(Acanthamoeba)、絳蟲(Taenia)、蛔蟲(Ascarid)、球蟲(Coccidia)、隱孢子蟲(Cryptosporidium)等,其特點是群體傳播,臨床癥狀表現(xiàn)為體重減輕、厭食、肥厚型胃炎、血便最后導致營養(yǎng)衰竭死亡。診斷方式有糞便檢查、尸檢等,主要以預防為主:隔離、定期清理、針對患病和健康動物食物和水要分開。治療球蟲和阿米巴原蟲的方法為拜耳公司的百球清或滅滴靈(甲硝唑、甲硝噠唑),治療線蟲可用苯硫咪唑,同時結(jié)合營養(yǎng)支持療法等。也可在餌料中添加硫磺粉(0.5 kg餌料中加入 2~3 g),連喂3~4 d。在場內(nèi)堆積一些消毒的河沙,即在河沙里拌入90%晶體敵百蟲1 000倍液,混合均勻后,讓穿山甲沙浴,可預防病害發(fā)生,并使穿山甲磷片光潔、豐滿。
體外寄生蟲包括了螨蟲(Acarian)、蜱蟲(Tick)、虱子(Louse)等,發(fā)生于體表,可應(yīng)用10 mL的除虱精兌水3~4 kg對其體表進行藥浴。治療可用擬除蟲菊酯、阿維菌素。在圈養(yǎng)穿山甲過程中,在保證種苗健康的同時,引入種苗后要及時進行驅(qū)蟲,避免動物在剛引入時因抵抗力下降,導致體內(nèi)寄生蟲暴發(fā)而死亡。
人工最困難的方面就是提供合適的食物,這也是影響它能否繁殖成功的關(guān)鍵因素[3]。在野外,穿山甲主要以白蟻、螞蟻為食,偶爾也食用其他無脊椎動物包括蜜蜂幼蟲,蒼蠅,蠕蟲,蚯蚓和蟋蟀等[8]。然而對于人工飼養(yǎng)來說,難以尋找足夠數(shù)量的天然食物滿足其營養(yǎng)需要[9]。目前針對穿山甲天然食物中營養(yǎng)成分的分析,主要進行的是概略營養(yǎng)成分分析[10],缺乏一定的精準性和全面性。分析這些天然飼料中的蛋白質(zhì)和氨基酸的種類和數(shù)量可能會對人工配制適合穿山甲人工飼養(yǎng)的飼料有幫助[3]。在此次中華穿山甲人工飼養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)穿山甲對于活體飼料有較強的自主采食欲望,對于黑螞蟻干并無自主采食欲望。
抗應(yīng)激主要從前期的食物角度、飼養(yǎng)環(huán)境角度、人為操作出發(fā),在穿山甲人工圈養(yǎng)的初期,大多數(shù)情況下穿山甲都不會自主進行采食,需要進行人工灌胃,而正是人為的操作會造成穿山甲的應(yīng)激反應(yīng),容易發(fā)生腹瀉、精神沉郁等情況,針對這種情況要盡量選取合適的操作時間點,并且投喂適量的益生菌等藥物。有報道表明在中午進行這些人為的操作相對來說不會破壞穿山甲的自然習性[11]。
不同的飼養(yǎng)條件會影響穿山甲的生活行為習慣[2],進而影響營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收甚至引發(fā)營養(yǎng)代謝病。然而目前沒有成熟的穿山甲人工飼養(yǎng)模式[12],有報道采用仿生態(tài)式環(huán)境、地窖式、平房木箱式3種飼養(yǎng)模式對穿山甲進行飼養(yǎng)[13]。探尋最適合人工飼養(yǎng)穿山甲的飼養(yǎng)環(huán)境模式仍然是個十分重大的課題。本次的飼養(yǎng)采用的是室內(nèi)圈養(yǎng)和室外活動相結(jié)合的方式,適用于少量實驗樣本的飼養(yǎng),當對于規(guī)?;曫B(yǎng)還需要尋求新的飼養(yǎng)方式。
穿山甲最適宜的溫度在25~30℃之間,如遇低溫環(huán)境,穿山甲的活動性會降低,而對于低溫的穿山甲可以采用恒溫箱、溫水灌腸的方式緩慢復溫,同時進行支持療法:人工灌胃、抗生素治療,要避免使用電熱毯、過度強光照射的方式增加環(huán)境溫度。在圈養(yǎng)環(huán)境中,對溫度的波動范圍應(yīng)控制好。
對于環(huán)境的濕度,最佳的是70%左右的環(huán)境濕度,可通過霧化、濕毛巾等方式增加環(huán)境中的濕度,但要避免潮濕的飼養(yǎng)環(huán)境,因為高濕度容易出現(xiàn)皮膚疾病(圖2)。
底料問題,有報道穿山甲在人工飼養(yǎng)過程中因攝入木屑等墊料而發(fā)生呼吸道梗阻死亡,要避免砂石、潮濕的有機物、毒物攝入。通過飼喂發(fā)現(xiàn)在穿山甲的人工飼料中,加入泥土有助于穿山甲的自主采食。在這點上與蜥蜴(Lacertaspp.)、蟒蛇(Pythonmolurusbivittatus)等飼養(yǎng)過程中加入一些沙石有助采食相似,但也可能造成的問題是:刺激、胃腸道阻塞、難清理等。
圈養(yǎng)問題,心理效應(yīng)-壓力、運動不充分造成能量代謝問題,對金屬籠子的摩擦可能會導致四肢、嘴巴的損傷:擦傷、感染、生長畸形。有報道稱人為干擾項目更多應(yīng)該放在中午進行,對其攀爬、作窩的小環(huán)境應(yīng)接近其生存環(huán)境,有助于降低穿山甲人工飼養(yǎng)中的應(yīng)激。
陽光問題,缺乏陽光照射造成維生素D3缺乏使鈣離子吸收出現(xiàn)問題,會影響多器官營養(yǎng)代謝,使骨骼代謝問題(甲狀旁腺機能亢進)等。
惡劣的衛(wèi)生條件,比如糞便積累、未食用的食物和水會造成細菌、真菌、寄生蟲的滋生,加重皮膚、呼吸道、胃腸道疾病的發(fā)生。
致病性細菌能引起穿山甲廣泛性的疾病,包括膿腫、肺炎、腸炎、皮炎和口炎等方面[14]。
一般來說,穿山甲的大多數(shù)細菌病原體都是革蘭氏陰性的。主要的致病菌有沙門氏菌、假單胞菌(特別是銅綠假單胞菌)、氣單胞菌等[7],常見于口腔和腸道內(nèi)。這些細菌都是機會致病菌,當環(huán)境條件不當和營養(yǎng)不良時會呈現(xiàn)出致病作用。治療細菌性感染中可以首選對革蘭陰性菌敏感的抗生素進行治療。大約50%的臨床癥狀不良的爬行動物培養(yǎng)的標本中會產(chǎn)生厭氧菌,尤其是擬桿菌屬和梭菌屬。其中大多數(shù)厭氧菌都對甲硝唑敏感。
通過一段時間的飼養(yǎng),總結(jié)出穿山甲的正常生理指標為:體溫32.5~33.5℃(腋下體溫),呼吸10~15次/min,心跳50~70次/min,當臨床檢查時,如發(fā)現(xiàn)這些正常指標出現(xiàn)明顯異常,表示動物可能處于某些疾病中,應(yīng)及時發(fā)現(xiàn),及時診斷治療。
在飼養(yǎng)管理上,要配置好穿山甲的人工飼料,在營養(yǎng)均衡的同時要注意適口性。飼喂實驗中發(fā)現(xiàn),活體飼料配合飼料中添加適量的泥土有利于穿山甲的自主采食的形成。同時,在飼料中添加益生菌有利于腸道腹瀉病例的健康恢復,有利于引進初期的抗應(yīng)激治療。在畜舍的建設(shè)中,要根據(jù)具體的環(huán)境條件選取合適的畜舍,注意控制環(huán)境中的溫度和濕度,這樣可以有效地預防一些呼吸道和皮膚寄生蟲的疾病問題。對于圈養(yǎng)的穿山甲,保證環(huán)境的清潔衛(wèi)生,保證一定的野外活動量可能有利于穿山甲適應(yīng)陌生的環(huán)境。
目前,國內(nèi)對于穿山甲的疾病研究和飼養(yǎng)管理還鮮有報道,但在很多野生動物園和林業(yè)部門的日常工作中經(jīng)常會遇到收繳而來的野生穿山甲,由于缺乏基本的疾病預防和治療經(jīng)驗,常常會使收繳而來的野生中華穿山甲死亡的情況。本文的研究可以給野生動物救助站以及野生動物園提供基本的飼養(yǎng)管理和疾病防治經(jīng)驗,有利于保護日漸減少的中華穿山甲種群。同時,由于穿山甲的飼養(yǎng)、疾病預防、繁殖等問題一直也沒有得到很好的解決,導致目前國內(nèi)還沒有規(guī)?;斯わ曫B(yǎng)穿山甲的成功經(jīng)驗,本文的研究內(nèi)容可為今后人工飼養(yǎng)穿山甲提供了一定的理論依據(jù)。不論是從保護野生動物的物種豐富性角度,還是為我國中醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)提供寶貴的藥用原材料,實現(xiàn)穿山甲的人工飼養(yǎng)都顯得刻不容緩。本文拋磚引玉,希望更多的野生動物研究人員能夠攻堅克難,早日實現(xiàn)規(guī)?;拇┥郊兹斯わ曫B(yǎng)。
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