TRUST試驗(yàn)聯(lián)合TPPA法在產(chǎn)檢孕婦梅毒產(chǎn)前篩查中的應(yīng)用價(jià)值

周婷

(商丘市中心醫(yī)院輸血科，河南 商丘 476000)

梅毒為臨床常見(jiàn)慢性全身性性傳播疾病之一，多由梅毒螺旋體感染所致，該病原體又被稱為蒼白密螺旋體，感染人體后，表現(xiàn)極為復(fù)雜，早期侵犯皮膚、生殖器官，晚期可累及機(jī)體多臟器，且病程較長(zhǎng)，嚴(yán)重危害機(jī)體正常功能[1，2]。近年來(lái)，受多種因素影響，梅毒患病人數(shù)不斷攀升，對(duì)患者身體健康、生活質(zhì)量造成嚴(yán)重威脅[3，4]。梅毒多由性交傳染，部分可由接觸污染物、手術(shù)、輸血等途徑傳染，患梅毒孕產(chǎn)婦可經(jīng)由胎盤傳染胎兒，誘發(fā)宮內(nèi)感染，造成不良妊娠發(fā)生。據(jù)相關(guān)調(diào)查顯示，孕產(chǎn)婦梅毒陽(yáng)性檢出率可達(dá)到1%以上[5，6]。因此，產(chǎn)前積極篩查梅毒孕婦，早發(fā)現(xiàn)、早預(yù)防對(duì)減少不良妊娠結(jié)局具有重要意義。以往臨床上多單純應(yīng)用TRUST試驗(yàn)、TPPA法展開(kāi)產(chǎn)檢孕婦梅毒產(chǎn)前篩查，雖可取得一定效果，但檢測(cè)準(zhǔn)確性并不理想[7]。本研究選取74例妊娠梅毒孕婦，分析TRUST試驗(yàn)聯(lián)合TPPA法在產(chǎn)檢孕婦梅毒產(chǎn)前篩查中的應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果如下。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 選取2013年7月至2017年4月我院74例妊娠梅毒孕婦作為觀察組，其中34例初產(chǎn)婦，40例經(jīng)產(chǎn)婦；年齡21～47歲，平均年齡（28．42±6．65）歲；孕周 10～19 周，平均孕周（15．32±2．89）周；并選取同期進(jìn)行產(chǎn)前檢查的92例健康孕婦作為對(duì)照組，其中42例初產(chǎn)婦，50例經(jīng)產(chǎn)婦；年齡 21～48 歲，平均年齡（29．01±6．40）歲；孕周 10～19周，平均孕周（15．98±2．52）周。 兩組臨床資料均無(wú)明顯差異（P＞0．05），可進(jìn)行對(duì)比研究，且本研究經(jīng)我院倫理協(xié)會(huì)審核批準(zhǔn)。

1．2 入選標(biāo)準(zhǔn)

1．2．1 納入標(biāo)準(zhǔn) ⑴育齡期女性；⑵未合并其他傳染性疾病者；⑶臨床資料完整、詳細(xì)。

1．2．2 排除標(biāo)準(zhǔn) ⑴合并心、肝、腎等重要臟器功能障礙者；⑵伴有嚴(yán)重認(rèn)知功能障礙者；⑶具有家族疾病遺傳史者；⑷臨床資料不完整者；⑸無(wú)法配合本研究者。

1．3 檢測(cè)方法

1．3．1 樣本采集與儀器、試劑盒 兩組孕婦均于清晨抽取4ml空腹靜脈血，予以肝素抗凝后，高速離心處理（3000r/min，10min），取上層清液送檢，分別采用TRUST試驗(yàn)、TPPA法進(jìn)行檢測(cè)，儀器應(yīng)用XK96-8型梅毒螺旋振蕩器、佰樂(lè)680全自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)；試劑盒購(gòu)自北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司、日本富士瑞必歐株式會(huì)社。二者檢測(cè)步驟、結(jié)果判斷均嚴(yán)格依據(jù)試劑盒、儀器操作說(shuō)明書進(jìn)行，且注意于試劑盒有效期內(nèi)使用。

1．3．2 TRUST試驗(yàn) 血清于室溫下進(jìn)行稀釋，由1：2 倍 直 至 1：64 倍 （1：2、1：4、1：8、1：16、1：32、1：64），首先于反應(yīng)板上加心磷脂抗原，1滴/孔，隨后以梅毒螺旋振蕩器水平振蕩，100次/min，連續(xù)振蕩8min，仔細(xì)觀察凝集結(jié)果，確定血清陽(yáng)性滴度。陽(yáng)性結(jié)果判定依據(jù)試劑盒規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，血清滴度＜1：2。

1.3.3 TPPA法 首選將首先將100μl血清稀釋液加入反應(yīng)板第1孔，第2～4孔則加入血清稀釋液25μl；隨后第1孔再次加入25μl血清稀釋液，以2n形式由第1孔加至第4孔后，將25μl未致敏粒子加至第1～3孔，第4孔加入25μl未致敏粒子，充分混勻后，靜置于15℃～30℃室溫下，維持2h，觀察結(jié)果。陽(yáng)性結(jié)果判定依據(jù)試劑盒規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，血清滴度＜1：80。

1.4妊娠梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn) 聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性：TRUST試驗(yàn)、TPPA法均為陽(yáng)性，或TRUST試驗(yàn)陰性、TPPA法陽(yáng)性，14d復(fù)查TRUST試驗(yàn)，若轉(zhuǎn)為陽(yáng)性，則可判定為妊娠梅毒。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)以SPSS 17.0分析，計(jì)數(shù)資料用 n（%）表示，以卡方檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TRUST試驗(yàn)、TPPA法單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果分析 TRUST試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果：妊娠梅毒78例，健康88例；TPPA法檢測(cè)結(jié)果：妊娠梅毒85例，健康81例；聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果：妊娠梅毒80例，健康86例。

2.2兩種方法單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)在孕婦梅毒產(chǎn)前篩查中的價(jià)值分析 TRUST試驗(yàn)、TPPA法聯(lián)合檢測(cè)準(zhǔn)確度（90.36%）分別高于TRUST試驗(yàn)（63.85%）、TPPA 法（85.53%），敏感性（93.24%）高于 TRUST試驗(yàn)（62.16%），特異度（88.04%）高于 TRUST試驗(yàn)（65.22%），陽(yáng)性預(yù)測(cè)值（86.25%）高于 TRUST試驗(yàn)（58.97%），陰性預(yù)測(cè)值（94.19%）高于 TRUST試驗(yàn)（68.18%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表 2。

3 討論

表1 TRUST試驗(yàn)、TPPA法單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果分析（n=166）

表2 兩種方法單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)在孕婦梅毒產(chǎn)前篩查中的價(jià)值分析（n=166）

自上世紀(jì)90年代以來(lái)，我國(guó)梅毒發(fā)病率不斷攀升，尤其是先天性梅毒增長(zhǎng)趨勢(shì)較為明顯，該疾病防治工作仍然為臨床學(xué)者亟待解決問(wèn)題更換[8，9]。梅毒是一種由梅毒螺旋體感染所致的傳染性疾病，可通過(guò)性接觸方式傳播，同時(shí)還可通過(guò)胎盤傳播，患有梅毒孕婦可于妊娠6周時(shí)，經(jīng)由胎盤致使梅毒螺旋體感染胎兒，妊娠18周左右，病原體可擴(kuò)散至胎兒各個(gè)器官，造成流產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)、胎傳梅毒兒等多種不良妊娠結(jié)局[10，11]。妊娠梅毒多為潛伏梅毒，可能由孕婦孕期體內(nèi)免疫系統(tǒng)暫時(shí)抑制所致，多數(shù)患者并無(wú)典型臨床癥狀、體征，故梅毒血清學(xué)檢查為妊娠梅毒重要診斷依據(jù)之一。有研究表明，90%左右不良妊娠結(jié)局為可預(yù)防的[12]。因此，產(chǎn)檢孕婦梅毒產(chǎn)前篩查時(shí)采取高敏感度、準(zhǔn)確度檢測(cè)方法對(duì)保證母嬰安全，減少梅毒并發(fā)癥發(fā)生尤為重要。

TRUST試驗(yàn)是一種梅毒非特異性試驗(yàn)，主要通過(guò)牛心中提取出類脂質(zhì)抗原（由卵磷脂、膽固醇及心磷脂組成）檢測(cè)梅毒患者血清非特異性類脂質(zhì)抗體，操作簡(jiǎn)便、迅速、反應(yīng)時(shí)間短，試劑成本較低，且試驗(yàn)結(jié)果可由肉眼直接看出。但研究表明TRUST試驗(yàn)敏感度不高，且弱陽(yáng)性標(biāo)本易受肉眼主觀判斷影響[13，14]。 本研究中74例梅毒孕婦，TRUST試驗(yàn)僅檢出46例，故單一應(yīng)用TRUST試驗(yàn)檢測(cè)梅毒孕婦，漏診率較高，易增加醫(yī)療風(fēng)險(xiǎn)。TPPA法屬于梅毒特異性血清學(xué)檢測(cè)，為目前公認(rèn)梅毒確認(rèn)試驗(yàn)，是通過(guò)在人工載體明膠顆粒上包被梅毒Nichols株的精制菌體成分檢測(cè)血清中特異性抗體。該檢測(cè)方法不受生物因素影響，一旦感染梅毒螺旋體，則可終身檢測(cè)陽(yáng)性，該檢測(cè)方法多作為確證檢查應(yīng)用于臨床工作中。本研究中74例梅毒患者，TPPA法檢測(cè)出65例陽(yáng)性，明顯高于TRUST試驗(yàn)。但有學(xué)者指出，TPPA法對(duì)于病情嚴(yán)重程度及疾病治療情況判定并無(wú)明顯作用，而TRUST試驗(yàn)則可應(yīng)用于梅毒治療效果、復(fù)發(fā)、治療觀察中具有重要意義[15]。本研究聯(lián)合采用TRUST試驗(yàn)、TPPA法，結(jié)果顯示TRUST試驗(yàn)、TPPA法聯(lián)合檢測(cè)準(zhǔn)確度 （90．36%）分別高于TRUST試驗(yàn)（63．85%）、TPPA 法（85．53%），敏感性（93．24%）高于 TRUST 試驗(yàn)（62．16%），特異度（88．04%）高于TRUST 試驗(yàn)（65．22%），陽(yáng)性預(yù)測(cè)值（86．25%）高于TRUST 試驗(yàn)（58．97%），陰性預(yù)測(cè)值（94．19%）高于TRUST 試驗(yàn)（68．18%）（P＜0．05）。 結(jié)果充成分說(shuō)明聯(lián)合采用TRUST試驗(yàn)、TPPA法檢測(cè)孕婦梅毒，可顯著提高檢測(cè)準(zhǔn)確性、敏感性、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值。

綜上所述，產(chǎn)檢孕婦梅毒產(chǎn)前篩查中聯(lián)合采用TRUST試驗(yàn)、TPPA法檢測(cè)，檢測(cè)準(zhǔn)確性、特異度、敏感度較高，可減少誤診、漏診發(fā)生，便于臨床早期展開(kāi)預(yù)防工作。

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