• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    經(jīng)不同途徑區(qū)域灌注氟尿嘧啶在肝癌、肝組織及血漿中的濃度差異

    2015-01-04 05:28:02鄭驚雷梁力建王在國黃文靜王雪丁
    中國癌癥雜志 2015年1期
    關(guān)鍵詞:經(jīng)肝門靜脈血漿

    鄭驚雷,梁力建,王在國,黃文靜,王雪丁

    1.廣東省東莞市人民醫(yī)院腫瘤外科,廣東 東莞 523059;

    2.中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院肝膽外科,廣東 廣州 510080;

    3.廣東省藥品檢驗(yàn)所抗生素室,廣東 廣州 510180;

    4.中山大學(xué)藥學(xué)院,廣東 廣州510080

    經(jīng)不同途徑區(qū)域灌注氟尿嘧啶在肝癌、肝組織及血漿中的濃度差異

    鄭驚雷1,梁力建2,王在國1,黃文靜3,王雪丁4

    1.廣東省東莞市人民醫(yī)院腫瘤外科,廣東 東莞 523059;

    2.中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院肝膽外科,廣東 廣州 510080;

    3.廣東省藥品檢驗(yàn)所抗生素室,廣東 廣州 510180;

    4.中山大學(xué)藥學(xué)院,廣東 廣州510080

    背景與目的:肝動脈、肝門靜脈灌注區(qū)域化療是肝癌的重要治療手段,本研究探討區(qū)域性灌注化療時(shí)氟尿嘧啶(fluorouracil,5-FU)在大鼠肝癌和肝臟組織及血漿中的分布,為臨床肝臟腫瘤化療提供參考。方法:將24只荷瘤大鼠隨機(jī)分為4組,分別經(jīng)外周靜脈(尾靜脈)、肝動脈、肝門靜脈或結(jié)扎肝動脈后經(jīng)肝門靜脈灌注5-FU,劑量為20 mg/kg。采用高效液相色譜法測定肝癌、肝臟組織及血漿中5-FU的含量,并計(jì)算藥物在血漿、肝臟和肝癌組織間的穿透比率。結(jié)果:結(jié)扎肝動脈的肝門靜脈組5-FU濃度在肝臟和肝癌組織中最高,分別為(22.1±9.5)μg/g和(16.4±7.2)μg/g;其次為肝動脈組;肝門靜脈組5-FU濃度在肝癌組織中的濃度較低,為(8.9±3.7)μg/g;外周靜脈組5-FU濃度在肝臟和肝癌組織中的藥物濃度均為最低,肝癌組織中的濃度僅為(4.3±2.2)μg/g。在血漿中的5-FU濃度正好相反,外周靜脈組濃度最高(26.8±12.5)μg/mL,肝動脈組(16.4±9.7)μg/mL、結(jié)扎肝動脈的肝門靜脈組(15.9±10.1)μg/mL和肝門靜脈組(14.9±8.5)μg/mL等3組濃度相近,均明顯低于外周靜脈組(P<0.05)。5-FU的肝癌/血漿穿透比率依次為結(jié)扎肝動脈的肝門靜脈組(103.47%),肝動脈組(92.94%),肝門靜脈組(59.58%)和外周靜脈組(16.08%)。結(jié)論:與外周靜脈注射全身化療比較,區(qū)域性灌注化療可顯著提高肝癌和肝臟組織中的藥物濃度,同時(shí)減少化療藥物在外周血中的分布,其中經(jīng)結(jié)扎肝動脈的肝門靜脈灌注和經(jīng)肝動脈灌注是肝癌區(qū)域性化療2種較好的途徑。

    氟尿嘧啶;肝癌;區(qū)域化療;穿透比率

    肝癌全身化療效果不理想,有效率不足20%。肝動脈和(或)肝門靜脈灌注區(qū)域化療常作為肝癌術(shù)后治療和不能切除的晚期肝癌治療的重要手段,以實(shí)現(xiàn)藥物在癌灶和靶組織器官中達(dá)到高濃度,并減少外周血和其它組織器官中藥物分布、降低不良反應(yīng)的目的[1-2]。本研究在既往研究[3]的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究和比較分別在外周靜脈注射和不同途徑的區(qū)域性灌注下,肝癌和肝臟組織及血漿中的藥物分布規(guī)律和差異,探討區(qū)域性灌注化療對肝癌的化學(xué)治療作用。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物

    雄性BALB/c裸鼠2只,體質(zhì)量17.1~19.6 g,作種鼠供皮下接種腫瘤細(xì)胞株用,雄性Wistar大鼠24只,體質(zhì)量(120±15) g,供肝內(nèi)種植腫瘤用;均為SPF級,由中山大學(xué)動物中心提供。動物實(shí)驗(yàn)過程嚴(yán)格按動物倫理規(guī)范進(jìn)行。

    1.1.2 腫瘤細(xì)胞株

    大鼠CBRH-7919肝癌細(xì)胞株,由中山大學(xué)細(xì)胞保藏中心提供。

    1.1.3 藥品

    氟尿嘧啶(fluorouracil,5-FU),南通精華制藥有限公司生產(chǎn),批號:070402,規(guī)格10 mL: 0.25 g。5-FU對照品:南通精華制藥有限公司提供,批號:02005098。

    1.1.4 儀器

    Waters高效液相色譜系統(tǒng):Waters 486紫外檢測器,Waters 510泵,SCL進(jìn)樣器,三銳色譜工作站;XW-80A旋渦混合器(上海醫(yī)科大學(xué)儀器廠);飛鴿TGL-16C臺式高速離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);微量采樣器(上海求精生化試劑廠);0.45μm微孔濾膜(天津騰達(dá)過濾器件廠)。

    1.2 方法

    1.2.1 大鼠移植性肝癌模型的建立

    參照程文等[4]的方法并加以改進(jìn),將培養(yǎng)好的CBRH-7919肝癌細(xì)胞懸液在無菌條件下注射于2只裸小鼠背部皮下,每只注射0.2 mL (約5×106個細(xì)胞)。2周后長成直徑1.5 cm大小的腫瘤,麻醉后在無菌條件下取出腫瘤,選擇邊緣的乳白色癌組織,用眼科剪剪成1 mm×1 mm×1 mm瘤塊。大鼠術(shù)前禁食12 h,10%水合氯醛0.3 mg/100 g腹腔注射麻醉后固定,消毒后在無菌條件下取劍突下正中切口打開腹腔。選擇肝左葉,以穿刺針在肝包膜下斜形作一深約8 mm的隧道,將預(yù)先裝在針芯內(nèi)的瘤塊緩慢推出植入肝內(nèi),用小塊明膠海綿封閉創(chuàng)口。手術(shù)當(dāng)天始連續(xù)5 d腹腔注射氫化可的松2 mg/只抑制免疫。

    1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組及給藥

    造模2周后,將荷瘤大鼠24只用簡單隨機(jī)抽樣法分為4組,每組6只。①外周靜脈組:經(jīng)尾靜脈注射給藥;②肝動脈組:經(jīng)胃十二指腸動脈插管至肝動脈給藥;③肝門靜脈組:經(jīng)胃網(wǎng)膜靜脈插管至肝門靜脈給藥;④肝動脈結(jié)扎的肝門靜脈組:先行肝動脈結(jié)扎后經(jīng)肝門靜脈給藥。大鼠的5-FU給藥劑量為20 mg/kg體質(zhì)量。

    1.2.3 肝動脈和門靜脈插管方法

    肝動脈組大鼠開腹后,分離出胃十二指腸動脈、肝總動脈及肝固有動脈。用動脈夾暫時(shí)阻斷肝總動脈,在胃十二指腸動脈遠(yuǎn)端插入外徑約0.5 mm的自制導(dǎo)管到肝固有動脈開口處,確認(rèn)管腔通暢后(松開動脈夾,可以看到導(dǎo)管內(nèi)血液波動),前端用已經(jīng)套好的絲線結(jié)扎并固定,按體質(zhì)量注入稀釋于0.9%NaCl溶液的5-FU注射液后結(jié)扎胃十二指腸動脈。同法,對肝門靜脈組大鼠行胃網(wǎng)膜靜脈插管經(jīng)腸系膜上靜脈至肝門靜脈給藥。

    1.2.4 標(biāo)本采集

    大鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉后,按上述不同途徑注射5-FU,給藥后10 min經(jīng)下腔靜脈取血2 mL,置于已肝素化的聚乙烯塑料管,1 400×g離心20 min取血漿,-20 ℃低溫保存;同時(shí)剝離肝臟腫瘤并切取癌旁肝臟組織約2 g,用0.9%NaCl溶液清洗后,置于玻璃研缽中研磨成勻漿,-20 ℃低溫保存,備用。

    1.2.5 測定5-FU濃度[5]

    采用高效液相色譜法(HPLC)測定大鼠血漿、肝癌和肝臟組織中5-FU的濃度。①標(biāo)本處理:取0.2 mL血漿或全部肝臟(或腫瘤)組織勻漿,加1 mL乙酰乙酯旋渦振蕩5 min,5 600×g離心10 min,吸取上清液于試管中,用氮?dú)獯蹈?。殘留物?00 μL流動相溶解,取20 μL進(jìn)樣測定;②HPLC色譜條件:色譜柱為Kromasil 100A C18柱(5 μ,250 mm×4.6 mm,迪馬公司);流動相為0.01 mol/L的磷酸二氫鉀緩沖液、流速為1 mL/min;紫外檢測波長為265 nm;進(jìn)樣量20 μL。使用三銳色譜工作軟件記錄色譜峰,自動計(jì)算峰面積;③制作標(biāo)準(zhǔn)曲線:分別取大鼠空白血漿0.2 mL或2 g空白肝臟的勻漿液,加入不同濃度的5-FU標(biāo)準(zhǔn)溶液,重復(fù)上述方法測定,以相應(yīng)的藥物濃度對色譜峰面積進(jìn)行線性回歸,得血漿和肝臟組織的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。①不同給藥途徑下5-FU區(qū)域灌注化療時(shí)肝癌、癌旁肝臟組織和血漿中的藥物濃度分布數(shù)據(jù)用±s表示。各組之間計(jì)量資料比較采用方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;②計(jì)算穿透比率(PR):PRLP=CL/CP,PRCP=CC/CP,PRCL=CC/ CL;PRLP為化療藥物在肝臟-血漿的穿透比率,PRCP為肝癌-血漿的穿透比率,PRCL為肝癌-肝臟組織的穿透比率;CP為血漿藥物濃度,CL為肝臟組織藥物濃度,CC為肝癌組織藥物濃度。

    2 結(jié) 果

    2.1 藥物在肝癌、癌旁肝臟組織和血漿中的濃度分布

    大鼠經(jīng)不同途徑灌注化療藥物5-FU后,藥物在肝癌、癌旁肝臟組織和血漿中的分布具有顯著的差異。外周靜脈組的血漿5-FU濃度最高,達(dá)(26.8±12.5)μg/mL,而癌旁肝臟組織和肝癌中的藥物濃度均為最低,癌灶中的濃度僅為(4.3±2.2)μg/g。結(jié)扎肝動脈的肝門靜脈組的藥物濃度在癌旁肝臟組織和肝癌中最高,分別為(22.1±9.5)μg/g和(16.4±7.2)μg/g;其次為肝動脈組,癌旁肝臟組織和肝癌中的濃度均稍低于前者;肝門靜脈組在肝癌中的濃度較低,為(8.9±3.7)μg/g。5-FU在上述3組中的血漿濃度分別為(15.9±10.1),(16.4±9.7)和(14.9±8.5) μg/mL,均顯著低于外周靜脈組,而3組之間的血藥濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,表1)。

    2.2 5-FU經(jīng)不同途徑灌注給藥后的穿透比率

    經(jīng)不同途徑灌注5-FU后,結(jié)扎肝動脈的肝門靜脈組的穿透比率最高,藥物在肝臟/血漿、肝癌/血漿和肝癌/肝臟間的穿透比率分別為139.19%、103.47%和74.33%;肝動脈組的穿透比率稍低;肝門靜脈組肝癌/血漿的穿透比率為59.58%,遠(yuǎn)低于前2組,而外周靜脈組的肝臟/血漿和肝癌/血漿穿透比率最小,分別為35.26%和16.08%(表2)。

    表1 5-FU經(jīng)不同途徑給藥后在大鼠肝臟、癌旁肝臟組織和血漿中的濃度分布Tab. 1 Distribution of 5-FU in rat hepatoma, liver tissue and plasma after different routes of administration

    表2 5-FU經(jīng)不同途徑灌注后在大鼠肝臟中的穿透比率Tab. 2 The penetration rates of 5-FU in the rats livers through different routes of administration

    3 討 論

    化療藥物殺滅或抑制癌變部位的腫瘤細(xì)胞,是通過在癌灶內(nèi)達(dá)到和維持一定的藥物濃度所產(chǎn)生的化學(xué)作用來實(shí)現(xiàn)的。要達(dá)到較好的化療效果,應(yīng)符合以下基本條件:①癌細(xì)胞要對化療藥物敏感;②藥物在癌灶或靶組織器官中有較高濃度;③藥物的不良反應(yīng)小,盡可能經(jīng)濟(jì)實(shí)惠。目前,化療是肝癌除手術(shù)以外一項(xiàng)重要的治療措施,肝癌全身化療效果不理想,有效率不超過20%。區(qū)域性灌注化療是目前常采用的化療方法,用于預(yù)防肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)和不能切除的晚期肝癌的治療[6-7]。

    5-FU在現(xiàn)有化療藥物中是對肝癌療效較好的藥物,且不良反應(yīng)小、價(jià)格便宜,是目前肝癌化療最常用的藥物[8]。本研究結(jié)果顯示,經(jīng)肝動脈、肝門靜脈和結(jié)扎肝動脈后的肝門靜脈3種途徑區(qū)域性灌注化療后,5-FU在癌旁肝臟組織和肝癌中的濃度分別為19.92~22.09 μg/g和8.86~16.42 μg/g,均顯著高于經(jīng)外周靜脈注射全身化療(9.45和4.31 μg/g)。相反,經(jīng)外周靜脈注射全身化療時(shí),5-FU的血漿藥物濃度高達(dá)26.80 μg/mL,明顯高于其它3個區(qū)域灌注化療組的血藥濃度(肝動脈組16.44 μg/mL,肝門靜脈組14.87 μg/mL和結(jié)扎肝動脈后的肝門靜脈組15.87 μg/mL)。從5-FU的穿透比率也可以看出,3組區(qū)域性灌注化療的肝臟/血漿和肝癌/血漿的穿透比率分別為132.79%~139.19%和59.58%~103.47%,均遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于外周靜脈注射全身化療??梢?,區(qū)域灌注化療可顯著提高肝臟和腫瘤中的藥物濃度、增加肝癌化療效果,同時(shí)顯著減少化療藥物在外周血中的暴露、降低藥物的不良反應(yīng)。

    經(jīng)肝動脈、肝門靜脈和結(jié)扎肝動脈的肝門靜脈3種不同途徑對肝癌進(jìn)行區(qū)域性灌注化療,藥物在肝臟和血漿中的分布差異不大,這與我們既往的研究結(jié)果一致[3],但肝癌組織中的藥物濃度存在較大的差異。經(jīng)結(jié)扎肝動脈的肝門靜脈和經(jīng)肝動脈灌注化療藥物時(shí),5-FU在癌灶中的濃度顯著大于單純經(jīng)肝門靜脈注射。原因可能是肝臟接受肝動脈和肝門靜脈雙重供血,肝臟從肝動脈血和肝門靜脈血中攝取氧量約各占一半,故經(jīng)肝動脈或肝門靜脈灌注化療藥物時(shí),5-FU在肝臟組織中的濃度差異不大;而肝癌的血液供應(yīng)90%~95%來自肝動脈,肝門靜脈供血只占很少的比例,因此,經(jīng)肝動脈灌注時(shí)肝癌的藥物濃度明顯大于經(jīng)肝門靜脈灌注。結(jié)扎肝動脈后,肝門靜脈血成為包括肝癌在內(nèi)的整個肝臟的唯一血液供應(yīng)來源,經(jīng)肝門靜脈灌注的化療藥物得以大量進(jìn)入癌灶內(nèi)。同時(shí)有研究表明[9-10],肝癌的血管并不與肝動脈直接溝通,而是與瘤體的末梢肝門靜脈和肝竇相通,藥物是經(jīng)這些吻合支進(jìn)入腫瘤組織的,這也可能是結(jié)扎肝動脈后肝門靜脈灌注5-FU在肝癌病灶中的濃度和穿透比率較單一的門靜脈灌注時(shí)得以顯著提高的緣故。

    綜上所述,區(qū)域性灌注化療可通過有效提高肝癌和肝臟中的藥物濃度而增加化療效果,同時(shí)顯著減少藥物在外周血中的分布、降低毒副作用,其中經(jīng)結(jié)扎肝動脈的肝門靜脈灌注和經(jīng)肝動脈灌注是肝癌區(qū)域性灌注化療的2種較好途徑。

    [1] CAGOL P P, PASQUAL E, BACCHETTI S. Potential advantages of loco-regional intra-arterial chemotherapy[J]. In Vivo, 2006, 20(6A): 777-779.

    [2] KIRCHHOFF T D, BLECK J S, DETTMER A, et al. Transarterial chemoembolization using degradable starch microspheres and iodized oil in the treatment of advanced hepatocellular carcinoma: evaluation of tumor response, toxicity, and survival[J]. Hepatobiliary Pancreat Dis Int, 2007, 6(3): 259-266.

    [3] 鄭驚雷, 梁力建, 胡文杰, 等. 區(qū)域性灌注化療時(shí)5-FU的血液和肝臟組織藥物濃度分布特征[J]. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2008, 28(5):823-827.

    [4] 程文, 張青萍, 貢雪灝, 等. 超聲監(jiān)護(hù)下免疫抑制大鼠肝癌模型的建立[J]. 中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù), 2003, 19(7): 840-842.

    [5] 谷元, 陸榕, 司端運(yùn), 等. Determination of 5-fluorouracil in human plasma by high-performance liquid chromatography (HPLC)[J]. 天津大學(xué)學(xué)報(bào)(英文版), 2010, 16(3):167-173.

    [6] SCHWARTZ M, ROAYAIE S, KONSTADOULAKIS M. Strategies for the management of hepatocellular carcinoma[J]. Nat Clin Pract Oncol, 2007, 4(7): 424-432.

    [7] LIANG H L, HUANG J S, LIN Y H, et al. Hepatic arterial infusion chemotherapy for advanced hepatocellular carcinoma by placing a temporary catheter via the subclavian route[J]. Acta Radiol, 2007, 48(7):734-740.

    [8] WADA H, NAGANO H, NODA T, et al. Complete remission of hepatocellular carcinoma with portal vein tumor thrombus and lymph node metastases by arterial infusion of 5-fluorouracil and interferon-alpha combination therapy following hepatic resection[J]. J Gastroenterol, 2007, 42(6):501-506.

    [9] 高潔, 張華, 趙化榮, 等. 新疆地區(qū)246例維吾爾族原發(fā)性肝癌預(yù)后因素及療效分析[J]. 中國癌癥雜志, 2013, 23(5): 362-369.

    [10] VOBORIL R. Blood supply of metastatic liver tumors: an experimental study[J]. Int Surg, 2005, 90(2):71-77.

    Distribution of 5-FU in rat hepatoma, liver tissue and plasma after locoregional infusion

    ZHENG Jinglei1, LIANG Lijian2, WANG Zaiguo1, HUANG Wenjing3, WANG Xueding4(1. Department of Oncosurgery, Dongguan People’s Hospital, Dongguan Guangdong 523059, China; 2.Department of Hepatobiliary, the First Affiliated Hospital, Sun Yat-sen University, Guangzhou Guangdong 510080, China; 3. Guangdong Institute of Drug, Guangzhou Guangdong 510180, China; 4. School of Pharmaceutical Sciences, Sun Yat-sen University, Guangzhou Guangdong 510080, China)

    ZHENG Jinglei E-mail: jlzheng@126.com

    Background and purpose:Locoregional infusion chemotherapy such as hepatic artery, or hepaticportal vein infusion is one of the most important treatments for hepatocelluar carcinoma. This study was aimed to investigate the distribution of fluorouracil(5-FU) in rat hepatoma, liver tissue and plasma after administrated by caudal vein or locoregional routes of hepatic artery, hepaticportal vein, and hepaticportal vein with ligated hepatic artery.Methods:Twenty-four tumor-bearing rats were divided into 4 groups randomly, and they were infused with 5-FU through peripheral vein(caudal vein), hepatic artery, hepaticportal vein or hepaticportal vein with ligated hepatic artery, which dose was 20 mg/kg. High performance liquid chromatography was adopted to measure the content of 5-FU in hepatoma, liver tissue and plasma, and the drug penetration rate among them were calculated.Results:The group of hepaticportal vein with ligated hepatic artery reached the highest concentrations of 5-FU in live tissue andhepatoma, which concentrations were (22.1±9.5) μg/g and (16.4±7.2) μg/g. Then was the hepatic artery group, and the concentration of the hepaticportal vein group in the hepatoma focus was much smaller than the former 2 groups, which was (8.9±3.7) μg/g. The peripheral vein group got the lowest concentrations both in the liver tissue and hepatoma, which were (9.4±3.7) and (4.3±2.2) μg/g. The concentrations of 5-FU in the plasma in the peripheral vein group, the hepatic artery group, the group of hepaticportal vein with ligated hepatic artery and the hepaticportal vein group were (26.8±12.5), (16.4±9.7), (15.9±10.1) and (14.9±8.5) μg/mL, which indicated that the drug concentrations of the latter 3 groups were much lower than the former group. The hepatoma/plasma penetration rate of 5-FU in the group of hepaticportal vein with ligated hepatic artery, the hepatic artery group, the hepaticportal vein group and the peripheral vein group were 103.47%, 92.94%, 59.58% and 16.08%.Conclusion:Compared to the peripheral venous bolus injection, locoregional infusion could significantly increase the concentrations of chemotherapy agent in hepatoma focus and liver tissue, and decrease the drug distributions in peripheral blood. And the infusion through hepaticportal vein with ligated hepatic artery and through hepatic artery reaches higher concentrations in the hepatoma focuses, which indicate that they are 2 practical and promising routes for the locoregional chemotherapy of hepatoma.

    Fluorouracil; Hepatoma; Regional chemotherapy; Penetration rate

    10.3969/j.issn.1007-3969.2015.01.008

    R735.7;R73-36

    A

    1007-3639(2015)01-0045-05

    2014-03-16

    2014-12-03)

    廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2011B020800001)、廣東省醫(yī)學(xué)科研基金(B2010324)、東莞市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2010105150009)。

    鄭驚雷 E-mail:jlzheng@126.com

    猜你喜歡
    經(jīng)肝門靜脈血漿
    糖尿病早期認(rèn)知功能障礙與血漿P-tau217相關(guān)性研究進(jìn)展
    血漿置換加雙重血漿分子吸附對自身免疫性肝炎合并肝衰竭的細(xì)胞因子的影響
    3.0T MR NATIVE True-FISP與VIBE序列在肝臟門靜脈成像中的對比研究
    基于W-Net的肝靜脈和肝門靜脈全自動分割
    經(jīng)肝穿刺膽道引流置管出院患者電話隨訪效果的觀察
    CHF患者血漿NT-proBNP、UA和hs-CRP的變化及其臨床意義
    腦卒中后中樞性疼痛相關(guān)血漿氨基酸篩選
    肝臟門靜脈積氣1例
    經(jīng)皮經(jīng)肝膽囊穿刺造瘺術(shù)治療老年急性重癥膽囊炎臨床價(jià)值研究
    經(jīng)肝動脈化療栓塞聯(lián)合同步射頻消融術(shù)治療單個大肝癌的初步臨床研究
    久久久久久九九精品二区国产| 高清日韩中文字幕在线| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 精品人妻偷拍中文字幕| 伦理电影大哥的女人| 99热这里只有是精品50| 女性被躁到高潮视频| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产精品av视频在线免费观看| 国产有黄有色有爽视频| 久久久久久久久久成人| 特大巨黑吊av在线直播| 久久久色成人| 免费观看性生交大片5| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产极品天堂在线| 亚洲色图av天堂| 日韩欧美一区视频在线观看 | 日韩一本色道免费dvd| 亚洲久久久国产精品| 男男h啪啪无遮挡| 日本午夜av视频| 伊人久久精品亚洲午夜| 在线观看一区二区三区激情| 国产精品一二三区在线看| 国产精品久久久久久av不卡| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 内射极品少妇av片p| 涩涩av久久男人的天堂| 久久久色成人| 成人影院久久| 亚洲av男天堂| 婷婷色麻豆天堂久久| 性高湖久久久久久久久免费观看| 日韩电影二区| 久久久久久久久久久丰满| 免费在线观看成人毛片| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 欧美少妇被猛烈插入视频| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 中文字幕av成人在线电影| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产午夜精品一二区理论片| 老熟女久久久| 色视频www国产| 黄色视频在线播放观看不卡| 天天躁日日操中文字幕| 亚洲精品国产成人久久av| 少妇人妻 视频| 日日啪夜夜撸| 天堂中文最新版在线下载| 大香蕉久久网| 亚洲无线观看免费| 99热这里只有是精品50| 热re99久久精品国产66热6| 男人爽女人下面视频在线观看| 99久久综合免费| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲欧洲日产国产| 久久久久久伊人网av| 一区在线观看完整版| 色婷婷av一区二区三区视频| 日韩伦理黄色片| 两个人的视频大全免费| 国产精品一区二区三区四区免费观看| av视频免费观看在线观看| 高清毛片免费看| 男人狂女人下面高潮的视频| 日本欧美国产在线视频| 黄色怎么调成土黄色| 精品久久国产蜜桃| 少妇丰满av| 欧美精品一区二区大全| 精品少妇黑人巨大在线播放| 一级爰片在线观看| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲四区av| 校园人妻丝袜中文字幕| 欧美国产精品一级二级三级 | a级一级毛片免费在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲国产最新在线播放| 我要看日韩黄色一级片| www.色视频.com| 黄片无遮挡物在线观看| 在线观看一区二区三区激情| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲av免费高清在线观看| 青春草亚洲视频在线观看| 一级毛片电影观看| 大片电影免费在线观看免费| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 26uuu在线亚洲综合色| 一区在线观看完整版| 亚洲美女黄色视频免费看| 两个人的视频大全免费| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 黄色一级大片看看| 国产成人freesex在线| 97超碰精品成人国产| kizo精华| 欧美一级a爱片免费观看看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产在线一区二区三区精| 亚洲国产成人一精品久久久| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲国产精品成人久久小说| 在现免费观看毛片| 美女cb高潮喷水在线观看| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲国产精品一区三区| 亚洲自偷自拍三级| 国产精品人妻久久久影院| 一本色道久久久久久精品综合| 亚洲怡红院男人天堂| 亚洲美女视频黄频| 大码成人一级视频| 一级毛片 在线播放| 高清日韩中文字幕在线| 色吧在线观看| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲美女视频黄频| 国产成人91sexporn| 美女国产视频在线观看| 26uuu在线亚洲综合色| 精华霜和精华液先用哪个| 日本午夜av视频| 欧美bdsm另类| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲精品自拍成人| 久久精品人妻少妇| 男女边摸边吃奶| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲精品自拍成人| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 久久久久久九九精品二区国产| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲精品自拍成人| 午夜福利在线在线| 亚洲精品自拍成人| 亚洲美女黄色视频免费看| 哪个播放器可以免费观看大片| 少妇被粗大猛烈的视频| av免费观看日本| 3wmmmm亚洲av在线观看| 视频区图区小说| 哪个播放器可以免费观看大片| 久久久午夜欧美精品| 精品人妻偷拍中文字幕| 制服丝袜香蕉在线| 99精国产麻豆久久婷婷| .国产精品久久| 久久99精品国语久久久| 国产黄频视频在线观看| 国产黄色免费在线视频| freevideosex欧美| 免费人妻精品一区二区三区视频| 老司机影院毛片| 一个人看的www免费观看视频| 黄色配什么色好看| 一个人看视频在线观看www免费| 97超碰精品成人国产| 国产探花极品一区二区| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国产伦理片在线播放av一区| 日韩国内少妇激情av| 伦精品一区二区三区| 岛国毛片在线播放| 国产在线男女| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲国产精品999| 亚洲中文av在线| 欧美xxⅹ黑人| 中文天堂在线官网| 国产精品久久久久久久电影| 交换朋友夫妻互换小说| 国产精品福利在线免费观看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲av.av天堂| 大码成人一级视频| 搡老乐熟女国产| 草草在线视频免费看| 久久久成人免费电影| 亚洲自偷自拍三级| 成人影院久久| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 免费观看无遮挡的男女| 最近手机中文字幕大全| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 久久热精品热| 日本与韩国留学比较| 欧美日韩视频精品一区| 美女国产视频在线观看| 高清日韩中文字幕在线| a级毛片免费高清观看在线播放| 久久久久久久精品精品| 欧美性感艳星| 毛片一级片免费看久久久久| av不卡在线播放| 少妇熟女欧美另类| 天堂俺去俺来也www色官网| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲国产精品国产精品| 秋霞伦理黄片| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲av综合色区一区| 午夜激情福利司机影院| 日韩强制内射视频| 亚洲成色77777| 视频区图区小说| 一本色道久久久久久精品综合| 国产精品三级大全| 91久久精品国产一区二区成人| 简卡轻食公司| 久久精品久久久久久久性| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 日韩一区二区视频免费看| 久久鲁丝午夜福利片| 1000部很黄的大片| 精华霜和精华液先用哪个| 国产亚洲欧美精品永久| 精品少妇久久久久久888优播| 99久久精品国产国产毛片| 成年免费大片在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 97超碰精品成人国产| 久久久久久久久久人人人人人人| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 日本色播在线视频| 日韩中文字幕视频在线看片 | 国产深夜福利视频在线观看| 久久精品国产a三级三级三级| 免费黄网站久久成人精品| 精品久久久噜噜| 日韩国内少妇激情av| av福利片在线观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 亚洲av男天堂| 成人漫画全彩无遮挡| 亚洲av免费高清在线观看| 国产深夜福利视频在线观看| 久久亚洲国产成人精品v| 免费av不卡在线播放| 久久热精品热| av在线观看视频网站免费| 久久久久久久久大av| 成人影院久久| 美女cb高潮喷水在线观看| 乱系列少妇在线播放| av视频免费观看在线观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 日本vs欧美在线观看视频 | 亚洲精品日韩av片在线观看| 日本色播在线视频| 国产精品欧美亚洲77777| 最后的刺客免费高清国语| 久久精品夜色国产| 欧美高清性xxxxhd video| 久久久精品免费免费高清| .国产精品久久| 男女边摸边吃奶| 亚洲av成人精品一二三区| 精品久久久久久久久av| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 在线 av 中文字幕| 国产视频内射| 在线观看一区二区三区激情| 91精品一卡2卡3卡4卡| 国产精品久久久久久久电影| 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲av男天堂| 搡老乐熟女国产| 国产精品熟女久久久久浪| av线在线观看网站| 国产成人freesex在线| 这个男人来自地球电影免费观看 | 黑人猛操日本美女一级片| 精品久久久久久电影网| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 成人漫画全彩无遮挡| 国内精品宾馆在线| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 国产高潮美女av| 午夜福利网站1000一区二区三区| 看非洲黑人一级黄片| 免费大片18禁| 成年人午夜在线观看视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 日本欧美视频一区| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 黄色一级大片看看| 边亲边吃奶的免费视频| 亚洲伊人久久精品综合| 一级二级三级毛片免费看| 国产精品熟女久久久久浪| 内地一区二区视频在线| 91狼人影院| 成人毛片60女人毛片免费| 久久久久精品久久久久真实原创| 久久久久人妻精品一区果冻| 热99国产精品久久久久久7| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 在线观看一区二区三区| 欧美另类一区| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲av在线观看美女高潮| 网址你懂的国产日韩在线| 欧美bdsm另类| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产69精品久久久久777片| 欧美高清成人免费视频www| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 免费av中文字幕在线| 国产精品熟女久久久久浪| 国产成人精品一,二区| 高清午夜精品一区二区三区| 国产精品av视频在线免费观看| 天天躁日日操中文字幕| 欧美高清性xxxxhd video| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲欧美日韩无卡精品| 丰满迷人的少妇在线观看| 97精品久久久久久久久久精品| 日韩视频在线欧美| 我的老师免费观看完整版| 777米奇影视久久| 最近手机中文字幕大全| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产高清不卡午夜福利| 七月丁香在线播放| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 最近最新中文字幕大全电影3| 插逼视频在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 精品久久久精品久久久| 99热这里只有是精品50| 在线看a的网站| 国产亚洲欧美精品永久| 国产精品熟女久久久久浪| 在线观看一区二区三区激情| 日本-黄色视频高清免费观看| av免费在线看不卡| 亚洲精品国产av成人精品| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 夫妻性生交免费视频一级片| 成人国产麻豆网| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产视频内射| 中文资源天堂在线| 日日啪夜夜撸| 国产亚洲欧美精品永久| a 毛片基地| 国产精品人妻久久久久久| 这个男人来自地球电影免费观看 | 一边亲一边摸免费视频| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 中国美白少妇内射xxxbb| 日韩中字成人| 国产人妻一区二区三区在| 夜夜爽夜夜爽视频| 欧美区成人在线视频| 亚洲国产精品专区欧美| 插阴视频在线观看视频| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 欧美日韩综合久久久久久| 七月丁香在线播放| 国模一区二区三区四区视频| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 欧美日韩综合久久久久久| 99久久精品热视频| 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲美女搞黄在线观看| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲av男天堂| 成年人午夜在线观看视频| 少妇的逼水好多| 免费人妻精品一区二区三区视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 极品少妇高潮喷水抽搐| 1000部很黄的大片| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 国产色爽女视频免费观看| 亚洲最大成人中文| 国产伦精品一区二区三区视频9| 免费观看的影片在线观看| 中文字幕久久专区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 观看美女的网站| 中文字幕av成人在线电影| 三级国产精品欧美在线观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产精品不卡视频一区二区| 精品人妻视频免费看| 大片免费播放器 马上看| 成人美女网站在线观看视频| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 久久精品国产a三级三级三级| 成人亚洲精品一区在线观看 | 国产综合精华液| 精品人妻一区二区三区麻豆| 91久久精品电影网| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 中文字幕制服av| 日本-黄色视频高清免费观看| 精品一区在线观看国产| 国产中年淑女户外野战色| 国产成人freesex在线| av免费观看日本| 国产在视频线精品| 精品视频人人做人人爽| 一区在线观看完整版| 能在线免费看毛片的网站| 观看免费一级毛片| av网站免费在线观看视频| 国产亚洲最大av| 如何舔出高潮| 中文天堂在线官网| 一级毛片电影观看| 国产深夜福利视频在线观看| 91精品一卡2卡3卡4卡| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲自偷自拍三级| 久久精品久久久久久久性| 免费大片黄手机在线观看| 亚洲精品色激情综合| 久久精品国产亚洲网站| 成人亚洲精品一区在线观看 | 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 欧美高清性xxxxhd video| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久久久久久久久久丰满| 成年美女黄网站色视频大全免费 | av黄色大香蕉| 永久免费av网站大全| 偷拍熟女少妇极品色| 亚州av有码| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 伊人久久国产一区二区| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 久久97久久精品| 精品一品国产午夜福利视频| 国产精品无大码| 国产精品久久久久久av不卡| 男人添女人高潮全过程视频| 全区人妻精品视频| 国产视频首页在线观看| 日日啪夜夜爽| 日韩一本色道免费dvd| 嫩草影院新地址| 日韩视频在线欧美| 男人舔奶头视频| 久久97久久精品| 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲美女视频黄频| 一级黄片播放器| 波野结衣二区三区在线| 欧美少妇被猛烈插入视频| 直男gayav资源| 亚洲精品视频女| 99久久综合免费| 91精品一卡2卡3卡4卡| 国产成人91sexporn| 国产视频内射| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 综合色丁香网| 亚洲av成人精品一区久久| 少妇被粗大猛烈的视频| 极品教师在线视频| 2022亚洲国产成人精品| 久久久久精品性色| 成人亚洲精品一区在线观看 | 六月丁香七月| 欧美高清成人免费视频www| 七月丁香在线播放| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 国产69精品久久久久777片| 欧美最新免费一区二区三区| 午夜激情久久久久久久| av女优亚洲男人天堂| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 在线观看人妻少妇| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产免费福利视频在线观看| 久久 成人 亚洲| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 色婷婷av一区二区三区视频| 美女高潮的动态| 国产免费一级a男人的天堂| 好男人视频免费观看在线| 国产精品不卡视频一区二区| xxx大片免费视频| av线在线观看网站| 精品人妻视频免费看| 久久久久网色| 大陆偷拍与自拍| 国产综合精华液| 午夜免费男女啪啪视频观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 久久人人爽人人片av| 久久女婷五月综合色啪小说| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 少妇人妻 视频| 亚洲av综合色区一区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲综合精品二区| 成人亚洲精品一区在线观看 | 人妻系列 视频| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 中文资源天堂在线| 有码 亚洲区| 国产日韩欧美亚洲二区| 成人黄色视频免费在线看| 久久久久网色| 国产熟女欧美一区二区| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲,欧美,日韩| 国产亚洲最大av| 日韩一区二区视频免费看| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久久久久久久久久丰满| 日本av免费视频播放| 少妇熟女欧美另类| 日韩一本色道免费dvd| 老司机影院成人| 亚洲成人av在线免费| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲,欧美,日韩| 久久ye,这里只有精品| 男人添女人高潮全过程视频| 在线观看三级黄色| av线在线观看网站| 精品人妻视频免费看| 免费黄色在线免费观看| 欧美区成人在线视频| 国产高清有码在线观看视频| av视频免费观看在线观看| 国产成人91sexporn| 中文字幕亚洲精品专区| 中文欧美无线码| 成年免费大片在线观看| 日韩av在线免费看完整版不卡| 高清欧美精品videossex| 欧美区成人在线视频| 久久午夜福利片| 看免费成人av毛片| 一级毛片久久久久久久久女| 亚洲精品一二三| 中文精品一卡2卡3卡4更新| av在线app专区| 日本vs欧美在线观看视频 | 丝袜脚勾引网站| 亚洲第一区二区三区不卡| 日日摸夜夜添夜夜爱| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 观看美女的网站| 亚洲国产精品999| 久久ye,这里只有精品| 国产又色又爽无遮挡免| 欧美另类一区| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产精品欧美亚洲77777| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| av专区在线播放| 大码成人一级视频| 国产高清三级在线| 一级毛片 在线播放| videos熟女内射| 色婷婷av一区二区三区视频| av线在线观看网站| 男女下面进入的视频免费午夜| 美女视频免费永久观看网站| av播播在线观看一区| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲av福利一区| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲av.av天堂| 一级爰片在线观看| 777米奇影视久久| 夜夜爽夜夜爽视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 青春草视频在线免费观看| 有码 亚洲区| 免费看不卡的av| 一级二级三级毛片免费看| 亚洲久久久国产精品| 91在线精品国自产拍蜜月| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 午夜福利在线在线| 青春草国产在线视频| 中文欧美无线码| 晚上一个人看的免费电影| 久久久久精品久久久久真实原创| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 内地一区二区视频在线| 日韩精品有码人妻一区| 国产乱人偷精品视频| 亚洲av.av天堂| 中文字幕久久专区| 久久久精品94久久精品|