不同免疫檢驗(yàn)方法檢測(cè)乙肝病毒感染血清標(biāo)志物的對(duì)比評(píng)價(jià)

張軼

[摘要] 目的 探討不同免疫檢驗(yàn)方法檢測(cè)乙肝病毒感染血清標(biāo)志物的效果差異性。方法 方便選擇2016年8月—2017年8月間該院收治的80例乙肝病毒感染患者實(shí)施觀察研究，對(duì)所有患者均實(shí)施電化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)，分析總結(jié)兩種免疫檢測(cè)方式對(duì)患者血清標(biāo)志物（表面抗原HBsAg、表面抗體HBsAb、e抗原HBeAg、e抗體HBeAb、核心抗體HBcAb）檢測(cè)結(jié)果差異性。結(jié)果 電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HBsAg、HBeAg、HBeAb陽(yáng)性率70.0%、31.3%、28.8%較酶聯(lián)免疫吸附法52.5%、17.5%、15.0%相比明顯升高（P=0.023、0.043、0.035）。電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HBsAb、HBcAb陽(yáng)性率17.5%、72.5%較酶聯(lián)免疫吸附法15.0%、70.0%相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.668、0.727）。實(shí)施電化學(xué)發(fā)光法對(duì)乙肝病毒感染診斷準(zhǔn)確率97.5%較酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)準(zhǔn)確率83.8%明顯較高（P=0.003）。結(jié)論 免疫檢驗(yàn)方法中電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)乙肝病毒感染血清標(biāo)志物效果優(yōu)于酶聯(lián)免疫吸附法。

[關(guān)鍵詞] 免疫檢驗(yàn)；電化學(xué)發(fā)光法；酶聯(lián)免疫吸附法；乙肝病毒感染；血清標(biāo)志物

[中圖分類號(hào)] R5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2017）12（c）-0035-03

[Abstract] Objective This paper tries to investigate the difference clinic effect of different immunoassay methods in detecting serum markers of hepatitis B virus infection. Methods 80 patients with hepatitis B virus infection were convenient selected from August 2016 to August 2017 in this department. All patients were examined by electrochemiluminescence and enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， and the results of two immunoassay methods Patient serum markers （surface antigen HBsAg， surface antibody HBsAb， e-antigen HBeAg， e-antibody HBeAb， core antibody HBcAb） test results differences. Results The positive rates of HBsAg， HBeAg and HBeAb by electrochemiluminescence were 70.0%， 31.3% and 28.8%， respectively， which were significantly higher than those by enzyme-linked immunosorbent assay of 52.5%， 17.5% and 15.0% （P=0.023， 0.043， 0.035）. The positive rate of HBsAb and HBcAb detected by electrochemiluminescence was 17.5%， 72.5% compared with 15.0% and 70.0% of enzyme-linked immunosorbent assay （P=0.668， 0.727）. The diagnostic accuracy of electrochemiluminescence assay for hepatitis B virus infection was 97.5%， which was significantly higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay （83.8%） （P=0.003）. Conclusion Immunoassay method in the detection of hepatitis B virus infection by electrochemiluminescence method serum markers better than enzyme-linked immunosorbent assay.

[Key words] Immunoassay； Electrochemiluminescence； Enzyme-linked immunosorbent assay； Hepatitis B virus infection； Serum markers

乙肝病毒感染是引起引發(fā)乙型病毒性肝炎、肝硬化、肝癌的重要因素，嚴(yán)重威脅患者生命安全。加強(qiáng)對(duì)乙肝病毒感染的早期診斷，及時(shí)確定患者感染狀況是防治乙型病毒性肝炎的關(guān)鍵。乙肝病毒感染血清標(biāo)志物檢測(cè)是了解乙肝病毒感染后機(jī)體免疫過(guò)程的重要指標(biāo)，也是當(dāng)前臨床了解乙肝病毒感染的重要檢測(cè)方式[1]。目前臨床檢測(cè)乙肝病毒感染血清標(biāo)志物的方式主要分為電化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附法。但臨床對(duì)于上述兩種檢查方式的選擇仍存在一定爭(zhēng)議。基于以上原因，對(duì)2016年8月—2017年8月間該院收治的80例乙肝病毒感染患者均實(shí)施了電化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)患者血清標(biāo)志物狀況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選擇該院收治的80例乙肝病毒感染患者實(shí)施觀察研究?；颊咧泻心?8例，女32例；患者年齡跨度20～76歲，平均年齡（45.3±9.5）。納入標(biāo)準(zhǔn)：實(shí)施臨床檢測(cè)、病毒檢測(cè)等確診為乙肝病毒感染患者；自愿簽署知情同意書患者；研究過(guò)程經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：其他病毒性感染患者；惡性腫瘤性疾病、嚴(yán)重心肺腎功能損傷患者；妊娠、哺乳狀態(tài)患者；其他類型肝炎及肝病患者；精神障礙患者；不配合檢查患者。endprint

1.2 方法

對(duì)所有患者均實(shí)施電化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝病毒感染血清標(biāo)志物（表面抗原HBsAg、表面抗體HBsAb、e抗原HBeAg、e抗體HBeAb、核心抗體HBcAb）狀況。采集患者清晨空腹?fàn)顟B(tài)靜脈血5 mL，分置于兩支試管，常規(guī)離心分離，轉(zhuǎn)速為3 000 r/min，5 min后取血清實(shí)施檢查。電化學(xué)發(fā)光法：使用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套檢測(cè)試劑實(shí)施檢查，實(shí)施電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)：使用AWARENESS酶標(biāo)儀酶標(biāo)儀及相關(guān)試劑盒實(shí)施檢查，行酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)。所有檢測(cè)過(guò)程均參照器械使用說(shuō)明書及試劑盒使用說(shuō)明書實(shí)施，使用定值參比血清進(jìn)行質(zhì)控。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）分析總結(jié)兩種免疫檢測(cè)方式對(duì)患者血清標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果差異性。（2）分析總結(jié)兩種免疫檢測(cè)方式對(duì)患者乙肝病毒感染檢測(cè)準(zhǔn)確性。檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為：①電化學(xué)發(fā)光法：HBsAg陽(yáng)性：檢測(cè)水平>0.05 IU/mL；HBsAb陽(yáng)性：檢測(cè)水平>10 IU/mL；HBeAg陽(yáng)性：標(biāo)本相對(duì)光強(qiáng)度/臨界相對(duì)光強(qiáng)度水平≥1.0；HBeAb陽(yáng)性：標(biāo)本相對(duì)光強(qiáng)度/臨界相對(duì)光強(qiáng)度水平≤1.0；HBcAb陽(yáng)性：標(biāo)本相對(duì)光強(qiáng)度/臨界相對(duì)光強(qiáng)度水平≥1.0。②酶聯(lián)免疫吸附法：HBsAg陽(yáng)性：標(biāo)本相對(duì)光強(qiáng)度/臨界相對(duì)光強(qiáng)度水平≥1.0；HBsAb陽(yáng)性：標(biāo)本相對(duì)光強(qiáng)度/臨界相對(duì)光強(qiáng)度水平≥1.0；HBeAg陽(yáng)性：標(biāo)本相對(duì)光強(qiáng)度/臨界相對(duì)光強(qiáng)度水平≥1.0；HBeAb陽(yáng)性：標(biāo)本相對(duì)光強(qiáng)度/臨界相對(duì)光強(qiáng)度水平≤1.0；HBcAb陽(yáng)性：標(biāo)本相對(duì)光強(qiáng)度/臨界相對(duì)光強(qiáng)度水平≤1.0[2]。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，用[n（%）]表示檢測(cè)陽(yáng)性率及準(zhǔn)確率，χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種免疫檢測(cè)方式對(duì)患者血清標(biāo)志物測(cè)結(jié)果差異性分析

電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HBsAg、HBeAg、HBeAb陽(yáng)性率較酶聯(lián)免疫吸附法相比明顯升高（P<0.05）。電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HBsAb、HBcAb陽(yáng)性率較酶聯(lián)免疫吸附法相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。詳見(jiàn)下表1。

2.2 兩種免疫檢測(cè)方式對(duì)患者乙肝病毒感染檢測(cè)準(zhǔn)確性分析

實(shí)施電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)確診存在乙肝病毒感染78例，實(shí)施酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)確診存在乙肝病毒感染67例。實(shí)施電化學(xué)發(fā)光法對(duì)乙肝病毒感染診斷準(zhǔn)確率97.5%較酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)準(zhǔn)確率83.8%明顯較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8.901，P=0.003）。

3 討論

乙肝病毒感染是導(dǎo)致乙型肝炎發(fā)生的主要原因。乙肝病毒屬于DNA病毒，為嗜肝DNA病毒科，其耐熱、耐低溫、耐紫外線能力較強(qiáng)，治療難度較大，當(dāng)乙肝病毒侵入機(jī)體后，將攻擊機(jī)體肝臟，并在肝細(xì)胞內(nèi)定植、繁殖、復(fù)制，引起肝細(xì)胞損傷，誘發(fā)乙型肝炎發(fā)生。且臨床研究顯示乙肝病毒還具有泛酸性，其對(duì)于胃黏膜細(xì)胞、胰腺細(xì)胞、膽管上皮細(xì)胞、腎小管細(xì)胞等相關(guān)細(xì)胞也具有一定損傷作用，影響患者生命安全。加強(qiáng)對(duì)乙肝病毒感染的早期診斷，及時(shí)對(duì)患者進(jìn)行針對(duì)性抗病毒治療是控制患者肝損傷狀況，積極預(yù)防肝硬化及肝癌發(fā)生的關(guān)鍵。

乙肝病毒血清標(biāo)志物是了解機(jī)體免疫反應(yīng)的重要指標(biāo)。HbsAg是乙肝病毒外殼蛋白，其本身不具備傳染性，乙肝病毒感染后HbsAg水平將明顯升高。HbsAg是乙肝病毒感染的重要標(biāo)志，可在一個(gè)病毒感染后1～2周內(nèi)出現(xiàn)，并在感染2～6個(gè)月明顯升高，部分患者可表現(xiàn)為持續(xù)性陽(yáng)性狀態(tài)。HBsAb是在HBsAg刺激下產(chǎn)生的相應(yīng)抗體，可與HBsAg結(jié)合，并與其他免疫過(guò)程共同清除乙肝病毒，控制機(jī)體乙肝病毒感染狀況。HBsAb是中和抗體，可反映乙肝病毒感染后機(jī)體免疫反應(yīng)狀況，當(dāng)HBsAb明顯升高時(shí)，提示機(jī)體在乙肝病毒感染后已經(jīng)出現(xiàn)免疫力，其多在血清HBsAg轉(zhuǎn)陰后2周左右才能在血清中檢出。HBeAg是乙肝病毒核心顆粒中的可溶性蛋白質(zhì)，存在于HBcAg內(nèi)，多在HBcAg裂解后溶入血清，HBeAg多在HbsAg出現(xiàn)時(shí)間與消失時(shí)間之間出現(xiàn)，是乙肝病毒感染的重要指標(biāo)，HBeAg陽(yáng)性時(shí)表示患者具有高傳染性，處于病情活動(dòng)期。HBeAb是因HBeAg刺激產(chǎn)生的相應(yīng)抗體，其對(duì)機(jī)體無(wú)保護(hù)作用，HBeAb的出現(xiàn)表示乙肝病毒復(fù)制過(guò)程相對(duì)靜止，患者病情得到控制，傳染性較低。HBcAb是乙型肝炎核心抗原刺激肝細(xì)胞產(chǎn)生的免疫球蛋白，其本身對(duì)機(jī)體無(wú)保護(hù)作用，HBcAb的出現(xiàn)反映了乙肝病毒復(fù)制活躍度狀況，其水平越高表示患者傳染性越強(qiáng)。HBcAb可持續(xù)數(shù)十年甚至終身陽(yáng)性[3-4]。因此，及時(shí)了解患者乙肝病毒血清標(biāo)志物狀況是了解患者病情狀態(tài)及機(jī)體免疫狀況的重要指標(biāo)。

電化學(xué)發(fā)光免疫法與酶聯(lián)免疫吸附法是目前臨床檢測(cè)血清學(xué)指標(biāo)的常用方法。酶聯(lián)免疫吸附法是將受檢標(biāo)本與酶標(biāo)抗原及抗體在不同步驟下與固相載體表面抗原及抗體發(fā)生特定反應(yīng)，通過(guò)酶與底物出現(xiàn)的特定顏色反應(yīng)實(shí)施定量檢測(cè)的檢測(cè)方式[5]。該檢測(cè)方式不僅可用于抗原測(cè)定，還可用于抗體測(cè)定，其檢測(cè)過(guò)程較為簡(jiǎn)單，檢測(cè)成本較低，臨床應(yīng)用較為廣泛。電化學(xué)發(fā)光法是利用化學(xué)檢測(cè)中待測(cè)物濃度與體系化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度在一定條件下表現(xiàn)為線性定量關(guān)系，通過(guò)儀器檢測(cè)體系電化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，進(jìn)而確定待測(cè)物含量的檢測(cè)方式[6]。實(shí)施電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)時(shí)診斷范圍較廣，操作較為簡(jiǎn)單，操作時(shí)間較短，優(yōu)勢(shì)較多。在殷蓓琦等人[7]的相關(guān)研究中，對(duì)酶聯(lián)免疫法、免疫膠體金法、電化學(xué)發(fā)光免疫分析法3種檢測(cè)方式的效果實(shí)施了分析，結(jié)果顯示電化學(xué)發(fā)光免疫分析法敏感性最高，達(dá)96.0%，其次為酶聯(lián)免疫法80.0%，免疫膠體金法最低，為72.0%。該研究中電化學(xué)發(fā)光法對(duì)乙肝病毒感染診斷準(zhǔn)確率97.5%也較酶聯(lián)免疫吸附法83.8%更高，2種研究結(jié)果相符。該研究中電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HBsAg、HBeAg、HBeAb陽(yáng)性率及乙肝病毒感染診斷準(zhǔn)確率較酶聯(lián)免疫吸附法相比明顯升高（P<0.05）。分析原因是，實(shí)施酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)結(jié)果受試劑質(zhì)量、保存過(guò)程等因素影響，穩(wěn)定性較差，且酶聯(lián)免疫吸附法只能進(jìn)行定量檢測(cè)，極易出現(xiàn)誤診和漏診。實(shí)施電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)可減少上述因素的影響，且檢查過(guò)程重復(fù)性高，可將免疫測(cè)定與電化學(xué)發(fā)光原理結(jié)合，達(dá)到良好的定量檢測(cè)效果，減少漏診和誤診[8-9]。

綜上所述，免疫檢驗(yàn)方法中電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)乙肝病毒感染血清標(biāo)志物效果優(yōu)于酶聯(lián)免疫吸附法，運(yùn)用價(jià)值更高。

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（收稿日期：2017-09-24）endprint