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    雞蛋過敏患者外周血清中半乳糖凝集素—3的表達及與雞蛋特異性IgE的相關性

    2018-03-07 00:23:30張書辰楊林胡林濤
    中國醫(yī)藥導報 2018年1期
    關鍵詞:凝集素皮炎過敏

    張書辰+楊林+胡林濤

    [摘要] 目的 探討雞蛋過敏患者血清半乳糖凝集素-3(Gal3)與雞蛋特異性IgE含量的相關性,為臨床雞蛋過敏提供新途徑。 方法 篩查2016年4月~2017年4月于華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院過敏反應科就診的食物過敏患者,根據(jù)患者病史、皮膚點刺試驗、雞蛋特異性IgE數(shù)值和食物排除法篩選68例雞蛋過敏且無其他疾病患者作為雞蛋過敏組,其中癥狀包含嚴重過敏性休克、特異性皮炎、慢性蕁麻疹、輕度皮炎伴搔癢、過敏性哮喘、變應性咳嗽和過敏性鼻炎。選取同期就診的20名無過敏病史、皮膚點刺試驗及雞蛋血清特異性IgE為陰性者作為健康對照組。分析不同癥狀的雞蛋過敏患者血清中Gal3的表達及與雞蛋特異性IgE含量的相關性。 結(jié)果 血清Gal3在對照組中平均濃度為(4.23±0.53)ng/mL,雞蛋過敏組中平均濃度為(9.95±6.31)ng/mL,兩組間差異有統(tǒng)計學意義(P = 0.0032);各組癥狀中Gal3的表達量分別為:過敏性休克組為(17.21±2.54)ng/mL,過敏性哮喘組為(10.95±1.97)ng/mL,與對照組比較差異均有顯著統(tǒng)計學意義(P = 0.0007、0.0001);慢性蕁麻疹組為(6.71±2.13)ng/mL,過敏性鼻炎組為(7.24±1.75)ng/mL,與對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P = 0.038、0.022),而特異性皮炎組(5.04±0.15)ng/mL,變異性咳嗽組(3.24±2.75)ng/mL,輕度皮炎伴搔癢組(4.24±1.33)ng/mL,與對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P = 0.156、0.354、0.282);雞蛋過敏患者血清Gal3表達與血清中雞蛋特異性IgE含量呈顯著正相關(r = 0.5932),各組臨床表現(xiàn)癥狀中過敏性哮喘、過敏性鼻炎和慢性蕁麻疹與特異性IgE含量呈正相關(r = 0.7792,0.8658,0.8091均P < 0.01),其余癥狀中Gal3表達與特異性IgE含量無明顯相關性(P > 0.05)。 結(jié)論 Gal3在以過敏性哮喘、過敏性鼻炎和慢性蕁麻疹為表現(xiàn)的過敏患者中,外周血清中數(shù)值的升高表示能夠提示患者存在雞蛋過敏。

    [關鍵詞] 半乳糖凝集素-3;雞蛋過敏;食物過敏;特異性IgE

    [中圖分類號] R44 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210(2018)01(a)-0064-04

    [Abstract] Objective To detect the expression of galectin-3(Gal3) in serum of patients with egg allergy and the correlation with egg-specific IgE. Methods Screening 68 patients with egg allergy according to the history of allergy, prick test, egg-specific IgE and food exclusion from April 2016 to April 2017 in Department of Allergy of Tongji hospital Affiliated to Tongji Medical College of Huazhong University of Science & Technology. The patients with egg allergymanifested withanaphylactic shock, eczema, chronic urticaria, mild dermatitis, allergic asthma, cough variant asthma and allergic rhinitis were selected as egg allergy group. Twenty patients with no history of allergies, skin prick test and egg serum specific IgE were negative were selected as healthy controlsin the same period. The correlation between Gal3 expression and egg-specific IgE in patients with different symptoms was analyzed. Results The average concentration of Gal3 in serum of control group was (4.23±0.53) ng/mL, the average concentration of Gal3 in serum of egg allergy group was(9.95±6.31)ng/mL. The difference was statistically significant (P = 0.0032). The expression of Gal3 in each group: the concentration of Gal3 in anaphylactic shock group was (17.11±2.54) ng/mL and allergic asthma was (10.95±1.97) ng/mL significant higher than those of control group, the difference was statistically significant (P= 0.0007, 0.0001); the group of chronic urticaria was (6.71±2.13) ng/mL and allergic rhinitis was(7.24±1.75) ng/mL, compared with the control group, the differences were statistically significant (P = 0.038, 0.022); the eczema group (5.04±0.15) ng/mL, mild dermatitis group was(4.24±1.33) ng/mL and cough variant asthma group was (3.24±2.75) ng/mL, the differences were not statistically significant(P = 0.156, 0.354, 0.282 respectively). The expression of Gal3 was positively correlated with egg-specific IgE in serum (r = 0.5932). There was a positive correlation among allergic asthma, allergic rhinitis and cough variant asthma in patients with egg-specific IgE (r = 0.7792, 0.8658, 0.8091, all P < 0.01), but there was no significant difference between Gal3 expression and egg-specific IgE in the other symptoms (P > 0.05). Conclusion The expression of Gal3 in serum of patients with allergic asthma, allergic rhinitis and chronic urticaria was significantly increased, which can prompt allergy patients provoked by egg.endprint

    [Key words] Galectin-3; Egg allergy; Foodallergy; Specific IgE

    半乳糖凝集素(Galectins)是凝集素超家族中的一個大家族[1],廣泛分布在各種生物體內(nèi),從線蟲到哺乳動物等數(shù)種動物體,均可以測出半乳糖凝集素的表達。其具有啟動固有免疫反應、合成和分泌炎性因子、介導細胞之間的信號識別及調(diào)節(jié)細胞分化等多種生物學功能[2]。半乳糖凝集素-3(Galectin-3,Gal3)是半乳糖凝集素特殊的一類,屬于脊椎動物中惟一嵌合型半乳糖凝集素,其由一個C端的糖識別域與另一個N端膠原蛋白重復結(jié)構域融合而成[3]。研究表明Gal3可以表達于上皮細胞,樹突細胞及各種白細胞中,主要定位于胞質(zhì),但在細胞核和細胞表面同樣有表達。Gal3可以通過受體-配體結(jié)合的方式發(fā)揮生物學效應,其參與的主要生物學功能有調(diào)節(jié)細胞增殖、黏附、凋亡、參與炎性反應、參與血管生成和誘導腫瘤細胞溢出等[4]。其可以通過相應的受體結(jié)合,激活IgE/FcεRI信號通路,參與過敏反應[5]。目前有多項研究表明,Gal3在過敏性疾病中表達升高[6-8]。

    雞蛋作為食物過敏的首要過敏原,占所有食物過敏源的52%[9],能引發(fā)的速發(fā)過敏反應可引起過敏性休克[10],危害患者的生命,而遲發(fā)型過敏反應主要危害兒童的生長發(fā)育,其可引起消化道黏膜的損傷,導致腸道營養(yǎng)吸收障礙,從而使患兒生長發(fā)育遲緩[11]。目前臨床上針對雞蛋過敏的診斷仍以皮膚點刺試驗(skin pick test,SPT)和血清特異性IgE結(jié)果為主[12],此方法難以有效地診斷雞蛋過敏[13]。而國際上所推薦的食物過敏診斷的“金標準”——雙盲對照激發(fā)試驗[14],由于操作繁瑣及存在臨床安全隱患在國內(nèi)尚未開展。本研究通過檢測雞蛋過敏患者血清中Gal3的表達,對比雞蛋過敏組與健康對照組的差異,和雞蛋過敏引發(fā)的不同癥狀患者血清Gal3表達差異,及Gal3的表達和外周血清中雞蛋特異性IgE的數(shù)值,分析Gal3對雞蛋過敏的臨床診斷價值。

    1 資料與方法

    1.1一般資料

    篩查2016年4月~2017年4月于華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院過敏反應科就診的食物過敏患者,根據(jù)患者病史、皮膚點刺試驗、雞蛋特異性IgE數(shù)值和食物排除法篩選68例雞蛋過敏且無其他疾病患者作為雞蛋過敏組,其中癥狀包含嚴重過敏性休克、特異性皮炎、慢性蕁麻疹、輕度皮炎伴搔癢、過敏性哮喘、變應性咳嗽和過敏性鼻炎。選取同期就診的20名無過敏病史,皮膚點刺試驗及雞蛋血清特異性IgE為陰性者作為健康對照組。在患者知情條件下,收集患者血清凍存于-80℃冰箱備ELISA檢測用。資料的收集包括患者性別、年齡、病史資料、食物日記、雞蛋特異性IgE數(shù)值、過敏原皮膚點刺試驗結(jié)果等。本研究獲本院倫理委員會批準。

    1.2檢測雞蛋過敏患者外周血清中Gal3的蛋白含量

    使用BG medicine 公司的Gal3 ELISA試劑盒檢測人外周血清中Gal3的含量。將待測血清加入到預包被的Gal3 ELISA板中,室溫孵育90 min后加入生物素化抗體工作液孵育60 min,再加入酶結(jié)合物稀釋液孵育30 min,以上每個步驟結(jié)束之后用TBST洗5次,孵育溫度為37℃。最后加入顯色液并適時終止,用酶標儀測量450 nm處的OD值。計算出各樣本的Gal3蛋白含量后,比較對照組和雞蛋過敏組血清Gal3的表達差異,及由雞蛋過敏導致的不同臨床癥狀患者的血清Gal3含量。

    1.3 統(tǒng)計學方法

    采用SPSS 19(SPSS Inc.,USA)統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析,計量資料用均數(shù)±標準差(x±s)表示,兩組間比較采用t檢驗;計數(shù)資料用(%)表示,組間比較采用χ2檢驗,以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組一般資料比較

    本研究共收集20例健康對照者及68例符合此條件的雞蛋過敏患者病史及外周血清,男36例(52.9%),女32例(47.1%)。由雞蛋過敏導致的臨床癥狀出現(xiàn)嚴重過敏性休克者4例(5.8%),平均年齡(19.6±12.1)歲;出現(xiàn)特異性皮炎者8例(11.8%),平均年齡(24.3±16.1)歲;慢性蕁麻疹者11例(16.2%),平均年齡(35.1±10.6)歲;輕度皮炎伴搔癢者13例(19.1%),平均年齡(35.6±15.8)歲;過敏性哮喘者15例(22.1%),平均年齡(37.6±16.6)歲;變應性咳嗽者8例(11.5%),平均年齡(25.8±13.8)歲;過敏性鼻炎者9例(13.2%),平均年齡(23.6±4.5)歲。20例健康對照者的平均年齡(28.1±4.3)歲。各組雞蛋過敏患者的年齡與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P > 0.05)。

    2.2各組間血清Gal3含量的比較

    血清Gal3在對照組中平均濃度為(4.23±0.53)ng/mL,雞蛋過敏組中為(9.95±6.31)ng/mL,兩組間差異有統(tǒng)計學意義(P = 0.0032);各組癥狀中,在過敏性休克組為(17.21±2.54)ng/mL,過敏性哮喘組為(10.95±1.97)ng/mL,與對照組比較差異均有顯著統(tǒng)計學意義(P = 0.0007、0.0001);慢性蕁麻疹組為(6.71±2.13)ng/mL、過敏性鼻炎組為(7.24±1.75)ng/mL,與對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P = 0.038、0.022),而特異性皮炎組為(5.04±0.15)ng/mL、變異性咳嗽組為(3.24±2.75)ng/mL、輕度皮炎伴搔癢組為(4.24±1.33)ng/mL,與對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P = 0.156、0.354、0.282)。

    2.3各組間血清Gal3含量與血清雞蛋特異性IgE含量的相關性分析endprint

    雞蛋過敏患者血清Gal3表達量與血清雞蛋特異性IgE含量呈正相關(r = 0.5932),各組臨床表現(xiàn)癥狀中過敏性哮喘、過敏性鼻炎和慢性蕁麻疹與特異性IgE含量呈正相關(r = 0.7792、0.8658、0.8091,均P < 0.01),其余癥狀中Gal3表達量與特異性IgE含量差異無明顯相關性(P > 0.05)。見圖1、2。

    3 討論

    食物過敏為主要的過敏性疾病之一,是過敏性疾病進程(the allergic march)的開端[15]。據(jù)調(diào)查,在發(fā)達國家約1/3的兒童至少出現(xiàn)過1次食物過敏癥狀。在美國,每年會發(fā)生超30000起食物誘導的嚴重過敏反應,其中超過150例患者因食物過敏導致死亡[16]。

    雞蛋在眾多食物過敏中有著特殊的地位和意義。雞蛋作為一種常見的食物過敏原,其是各類蛋白制品的主要來源,同時也是各種副食的添加輔料,其中蛋清是絕大多數(shù)嬰幼兒疫苗的培養(yǎng)基中的主要成分[17]。當患者對雞蛋過敏并攝入以上制品時即可引起呼吸、消化、皮膚等各系統(tǒng)過敏癥狀,病情嚴重時可出現(xiàn)嚴重過敏反應(多系統(tǒng)癥狀)及過敏性休克。對于嬰幼兒的特殊危害還在于影響患兒營養(yǎng)吸收和生長發(fā)育,有調(diào)查表明因進食顧慮造成患者及家屬不得不改變飲食習慣和社交活動,嚴重導致了患者及家庭的社交焦慮[18]。目前針對雞蛋過敏的診斷“金標準”為國際上推行的體內(nèi)雙盲對照激發(fā)試驗,但因激發(fā)風險較高,在國內(nèi)少有開展。常規(guī)血清學特異性IgE檢測往往不能有效地診斷雞蛋過敏,因此,尋求一種安全的體外檢測方法,是臨床上迫切的需要。

    本研究通過對比68例雞蛋過敏的患者外周血清中Gal3的表達發(fā)現(xiàn),Gal3在雞蛋過敏患者血清中表達明顯高于健康對照組,且與雞蛋特異性IgE含量呈正相關。在以過敏性哮喘、過敏性鼻炎和慢性蕁麻疹為表現(xiàn)的雞蛋過敏患者血清中Gal3的表達顯著升高,且與雞蛋特異性IgE含量呈明顯正相關,與國外相關文獻結(jié)果相符[19]。過敏性休克患者中Gal3的表達顯著升高,但與雞蛋特異性IgE含量無明顯相關性。本研究組分析原因,考慮可能是由于未在患者急性發(fā)作期采取外周血清進行分析,而在就診時血清學特異性IgE正處于緩慢回落期,引起Gal3的表達與雞蛋特異性IgE含量無明顯相關性。在特異性皮炎組,輕度皮炎伴搔癢組、變應性咳嗽組患者中,Gal3的表達和雞蛋特異性IgE含量均無相關性。本研究組考慮這部分癥狀的發(fā)病機制存在非IgE介導的遲發(fā)型超敏反應。根據(jù)試驗結(jié)果,本文認為血清中Gal3的表達對雞蛋過敏的診斷有所幫助。同時,根據(jù)過敏性疾病的癥狀的表現(xiàn)分類,哮喘、蕁麻疹的發(fā)作及休克的出現(xiàn),均屬于嚴重過敏反應的前驅(qū)表現(xiàn)或已造成嚴重過敏反應的發(fā)生,因此,本文也認為Gal3的表達能從一定程度上反映患者過敏性疾病的發(fā)病嚴重程度。

    本試驗的結(jié)論仍建立在臨床現(xiàn)象學的分析上,Gal3參與過敏反應的具體免疫機制仍未明確。因此,應在消化道黏膜上皮細胞進一步探討細胞信號轉(zhuǎn)導機制,為食物過敏安全的體外檢測提供新方向。

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    (收稿日期:2017-10-12 本文編輯:李雅南)endprint

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