苗玲
一 、溫度對(duì)淀粉酶活性的影響
1.實(shí)驗(yàn)原理。
淀粉遇碘后變藍(lán)。淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖(大量)和葡萄糖(少量),麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色
2.材料用具:略
3.方法步驟:
①取3只試管,編上號(hào),然后分別注入2ml可溶性淀粉溶液
②另取3只試管,編上號(hào),然后分別注入1ml新鮮的淀粉酶溶液
③將裝有淀粉溶液和酶溶液的試管分成3組,分別放入熱水(若是唾液淀粉酶,溫度設(shè)為370C;若是植物淀粉酶,則溫度設(shè)為500C),沸水和冰塊中,維持各自溫度5min
④分別將淀粉酶溶液注入相同溫度下的淀粉溶液中,搖勻后,維持各自溫度5min
⑤在3支試管中各滴入1滴碘液,然后搖勻。
⑥觀察這3支試管中溶液顏色的變化情況,并記錄結(jié)果:
冰水中試管溶液變?yōu)樗{(lán)色;熱水中試管溶液不變藍(lán);沸水中試管溶液變藍(lán)色
4.結(jié)論:酶的催化需要適宜的溫度;溫度低,酶活性降低;溫度過(guò)高,酶活性降低。
5.問(wèn)題討論:
①為什么在第四個(gè)步驟之前,要同時(shí)控制好酶溶液和淀粉溶液的溫度?
答:確保各自的溫度不變
②在第四個(gè)步驟中,為什么仍需要維持各自的溫度5min?
答:確保不同溫度對(duì)實(shí)驗(yàn)充分影響
③能否用斐林試劑檢測(cè)還原糖的生成情況來(lái)測(cè)定溫度對(duì)酶活性的影響?
答:不能,因?yàn)橛渺沉衷噭z測(cè)還原性糖需要加熱,不能確保每一組溫度的恒定,會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
④能否用過(guò)氧化氫酶促進(jìn)H2O2分解來(lái)探究溫度對(duì)酶活性的影響?
探究溫度對(duì)酶活性的影響,一般不采用過(guò)氧化氫酶催化過(guò)氧化氫的分解,因?yàn)榧訜嵋矔?huì)促進(jìn)的H2O2分解,干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果必須要用此實(shí)驗(yàn)材料,則每一個(gè)溫度下必須設(shè)置一個(gè)空白對(duì)照(只加H2O2溶液,不加酶溶液),以消除不同溫度對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響。
⑤怎么探究酶活性最適溫度?
在0℃——100℃之間縮小溫度梯度差,每一溫度下均作一實(shí)驗(yàn)
⑥該實(shí)驗(yàn)中哪些是對(duì)照組?哪些是實(shí)驗(yàn)組?
每一溫度下既是實(shí)驗(yàn)組,又是其他溫度組的對(duì)照組,構(gòu)成相互對(duì)照。
二、溫度對(duì)淀粉酶活性的影響
1.實(shí)驗(yàn)原理。酶可以促進(jìn)過(guò)氧化氫分解為水和氧氣,因此,可以依據(jù)單位時(shí)間內(nèi)溶液產(chǎn)生氣泡的數(shù)量來(lái)確定在不同pH條件下過(guò)氧化氫酶活性的大小,或依據(jù)氧氣使帶火星衛(wèi)生香復(fù)燃程度的強(qiáng)弱來(lái)確定在不同條件下過(guò)氧化氫酶活性的大小
2.材料用具:略
3.方法步驟:
①取5只潔凈試管,分別編號(hào)為1、 2、 3 、4、 5 ,向各試管內(nèi)加入1ml過(guò)氧化氫溶液,并將試管中的pH調(diào)整為3、5、7、9、11
②取5只潔凈試管,分別編號(hào)為6、 7、8 、9、 10,向各試管內(nèi)加入1ml肝臟研磨液,并將試管中的pH調(diào)整為3、5、7、9、11
③將6-10號(hào)試管中肝臟研磨液分別加入到pH相同的裝有過(guò)氧化氫溶液的試管中,振蕩混勻
④觀察并記錄5支試管單位時(shí)間內(nèi)放出氣泡的數(shù)量,2-3分鐘,將點(diǎn)燃的衛(wèi)生香分別放入5支試管內(nèi)液面的上方,觀察5支試管中的衛(wèi)生香的燃燒情況。
4.問(wèn)題討論
①實(shí)驗(yàn)中怎樣排除溫度和其他因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾?
答:保持各試管在相同的溫度(室溫或37度水?。┻M(jìn)行試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)中各組試劑添加量相等。
②試管中試劑添加順序可不可以改為:肝臟研磨液→過(guò)氧化氫溶液→各pH的溶液?
答:若改為這個(gè)順序,在達(dá)到設(shè)定的pH值之前酶已經(jīng)催化底物發(fā)生了反應(yīng),試驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確。
③試管中試劑添加順序可不可以改為:過(guò)氧化氫溶液→各pH值得溶液→肝臟研磨液?
答:若改為這個(gè)順序,加入pH溶液后,可能會(huì)由于之前底物的添加會(huì)使混合液的pH發(fā)生一定的變化。
④能否用淀粉作為底物探究pH對(duì)淀粉酶活性的影響?
不能,因?yàn)樵谒嵝詶l件下淀粉會(huì)被水解為葡萄糖,干擾試驗(yàn)結(jié)果。
(作者單位:湖北省十堰市東風(fēng)高級(jí)中學(xué) 442000)