急性腦梗死患者血清中可溶性白細胞分化抗原40配體和低氧誘導(dǎo)因子-1α的表達

陸 雙 陸 陽 羅 影 李 巖

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院急診高壓氧病區(qū)，遼寧 錦州 121000)

急性腦梗死病變發(fā)展時神經(jīng)細胞出現(xiàn)液化性壞死，進展快〔1〕。90%存活患者遺留不同程度的神經(jīng)功能癥狀〔2〕。近年學(xué)者關(guān)注血清中相關(guān)因子的表達，發(fā)現(xiàn)相關(guān)蛋白水平表達升高，這些因子或者參與病變的進展或參與神經(jīng)細胞的保護〔3〕?？扇苄园准毎只乖?0配體(sCD40L)屬于腫瘤壞死因子受體超家族成員，是體液免疫的一條重要細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路〔4〕。sCD40L 可以誘導(dǎo)人類血管內(nèi)皮細胞表達黏附分子，并刺激釋放趨化因子，這些分子均可以參與斑塊的形成，并能誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞表達相關(guān)炎性因子，對斑塊的脂紋向斑塊轉(zhuǎn)化起重要作用〔5〕。低氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α是缺氧條件下的一種轉(zhuǎn)錄因子，由組織中分子氧的水平所誘導(dǎo)，激活后產(chǎn)生的效應(yīng)是調(diào)節(jié)缺氧反應(yīng)性基因表達的分子通路〔6〕。目前認為HIF-1α表達的下游基因有多種，其功能包括促進血管新生、調(diào)節(jié)紅細胞生成、調(diào)節(jié)氨基酸的代謝、促進腫瘤細胞的遷移等〔7〕。本文分析急性腦梗死患者血清中sCD40L和HIF-1α的表達及其臨床意義和相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2014年5月至2016年6月錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院確診的急性腦梗死患者75例，納入均符合第四屆全國腦血管病學(xué)術(shù)會議標準確定的診斷標準，并經(jīng)CT、磁共振成像(MRI)檢查證實。男40例，女35例，年齡51～79歲，平均65.3歲。發(fā)病在72 h以內(nèi)，均為首次發(fā)病，既往無遺留的神經(jīng)功能缺損癥狀。排除標準：①腦出血；②嚴重內(nèi)臟器官疾??；③癲癇；④過敏體質(zhì)。同期體檢證實無明顯器質(zhì)性疾病且無神經(jīng)功能障礙的正常成人血清標本18例為對照組，其中男9例，女9例，年齡40～64歲，平均58.7歲。兩組常規(guī)資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。

1.2酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中sCD40L和HIF-1α的表達 患者于入院后以抗凝管抽取肘空腹靜脈血3 ml，對照組成人常規(guī)抽取肘空腹靜脈血，均應(yīng)用3 000 r/min離心15 min，分離血清，并置于-20℃冰箱中凍存，待檢。按照說明書應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法檢測sCD40L和HIF-1α的表達，做好質(zhì)控工作。操作均由同一技師完成，減少人為誤差。

1.3腦梗死灶體積的分組 腦梗死灶體積根據(jù)患者發(fā)病2 d內(nèi)頭顱MRI結(jié)果計算：梗死體積=a×b×c×層厚×π/6(a為梗死灶的最大長徑，b為與長徑相垂直的直徑，c為MRI掃描的陽性層數(shù))。分為小梗死組≤4.0 cm3，中梗死組4.1～10.0 cm3，大梗死組>10.0 cm3。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行t檢驗、方差分析和相關(guān)性檢驗。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清中sCD40L和HIF-1α表達比較 觀察組sCD40L和HIF-1α表達明顯高于對照組(P<0.01)，見表1。

表1 兩組血清中sCD40L和HIF-1α表達比較

2.2觀察組不同臨床特征患者血清中sCD40L和HIF-1α的表達比較 觀察組中不同梗死灶體積和不同預(yù)后分組患者血清中sCD40L和HIF-1α表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 觀察組不同臨床特征患者血清中sCD40L和HIF-1α的表達比較

2.3觀察組sCD40L和HIF-1α表達相關(guān)性 sCD40L和HIF-1α表達呈正相關(guān)(r=0.41，P=0.042 1)。

3 討 論

腦梗死與動脈粥樣硬化有直接關(guān)聯(lián)，動脈粥樣硬化是一種慢性炎癥性疾病，其涉及病變發(fā)展的各個階段〔8〕。血清中相關(guān)蛋白表達失調(diào)對病變的形成有一定作用〔9〕。sCD40L是CD40的天然配體，相對分子量為39 000 D，是一種跨膜糖蛋白，由261個氧基酸組成，分為3個區(qū)，即胞質(zhì)區(qū)、跨膜區(qū)和胞外區(qū)。研究顯示sCD40L有多種表達形式，在細胞膜表達即可以形成同源三聚體，也可以形成異源三聚體〔10〕。sCD40L與效應(yīng)細胞上的CD40分子結(jié)合后，使膜上的CD40分子交聯(lián)，改變了CD40胞外的部分結(jié)構(gòu)，這時可以調(diào)節(jié)細胞間黏附分子、血管細胞黏附分子和P-選擇素的表達，誘導(dǎo)單核細胞及上皮細胞的合成，同時分泌更多的炎癥因子和促凝物質(zhì)〔11,12〕。HIF-1α是一種轉(zhuǎn)錄因子，在缺氧誘導(dǎo)的基因表達調(diào)節(jié)中起重要作用〔13〕。在常氧狀態(tài)下，該因子不能發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)，在低氧的環(huán)境中，HIF-1α和細胞質(zhì)中穩(wěn)定表達的HIF-1α的亞單位結(jié)合，形成有活性的HIF-1α，激活后的HIF-1α可以調(diào)節(jié)多種下游基因轉(zhuǎn)錄，如對血管內(nèi)皮生長因子的調(diào)節(jié)，對血小板源性生長因子的調(diào)控等，這些調(diào)控可以促進機體紅細胞的生成及血管構(gòu)架的形成，調(diào)節(jié)氨基酸和糖能量代謝，參與神經(jīng)細胞代謝和凋亡〔14,15〕。

本研究結(jié)果提示sCD40L和HIF-1α二者高表達在病變的形成和進展中有重要作用。sCD40L表達升高后與巨噬細胞表面的CD40結(jié)合，能激發(fā)炎性相關(guān)因子中IL-6和IL-8的釋放，而CD40L與內(nèi)皮細胞表面的CD40結(jié)合，可以激活核因子的表達，增加E-選擇素、血管內(nèi)皮細胞黏附分子(VCAM)-1和細胞間黏附分子(ICAM)-1的表達。在CD40L的作用下，平滑肌細胞和成纖維細胞也可以活化、增殖和遷移，促進動脈粥樣硬化的形成。因此sCD40L是通過調(diào)節(jié)促炎因子的表達，影響斑塊的形成、發(fā)展和穩(wěn)定。而HIF-1α的表達升高，是缺血的一個反應(yīng)性的變化，這可能是神經(jīng)細胞保護作用的結(jié)果。本文結(jié)果提示sCD40L和HIF-1α二者高表達在一定程度上提示病變進程，即sCD40L和HIF-1α高表達預(yù)示著梗死灶的增大及不良的預(yù)后，病變處于進展狀態(tài)〔16,17〕。本文結(jié)果提示sCD40L和HIF-1α二者可能在一定程度上具有協(xié)同作用，可能與炎性反應(yīng)因子的共同調(diào)控有關(guān)，也可能與腦梗死后的修復(fù)中血管內(nèi)皮生長因子的增生有關(guān)，具體機制有待更多基礎(chǔ)實驗來證實。

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