李明遠(yuǎn)斷病手跡（八十四）鑒定由灰霉病引起的萬(wàn)壽菊田間死株

年的11月，都是保護(hù)地灰霉病開(kāi)始發(fā)生的時(shí)候。一般說(shuō)來(lái)，灰霉病比較好認(rèn)。一旦發(fā)生，可根據(jù)癥狀立即采取相應(yīng)的措施進(jìn)行防治，一般都會(huì)有一定的效果。

萬(wàn)壽菊灰霉病也一樣。如果發(fā)現(xiàn)花朵上有些花瓣腐爛，長(zhǎng)出灰色的霉層，一般都是霉病引起（圖1）。但是，看得多了，就會(huì)覺(jué)得事情不那么簡(jiǎn)單，在條件不合適的時(shí)候，看不到灰霉，所以要弄明白是什么病還真的需要下點(diǎn)功夫。

時(shí)間回溯到2016年8月2日，我們到北京市延慶區(qū)的四海鎮(zhèn)看制種棚里萬(wàn)壽菊的長(zhǎng)勢(shì)，發(fā)現(xiàn)里面有些死株。主管這項(xiàng)工作的黃博士問(wèn)我是什么病？我仔細(xì)地觀察了一番，只見(jiàn)到病株莖、葉干枯，說(shuō)不上來(lái)是什么??？再仔細(xì)觀察，發(fā)病輕的病株先是葉片枯死，病斑通過(guò)葉柄擴(kuò)展到莖上，在莖上形成縱向的暗色條斑；病葉多時(shí)，莖上的病斑會(huì)連成片，使植株枯死（圖2）。

因?yàn)闆](méi)有霉層，要鑒定它只好用組織分離的方法來(lái)取得病原。我們擔(dān)心病株在棚里會(huì)有腐生菌附著在上面，特意采了一些輕病株，還到棚外以藍(lán)天為背景拍下了輕病株的表現(xiàn)（圖3）。

病菌分離工作比較容易，是用PDA培養(yǎng)基采用組織分離法進(jìn)行。一周后得到3個(gè)灰色的菌落。由于當(dāng)時(shí)事情較多，我就將它轉(zhuǎn)到試管斜面上，放在2℃的冷藏箱中保存起來(lái)。半年過(guò)去，我想起了這件沒(méi)能完成的工作，找出此前保存的試管斜面，將它轉(zhuǎn)到PDA平板上。待菌落形成后，采用常規(guī)的技術(shù)，觀察它的侵染性及子實(shí)體的形態(tài)。

侵染性的試驗(yàn)是采用離體葉的方法進(jìn)行。即采下萬(wàn)壽菊的葉片，先用自來(lái)水洗凈，再用消毒水洗3次，將其分放在直徑9 cm的一次性培養(yǎng)皿里。每個(gè)分離物3皿，對(duì)照3皿，共12皿。每個(gè)皿底墊有3張消毒濾紙并倒有少量的無(wú)菌水將濾紙浸濕。再將得到的3個(gè)病菌的分離物，分別貼在3皿葉片下端的傷口處，而在對(duì)照葉片下部的傷口上，僅放1塊蘸有無(wú)菌水的消毒脫脂棉。然后一起將這12皿置于23℃的光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

6天后觀察發(fā)現(xiàn)，使用2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)3個(gè)分離物接種的葉片均發(fā)病，而對(duì)照安然無(wú)恙。說(shuō)明這3個(gè)分離物對(duì)萬(wàn)壽菊的葉片都有侵染力。挑出病葉上的病原在顯微鏡下觀察，都是典型的灰霉病菌（圖4）。

接著又觀察了病菌對(duì)萬(wàn)壽菊莖部的侵染性。即采下萬(wàn)壽菊的枝條，在三角瓶里用自來(lái)水誘發(fā)出根，在莖的中部用一束大頭針刺上7個(gè)微孔，將帶有PDA培養(yǎng)基的菌塊貼在微孔上，再敷上一塊經(jīng)過(guò)消毒的蘸有無(wú)菌水的脫脂棉，用石蠟?zāi)だp上。與此同時(shí)還用刺微孔、不加病菌的處理做對(duì)照。同時(shí)放在室溫下（23℃左右）培養(yǎng)，第5天各接種病菌的萬(wàn)壽菊即發(fā)病，其表現(xiàn)為莖折倒（圖5?圖6），揭開(kāi)石蠟?zāi)ぜ敖臃N物，看到接種孔附近組織變?yōu)闇\灰褐色、腐爛。將其放在培養(yǎng)皿中保濕，也見(jiàn)到了長(zhǎng)出的灰霉菌，而未接病菌的對(duì)照安然無(wú)恙。進(jìn)一步證明了我們從病株上分離的病菌具有侵染力。

我們還對(duì)病原菌進(jìn)行了觀察。結(jié)果表明在顯微鏡下分生孢子梗為淡褐色至褐色，長(zhǎng)324～2850 μm，直徑較粗，為2.71～4.17 μm，且下端與末梢的寬度差距不大，分枝3～7次（圖7），分枝的末端略膨大，上密生小梗。分生孢子一般透明，略帶淡灰褐色，雨滴形，密列在孢梗的小枝梗頂端（圖8），孢子大?。海?1.16～19.73）μm×（6.99～8.55）μm（圖9）。孢子易脫落，可浮在液滴的表面滾動(dòng)。與文獻(xiàn)核對(duì)，確為灰霉菌[Btrytis cinerea Pers.又名：Botrytis state of Sclerotinia fuckeliana （de Bary ）Fuckle][1-2]。

這一結(jié)果說(shuō)明這次在田間見(jiàn)到的病株也是萬(wàn)壽菊灰霉病。筆者認(rèn)為，這種無(wú)灰霉癥狀的出現(xiàn)，和萬(wàn)壽菊所處的條件有關(guān)。一是此時(shí)天氣較熱，并不適合灰霉病的發(fā)生。再就是這個(gè)大棚在此期間一直是敞開(kāi)的，相對(duì)濕度一直上不去，不利灰霉的產(chǎn)生。這次試驗(yàn)說(shuō)明，灰霉病不僅可以侵染萬(wàn)壽菊的花蕾，還可以侵染植株。而在某些條件下并不出現(xiàn)灰色霉層，卻引起植株的枯死。

時(shí)間過(guò)了近1年，我才將鑒定的結(jié)果告訴了黃博，告訴他制種棚里的病株是萬(wàn)壽菊灰霉病。他問(wèn)這種灰霉病如何防治？我認(rèn)為萬(wàn)壽菊發(fā)生的這種灰霉病不難防治。只要做好以下3點(diǎn)，還是可控的。①要隨時(shí)徹底清除病殘株，集中起來(lái)銷毀。制種棚里灰霉病原少了，就不容易發(fā)病。②注意控制棚里的濕度。即在大雨前及時(shí)放下棚膜，避免雨水倒灌入棚內(nèi)；澆水后注意放風(fēng)排濕，中耕土壤，不給灰霉菌造成發(fā)生的條件。③必要時(shí)還要用藥預(yù)防。即在發(fā)病的初期使用對(duì)灰霉病有效的農(nóng)藥噴灑植株。鑒于這種病株多從莖基部侵染，防治的時(shí)候除噴灑整株外，在根頸部應(yīng)多噴些農(nóng)藥?？捎玫乃巹┹^多，如50%異菌脲1000倍液，或40%嘧霉胺懸浮劑1500倍液，或50%啶酰菌胺水分散粒劑2000倍液等。每7～10天1次，連續(xù)用藥2～3次。

參考文獻(xiàn)

[1] 李明遠(yuǎn)，李固本，裘季燕.北京蔬菜病情志[M].北京：北京科學(xué)技術(shù)出版社，1987：87-88.

[2] 張中義.中國(guó)科學(xué)院孢子植物志編輯委員會(huì)[M].北京：科學(xué)出版社，2006：1-89.

[引用信息]李明遠(yuǎn).李明遠(yuǎn)斷病手跡（八十四）鑒定由灰霉病引起的萬(wàn)壽菊田間死株[J].農(nóng)業(yè)工程技術(shù)，2017，37（31）：36-38.