奶牛魏氏梭菌病診斷與防治

紀德蘭

（山東省菏澤市曹縣梁提頭公路動物衛(wèi)生監(jiān)督檢查站，菏澤 274400）

0 引言

奶牛魏氏梭菌病又被稱為猝死癥，是由魏氏梭菌感染引起的一種急性、傳染性、高度接觸性疾病。魏氏梭菌是一種條件致病菌，廣泛存在于自然界中，當牛群機體抵抗能力較強、胃腸道有益菌群數(shù)量維持穩(wěn)定時，該種致病菌很少會表現(xiàn)出致病能力。圈舍的飼養(yǎng)密度較大，衛(wèi)生環(huán)境較差，糞便堆積產(chǎn)生大量有毒有害氣體，使牛呼吸道產(chǎn)生損傷，牛身體抵抗能力下降，為該種疾病的傳播流行提供條件。從發(fā)病年齡分析，成年奶牛多發(fā)，犢?；静话l(fā)病，犢牛對該種病菌具有一定的抵抗能力。臨床上該種疾病以導致牛突然死亡、消化道和實質(zhì)器官廣泛性出血為主要特征，該種疾病一年四季均可發(fā)生，但以春秋兩季發(fā)病率最高。

1 發(fā)病經(jīng)過

山東省菏澤市一養(yǎng)殖戶2017年4月11日早晨飼喂時，發(fā)現(xiàn)牛舍中出現(xiàn)一頭青年牛死亡病例，出現(xiàn)死亡現(xiàn)象后，養(yǎng)殖戶立即將病死牛清理出牛舍，并進行了嚴格的無害化處理，同時選擇使用常規(guī)消毒劑，對牛舍內(nèi)外環(huán)境進行了一次全面消毒。當天下午牛舍中又出現(xiàn)2頭發(fā)病較為嚴重的患病牛，隨后病情在牛群中進一步傳播。發(fā)病后，養(yǎng)殖戶立即將患病牛隔離安置在安靜的牛舍中單獨養(yǎng)殖，并使用青霉素、鏈霉素進行針對性治療，并沒有取得明顯效果，且當天又有一頭青年牛死亡。養(yǎng)殖戶意識到疫情的嚴峻性，立即將病情上報當?shù)孬F醫(yī)站，要求當?shù)孬F醫(yī)站委派專業(yè)獸醫(yī)到養(yǎng)殖場進行針對性診治。獸醫(yī)站接到求助后，立即委派專業(yè)獸醫(yī)到養(yǎng)殖場，獸醫(yī)到達養(yǎng)殖場后，該養(yǎng)殖場的病情已經(jīng)較為嚴重，死亡率進一步升高。通過進一步調(diào)查，對養(yǎng)殖場的養(yǎng)殖檔案進行檢查發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)殖戶并未對牛群進行嚴格的疫苗免疫，存在僥幸心理，牛舍中糞便堆積，并且能聞到刺鼻的氣味。結(jié)合整個發(fā)病經(jīng)過，獸醫(yī)懷疑是某種致病菌感染引起的劇烈傳染性疾病，將隨機采集的病死牛病料帶回實驗室進行診治，明確病原后，立即采取有效措施進行治療，但該種疾病發(fā)病急，死亡率較高，整個治療效果較差。

2 臨床癥狀

該養(yǎng)殖場共有2頭牛在沒有出現(xiàn)任何臨床癥狀的前提下突然倒地死亡，死亡的牛腹部膨大，舌頭向外伸出，口腔中流出帶有紅色泡沫的液體，肛門外翻。剩下的患病牛呈現(xiàn)典型的急性型經(jīng)過，體溫顯著升高到40 ℃以上，呼吸急促，結(jié)膜發(fā)紺，從口腔和鼻腔中流出白色或紅色泡沫狀內(nèi)容物[1]。全身肌肉震顫，不能正常行走，有的患病牛臥地不起、狂叫、四肢滑動，最后死亡；有的患病牛表現(xiàn)為兩耳豎立，眼睛圓睜，呈現(xiàn)出精神高度緊張狀態(tài)，隨后轉(zhuǎn)為安靜，上述臨床癥狀反復呈周期性發(fā)作，最終死亡。除出現(xiàn)上述癥狀外，患病牛還會出現(xiàn)腹瀉癥狀，排出大量帶有黑紅色粘液的惡臭糞便，有時糞便呈噴射狀，患病牛不斷怒責。

3 病理學變化

解剖2頭病死牛尸體，觀察到外觀營養(yǎng)性良好，腹部膨大明顯，將病死牛解剖后發(fā)現(xiàn)體表血液濃稠，凝固正常，肝臟和脾臟腫大明顯，在肝臟和脾臟表面還出現(xiàn)小點狀的出血病灶，大網(wǎng)膜無出血現(xiàn)象，真胃黏膜脫落，胃底部出血嚴重，其他三胃均存在不同程度的炎癥病變。肺臟切面外翻，氣管、支氣管中存在大量白色泡沫狀內(nèi)容物[2]。小腸脹氣明顯，病變小腸管出血明顯，全身淋巴結(jié)組織都存在不同程度腫大充血現(xiàn)象。腎臟質(zhì)地變軟，外觀呈現(xiàn)暗紅色，腎臟表面存在點狀出血病灶。

4 實驗室診斷

4.1 涂片鏡檢

無菌環(huán)境下，采集上述病死牛典型病變臟器組織，作為病料帶回實驗室，進行常規(guī)涂片鏡檢。將病料制成涂片后，經(jīng)火焰固定，選擇使用革蘭氏染色劑對涂片進行全面染色處理。鏡檢可以發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽性染色存在莢膜的大桿菌，呈單個或成對排列。

4.2 致病菌分離

將上述采集到的病料，在厭氧條件下，分別接種到鮮血瓊脂平板和肉湯中，37 ℃恒溫培養(yǎng)24 h，鮮血瓊脂平板上生長出灰白色、圓形、邊緣呈現(xiàn)鋸齒狀的大菌落，菌落周圍存在溶血環(huán)；肉湯接種6 h后混濁，并產(chǎn)生大量氣體，有惡臭氣味排出。用玻璃棒蘸取肉湯培養(yǎng)物和可疑菌落組織制成涂片后，用革蘭氏染色劑充分染色，常規(guī)方法鏡檢，多為革蘭氏陽性染色的兩端鈍圓、中間有芽孢的大桿菌。

4.3 牛乳發(fā)酵試驗

無菌環(huán)境下，選取脫脂牛乳100 mL，向其中加入50%的石蕊溶液2 mL，混合均勻后，分裝于試管中，100 ℃環(huán)境下滅菌30 min備用。將鮮血瓊脂平板上培養(yǎng)的典型菌落接種到2支試管的牛乳培養(yǎng)基內(nèi)，在厭氧環(huán)境下，37 ℃恒溫培養(yǎng)12 h，牛乳凝固呈現(xiàn)劇烈發(fā)酵，培養(yǎng)物被沖擊成塊狀。

4.4 生化試驗

挑取血液瓊脂平板上培養(yǎng)得到的致病菌，采用常規(guī)方法進行生化試驗，生化試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該組織葡萄菌能發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖、果糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不反應靛基質(zhì)，不分解菊糖，與魏氏梭菌理化性質(zhì)基本吻合。

4.5 動物接種試驗

選擇6只體重相等的小白鼠，按照隨機原則將其劃分為3組，每組2只小白鼠，第一組小白鼠肌肉注射上述肉湯培養(yǎng)物0.2 mL；第二組每只小白鼠注射肉湯培養(yǎng)物0.4 mL；第三組作為對照組，肌肉注射生理鹽水0.4 mL。注射0.5 h后，第一組和第二組小白鼠出現(xiàn)精神萎靡不振、呼吸急促、嗜睡、扎堆的現(xiàn)象，第一組小白鼠發(fā)病8 h內(nèi)死亡，將死亡的小白鼠放置在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)6 h后取出，觀察發(fā)現(xiàn)死亡小白鼠腹部維度明顯增大，解剖后可以發(fā)現(xiàn)肝臟質(zhì)地堅硬，腸道出血嚴重，采集小白鼠典型病變臟器組織，涂片，染色鏡檢，可以發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽性染色的大桿菌存在[3]。其余2只小白鼠分別在18 h內(nèi)死亡。結(jié)合整個實驗室診斷結(jié)果，最終可以確定為魏氏梭菌病。藥敏試驗發(fā)現(xiàn)該種致病菌對頭孢氨芐、硫酸慶大霉素、頭孢拉定高敏。

5 防治

由于奶牛魏氏梭菌病發(fā)病速度快、死亡率高，在治療中，應該選擇發(fā)病較為緩慢的牛進行針對性治療。針對沒有治療價值的牛立即撲殺，進行無害化處理。該次共治療6頭牛，選擇使用頭孢氨芐注射液，使用劑量10 mg/kg體重，1次/d，連續(xù)使用3 d為一個療程。采用抗生素治療6 d，共有2頭?；謴徒】?，剩余患病牛全部死亡。將病死的奶牛和被奶牛污染的墊料、飼料等污染物共同清理出牛舍，運送到無害化處理點，進行無害化處理。針對該養(yǎng)殖場未發(fā)病的牛群，緊急灌服0.1%的高錳酸鉀溶液和中藥三黃猝死寧，同時肌肉注射頭孢氨芐，使用劑量10 mg/kg體重，1次/d，連續(xù)使用1周。日常要指導飼養(yǎng)戶強化預防，使用雙鏈季銨鹽對場地用具進行全面消毒，此外，選擇使用魏氏梭菌滅活疫苗，對健康牛進行緊急免疫接種。日常養(yǎng)殖中，要確保牛舍環(huán)境清潔衛(wèi)生，及時清理牛舍糞便，避免產(chǎn)生大量有毒有害氣體。

6 結(jié)束語

魏氏梭菌病是一種急性傳染病，該病雖然在養(yǎng)殖場內(nèi)的發(fā)病率較低，但牛群中一旦出現(xiàn)該種疾病，將會以較快的速度傳播，引起很高的死亡率，給養(yǎng)殖戶造成巨大經(jīng)濟損失。因此，要采取科學的方法對該病進行診斷，并選擇有效的措施進行防治，降低該病的發(fā)病率。