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    基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)

    2018-02-08 17:11:41
    中國學(xué)術(shù)期刊文摘 2018年11期
    關(guān)鍵詞:卵形瘧原蟲血樣

    浙江省5例輸入性瘧疾誤診病例的病原學(xué)診斷分析

    姚立農(nóng),張玲玲,阮衛(wèi),等

    摘要:目的:瘧疾是全球重要的公共衛(wèi)生問題之一,每年可引起2億多人的感染病例和60~80萬人的死亡病例。卵形瘧原蟲是瘧疾的致病蟲種之一,主要分布在西非和太平洋西部的某些島嶼,其致病和臨床癥狀與間日瘧相似,且同樣存在可引起復(fù)發(fā)肝期裂殖子。在形態(tài)學(xué)上,間日瘧原蟲和卵形瘧原蟲也較為相近,僅依靠顯微鏡檢查對兩者進(jìn)行區(qū)分仍存在一定的困難,常常導(dǎo)致錯(cuò)判或誤診。本文結(jié)合顯微鏡檢查、瘧疾快速診斷試紙條(RDT)和巢式PCR檢測方法,對浙江省2011—2012年發(fā)現(xiàn)的5例輸入性瘧疾誤診病例進(jìn)行病原學(xué)診斷和鑒定。方法:收集浙江省5例前期誤診為輸入性間日瘧患者的流行病學(xué)資料和血樣。應(yīng)用抗凝血樣制作厚、薄血涂片,自然干燥、甲醇固定、吉姆薩染色后進(jìn)行顯微鏡形態(tài)學(xué)檢查;應(yīng)用RDT檢測試劑對血樣進(jìn)行瘧原蟲抗原檢測;應(yīng)用巢氏PCR方法(采用瘧原蟲屬特異性引物和4種種特異性引物)進(jìn)行瘧原蟲基因檢測。對陽性PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序,將測序序列與GenBank中已有的序列進(jìn)行Blast比對分析,并將測序序列提交至GenBank中。結(jié)果:5例患者均為自非洲的歸國人員,其中3例歸國前有瘧疾發(fā)病史,臨床上主要表現(xiàn)為頭痛、咳嗽、發(fā)冷和發(fā)熱等癥狀,偶有腹瀉,初步診斷結(jié)果均為間日瘧感染。本文鏡檢復(fù)核結(jié)果顯示,4份血樣為卵形瘧原蟲感染1份(病例1)為卵形瘧原蟲和間日瘧原蟲混合感染。鏡下可見瘧原蟲環(huán)狀體、滋養(yǎng)體、未成熟裂殖體、成熟裂殖體和配子體。被寄生的紅細(xì)胞大小正?;蚵阅[脹,部分被感染的紅細(xì)胞邊緣呈現(xiàn)傘矢狀,有的可見斑點(diǎn)粗大的薛氏小點(diǎn)。環(huán)狀體核較大,胞質(zhì)粗厚,且存在一個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)多個(gè)環(huán)狀體以及環(huán)狀體和配子體重復(fù)感染的現(xiàn)象。大滋養(yǎng)體胞質(zhì)堅(jiān)實(shí),空泡不顯著,呈圓形,瘧色素棕黃色。未成熟的裂殖體胞漿呈圓形或卵圓形,無空泡,可見棕黃色的瘧色素散在分布。成熟裂殖體可見聚集成團(tuán)的棕黃色瘧色素,裂殖子數(shù)約為10個(gè)。雄配子體核質(zhì)疏松,位于中央,胞質(zhì)呈淺藍(lán)色,棕黃色瘧色素散在分布。RDT檢測結(jié)果顯示,5份血樣均為瘧原蟲陰性。巢氏PCR檢測結(jié)果顯示,5份血樣的全血DNA均擴(kuò)增出卵形瘧原蟲特異性條帶(約800 bp),其中1份血樣(病例1)同時(shí)還擴(kuò)增出間日瘧原蟲特異性條帶(約120 bp)。測序序列經(jīng)Blast比對,5份血樣的擴(kuò)增片段序列與Genbank中卵形瘧原蟲SSU RNA部分序列(登錄號(hào)分別為AB182489.1、AF145337.1、AB182490.1、AB182489.1和AF145337.1)的同源性均為99%,其中1份血樣(病例1)的另一擴(kuò)增片段序列與間日瘧原蟲SV5 18S rRNA部分序列(登錄號(hào)為JQ627157.1)的同源性為99%。將5例卵形瘧原蟲特異性基因序列提交至GenBank中,登錄號(hào)分別為KC633223、KC633225-KC63228。結(jié)論:結(jié)合顯微鏡檢查、RDT和巢式PCR檢測結(jié)果,5例輸入性瘧疾病例中4例為卵形瘧原蟲感染,1例為卵形瘧原蟲和間日瘧原蟲混合感染。本文檢測結(jié)果提示:在瘧原蟲蟲種鑒定中,顯微鏡檢查雖作為瘧原蟲診斷的金標(biāo)準(zhǔn),但僅依靠顯微鏡形態(tài)學(xué)檢查在某些蟲種鑒定時(shí)仍存在一定的局限,尤其在間日瘧原蟲和卵形瘧原蟲以及混合感染蟲種的鑒定中;RDT檢測方法因操作簡便、快速等優(yōu)點(diǎn)而備受推崇,但其在檢測卵形瘧原蟲時(shí)常存在一定的假陰性結(jié)果,因此在感染瘧原蟲蟲種較難判定時(shí),需進(jìn)一步結(jié)合巢式PCR檢測結(jié)果進(jìn)行確診。

    來源出版物:中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志, 2013, 31(3):221-223

    入選年份:2015

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