消化性潰瘍細(xì)胞因子水平與相關(guān)因素分析※

曹 云，通信作者：張 雯

(北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院，北京 100700)

消化性潰瘍(peptic ulcer，PU)包括胃潰瘍(gastric ulcer，GU)和十二指腸潰瘍(duodenal ulcer，DU)，是臨床常見病、多發(fā)病，屬于中醫(yī)“胃痛”“嘈雜”等范疇。其發(fā)病由胃黏膜攻擊因子和防御因子失衡，黏膜自我消化所致。近年來，細(xì)胞因子在潰瘍病發(fā)病機(jī)制中的地位愈受重視。為進(jìn)一步探討細(xì)胞因子在PU發(fā)病中的作用以及年齡、性別、季節(jié)等因素對其表達(dá)水平的影響，筆者對47例PU患者一氧化氮(NO)、血清水通道蛋白(AQP4)、內(nèi)皮素(ET)、α-防御素(DEFA)及三葉因子(TFF)表達(dá)水平進(jìn)行了檢測，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 收集2015年11月至2016年12月東直門醫(yī)院符合PU診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者47例，其中男30例，女17例；青年組(23～41歲)13例，中年組(42～60歲)28例，老年組(61～79歲)6例；冬春季節(jié)發(fā)病者27例，夏秋季節(jié)發(fā)病者20例；GU者16例，DU者16例，其他類型15例；初發(fā)型17例，復(fù)發(fā)型30例；Hp感染陽性 27例，陰性15例，不詳5例。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《實(shí)用內(nèi)科學(xué)》[1]，經(jīng)電子胃鏡及病理學(xué)檢查確診為消化性潰瘍者。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) 符合診斷標(biāo)準(zhǔn)；年齡18～80歲；簽署知情同意書。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) ①有特殊原因的消化性潰瘍，如胃泌素瘤；②胃鏡證實(shí)為穿鑿性潰瘍、胃底部潰瘍、胃潰瘍合并重度異型增生及具有外科手術(shù)指征者；③孕婦、哺乳期女性；④合并有心、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病、精神病者。

2 方法

2.1 標(biāo)本采集方法 晨起空腹采集PU患者靜脈血5 mL，自然狀態(tài)下放置30 min，低溫3 000 r/min離心10 min，取上清液于-80℃貯存。

2.2 檢測方法 按照試劑盒說明書，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測NO、DEFA、TFF、AQP4和ET水平。

3 結(jié)果

3.1 性別因素 不同性別PU患者血清NO、ET、TFF、AQP4、DEFA表達(dá)水平有差異，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 47例消化性潰瘍患者性別與細(xì)胞因子水平相關(guān)性分析

3.2 年齡因素 不同年齡PU患者血清ET的表達(dá)水平有差異，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，中年組ET表達(dá)量明顯高于其他年齡段。而血清NO、TFF、AQP4、DEFA表達(dá)水平雖有差異，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 47例消化性潰瘍患者年齡與細(xì)胞因子水平相關(guān)性分析

3.3 季節(jié)因素 不同季節(jié)PU患者血清TFF表達(dá)水平有差異，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，冬春季TFF水平低于夏秋季；通過spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)，季節(jié)變化與TFF表達(dá)量呈顯著正相關(guān)(r=0.365，P<0.05)。血清NO、ET、AQP4、DEFA表達(dá)水平各不相同，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 47例消化性潰瘍患者季節(jié)與細(xì)胞因子水平相關(guān)性分析

3.4 病變部位細(xì)胞因子 TFF在PU患者不同病變部位的表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，DU組血清TFF水平明顯高于其他兩組。而其他細(xì)胞因子表達(dá)水平雖有差異，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

表4 47例消化性潰瘍患者病變部位與細(xì)胞因子水平相關(guān)性分析

3.5 發(fā)病類型 不同發(fā)病類型PU患者血清NO、ET、TFF、AQP4、DEFA表達(dá)水平有差異，但均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表5。

表5 47例PU患者發(fā)病類型與細(xì)胞因子水平相關(guān)性分析

3.6 Hp感染 細(xì)胞因子TFF表達(dá)水平與Hp感染情況具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，PU患者中Hp陽性者血清TFF含量低于Hp陰性者，經(jīng)spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)，兩者呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.399，P<0.01)。其他細(xì)胞因子亦有相似的表達(dá)趨勢，表達(dá)水平有差異，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表6。

表6 47例消化性潰瘍患者Hp感染與細(xì)胞因子水平相關(guān)性分析

4 討論

近年來，隨著對PU病因及發(fā)病機(jī)制研究的不斷深入，細(xì)胞因子學(xué)說在PU的發(fā)生、發(fā)展中起著愈來愈重要的作用。細(xì)胞因子因生物活性不同，分為攻擊性細(xì)胞因子與保護(hù)性細(xì)胞因子。正常狀態(tài)下，兩類細(xì)胞因子相對平衡，但當(dāng)攻擊性因子過強(qiáng)或保護(hù)性因子減弱，則會(huì)削減黏膜屏障作用，誘導(dǎo)潰瘍發(fā)生。本研究重點(diǎn)著眼于血清細(xì)胞因子NO、DEFA、AQP4、ET和TFF在不同環(huán)境及條件下的表達(dá)異同。NO是一種雙重作用性細(xì)胞因子，當(dāng)其水平較低時(shí)，可提高黏膜屏障防御功能，為組織修復(fù)和重建提供穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境；反之，則使黏膜血流量降低，細(xì)胞缺血、缺氧，毛細(xì)血管通透性增加，而表現(xiàn)出細(xì)胞毒作用[2]。DEFA是一種小分子抗菌肽，具有一定的免疫調(diào)節(jié)作用，其水平下降可能是誘發(fā)潰瘍發(fā)病的原因之一[3]。AQP4是一類位于胃底腺主細(xì)胞和壁細(xì)胞膜上的疏水性跨膜小分子整合蛋白，參與胃液的分泌及維持黏膜的完整性[4]。動(dòng)物試驗(yàn)證明其水平的變化與胃黏膜炎癥水腫變化相一致[5]，故與PU的形成關(guān)系密切。ET是一種活性多肽，屬于胃黏膜侵襲因子，通過影響?zhàn)つの⒀h(huán)、降低胃酸清除率等損傷胃黏膜，降低其防御功能，誘導(dǎo)潰瘍發(fā)生。TFF是由胃腸道黏膜細(xì)胞分泌的小分子多肽，具有保護(hù)、促進(jìn)黏膜修復(fù)的作用。因此，細(xì)胞因子表達(dá)水平的高低及其相互作用關(guān)系在PU發(fā)病及復(fù)發(fā)中占據(jù)重要地位。流行病學(xué)顯示，PU發(fā)病與年齡、性別、季節(jié)、部位等因素關(guān)系密切[6]，且這些因素可一定程度上影響細(xì)胞因子的表達(dá)水平，進(jìn)而決定疾病的發(fā)展方向。

本研究對47例PU患者NO、DEFA、TFF、AQP4和ET水平進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)由于自身基本情況及季節(jié)等因素的不同，其細(xì)胞因子表達(dá)水平也不盡相同。研究結(jié)果顯示：①不同年齡PU患者血清細(xì)胞因子ET的表達(dá)水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，中年組ET水平顯著高于青年組與老年組。流行病學(xué)發(fā)現(xiàn)，年齡為PU發(fā)病因素之一，且以40～60歲患者檢出率最高[7]，與本研究結(jié)論相一致。說明PU于中年組多發(fā)可能與該年齡段ET水平升高有關(guān)。②不同季節(jié)PU患者血清TFF的表達(dá)水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，冬春季TFF水平顯著低于夏秋季，且兩者呈現(xiàn)正相關(guān)性。TFF表達(dá)量于冬春季降低或許與寒冷天氣或氣溫劇變引起合成分布異常有關(guān)，但確切機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。③細(xì)胞因子TFF在PU患者不同病變部位的表達(dá)水平具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，DU組TFF水平高于其他兩組，考慮是否與其較強(qiáng)的組織表達(dá)專一性有關(guān)。因TFF與特異性受體或轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白通過一系列的信號傳導(dǎo)途徑完成其對黏膜的保護(hù)功能[8]，故可因作用靶點(diǎn)、通路的不同而呈現(xiàn)部位表達(dá)差異性。④Hp陽性組的血清細(xì)胞因子TFF表達(dá)量明顯低于Hp陰性組(P<0.05)，兩者呈顯著負(fù)相關(guān)性。說明Hp感染可能導(dǎo)致TFF表達(dá)量減少，從而降低黏膜防御功能，出現(xiàn)黏膜損傷，潰瘍發(fā)生。TFF作用機(jī)制除通過與黏蛋白的相互作用增強(qiáng)黏膜防御屏障外，還可通過細(xì)胞遷移、抗凋亡、參與血管生成等機(jī)制促進(jìn)黏膜重建。研究顯示TFF在胃黏膜有特定的細(xì)胞結(jié)合位點(diǎn)，故可能通過膜受體激活相關(guān)信號通路以及與其他蛋白質(zhì)結(jié)合而發(fā)揮其生物學(xué)功能[9]。本研究中TFF于冬春季節(jié)表達(dá)較低，與氣溫又無明確相關(guān)性，可進(jìn)一步研究季節(jié)對其影響的具體途徑；TFF在DU患者中表達(dá)較高，于Hp陽性患者中表達(dá)較低，說明其在潰瘍患者尤其是DU患者中發(fā)揮著明確的保護(hù)性作用，臨床中可以考慮檢測血清TFF預(yù)測PU的發(fā)生，尤其是更為反復(fù)難愈的DU的發(fā)生。

PU多因飲食不節(jié)、情志失調(diào)或感受外邪等致脾失健運(yùn)，胃失和降，不通而痛。病機(jī)以脾胃虛弱為本，氣滯、血瘀、濕、熱為標(biāo)[10]。病位在胃，和肝、脾兩臟關(guān)系密切?！端貑栠z編·刺法論》云：“正氣存內(nèi)，邪不可干。”指出發(fā)病多因正邪相爭、陰陽失調(diào)所致。潰瘍發(fā)生，亦是如此。正即保護(hù)性細(xì)胞因子對胃黏膜的防御、修復(fù)功能；邪為攻擊性細(xì)胞因子對黏膜的損傷、破壞之力。正常情況下兩者處于動(dòng)態(tài)平衡，維持臟腑正常的功能活動(dòng)；一方偏盛或偏衰，都會(huì)誘導(dǎo)潰瘍發(fā)生。故通過中醫(yī)“正邪觀”認(rèn)識細(xì)胞因子間的相互作用，可進(jìn)一步了解疾病的動(dòng)態(tài)變化。

PU因病位不同，臨床特點(diǎn)及證候虛實(shí)亦各有差異。GU疼痛規(guī)律為進(jìn)食后加重，1～2 h后可緩解；DU為空腹疼痛加重，得食緩解，且夜間痛甚。《景岳全書·心腹痛》載：“得食稍可者為虛，脹滿畏食者為實(shí)?！惫收J(rèn)為GU屬實(shí)，DU屬虛?！吧酁槠⒅夂颉?，舌苔由胃氣化生，可反映病邪性質(zhì)、邪正消長。王長洪等[11]觀察PU患者舌象變化，發(fā)現(xiàn)DU多為正常舌象，GU則多為黃厚苔，進(jìn)一步驗(yàn)證兩者的虛實(shí)關(guān)系。

《素問·寶命全形論篇》曰：“人以天地之氣生，四時(shí)之法成?！睆?qiáng)調(diào)自然四時(shí)氣候變化對人體生命活動(dòng)的影響。研究顯示，PU的中醫(yī)辨證分型以肝胃不和、脾胃虛寒等為主[12]，且于冬春季高發(fā)。肝在五行屬木，通于春氣，春季陽氣升發(fā)，肝的疏泄功能增強(qiáng)，有助于脾升胃降；若素體肝胃不和，不能順應(yīng)春季時(shí)序變化，則多于春季發(fā)病。冬季嚴(yán)寒，陽消陰長，人體亦順應(yīng)自然變化，收藏陽氣，以暖脾胃；若素體脾胃虛寒，正氣虧虛，無力收藏，常因脾失溫煦發(fā)病。故潰瘍病多發(fā)于冬春季。

《素問·陰陽應(yīng)象大論篇》曰：“年四十而陰氣自半也，起居衰矣。”中年之后腎氣漸虧，或因腎水不足，水不涵木，肝木橫逆，克伐脾胃，而見肝胃不和之證；或因腎陽不足，火不生土，致脾胃虛寒。中年人工作、家庭、生活壓力大，勞役過度，饑飽失常，寒溫不適，精神緊張，常損及肝脾，致胃失和降，不通則痛。故潰瘍病好發(fā)于中年。

細(xì)胞因子致PU發(fā)病已引起愈來愈廣泛的關(guān)注，隨著研究的深入，可能成為PU診斷、預(yù)測及預(yù)后的一項(xiàng)生物學(xué)指標(biāo)。筆者通過研究影響其表達(dá)水平的相關(guān)因素，可為更加有效地動(dòng)態(tài)監(jiān)測、干預(yù)PU的發(fā)展、轉(zhuǎn)歸及預(yù)后以及中醫(yī)微觀辨證用藥提供依據(jù)。但因樣本量有限，尚不能明確性別、發(fā)病類型等因素對細(xì)胞因子表達(dá)水平的影響，亟須進(jìn)一步的研究與探討。

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