胃息肉中TGF-β1、Smad 3的表達及其與胃息肉癌變之間的相關(guān)性

師艾麗，李菲，陳啟龍，安俊平，宋蘇華

（1.徐州市腫瘤醫(yī)院消化科，江蘇 徐州 221005；2.徐州市腫瘤醫(yī)院病理科，江蘇 徐州 221005）

胃息肉是從胃黏膜表面突起延伸向胃腔的隆起性病變，多數(shù)在內(nèi)鏡檢查時偶然發(fā)現(xiàn)[1]。胃息肉可分為腫瘤性息肉和非腫瘤性息肉。目前認為腺瘤性息肉與胃癌發(fā)生有密切關(guān)系。有報道稱，腺瘤性息肉的癌變率大約為15.69%～41.00%[2-3]。轉(zhuǎn)化生長因子-β是一種對多種細胞具有刺激或抑制作用的多功能多肽類細胞因子，幾乎體內(nèi)的所有細胞都能產(chǎn)生TGF-β1。在胃癌組織中，TGF-β1及其受體的異常表達在促進腫瘤的發(fā)生和進展過程中發(fā)揮著重要作用[4]，但TGF-β1及其通路在胃息肉中的表達及其在胃息肉癌變中的作用研究甚少?，F(xiàn)對本院2012年1月～2014年11月行胃鏡下息肉EMR摘除治療的胃息肉、胃癌及慢性胃炎患者行TGF-β1及Smad 3的表達監(jiān)測，以期為胃息肉癌變預測及早期胃癌的臨床診斷提供新的特異性的生物學標志物，進而為胃息肉的臨床處理策略提供選擇依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇本院2012年1月～2014年11月住院行胃息肉EMR切除的患者30例，其中男13例，女17例，平均年齡（53.3±11.7）歲，胃惡性腫瘤30例，其中男19例，女11例，平均年齡（64.6±9.4）歲，慢性胃炎20例，其中男12例，女8例，平均年齡（58.3±4.7）歲，對鏡下所發(fā)現(xiàn)的病變仔細觀察并記錄其形態(tài)及大型，采集每位患者的相關(guān)臨床資料，研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會同意，受試者均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化法檢測TGF-β1、Smad 3：采用免疫組化SP法。TGF-β1、Smad 3免疫組織化學檢測試劑盒均購自北京中杉生物公司。采用1∶100濃度稀釋。SP試劑盒，DAB購自北京中杉生物公司。免疫組化操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。以PBS代替一抗作為陰性對照。

1.2.2 免疫組化結(jié)果判定：TGF-β1蛋白主要表達于細胞質(zhì)中，呈棕黃色。Smad 3蛋白主要表達于細胞的胞質(zhì)和胞核中，亦呈棕黃色。染色結(jié)果按二級定位法判定，結(jié)果判定有兩位病理科醫(yī)師雙盲獨立完成。陽性染色細胞百分率評分標準為：＜20%為0分，21%～40%為1分，41%～60%為2分，61%～80%為3分，＞81%為4分。染色強度評分標準為：無著色或淡黃色為0分，淺棕黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分，兩項分數(shù)相加進行最終計分判定，＜2分為（-），2～3分為（+），4～5分為（++），6～7分為（+++）。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 12.0統(tǒng)計學軟件對相關(guān)數(shù)據(jù)進行分析。計數(shù)資料采用卡方檢驗，計量資料采用t檢驗，數(shù)值以“”差表示。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義，檢驗水準α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 TGF-β1、Smad 3的表達與胃息肉腫瘤進展的關(guān)系TGF-β1在胃癌中高表達，在胃息肉及慢性胃炎中低表達，差別有統(tǒng)計學意義，Smad 3在胃癌低表達，在慢性胃炎中高表達，在胃息肉中的表達低于胃癌組，但高于慢性胃炎組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

2.2 不同類型胃息肉和胃癌中TGF-β1、Smad 3的表達與臨床參數(shù)的關(guān)系 Smad 3在胃癌組織中低表達，在胃息肉中表達較高，與胃息肉類型無明顯差異性，Smad 3表達與胃癌進展負相關(guān)，分化程度高，TNM分期早，未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，Smad 3表達程度就高。兩者在胃癌中的表達與患者性別及年齡無關(guān)，與腫瘤的TNM分期、癌細胞分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，見表1，見圖1～圖6。

表1 TGF-β1、Smad 3的陽性表達在不同病理特征中的關(guān)系Table 1 The relationship between positive expression of TGF-beta 1 and Smad 3 in different pathological characteristics

圖1～圖3 轉(zhuǎn)化生長因子在慢性胃炎，胃息肉及胃癌中的表達

圖4～圖6 Smad 3在慢性胃炎，胃息肉及胃癌中的表達Figure 4-figure 6 Smad 3,expression in chronic gastritis,gastric polyps and gastric cancer

3 討論

胃癌是常見的惡性腫瘤之一，在我國，每年死于胃癌的患者大約16萬人，病死率居各類惡性腫瘤之首，由于胃癌缺乏特異性表現(xiàn)，故早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷對患者的治療和預后至關(guān)重要[5]。

胃癌的發(fā)生是一個長期的過程，常會經(jīng)歷多年持續(xù)的癌前變化，多種癌癥相關(guān)基因均在其中起著重要作用。胃癌的癌前疾病是指與胃癌相關(guān)的胃良性病變，包括慢性萎縮性胃炎、胃腺瘤、胃潰瘍、殘胃、惡性貧血及巨大胃黏膜皺襞癥等。近年來隨著胃鏡技術(shù)的開展及普及，越來越多的癌前疾病被及時發(fā)現(xiàn)，對阻止胃癌的發(fā)生有一定的作用，其中胃息肉作為臨床最常見的胃部疾病，其惡變的幾率及與腫瘤之間的相關(guān)性備受關(guān)注。

胃息肉作為癌前疾病的一種，可分為增生性息肉和腺瘤性息肉[6]。據(jù)文獻報告，增生性息肉癌變率為0.3%～0.6%[7-8]，腺瘤性息肉的癌變率達15.69%～41.00%[2-3]，其中呈乳頭狀生長者稱為乳頭狀息肉，后兩者可能發(fā)生癌變。這是因為腺瘤性息肉及乳頭狀息肉帶有腫瘤性質(zhì)，已完全失去了胃黏膜及腺體的正常結(jié)構(gòu)，胃息肉的癌變率因胃息肉的種類不同而不同，腺瘤性息肉的癌變率在40%左右，而增生性的胃息肉癌變率不超過5%，后者發(fā)生癌變的原因是在增生性息肉內(nèi)出現(xiàn)了異型增生或腺瘤，也就是說在癌前疾病內(nèi)出現(xiàn)了癌前病變。

轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）是一組結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān)的活性多肽，TGF-β1是這一家族的主要成員。TGF-β1可通過阻止細胞從G1-S期，對上皮起源細胞有明顯的生長抑制作用[9]。TGF-β1屬于負性生長因子[10]，但在胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中，腫瘤可擺脫TGF-β1的抑制，甚至被TGF-β1刺激而過度生長，故TGF-β1為雙向調(diào)節(jié)因子。隨著胃癌臨床分期的進展及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的出現(xiàn)，TGF-β1表達逐漸增強，但與患者的年齡及性別無關(guān)[11-13]，提示TGF-β1可能促進胃癌的發(fā)生及發(fā)展。在本試驗中，轉(zhuǎn)化生長因子-β1在胃癌中的表達明顯升高，胃癌組織中的陽性表達率為73.3%，明顯高于胃息肉及慢性胃炎組織，其陽性表達率分別為56.7%及40%，（χ2=5.19、3.98，P＜0.05），在不同類型胃息肉中，轉(zhuǎn)化生長因子-β1的表達具有差異性，在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌患者中，轉(zhuǎn)化生長因子-β1的陽性率表達增高，與相關(guān)文獻觀點相符，提示轉(zhuǎn)化生長因子-β1可能促進胃癌的發(fā)生及發(fā)展，而胃息肉作為癌前疾病的一種，轉(zhuǎn)化生長因子-β1表達的改變可能在息肉癌變中發(fā)揮一定的作用。

TGF-β超家族是一種信使蛋白，Smads蛋白是轉(zhuǎn)化生長因子通路中的重要信使，Smad 3的表達缺失或突變使TGF-β信號傳遞中斷，細胞逃脫TGF-β的生長抑制作用，導致許多腫瘤的發(fā)生及發(fā)展。故在胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中，Smad 3作為TGF-β超家族表達過程中的抑制生長信號因子，能改變細胞的生長周期，調(diào)控異常細胞的分裂周期[14]，對機體起到保護作用。在本試驗中，Smad 3在正常胃黏膜組織中的表達最高，值為55%，胃癌中的Smad 3陽性表達率最低，值為36.6%，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=4.27，P＜0.05），與胃息肉相比，兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義，提示Smad 3表達的減少及缺失是引發(fā)腫瘤發(fā)生的重要環(huán)節(jié)。

綜上所述，轉(zhuǎn)化生長因子-β在胃癌的發(fā)生與發(fā)展過程中均發(fā)生著重要的作用，而胃息肉作為胃癌的癌前疾病，亦存在上述信號傳導通路的異常，對研究胃癌的發(fā)生機制提供了一個新的思路，同時在臨床上，對于胃腺瘤樣息肉需盡早行內(nèi)鏡下治療，避免息肉的進一步惡變，預防胃癌的發(fā)生。

[1] 白賢女,王彥銘,王超.胃息肉[J].黑龍江醫(yī)學,2004,28(11):827-831.

[2] 增健,黎樂群,肖強.胃息肉惡變的臨床病理因素分析[J].綜合臨床醫(yī)學,1997,13:309.

[3] Eastwood GL.Premalignant condition of the gastrointestinal tract[J].Elsevier,1991,14(1):S29.

[4] Tateishi M,Kusaba I,Masuda H,et al.The progression of invasiveness regarding the role of transforming growth factor beta receptor typeⅡin gastric cancer[J].Eur J Sury Oncol 2000,26(4):377-380.

[5] Oka S,Tanaka S,Numata N,et al.Endoscopic diagnosis of early gastric Cancer[J].Nihon Rinsho,2012,70(10):1742-1747.

[6] Orlowska J,Jarosz D,Pachlewshi J,et al.Malignant transformation of benign epithelial gastric polyps[J]. Am J Gastroentenol, 1995,90(12):2152-2159.

[7] Stolte M.Clinical consequences of the endoscopic diagnosis of gastric polyps[J].Endoscopy,1995,27(1):32.

[8]Abraham SC,Singh VK,Yardley JH,et al.Hyperplastic polyps of the stomach[J].Am J Surgical Patho,2001,25(4):500-507.

[9] Wrana JL,Attisano L,Wieser R,et al.Mechanism of activation of the TGF-beta receptor[J]. Nature,1944,370(6488):341-347.

[10]Chen XM,Li HX.Expression and significance of TGF-β1,TGF-βRⅡ receptor and CDK4 in primary hepatocellar carcinoma[J].Chinese Journal of General Surgery,2005,14(2):146-148.

[11]Li X,Yue ZC,Zhang YY,et al.Elevated serum level and gene polymorphisms of TGF-β1 in gastric cancer[J].J Clin Lab Anal,2008,22(3):164-171.

[12]Gulubova M,Manolova I,Ananiev J,et al.Relationship of TGF-β1 and Smad 7 expression with decreased dendritic cell infiltration in liver gastrointestinal cancer metastasis[J].MIS,2013,121(10):967-975.

[13]Pang JC,Virani NK,Kidwell Km,et al.Characterization of typeⅢ TGF-βreceptor expression in breast carcinomas:a potential new marker and target for triple negative breast cancer[J].J Cell Commun signal,2014,8(3):211-218.

[14]馬速佳,周志強,吳成穩(wěn),等.人體胃癌組織中Smad 3與Smad 7的相關(guān)性表達及其臨床意義[J].重慶醫(yī)科大學學報,2014,39(3):378-382.