中藥川貝對(duì)哮喘模型小鼠氣道炎癥的影響及可能機(jī)制研究*

李厚忠，高照渝，王慧，任公平，徐紅納，劉藝，鞏麗虹，張羽飛

（1.牡丹江醫(yī)學(xué)院，黑龍江 牡丹江 157011；2.牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬紅旗醫(yī)院，黑龍江 牡丹江 157011；3.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院，黑龍江 齊齊哈爾 161006）

支氣管哮喘（bronchial asthma，BA）簡(jiǎn)稱哮喘，是一種高發(fā)病率的慢性炎癥性疾病，炎癥反應(yīng)在哮喘發(fā)生和進(jìn)展中發(fā)揮著重要作用，被認(rèn)為可能是哮喘的可能發(fā)病機(jī)制之一[1-2]。目前臨床上常用的抗炎藥，如糖皮質(zhì)激素、白三烯受體拮抗藥等，能迅速控住氣道炎癥，效果良好，但是仍然存在一些弊端，如停藥后的復(fù)發(fā)，長(zhǎng)期用藥導(dǎo)致全身或局部的不良反應(yīng)等[3-4]。因此尋找一種安全有效而不良反應(yīng)小的治療哮喘的藥物顯得格外重要。中藥大多為天然植物，不良反應(yīng)相對(duì)較小，可作為很好的選擇。

川貝（Bulbus fritillariae cirrhosae）是具有代表性的川產(chǎn)道地名貴藥材，為臨床常用中藥，其性苦、甘，微寒，有化痰止咳、清熱散結(jié)、潤(rùn)肺之功效，多用于熱痰、燥痰、肺虛勞嗽、久嗽、痰少咽燥及痰中帶血等最為對(duì)證，還常用于心胸郁結(jié)、肺痿、肺癰之證[5]。本研究前期實(shí)驗(yàn)表明，川貝可有效降低哮喘模型模型小鼠一氧化氮（nitric oxide，NO）、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、白細(xì)胞介素1（interleukin，IL-1）及白細(xì)胞介素6（interleukin，IL-6）含量，升高超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力等[6-7]，同時(shí)也降低哮喘模型模型小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和缺氧誘導(dǎo)因子1α（hypoxi-inducible factor-1α，HIF-1α）的表達(dá)[8]。本研究旨在前期研究基礎(chǔ)上，繼續(xù)觀察川貝對(duì)哮喘模型小鼠氣道炎癥及白細(xì)胞介素8（interleukin-8，IL-8）、白細(xì)胞介素13（interleukin-13，IL-13），CXC趨化因子受體（CXC chemokine receptor 2，CXCR-2）和趨化因子配體[腫瘤生長(zhǎng)相關(guān)因子α（growth-related oncogene-α，GRO-α）、上皮細(xì)胞嗜中性粒細(xì)胞活性蛋白78（epithelial cell-derived neutrophil-activating protein-78，ENA-78） 及 嗜 中 性 活 性 肽 2（neutral active peptides-2，NAP-2）]的影響，探討其可能作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試藥中藥川貝粉的制備：選取整齊、粉性足者。用潔凈的紗布擦拭藥材表面以去除藥材表面的灰塵。凈選后的川貝通過滅菌消毒窗消毒15 min后直接轉(zhuǎn)至粉碎車間，用Fz-400型粉碎機(jī)組加工成100目細(xì)粉，收得的細(xì)粉裝入潔凈的容器中，封口。全部加工完后的細(xì)粉用潔凈的塑料袋分裝成1 kg/袋備用。臨用時(shí)參照唐德才等主編的《中藥學(xué)》所載成人所用劑量為3～6 g/d，根據(jù)動(dòng)物體表面積等效劑量計(jì)算方法，計(jì)算小鼠給藥劑量18.0 mg/kg為高劑量組，9.0 mg/kg為低劑量組。分別稱取川貝粉18 mg，9 mg各溶于生理鹽水5 ml，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雌性BALB/c小鼠50只，6～8周齡，由哈爾濱醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)為：P00102008，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（黑）2008-033?？照{(diào)恒溫室內(nèi)22℃，相對(duì)濕度50%，自由飲水飲食，通風(fēng)換氣8次/h。

1.1.3 試劑和儀器卵蛋白（OVA）（Sigma公司），兔抗人CXCR-2多克隆抗體、兔抗人GRO-α多克隆抗體、兔抗人ENA-78多克隆抗體及羊抗人NAP-2多克隆抗體（美國(guó)Santa Cruz公司），IL-8和IL-13檢測(cè)試盒（美國(guó)ADL公司），其他試劑均為國(guó)產(chǎn)或進(jìn)口分析純。恒溫水浴箱（HH-W210420L）（天津泰斯鵬儀器有限公司），微量加樣器（3112）（德國(guó)eppendorf），自動(dòng)平衡離心機(jī)（LDZ5-2）（北京京立離心機(jī)有限公司），電子天平（UW820S）（日本島津電子天平），超聲霧化器（402A）（江蘇魚躍醫(yī)療設(shè)備股份有限公司），光學(xué)顯微鏡（BH-2）（日本Olympus公司），粉碎機(jī)組（Fz-400）（天津市茂源制藥機(jī)械有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 模型復(fù)制健康清潔級(jí)BALB/c小鼠40只，腹腔內(nèi)注射10% OVA+10%氫氧化鋁混合液1 ml作為首次致敏，第15天將小鼠依次置于超聲霧化器中，用1%OVA生理鹽水噴霧激發(fā)小鼠哮喘發(fā)作，隔日1次，1次20 min，共激發(fā)10 d。以小鼠出現(xiàn)口唇發(fā)紺、腹肌痙攣、呼吸加快、點(diǎn)頭呼吸或站立不穩(wěn)等表現(xiàn)為成功激發(fā)。共復(fù)制成功30只。

1.2.2 分組及給藥將成功復(fù)制的哮喘模型小鼠隨機(jī)分模型組、高劑量組及低劑量組，每組10只；另設(shè)正常組（10只以生理鹽水代替OVA進(jìn)行腹腔注射及霧化吸入）。分組后每天灌胃給藥，正常組和模型組給予等量生理鹽水，高劑量組，低劑量組分別按照18.0及9.0 mg/kg劑量給予川貝粉，每天1次，連續(xù)28 d。

1.2.3 支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)最后1次給藥2 h后，各組小鼠用1%巴比妥鈉麻醉，剪掉頸部毛發(fā)后剪開皮膚，分離氣管周圍的組織，氣管作一橫行切口，插入氣管插管；心臟采血0.8～1.0 ml，EDTA抗凝，用于ELISA檢測(cè)。結(jié)扎右主支氣管，經(jīng)氣管插管10 ml生理鹽水分3次灌洗左肺，回收BALF經(jīng)2 000 r/min離心15 min，棄上清液，取沉渣經(jīng)生理鹽水重懸。Diff-Quik染色液染色BALF細(xì)胞涂片后，作細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。切取右支氣管平滑肌固定于10%的中性甲醛中，用于病理學(xué)觀察。切取右肺門部位組織用于免疫組織化學(xué)和realtime PCR分析。

1.2.4 支氣管平滑肌病理學(xué)觀察將右支氣管平滑肌組織10%中性甲醛固定后，常規(guī)酒精脫水，石蠟包埋，切片，HE染色，光鏡下觀察各組小鼠支氣管平滑肌病理學(xué)變化。評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：沒有炎癥細(xì)胞（0分）；有少量炎癥細(xì)胞（1分）；較多分布炎癥細(xì)胞，且分布不均（2分）；大量炎癥細(xì)胞，少許聚集成團(tuán)，且分布較均勻（3分）；可見大量炎癥細(xì)胞并且聚集成團(tuán)（4分）。

1.2.5 血清IL-8和IL-13濃度測(cè)定采用ELISA測(cè)定IL-8和IL-13的濃度，嚴(yán)格按照ELISA試劑盒的操作說明書進(jìn)行操作。每份樣品檢測(cè)3次。

1.2.6 免疫組織化學(xué)分析檢測(cè)CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2陽性細(xì)胞右肺門組織石蠟切片、脫蠟、脫水、浸泡于3% H2O2中15 min滅活內(nèi)源性過氧化物酶。置于煮沸檸檬酸鈉中修復(fù)抗原，暴露抗原表位并且用3%小牛血清蛋白阻斷。滴加一抗、二抗及鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶復(fù)合物，DAB顯色、鏡下觀察至出現(xiàn)棕黃色陽性信號(hào)后蒸餾水沖洗終止反應(yīng)，蘇木素復(fù)染、封片，拍照。隨機(jī)選定3個(gè)HPF（×200倍，用Image Pro Plus 6.0 圖像分析軟件測(cè)出光密度（OD）值，并計(jì)算平均OD值。

1.2.7 Real-time PCR分析CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2 mRNA轉(zhuǎn)錄水平Trizol試劑提取肺組織總RNA，檢測(cè)RNA純度，按照Real-time PCR試劑盒進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，合成單鏈的cDNA。cDNA產(chǎn)物置入-20℃冰箱冷凍保存。利用Pubmed查找相關(guān)基因序列，并利用引物合成軟件Primer Premier 5.0設(shè)計(jì)引物。Real-time PCR反應(yīng)體系：體積為25 μl；反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃變性45 s，60℃復(fù)性45 s，72℃延伸50s，共28個(gè)循環(huán)，72℃再延伸7 min。每個(gè)樣本以內(nèi)參基因β-actin調(diào)整。每個(gè)樣本以內(nèi)參基因β-actin調(diào)整。2-ΔΔCt法定量分析。每份樣品檢測(cè)3次。引物序列見表1。

表1 Real-time PCR引物序列

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，各組數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布，方差齊時(shí)，采用one-way-ANOWA分析，組間兩兩比較采用LDS-t檢驗(yàn)；方差不齊時(shí)采用Games-Howell檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 BALF白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)結(jié)果

各組小鼠BALF中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。模型組中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)與正常組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高劑量組和低劑量組中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 各組小鼠BALF分類細(xì)胞計(jì)數(shù) （n =10，×104/ml，±s）

表2 各組小鼠BALF分類細(xì)胞計(jì)數(shù) （n =10，×104/ml，±s）

注：1）與正常組比較，P ＜0.05；2）與模型組比較，P ＜0.05

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圖1 各組小鼠支氣管平滑肌病理學(xué)觀察 （HE染色×200）

2.2 支氣管平滑肌病理學(xué)觀察及半定量分析結(jié)果

HE染色結(jié)果顯示，正常組小鼠支氣管壁完整，平滑肌呈正常厚度，支氣管黏膜平整，細(xì)胞排列整齊，管腔內(nèi)無上皮細(xì)胞脫落，支氣管平滑肌內(nèi)及其周圍無明顯炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；模型組小鼠基層細(xì)胞增生，排列紊亂，平滑肌增厚，支氣管壁和周圍肺組織中有大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，主要是嗜酸性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，支氣管黏膜上皮脫落，水腫，管腔內(nèi)有分泌物，以上改變也證明哮喘模型復(fù)制成功；高劑量組和低劑量組小鼠支氣管平滑肌和氣管壁厚度減少，支氣管腔內(nèi)少量黏液和脫落細(xì)胞，支氣管噬酸性粒細(xì)胞和其他炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)有所減少，支氣管噬酸性粒細(xì)胞及其他炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減少，幾乎消失，平滑肌和管壁厚度幾乎接近正常組，支氣管黏膜平整規(guī)則，管腔內(nèi)偶爾可見脫落上皮細(xì)胞和少量黏液。見圖1。各組小鼠炎癥評(píng)分比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=12.451，P=0.001）。模型組炎癥評(píng)分與正常組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高劑量組和低劑量組炎癥評(píng)分與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表 3。

表3 各組小鼠炎癥評(píng)分結(jié)果 （n =10，分，±s）

表3 各組小鼠炎癥評(píng)分結(jié)果 （n =10，分，±s）

注：1）與正常組比較，P ＜0.05；2）與模型組比較，P ＜0.05

組別 炎癥評(píng)分正常組 1.13±0.18模型組 3.37±0.471）高劑量組 1.93±0.172）低劑量組 1.98±0.132）F值 12.451 P值 0.001

2.3 ELISA結(jié)果

各組小鼠血清IL-8和IL-13濃度比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。模型組血清IL-8和IL-13濃度與正常組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高劑量組和低劑量組血清IL-8和IL-13濃度與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表4 各組小鼠血清IL-8和IL-13濃度（n =10，pg/mL，±s）

表4 各組小鼠血清IL-8和IL-13濃度（n =10，pg/mL，±s）

注 ：1）與正常組比較，P ＜0.05 ；2）與模型組比較，P ＜0.05

組別 IL-8 IL-13正常組 327.00±57.01 382.80±56.82模型組 765.50±82.241） 834.24±86.241）高劑量組 421.69±47.672） 469.30±19.982）低劑量組 587.56±30.762） 682.60±24.802）F值 12.176 14.763 P值 0.001 0.000

圖2 各組小鼠免疫組織化學(xué)結(jié)果 （免疫組織化學(xué)×200）

2.4 免疫組織化學(xué)結(jié)果

免疫組織化學(xué)分析結(jié)果顯示，CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2陽性細(xì)胞的胞漿呈棕黃色表達(dá)，主要為支氣管上皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞。正常組小鼠陽性細(xì)胞表達(dá)較低，而模型組小鼠表達(dá)較高，高劑量組和低劑量組小鼠表達(dá)降低。見圖2。各組小鼠CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2 OD值比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。模型組鼠CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2 OD值與正常組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高劑量組和低劑量組鼠CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2 OD值與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表5。

表5 各組小鼠CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2表達(dá) （n =10，±s）

表5 各組小鼠CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2表達(dá) （n =10，±s）

注：1）與正常組比較，P ＜0.05；2）與模型組比較，P ＜0.05

OD值CXCR-2 GRO-α ENA-78 NAP-2正常組 152.80±25.14 173.20±27.07 233.40±38.72 115.19±21.11模型組 916.63±154.201） 820.64±124.501） 1231.00±206.301） 1024.82±208.481）高劑量組 304.17±27.862） 415.50±57.392） 549.50±80.932） 363.76±58.642）低劑量組 401.51±31.592） 497.41±45.622） 833.79±48.012） 575.92±47.072）F值 16.746 13.534 16.263 13.639 P值 0.001 0.001 0.000 0.001組別

2.5 Real-time PCR結(jié)果

各 組 小 鼠CXCR-2和 GRO-α、ENA-78、NAP-2 mRNA表達(dá)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。模型組 鼠 CXCR-2和 GRO-α、ENA-78、NAP-2 mRNA表達(dá)與正常組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高劑量組和低劑量組鼠CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2 mRNA表達(dá)與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表 6。

表6 各組小鼠CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2 mRNA表達(dá) （n =10，±s）

表6 各組小鼠CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2 mRNA表達(dá) （n =10，±s）

注：1）與正常組比較，P ＜0.05；2）與模型組比較，P ＜0.05

mRNA表達(dá)CXCR-2 GRO-α ENA-78 NAP-2正常組 0.173±0.026 0.041±0.007 0.327±0.027 0.247±0.047模型組 0.414±0.0591） 0.743±0.1011） 1.228±0.1981） 1.189±0.1751）高劑量組 0.240±0.0262） 0.347±0.0642） 0.404±0.0612） 0.499±0.0652）低劑量組 0.301±0.0122） 0.531±0.0342） 0.729±0.0812） 0.675±0.0442）F值 10.481 24.935 7.642 17.423 P值 0.001 0.000 0.008 0.000組別

3 討論

氣道的炎癥是哮喘的特征性病理改變，包括多種炎癥細(xì)胞參與，如中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞等[9]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明，BALF中存在大量的中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞是哮喘的典型特征[10-11]。當(dāng)哮喘發(fā)作時(shí)，誘發(fā)機(jī)體的免疫反應(yīng)，引起中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞活化、向炎癥部位趨化、聚集，從而釋放炎癥介質(zhì)（如內(nèi)皮素、血小板活化因子及白三烯等）間接或者直接損傷氣道上皮細(xì)胞，引發(fā)氣道炎癥[12]。故此，中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞也稱為哮喘的主要炎癥效應(yīng)細(xì)胞，與哮喘的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，是哮喘臨床診斷最為重要的指標(biāo)。本研究顯示，模型組小鼠BALF中存在大量的中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞，與以往研究相一致，而正常組小鼠BALF中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞，淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞較少；給予川貝，高劑量組和低劑量組小鼠BALF中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞均較模型組降低。同時(shí)，本研究病理學(xué)觀察也證實(shí)川貝可降低哮喘小鼠炎癥評(píng)分。以上結(jié)果提示，川貝可有效抑制哮喘模型小鼠氣道炎癥反應(yīng)，改善哮喘癥狀。研究證實(shí)，IL-8和IL-13在哮喘的發(fā)病中起重要作用，且在哮喘的氣道炎癥形成中發(fā)揮更重要的作用[13]。IL-8是趨化因子超家族中的一員（CXCL亞家族），也是中性粒細(xì)胞主要的趨化劑和激活劑，又名中性粒細(xì)胞趨化因子，同時(shí)還是哮喘氣道炎癥的上調(diào)因子，對(duì)多種炎癥細(xì)胞具有趨化作用，并與哮喘的嚴(yán)重程度密切相關(guān)[14]。IL-13是一種具有多效性的免疫調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞因子，對(duì)哮喘的氣道炎癥具有激發(fā)和促進(jìn)作用，是哮喘病理改變發(fā)生和發(fā)展的主要因素，可導(dǎo)致哮喘氣道慢性持續(xù)性炎癥，增加氣道阻力，促進(jìn)哮喘發(fā)病[15]。本研究顯示，模型組小鼠血清IL-8和IL-13濃度較高，而正常組小鼠血清濃度較低；給予川貝，高劑量組和低劑量組小鼠血清IL-8和IL-13濃度降低。以上結(jié)果提示，川貝對(duì)哮喘模型小鼠抑制炎癥反應(yīng)的機(jī)制可能與其抑制IL-8和IL-13濃度有關(guān)。

趨化因子是一大類功能結(jié)構(gòu)基本相似，具有和相應(yīng)的受體結(jié)合，誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞等細(xì)胞趨化游走的作用，從而介導(dǎo)炎癥部位的細(xì)胞聚集活化，并參與組織損傷的小分子蛋白質(zhì)[16]。CXCR-2屬于趨化因子受體超家族中的重要成員之一，是趨化因子主要受體。趨化因子受體是表達(dá)在中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞表面上介導(dǎo)相應(yīng)趨化因子發(fā)揮生物學(xué)功能的關(guān)鍵的G蛋白偶聯(lián)受體超家族。常見的趨化因子配體有GRO-α、ENA-78及NAP-2等。CXCR-2可與GRO-α、ENA-78及NAP-2等特異結(jié)合，趨化表達(dá)CXCR2的中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等細(xì)胞的游走及脫顆粒等一系列生物學(xué)效應(yīng)，在機(jī)體的防御和炎癥反應(yīng)等方面起重要作用，為哮喘治療的新靶點(diǎn)[17]。目前，以趨化因子受體CXCR-2為靶點(diǎn)的藥物已有所開發(fā)[18]。研究發(fā)現(xiàn)，在IL-13的刺激下，支氣管平滑肌的CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2均升高，且與中性粒細(xì)胞的移行和活化有關(guān)[19]。本研究顯示，模型組小鼠CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2陽性細(xì)胞和基因表達(dá)均較高，與以往研究相一致[20]，而在正常組小鼠CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2陽性細(xì)胞和基因表達(dá)均較低；給予川貝，高劑量組和低劑量組小鼠CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2陽性細(xì)胞和基因表達(dá)降低。以上結(jié)果提示，川貝對(duì)哮喘模型小鼠抑制炎癥反應(yīng)的機(jī)制可能與其抑制CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2有關(guān)。

綜上所述，中藥川貝可通過降低中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞，淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，進(jìn)而緩解小鼠哮喘的發(fā)作，減輕哮喘模型小鼠支氣管平滑肌的炎癥反應(yīng)，其機(jī)制可能與其抑制IL-8、IL-13，CXCR-2和GRO-α、ENA-78、NAP-2有關(guān)。

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