張文森
(福建師范大學(xué)福清分校 發(fā)酵食品應(yīng)用技術(shù)研究所,福建 福清 350300)
地瓜又名“紅薯”,是一種非常重要的食材。地瓜耐早、耐瘠、穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)、適應(yīng)性強、容易栽培,在我國主要的食品作物中,僅次于水稻、小麥和玉米[1],居第4位。地瓜營養(yǎng)豐富,地瓜中含有10%~30%的淀粉,5%左右的糖分及少量蛋白質(zhì)、油脂、纖維素、半纖維素、果膠、灰分等[2]。我國明代著名醫(yī)藥家李時珍在《本草綱目》中記載“白薯蒸、切、曬、收,充作糧食,使人長壽少病”,并指出地瓜性味甘平,有補脾胃、養(yǎng)心神、益力氣[3]、活血化瘀、清熱解毒等功效。地瓜含有一種特殊功能的黏蛋白,能維持人體心血管壁的彈性,抑止動脈硬化發(fā)生,使皮下脂肪減少,防止肝腎中結(jié)締組織萎縮、預(yù)防膠原病發(fā)生,并對呼吸道、消化道、關(guān)節(jié)腔和漿膜腔有很好的潤滑作用[4]??傊毓蠈Ψ乐褂绊懭祟悏勖钪匾募膊 ┌Y和心血管疾病,都有獨到之功效,是真正的綠色保健食品,深受廣大消費者的青昧[5]。
近年來,國內(nèi)外對地瓜的深加工進行了許多研究,如日本薩摩酒造公司開發(fā)的甘薯發(fā)酵啤酒風(fēng)味飲料[6],韓國的“真釀”低度飲料酒,均采用甘薯加麥芽發(fā)酵而成。國內(nèi)以連城地瓜產(chǎn)業(yè)為例,其地瓜主產(chǎn)品以紅心地瓜干加工為主[7],但產(chǎn)品深加工程度低,附加值不高,高附加值的地瓜加工新產(chǎn)品及功能性深加工產(chǎn)品未得到有效的開發(fā)生產(chǎn)。尤其是加工過程中產(chǎn)生的邊角料等副產(chǎn)品均以直接扔掉或者喂豬這樣的簡單方式處理,造成資源的浪費,地瓜資源得不到合理的配制和利用[8]。
傳統(tǒng)的地瓜酒工藝采用地瓜干進行釀造,民間特別是東南沿海地區(qū)也有人用鮮地瓜釀造地瓜酒,卻因工藝落后,釀造出來的地瓜酒出現(xiàn)出酒率低,蒸餾時未截頭去尾、未勾兌而導(dǎo)致喝了易上頭等缺點。
本實驗選用餐用型脫水地瓜加工過程產(chǎn)生的邊角料等副產(chǎn)品為原料,并對傳統(tǒng)地瓜酒的工藝進行改進、優(yōu)化。通過單因素試驗和正交試驗確定糖化酶的最佳試驗參數(shù)和最佳發(fā)酵工藝參數(shù),研制開發(fā)出高附加值的低度鮮地瓜酒,提高了地瓜資源的利用率,實現(xiàn)地瓜資源的高效利用。
1.1 主要材料與設(shè)備
1.1.1 材料
鮮地瓜 福清市農(nóng)機協(xié)會
耐高溫α-淀粉酶(酶活力≥2000U/g) 江蘇銳陽生物科技有限公司
糖化酶(酶活力≥5萬U/g) 江蘇銳陽生物科技有限公司
紅曲 福建古田紅曲廠
安琪耐高溫釀酒高活性干酵母 安琪酵母股份有限公司
氫氧化鈉、乙醇等試劑(分析純) 福州申輝化學(xué)試劑有限公司
1.1.2 設(shè)備
酒壇 市售
精宏DK-S24恒溫水浴鍋 上海精宏實驗設(shè)備有限公司
BPH9-9272電熱恒溫培養(yǎng)箱 金壇市信誠實驗儀器有限公司
PHS-3E型pH 計 上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司
打漿機 美的電器有限公司
酒精計 上海科學(xué)儀器有限公司
蒸餾器等玻璃儀器 福州玻璃儀器有限公司
1.2 方法
1.2.1 工藝流程
1.2.2 操作要點
(1)原料選擇
選用餐用型脫水地瓜加工后剩余的地瓜邊角料和等外品。
(2)清洗
將一定量的地瓜邊角料和等外品去霉?fàn)€,去雜質(zhì),清洗干凈。
(3)混料、打漿
將清洗好的地瓜邊角料與地瓜等外品切塊后混合,加入50%的蒸餾水打漿,加熱至100℃,保溫5min。
(4)液化
在自然pH條件下往地瓜漿中加入8u/g耐高溫α-淀粉酶,液化工藝條件為:(92±2)℃,酶解30min。
(5)糖化
糊化完成后,地瓜漿隔水冷卻至(59±1)℃時,用2mol/L的檸檬酸調(diào) pH(4.25±0.25) 后,加入糖化酶,糖化工藝條件為:(59±1)℃,酶解89min 。
(6)發(fā)酵劑的活化
紅曲:將所需紅曲置于8~10倍水中常溫浸泡活化14~16h。
酵母:將所需干酵母置于25~30倍2%糖液中38~43℃復(fù)水活化2h后備用。
(7)接種
糖化結(jié)束后,冷卻酶解液至28~30℃,接種事先活化好的紅曲和酵母,攪拌均勻,裝料量需≤2/3的酒壇容量,壇口用兩層報紙封住。
(8)發(fā)酵
發(fā)酵溫度控制在25~30℃,落缸后12~14h開頭耙,頭耙后每隔12h開二耙、三耙、四耙。當(dāng)醪液拱起并出現(xiàn)開裂時應(yīng)及時開耙排放二氧化碳,發(fā)酵過程注意控制品溫不可超過32℃,發(fā)酵周期為72h。
(9)蒸餾
發(fā)酵結(jié)束后,將發(fā)酵液并入蒸餾瓶中,加入數(shù)顆沸石,緩慢加熱蒸餾,分別收集酒頭(1%)、基酒(88%~90%)、酒尾(9%~11%)。
(10)勾兌
按配方分別取酒頭,基酒,酒尾混合后經(jīng)錯流膜過濾,備用。
(11)灌裝、殺菌
地瓜酒灌裝封口后,經(jīng)巴氏殺菌(80℃,20min)獲得低度鮮地瓜酒。
1.2.3 分析方法
1.2.3.1 還原糖的測定:按GB/T 5009.7-2008《食品中還原糖的測定》中相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。
1.2.3.2 酒精度、總酸、總酯的測定:按GB/T 10345-2007《白酒分析方法》中相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。
1.2.3.3 pH的測定:采用GB/T 10345-2007《白酒分析方法》pH計法 。
1.2.3.4 出酒率的計算方法
發(fā)酵醪液采用200目尼龍絹布過濾,測量地瓜酒體積(L),蒸餾后測定其酒精度數(shù),按公式(1-1)計算出酒率:
式中:X——出酒率(%);
C——酒液的酒精度%(v/v);
V——過濾后酒液的體積(L);
m——地瓜皮邊角料(kg);
M——地瓜等外品(kg)。
1.2.3.5 感官評定
按GB/T 20821—2007《液態(tài)法白酒》中感官評價的方法,從香氣、外觀、口味、風(fēng)格4個方面進行評價。組織10位對白酒有品評經(jīng)驗的人按表1評分標(biāo)準(zhǔn)進行感官評價,取平均值為最終評分。
1.2.3.6 產(chǎn)品品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)
酒精度(V/V):4%~12%
其他理化指標(biāo)按GB/T 20821-2007《液態(tài)法白酒》中相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。
表1 感官評價表
1.2.4 實驗方法
1.2.4.1 液化工藝的研究
采用淀粉酶添加量為8u/g、液化溫度為90~95℃(廠家提供技術(shù)參數(shù)),選擇酶解時間作為考察因素,以酶解液遇碘液顯色情況作為參考指標(biāo),確定最佳液化時間。
1.2.4.2 糖化工藝條件的研究
通過單因素實驗分析糖化酶添加量、糖化時間對糖化工藝的影響,在單因素實驗的基礎(chǔ)上,選擇糖化酶添加量和糖化時間作為考察因素,以地瓜酶解液中還原糖含量作為參考指標(biāo),進行2因素2次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合確定糖化最佳工藝條件。
1.2.4.3 發(fā)酵工藝條件的研究
通過單因素實驗分析料水比、酵母添加量、紅曲添加量、發(fā)酵周期對發(fā)酵工藝的影響,在單因素實驗的基礎(chǔ)上,選擇料水比、酵母添加量、紅曲添加量、發(fā)酵周期作為考察因素,以出酒率和感官評價作為考察指標(biāo),進行正交試驗確定最佳發(fā)酵工藝條件。
1.2.4.4 驗證實驗
采用最佳的糖化和發(fā)酵工藝條件,以500g地瓜投料量進行3批次驗證實驗,對產(chǎn)品進行感官評價和產(chǎn)品理化指標(biāo)的測定,驗證產(chǎn)品的最佳發(fā)酵工藝條件。
1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法
實驗所得數(shù)據(jù)采用SPSS和Excel軟件統(tǒng)計分析
2.1 液化工藝的研究
取200g地瓜邊角料和50g地瓜等外品,洗凈切塊混合后加入50%蒸餾水打漿,煮開后保溫5min。冷卻至(92±2)℃時加入8u/g耐高溫α-淀粉酶。每隔5min用碘液測試酶解液呈色情況,結(jié)果如圖1所示:
由圖1可知,隨著酶解時間的增加,酶解液顯色情況從黑色逐漸變成無色。當(dāng)酶解時間為30min時,酶解液經(jīng)碘液測試呈無色,繼續(xù)增加酶解時間,酶解液顯色變化不明顯。故確定最佳液化時間為30min。即最佳液化工藝條件為:淀粉酶添加量為8u/g在(92±2)℃條件下酶解30min。
圖1 不同液化時間對液化效果的影響
2.2 糖化工藝的研究
2.2.1 不同糖化酶添加量對糖化效果的影響
液化結(jié)束后,地瓜漿隔水冷卻至58~60℃,分別采用糖化酶添加量為50、100、150、200、250、300u/g,在(59±1)℃,pH(4.25±0.25)的條件下糖化180min,加熱滅酶后測定地瓜酶解液中還原糖含量,結(jié)果如圖2、表2所示:
圖2 不同糖化酶添加量對糖化效果的影響
表2 不同糖化酶添加量對糖化影響的差異顯著性
由圖2可知,隨著糖化酶添加量的增加,還原糖含量增加,當(dāng)糖化酶添加量超過150u/g時,還原糖含量增加不顯著。在酶促反應(yīng)中,當(dāng)?shù)孜餄舛葹楣潭ㄖ禃r,隨著酶添加量的增加,生成物越多;當(dāng)?shù)孜锶勘幻阜纸?,酶用量繼續(xù)增加,生成物幾乎不再變化。且經(jīng)LSD多重比較結(jié)果表明:150u/g添加量與100u/g有顯著差異而與200u/g無顯著差異。故確定最佳糖化酶添加量為150u/g。
2.2.2 不同糖化時間對糖化效果的影響
液化結(jié)束后,地瓜漿隔水冷卻至58~60℃,在(59±1)℃,pH(4.25±0.25)的條件下添加糖化酶150u/g,分別糖化30、60、90、120、150、180min,加熱滅酶后測定地瓜酶解液中還原糖含量,結(jié)果如圖3、表3所示:
圖3 不同糖化時間對糖化效果的影響
表3 不同糖化時間對糖化影響的差異顯著性
由圖3可知,隨著糖化時間的增加,還原糖含量增加,當(dāng)糖化時間超過90min時,還原糖含量增加不顯著。在酶促反應(yīng)中,當(dāng)?shù)孜餄舛葹楣潭ㄖ禃r,隨著糖化時間的增加,生成物越多;當(dāng)?shù)孜锶勘幻阜纸夂?,繼續(xù)增加糖化時間,生成物幾乎不再變化。且經(jīng)LSD多重比較結(jié)果表明:90min與60min有顯著差異而與120min無顯著差異。故確定最佳糖化時間為90min。
2.2.3 二因素二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合優(yōu)化糖化工藝
在上述單因素實驗的基礎(chǔ)上,選擇糖化酶添加量和糖化時間作為考察因素,進行2因素2次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合實驗,測定地瓜酶解液中還原糖含量,結(jié)果見表4、表5、表6。
表4 試驗因素水平編碼表
表5 2次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計方案
在α=0.10顯著水平剔除不顯著項后,簡化后的回歸方程為Y=10.75312X1+0.17065X2-0.52113X1^2最高值各因素組合為X1=0,X2=1.414,Ymax=11.0。故糖化酶添加量為0.75g,糖化時間為89min。即最佳的糖化工藝為:糖化酶添加量為150u/g,在(59±1)℃條件下糖化89min。
表6 糖化工藝方差分析表
2.3 發(fā)酵工藝條件的研究
2.3.1 不同料水比對發(fā)酵結(jié)果的影響
圖4 不同料水比對發(fā)酵結(jié)果的影響
表7 不同料水比對感官評價影響的差異顯著性
取糖化結(jié)束后冷卻至28~30℃的地瓜酶解液加入6%紅曲、0.06%干酵母,料水比(酶解液:水)分別采用1:0.5、1:1、1:1.5、1:2和1:2.5,攪勻后28℃發(fā)酵3d。測定蒸餾酒液酒精度數(shù),計算出酒率并對其進行感官評價。結(jié)果如圖4、表7所示:由圖4可以看出:隨著料水比的增加,出酒率和感官品質(zhì)也呈上升趨勢,但當(dāng)料水比超過1:1.5時,出酒率和感官品質(zhì)卻呈下降趨勢。系料水比小于1:1.5時底物濃度偏高發(fā)酵不完全導(dǎo)致發(fā)酵醪液中殘?zhí)呛扛哂绊懗鼍坡屎彤a(chǎn)品口感;而料水比高于1:1.5時,產(chǎn)品酒精度呈下降趨勢,酒體單薄。且經(jīng)LSD多重比較結(jié)果表明:料水比1:1與1:0.5、1:1.5有顯著差異,故確定最佳料水比為1:1.5。
2.3.2 不同酵母添加量對發(fā)酵結(jié)果的影響
圖5 不同干酵母添加量對發(fā)酵結(jié)果的影響
表8 不同酵母添加量對感官評價影響的差異顯著性
取糖化結(jié)束后冷卻至28~30℃的地瓜酶解液加入6%紅曲,料水比為1:1.5,分別采用0.02%、0.04%、0.06%、0.08%和0.1%干酵母添加量,攪勻后28℃發(fā)酵3d。測定蒸餾酒液酒精度數(shù),計算出酒率并對其進行感官評價。結(jié)果如圖5、表8所示:
由圖5可知:隨著干酵母的增加,出酒率和感官品質(zhì)也呈上升趨勢,但當(dāng)干酵母量超過0.04%時出酒率增加不顯著,而感官品質(zhì)卻顯著下降。在底物濃度一定的情況下,由于酵母添加量過大,前發(fā)酵速度過快使得發(fā)酵酒液口感較為粗糙、苦澀味偏重導(dǎo)致感官品質(zhì)下降,且經(jīng)LSD多重比較結(jié)果表明:0.04%添加量與0.02%、0.06%有顯著差異。故確定最佳干酵母添加量為0.04%。
2.3.3 不同紅曲添加量對發(fā)酵結(jié)果的影響
取糖化結(jié)束后冷卻至28~30℃的地瓜酶解液加入0.04%干酵母,料水比為1:1.5,分別采用2%、4%、6%、8%和10%紅曲添加量,攪勻后28℃發(fā)酵3d。測定蒸餾酒液酒精度數(shù),計算出酒率并對其進行感官評價。結(jié)果如圖6、表9所示:
圖6 不同紅曲添加量對發(fā)酵結(jié)果的影響
表9 不同紅曲添加量對感官評價影響的差異顯著性
由圖6可知:隨著紅曲添加量的增加,出酒率和感官品質(zhì)也呈上升趨勢,但當(dāng)加曲量超過6%時出酒率增加不顯著,而感官品質(zhì)卻下降。隨著紅曲量的增加,受紅曲中多菌種的協(xié)同作用,淀粉水解和發(fā)酵速度加快,酒度逐漸上升,當(dāng)加曲量超過6%,對酒精發(fā)酵影響很小,出酒率幾乎不發(fā)生變化,酸味偏重導(dǎo)致感官品質(zhì)下降。且經(jīng)LSD多重比較結(jié)果表明:6%添加量與4%、8%有顯著差異,故確定最佳紅曲添加量為6%。
2.3.4 不同發(fā)酵周期對發(fā)酵結(jié)果的影響
取糖化結(jié)束后冷卻至28~30℃的地瓜酶解液加入0.04%干酵母、6%紅曲,料水比為1:1.5,攪勻后28℃發(fā)酵2、3、4、5、6、7d。測定蒸餾酒液酒精度數(shù),計算出酒率并對其進行感官評價。結(jié)果如圖7、表10所示:
表10 不同發(fā)酵周期對感官評價影響的差異顯著性
由圖7可以看出,隨著發(fā)酵周期的增加,出酒率和感官品質(zhì)也呈上升趨勢,但當(dāng)發(fā)酵天數(shù)超過5d時出酒率和感官品質(zhì)卻下降。是由于酒精發(fā)酵的同時受產(chǎn)酸菌影響,酒精轉(zhuǎn)化為有機酸,引起酸度增高,最終導(dǎo)致酒度下降,成品偏酸。因此, 從地瓜酒的感官品質(zhì)和從縮短生產(chǎn)周期考慮,且經(jīng)LSD多重比較結(jié)果表明:發(fā)酵3d與發(fā)酵2d有顯著差異而與4~5d都無顯著差異故確定最佳發(fā)酵周期為3~5d。
2.3.5 發(fā)酵工藝的優(yōu)化
在上述單因素實驗的基礎(chǔ)上,選擇料水比、酵母添加量、紅曲添加量、發(fā)酵周期作為考察因素,以出酒率和感官評價作為考察指標(biāo),進行正交試驗確定最佳發(fā)酵工藝條件選用L9(34)正交表進行實驗分析,結(jié)果見表11、表12、表13、表14。
通過正交分析,由表12可看出:影響產(chǎn)品出酒率的各因素主次順序為D>A>B>C,且較優(yōu)方案為:A2B2C3D1。影響產(chǎn)品感官品質(zhì)的各因素的主次順序為D>A>B>C且較優(yōu)方案為A2B2C3D1。且在置信度為95%條件下,4個因素對出酒率感觀評價的影響均達到顯著效果。綜合以上分析,較佳工藝為A2B2C3D1,即將糖化結(jié)束后冷卻至28~30℃的地瓜酶解液加入0.04%干酵母、8%紅曲,料水比為1:1.5,攪勻后28℃發(fā)酵3d。
表11 正交試驗因素水平表
表12 正交試驗結(jié)果分析表
表13 發(fā)酵工藝對出酒率影響的方差分析表
表14 發(fā)酵工藝對感官評價影響的方差分析表
表15 驗證實驗感官評定結(jié)果
3.1 采用正交優(yōu)化的發(fā)酵工藝,以500g投料量進行3批次驗證實驗,經(jīng)蒸餾、勾兌、灌裝、殺菌獲得成品后對產(chǎn)品進行感官評價,測定pH值、總酸、總酯并與GB/T 20821-2007《液態(tài)法白酒》中相關(guān)指標(biāo)進行對比,結(jié)果如表15和表16所示:
表16 驗證實驗結(jié)果測定
表15和表16產(chǎn)品質(zhì)量結(jié)果表明:3批次的產(chǎn)品的感官及理化指標(biāo)均符合產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求。
采用地瓜邊角料和等外品開發(fā)低度鮮地瓜酒工藝合理可行,最佳工藝為:以地瓜邊角料和等外品為主要原料,打漿加熱后加入8u/g淀粉酶在(92±2)℃條件下液化30min,冷卻后加入150u/g糖化酶在(59±1)℃條件下糖化89min,糖化結(jié)束后冷卻至28~30℃,加入0.04%干酵母,8%紅曲,料水比為1:1.5。于25~30℃下混合發(fā)酵72h。發(fā)酵結(jié)束后經(jīng)蒸餾、勾兌、灌裝、殺菌獲得低度鮮地瓜酒。產(chǎn)品呈無色清亮透明,口感爽凈,醇香濃郁、酒體協(xié)調(diào),產(chǎn)品各項指標(biāo)均符合GB/T 20821-2007標(biāo)準(zhǔn)要求。
[1]吳廣輝,畢韜韜.紅薯營養(yǎng)價值及綜合開發(fā)利用研究過程[J].食品研究與開發(fā),2015,36(20):189-190.
[2]施能浦.甘薯綠色栽培與地瓜干加工新技術(shù)[M].福州:福建科學(xué)技術(shù)出版社,2006.
[3]薛偉,丁燕.抗癌防病“薯”第一[J].上海蔬菜,2005(6):84.
[4]呂美.紅曲固態(tài)發(fā)酵條件的優(yōu)化及紅曲地瓜酒發(fā)酵工藝的研究[D].沈陽:沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué),2006.
[5]Ucfen·P.Recory of insoluble fiber fractions by filtration and centrifugation[J].Animal Feed Science and technology,2006(129):316.
[6]陳偉.國內(nèi)外甘薯飲料的研究現(xiàn)狀探析[J].遼寧經(jīng)濟職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報,2011,(2):68-69.
[7]曹曉紅.連城縣地瓜干產(chǎn)業(yè)發(fā)展對策研究[D].福州:福建農(nóng)林大學(xué),2006.
[8]王金輝.連城紫色甘薯產(chǎn)業(yè)發(fā)展問題與對策研究[D].福州:福建農(nóng)林大學(xué),2015.