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    通絡(luò)玉液湯對(duì)2型糖尿病心肌病大鼠心肌病變的保護(hù)作用

    2018-01-25 10:23:41李淑貞楊艷梅崔茂香張?zhí)m蘭
    科教導(dǎo)刊 2017年32期
    關(guān)鍵詞:玉液明顯降低心肌病

    李淑貞 楊艷梅 崔茂香 張?zhí)m蘭

    摘 要 目的:探討通絡(luò)玉液湯對(duì)糖尿病心肌病大鼠心肌的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法:采用高糖高脂飲食+小劑量鏈脲佐菌素腹腔注射的方法復(fù)制2型糖尿病心肌病大鼠模型。將48只大鼠隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組、糖尿病心肌病組、苯納普利對(duì)照組、通絡(luò)玉液湯組。分別處理8周后,測(cè)定大鼠FBG、血清中MDA、LDH、CK含量及SOD活性的改變,左室重量指數(shù)和心臟重量指數(shù)的變化,觀察心肌細(xì)胞的病理形態(tài)。結(jié)果:與糖尿病心肌病組比較,通絡(luò)玉液湯組大鼠FBG、MDA、LDH、CK含量水平明顯下降(P<0.01), SOD活性明顯上升(P<0.01),左室重量指數(shù)和心臟重量指數(shù)明顯下降(P<0.01)。結(jié)論:通絡(luò)玉液湯可降低血糖,清除

    氧自由基、改善糖尿病心肌病心肌損傷。

    關(guān)鍵詞 通絡(luò)玉液湯 2型糖尿病心肌病 心肌酶 抗氧化

    Abstract Objective: It is to explore the protective effect and possible mechanisms of TongluoYuye Decoction(TYD) in rats with diabetic cardiomyopathy(DC). Methods: Experimental rat model of type 2 diabetic cardiomyopathy was constructed by high sucrose-high fat diet and low dose streptozotocin peritoneal injection. 48 rats were randomly divided into four groups: normal group, DC group, Benazepril(BP) group, TYD group. After eight weeks, FBG, LDH, CK, MDA and SOD in serum are determined, LVMI and HWI were detected,the pathological change of myocardial cell is observed. Results: compared with DC group, FBG, LDH, CK, MDA of TYD groups decreased significantly (P<0.01), SOD increased significantly (P<0.01, P<0.05). LVMI and HWI decreased significantly (P<0.01).Conclusion: TYD can reduce glucose, clear oxygen radicals, improve myocardial damage.

    Keywords TongluoYuye Decoction; type 2 diabetic cardiomyopathy; myocardical Enzyme; antioxidat

    近年來(lái),隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的飛速發(fā)展,公眾調(diào)整了自身生活方式、飲食結(jié)構(gòu),導(dǎo)致糖尿病發(fā)病率逐年升高,而糖尿病心肌?。―C)是糖尿病患者的主要并發(fā)癥及死亡原因,目前已成為對(duì)人類(lèi)健康造成嚴(yán)重威脅的全球性公共衛(wèi)生問(wèn)題。[1,2]本實(shí)驗(yàn)通過(guò)給以大鼠高糖高脂飼料+腹腔注射小劑量鏈脲佐菌素復(fù)制實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病心肌病模型,以通絡(luò)玉液湯為治療藥物,貝那普利作為陽(yáng)性對(duì)照,觀察糖尿病心肌病大鼠相關(guān)指標(biāo)的變化,探討通絡(luò)玉液湯對(duì)DC 大鼠心肌的保護(hù)作用及其可能機(jī)制,為其防治和延緩糖尿病心肌病的發(fā)生、發(fā)展提供可靠的實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    通絡(luò)玉液湯(生曬參、生黃芪等十二味中藥組成)中藥飲片均購(gòu)自滄州同仁堂藥店。浸泡,煎煮、濃縮成2.5g生藥/ml的液體;鹽酸苯那普利片(商品名:洛汀新),北京諾華制藥有限公司生產(chǎn);鏈脲佐菌素(STZ),購(gòu)自美國(guó) Sigma 公司; 血糖(GLU)、肌酸激酶(CK) 、乳酸脫氫酶( LDH) 、丙二醛( MDA) 、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒均購(gòu)自南京建成生物制品研究所。

    1.2 造模與分組

    48 只 SD雄性大鼠,SPF 級(jí),體重 150~180 g,購(gòu)自中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,合格證號(hào):SCXK-(軍)2009-003。將大鼠進(jìn)行1 周的適應(yīng)性喂養(yǎng)后開(kāi)始實(shí)驗(yàn),根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,同時(shí)參考董世芬等方法[3]復(fù)制糖尿病心肌病模型,將48只大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組( NC 組) 和模型組。36只模型組大鼠全部采用高脂高糖飼料喂養(yǎng),4周后,完成1% STZ30 mg /kg一次性腹腔注射,72 h 后測(cè)空腹血糖( FBG),以FBG濃度大于11.1 mmol/L確認(rèn)是 2 型糖尿病模型復(fù)制成功的標(biāo)準(zhǔn),成模大鼠繼續(xù)采用高脂高糖飼料喂養(yǎng) 6 周,即成DC模型。選擇成模大鼠36 只,隨機(jī)分為3組:苯那普利對(duì)照組(Benazepril,BP組),糖尿病心肌病組(DC組),通絡(luò)玉液湯組(TYD組),每組數(shù)量均為12只。NC 組大鼠一直采用基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng),等量枸櫞酸鈉緩沖液(pH=4.4)代替STZ腹腔注射,不采血。

    1.3 給藥方法

    DC 模型成功后開(kāi)始用藥。BP組:灌服苯那普利 1mg/kg·d;TYD組:灌服通絡(luò)玉液湯 25g/Kg·d,; NC組和DC組大鼠灌服生理鹽水,連續(xù)灌服8周。

    1.4 血生化指標(biāo)測(cè)定

    結(jié)束用藥后4組大鼠全部禁食不禁水 12h由頸總動(dòng)脈取血2ml, 凝固,2000r/min離心,分離血清,空腹血糖(FBG)采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定,乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、MDA、SOD全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。endprint

    1.5 計(jì)算左室重量指數(shù)和心臟重量指數(shù)

    大鼠開(kāi)胸快速取出心臟,用 4℃預(yù)冷生理鹽水沖洗后稱量心臟、左心室重量,大鼠左心室重量(mg)/體重(g)=左室重量指數(shù)(LVMI),心臟重量(mg)/體重(g)=心臟重量指數(shù)(HWI)。

    1.6 心肌組織形態(tài)學(xué)檢查

    取心肌組織放入4%多聚甲醛緩沖液中固定,制成蠟塊,切片,進(jìn)行 HE染色,光鏡觀察心肌組織形態(tài)變化。

    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    所有數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件分析,全部數(shù)據(jù)均用均數(shù)€北曜疾畋硎荊階榧潯冉喜捎胻檢驗(yàn),多組間的比較用單因素方差分析法,以P<0.05為差異有顯著性。

    2 結(jié)果

    2.1 TYD對(duì)糖尿病心肌病大鼠血糖、心肌酶的影響

    與NC組比較,DC組大鼠空腹血糖、血清中LDH、CK含量明顯升高(P<0.01);經(jīng)用藥干預(yù)后,各治療組大鼠血清中LDH、CK含量及TYD組大鼠空腹血糖明顯降低,與DC組比較有顯著差異(P<0.01);與BP組比較,TYD組大鼠空腹血糖、血清中LDH、CK含量明顯降低(P<0.01)(見(jiàn)表1)。

    2.2 TYD對(duì)糖尿病心肌病大鼠血清SOD活性、MDA水平的影響

    DC組大鼠與NC組相比血清MDA水平明顯升高(P<0.01),SOD活性明顯下降(P<0.01);TYD組和BP組大鼠與DC組比較血清中MDA水平明顯降低, SOD活性明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.01); TYD組大鼠與BP組比較血清MDA水平明顯降低(P<0.01),SOD活性明顯上升(P<0.05)(見(jiàn)表2)。

    2.3 TYD對(duì)糖尿病心肌病大鼠LVMI 及 HWI的影響

    與NC組比較,DC組大鼠LVMI 及 HWI明顯升高(P<0.01);經(jīng)用藥干預(yù)后,各治療組大鼠LVMI 及 HWI明顯降低,與DC組比較有顯著差異(P<0.01,P<0.05);與BP組比較,TYD組大鼠LVMI 及 HWI明顯降低(P<0.01)(見(jiàn)表3)。

    2.4 各組大鼠心肌組織的病理學(xué)變化

    光鏡下觀察:NC組大鼠心肌纖維排列整齊,結(jié)構(gòu)清晰,形態(tài)正常,細(xì)胞外間質(zhì)較少,可見(jiàn)少量成纖維細(xì)胞。DC組大鼠心肌纖維排列紊亂,心肌細(xì)胞腫脹、變性,局灶性壞死,細(xì)胞間隙增大,可見(jiàn)成纖維細(xì)胞增生,并有炎細(xì)胞浸潤(rùn);TYD組和BP組大鼠心肌細(xì)胞邊界清楚,結(jié)構(gòu)基本正常,纖維紊亂和細(xì)胞腫脹明顯減輕。

    3 討論

    大量研究表明,長(zhǎng)期高血糖刺激,誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng),使高活性的自由基過(guò)量產(chǎn)生,促使心肌細(xì)胞壞死,心肌細(xì)胞外基質(zhì)合成增多,引起心肌纖維化,左室重構(gòu)和心肌肥厚,進(jìn)而影響了心臟正常功能,誘發(fā)心力衰竭,最終導(dǎo)致糖尿病心肌病的發(fā)生。[4]臨床上評(píng)價(jià)心肌損傷最常用的指標(biāo)是心肌酶。心肌細(xì)胞損傷時(shí),大量肌酸激酶(CK)從心肌細(xì)胞中滲出,可引起血清中CK含量升高,濃度越高,表明心肌損傷越嚴(yán)重。研究結(jié)果顯示:模型組大鼠血清中CK、乳酸脫氫酶(LDH)、MDA含量明顯升高,SOD活性明顯降低,表示在長(zhǎng)期的高血糖刺激下,生成了大量氧自由基,引起了細(xì)胞膜中的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),導(dǎo)致心肌損傷。

    中醫(yī)學(xué)對(duì)糖尿病心肌病并無(wú)專門(mén)記載。醫(yī)家歷來(lái)將其歸于“消渴”、“胸痹”等范疇。消渴病長(zhǎng)久不愈,肺脾腎陰虛燥熱,不斷耗氣傷陰,病久累及于心,心體受損,氣虛血液運(yùn)行無(wú)力,心脈被瘀血阻滯,引發(fā)糖尿病心肌病。

    通絡(luò)玉液湯由生曬參、生黃芪等十二味中藥組成,由經(jīng)典方劑玉液湯、生脈散加減化裁得來(lái),可行益氣養(yǎng)陰、活血通絡(luò)之功。 本實(shí)驗(yàn)顯示,通絡(luò)玉液湯組大鼠血清FBG、MDA 、LDH、CK水平明顯低于模型組大鼠,SOD活性也明顯升高,LVMI 及 HWI明顯降低,說(shuō)明通絡(luò)玉液湯能減輕脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),減少心肌酶的釋放,減輕了糖尿病心肌病大鼠的心肌損傷,對(duì)心肌具有保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為通絡(luò)玉液湯防治和延緩糖尿病心肌病的發(fā)生、發(fā)展提供了可靠的實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。

    €L鼙狙芯課?013年滄州市科學(xué)技術(shù)研究及發(fā)展指導(dǎo)計(jì)劃項(xiàng)目 課題編號(hào):131302077

    參考文獻(xiàn)

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    [2] Voulgari C,Papadogiannis D,Tentolouris N.Diabetic cardiomyopathy:from the pathophysiology of the cardiac myocytes to current diagnosis and management strategies[J]. Vasc Health Risk Manag,2010:6883-903.

    [3] 董世芬,洪纓,樊江波,等.實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病心肌病大鼠模型的建立與評(píng)價(jià)[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào),2009.17(4):245-251.

    [4] Watanabe K,Thandavarayan RA,?Harima M,et al. Role of differential signaling pathways and oxidative stress in?diabetic cardiomyopathy[J].Current cardiology reviews,2010.6(4):280-90.endprint

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