母源抗體對HuN4-F112株HPRRS活疫苗免疫的影響

（江蘇省動物疫病預(yù)防控制中心，江蘇南京 210036）

高致病性豬藍(lán)耳?。℉PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征（俗稱藍(lán)耳病，PRRS）病毒變異株引起一種急性高致死性疫病，臨床上以高熱，厭食或不食，咳嗽、氣喘等呼吸道癥狀，妊娠母豬晚期流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)死胎、弱胎和木乃伊胎，以及高死亡率為主要特征[1]。2006年國內(nèi)暴發(fā)了HPRRS疫情，仔豬發(fā)病率高達(dá)100%，死亡率高達(dá)50%以上，母豬流產(chǎn)率高達(dá)30%以上，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大傷害[2]。疫苗免疫是HPRRS防治的重要技術(shù)措施，高致病性豬藍(lán)耳病疫苗主要包括滅活疫苗和弱毒活疫苗等2種類型，實(shí)際應(yīng)用中滅活疫苗的使用效果并不理想，一般用于不適合弱毒活疫苗免疫的種豬的免疫，弱毒活疫苗才是該病防治的主導(dǎo)疫苗，但弱毒活疫苗由于疫苗本身的特點(diǎn)，容易受到機(jī)體內(nèi)已有的抗體，特別是母源抗體的干擾，不能刺激機(jī)體產(chǎn)生有效免疫應(yīng)答，導(dǎo)致免疫效果不確切。因此，摸清弱毒活疫苗的免疫特性，是科學(xué)制定免疫程序，保證免疫效果的前提和基礎(chǔ)。本試驗(yàn)以HuN4-F112株HPRRS弱毒活疫苗為對象，進(jìn)行免疫試驗(yàn)研究，結(jié)果表明該疫苗能夠突破母源抗體干擾，有效刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫抗體。現(xiàn)總結(jié)報告如下：

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)疫苗

高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗（HuN4-F112株），哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司提供。

1.2 診斷液

北京世紀(jì)動物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)的豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Nsp2 1594-1680變異株）實(shí)時熒光RT-PCR檢測試劑盒；法國LSI公司生產(chǎn)的豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體ELISA檢測試劑盒。

1.3 試驗(yàn)豬與分組

預(yù)先檢測篩選，選擇PRRS母源抗體為陽性，病原為陰性的斷奶仔豬30頭，分為2組，一組進(jìn)行疫苗免疫，一組作為不免疫對照。選擇PRRS母源抗體和病原均為陰性的斷奶仔豬30頭，分為2組，一組進(jìn)行疫苗免疫，一組作為不免疫對照。（詳見表1）

表1 試驗(yàn)豬分組情況

1.4 樣品采集

A組和C組各選擇5頭試驗(yàn)豬，B組和D組各選擇2頭試驗(yàn)豬，用于連續(xù)采樣監(jiān)測。

免疫后14d、28d、60d分別對各組試驗(yàn)豬采樣進(jìn)行PRRS免疫抗體和病原監(jiān)測。A組和C組各采集10份血清樣品，其中5份為連續(xù)采樣監(jiān)測，5份為同組其他試驗(yàn)豬血清樣品；B組和D組各采集5份血清樣品，其中2份為連續(xù)采樣監(jiān)測，3份為同組其他試驗(yàn)豬血清樣品。

1.5 檢測方法

免疫后機(jī)體疫苗毒檢測用豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Nsp2 1594-1680變異株）實(shí)時熒光RT-PCR方法；抗體檢測用ELISA方法。

2 結(jié)果

2.1 免疫后機(jī)體疫苗毒消長變化

對各組采集的血清樣品進(jìn)行PRRS（Nsp2 1594-1680變異株）實(shí)時熒光RT-PCR跟蹤檢測，結(jié)果如下：

表2 免疫后各組試驗(yàn)豬機(jī)體內(nèi)疫苗毒檢測結(jié)果

檢測結(jié)果顯示，PRRS母源抗體為陽性的免疫試驗(yàn)A組和PRRS母源抗體為陰性的C免疫試驗(yàn)組均在免疫后14d、28d、60d檢出PRRS（Nsp2 1594-1680變異株）陽性，而相同環(huán)境飼養(yǎng)的作為不免疫對照的B組和D組試驗(yàn)豬均為陰性。

2.2 免疫后抗體消長變化

對各組采集的血清樣品進(jìn)行ELISA跟蹤檢測，結(jié)果如下：

表3 免疫后各組試驗(yàn)豬免疫抗體檢測結(jié)果

圖2 連續(xù)采樣監(jiān)測豬免疫抗體陽性變化情況

各試驗(yàn)組HPRRS群體免疫抗體陽性率檢測結(jié)果和連續(xù)采樣監(jiān)測豬免疫抗體ELISA試驗(yàn)IRPC值顯示，PRRS母源抗體為陽性的免疫試驗(yàn)A組，在免疫后14d至28d期間，IRPC值均有一個下降過程，部分豬轉(zhuǎn)為陰性，陽性率低于100%，然后至免疫后60d，IRPC值出現(xiàn)回升，前期轉(zhuǎn)為陰性的試驗(yàn)豬又全部轉(zhuǎn)為陽性，陽性率回升至100%；PRRS母源抗體為陽性的不免疫對照B組，在同批試驗(yàn)14d后出現(xiàn)下降，至60d全部轉(zhuǎn)為陰性；PRRS母源抗體為陰性的免疫試驗(yàn)C組，在免疫14d后出現(xiàn)上升，至60d全部轉(zhuǎn)為陽性；PRRS母源抗體為陰性的不免疫對照D組，在同批試驗(yàn)期間，始終保持陰性。

3 討論

（1）疫苗免疫必須考察母源抗體的干擾影響。本次試驗(yàn)，有PRRS母源抗體的試驗(yàn)豬，免疫HuN4-F112株P(guān)RRS弱毒活疫苗后14d開始檢出PRRSV變異株陽性，而同期不免疫對照組均無檢出，說明疫苗在機(jī)體內(nèi)得到有效增殖。血清抗體檢測結(jié)果顯示，有PRRS母源抗體的試驗(yàn)豬，群體抗體陽性率和連續(xù)采樣監(jiān)測PRRSV抗體檢測IRPC值均呈現(xiàn)先降低后升高的態(tài)勢，而同期有PRRS母源抗體的不免疫對照組則表現(xiàn)為只降不升的態(tài)勢，說明疫苗有效刺激機(jī)體產(chǎn)生了免疫應(yīng)答。同時，有PRRSV母源抗體的試驗(yàn)豬，免疫HuN4-F112株P(guān)RRSV弱毒活疫苗后，群體抗體陽性率經(jīng)過降低后又回升到100%，說明HuN4-F112株P(guān)RRSV弱毒活疫苗免疫母源抗體陽性豬，可以突破母源抗體干擾，達(dá)到有效免疫保護(hù)。

（2）當(dāng)前用于PRRS免疫的弱毒活疫苗還有JXA1-R株和TJM-F92株，這2種疫苗能否突破母源抗體的干擾，需要進(jìn)一步試驗(yàn)研究。

（3）PRRS不僅致病力強(qiáng)，對生豬生產(chǎn)安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅，同時，該病還是一個免疫抑制性疫病[3]，該病的發(fā)生和病原侵襲都會破壞口蹄疫、豬瘟等其他疫病的免疫，導(dǎo)致免疫失敗。因此，生豬免疫可以充分利用HuN4-F112株P(guān)RRSV弱毒活疫苗可以突破母源抗體干擾，刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫保護(hù)的特性，盡早實(shí)施PRRS免疫，一方面減少PRRS野毒侵襲，減少其他疫病免疫失敗的發(fā)生，另一方面也可以規(guī)避PRRS免疫與其他疫病免疫的相互干擾，為生豬主要疫病免疫的科學(xué)組織贏得了時機(jī)。

[1]宋李杰.高致病性豬藍(lán)耳病[A].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)術(shù)年會[C].2009：124.

[2]Tian K，Yu X，Zhao T，et al.Emergence of fatal PRRSV variants：unparalleled outbreaks of atypical PRRS in China and molecular dissection of the unique hallmark[J].PloS one，2007，2（6）：e526.

[3]楊漢春.豬免疫抑制性疾病的流行特點(diǎn)與控制對策[J].中國畜牧獸醫(yī)，2004，31（5）：41-43.