(江蘇省動物疫病預防控制中心,江蘇南京 210036)
高致病性豬藍耳?。℉PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征(俗稱藍耳病,PRRS)病毒變異株引起一種急性高致死性疫病,臨床上以高熱,厭食或不食,咳嗽、氣喘等呼吸道癥狀,妊娠母豬晚期流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)死胎、弱胎和木乃伊胎,以及高死亡率為主要特征[1]。2006年國內(nèi)暴發(fā)了HPRRS疫情,仔豬發(fā)病率高達100%,死亡率高達50%以上,母豬流產(chǎn)率高達30%以上,給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大傷害[2]。疫苗免疫是HPRRS防治的重要技術(shù)措施,高致病性豬藍耳病疫苗主要包括滅活疫苗和弱毒活疫苗等2種類型,實際應用中滅活疫苗的使用效果并不理想,一般用于不適合弱毒活疫苗免疫的種豬的免疫,弱毒活疫苗才是該病防治的主導疫苗,但弱毒活疫苗由于疫苗本身的特點,容易受到機體內(nèi)已有的抗體,特別是母源抗體的干擾,不能刺激機體產(chǎn)生有效免疫應答,導致免疫效果不確切。因此,摸清弱毒活疫苗的免疫特性,是科學制定免疫程序,保證免疫效果的前提和基礎。本試驗以HuN4-F112株HPRRS弱毒活疫苗為對象,進行免疫試驗研究,結(jié)果表明該疫苗能夠突破母源抗體干擾,有效刺激機體產(chǎn)生免疫抗體?,F(xiàn)總結(jié)報告如下:
高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(HuN4-F112株),哈藥集團生物疫苗有限公司提供。
北京世紀動物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)的豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Nsp2 1594-1680變異株)實時熒光RT-PCR檢測試劑盒;法國LSI公司生產(chǎn)的豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體ELISA檢測試劑盒。
預先檢測篩選,選擇PRRS母源抗體為陽性,病原為陰性的斷奶仔豬30頭,分為2組,一組進行疫苗免疫,一組作為不免疫對照。選擇PRRS母源抗體和病原均為陰性的斷奶仔豬30頭,分為2組,一組進行疫苗免疫,一組作為不免疫對照。(詳見表1)
表1 試驗豬分組情況
A組和C組各選擇5頭試驗豬,B組和D組各選擇2頭試驗豬,用于連續(xù)采樣監(jiān)測。
免疫后14d、28d、60d分別對各組試驗豬采樣進行PRRS免疫抗體和病原監(jiān)測。A組和C組各采集10份血清樣品,其中5份為連續(xù)采樣監(jiān)測,5份為同組其他試驗豬血清樣品;B組和D組各采集5份血清樣品,其中2份為連續(xù)采樣監(jiān)測,3份為同組其他試驗豬血清樣品。
免疫后機體疫苗毒檢測用豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Nsp2 1594-1680變異株)實時熒光RT-PCR方法;抗體檢測用ELISA方法。
對各組采集的血清樣品進行PRRS(Nsp2 1594-1680變異株)實時熒光RT-PCR跟蹤檢測,結(jié)果如下:
表2 免疫后各組試驗豬機體內(nèi)疫苗毒檢測結(jié)果
檢測結(jié)果顯示,PRRS母源抗體為陽性的免疫試驗A組和PRRS母源抗體為陰性的C免疫試驗組均在免疫后14d、28d、60d檢出PRRS(Nsp2 1594-1680變異株)陽性,而相同環(huán)境飼養(yǎng)的作為不免疫對照的B組和D組試驗豬均為陰性。
對各組采集的血清樣品進行ELISA跟蹤檢測,結(jié)果如下:
表3 免疫后各組試驗豬免疫抗體檢測結(jié)果
圖2 連續(xù)采樣監(jiān)測豬免疫抗體陽性變化情況
各試驗組HPRRS群體免疫抗體陽性率檢測結(jié)果和連續(xù)采樣監(jiān)測豬免疫抗體ELISA試驗IRPC值顯示,PRRS母源抗體為陽性的免疫試驗A組,在免疫后14d至28d期間,IRPC值均有一個下降過程,部分豬轉(zhuǎn)為陰性,陽性率低于100%,然后至免疫后60d,IRPC值出現(xiàn)回升,前期轉(zhuǎn)為陰性的試驗豬又全部轉(zhuǎn)為陽性,陽性率回升至100%;PRRS母源抗體為陽性的不免疫對照B組,在同批試驗14d后出現(xiàn)下降,至60d全部轉(zhuǎn)為陰性;PRRS母源抗體為陰性的免疫試驗C組,在免疫14d后出現(xiàn)上升,至60d全部轉(zhuǎn)為陽性;PRRS母源抗體為陰性的不免疫對照D組,在同批試驗期間,始終保持陰性。
(1)疫苗免疫必須考察母源抗體的干擾影響。本次試驗,有PRRS母源抗體的試驗豬,免疫HuN4-F112株P(guān)RRS弱毒活疫苗后14d開始檢出PRRSV變異株陽性,而同期不免疫對照組均無檢出,說明疫苗在機體內(nèi)得到有效增殖。血清抗體檢測結(jié)果顯示,有PRRS母源抗體的試驗豬,群體抗體陽性率和連續(xù)采樣監(jiān)測PRRSV抗體檢測IRPC值均呈現(xiàn)先降低后升高的態(tài)勢,而同期有PRRS母源抗體的不免疫對照組則表現(xiàn)為只降不升的態(tài)勢,說明疫苗有效刺激機體產(chǎn)生了免疫應答。同時,有PRRSV母源抗體的試驗豬,免疫HuN4-F112株P(guān)RRSV弱毒活疫苗后,群體抗體陽性率經(jīng)過降低后又回升到100%,說明HuN4-F112株P(guān)RRSV弱毒活疫苗免疫母源抗體陽性豬,可以突破母源抗體干擾,達到有效免疫保護。
(2)當前用于PRRS免疫的弱毒活疫苗還有JXA1-R株和TJM-F92株,這2種疫苗能否突破母源抗體的干擾,需要進一步試驗研究。
(3)PRRS不僅致病力強,對生豬生產(chǎn)安全構(gòu)成嚴重威脅,同時,該病還是一個免疫抑制性疫病[3],該病的發(fā)生和病原侵襲都會破壞口蹄疫、豬瘟等其他疫病的免疫,導致免疫失敗。因此,生豬免疫可以充分利用HuN4-F112株P(guān)RRSV弱毒活疫苗可以突破母源抗體干擾,刺激機體產(chǎn)生免疫保護的特性,盡早實施PRRS免疫,一方面減少PRRS野毒侵襲,減少其他疫病免疫失敗的發(fā)生,另一方面也可以規(guī)避PRRS免疫與其他疫病免疫的相互干擾,為生豬主要疫病免疫的科學組織贏得了時機。
[1]宋李杰.高致病性豬藍耳病[A].南京農(nóng)業(yè)大學畜牧獸醫(yī)學術(shù)年會[C].2009:124.
[2]Tian K,Yu X,Zhao T,et al.Emergence of fatal PRRSV variants:unparalleled outbreaks of atypical PRRS in China and molecular dissection of the unique hallmark[J].PloS one,2007,2(6):e526.
[3]楊漢春.豬免疫抑制性疾病的流行特點與控制對策[J].中國畜牧獸醫(yī),2004,31(5):41-43.