我國新記錄海鏈藻屬物種的形態(tài)學(xué)和系統(tǒng)學(xué)研究

郭雅瓊 李 揚(yáng)

(華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院, 廣州市亞熱帶生物多樣性與環(huán)境生物監(jiān)測重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 廣州 510631)

海鏈藻屬ThalassiosiraCleve是硅藻中的一個(gè)典型大屬, 廣泛分布于全球各類水體中[1,2]。絕大多數(shù)海鏈藻屬物種的細(xì)胞個(gè)體微小[1,2], 但它們卻是海洋生態(tài)系統(tǒng)中最主要的初級(jí)生產(chǎn)者[3,4], 也是常見的藻華物種[5,6]。此外, 一些海鏈藻屬物種還是很好的模式生物, 廣泛應(yīng)用于硅藻基因組、有性繁殖生活史、群落和個(gè)體生理生態(tài)等多方面的研究[7, 8]。

本文通過建立海鏈藻單克隆培養(yǎng)株系, 結(jié)合形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)數(shù)據(jù), 報(bào)道了我國海鏈藻屬的2個(gè)新記錄種, 分別是狹線形海鏈藻T. anguste-lineata(Schmidt) Fryxell & Hasle和碟形海鏈藻T. minicosmicaLee & Park。同時(shí)還擴(kuò)增了其核糖體大亞基高變區(qū)序列, 基于分子系統(tǒng)樹, 針對海鏈藻屬的系統(tǒng)學(xué)研究展開了分析。

1 材料與方法

1.1 單克隆培養(yǎng)株系的建立

利用浮游植物網(wǎng)(孔徑10 μm)進(jìn)行水平拖網(wǎng), 然后盡快帶回實(shí)驗(yàn)室。在生物倒置顯微鏡(Mshot MI-12)下, 利用毛細(xì)管復(fù)洗技術(shù)對目標(biāo)藻細(xì)胞進(jìn)行分離, 之后轉(zhuǎn)移至預(yù)先裝有L培養(yǎng)基的48孔細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)[14], 置于培養(yǎng)室內(nèi)培育。培養(yǎng)條件為: 光照強(qiáng)度約50—80 μmol photons/(m2·s)、光周期12h鯰12h,溫度(20±2)℃。經(jīng)過5—7d培養(yǎng)后, 觀察其生長狀況, 待細(xì)胞個(gè)數(shù)達(dá)到100個(gè)以上, 再轉(zhuǎn)移到裝有L培養(yǎng)基的100 mL錐形瓶中, 繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)。具體藻株信息詳見表 1。

表 1 本文建立的目標(biāo)藻株信息Tab. 1 The information of established monoclonal strains in this study

1.2 形態(tài)學(xué)特征的觀察

光學(xué)顯微鏡(Light Microscopy, LM)觀察: 取0.1 mL對數(shù)生長期藻液, 利用Olympus BX53進(jìn)行微分干涉(Differential interference contrast, DIC)的觀察, 并使用Olympus DP27數(shù)碼相機(jī)拍照, 在Olympus CellSens軟件上獲取圖像信息。主要觀察特征有: 群體特征、細(xì)胞色素體形態(tài)等。

掃描電子顯微鏡(Scanning Electron Microscopy, SEM)觀察: 取1 mL對數(shù)生長期藻液, 加入等體積的濃硫酸(＞95%), 酸化以去除有機(jī)質(zhì), 然后用蒸餾水多次水洗至中性[3]。用20 mL注射器吸取適量樣品, 并過濾至5 μm微孔濾膜上。取出濾膜, 自然晾干后, 用碳導(dǎo)電膠貼于SEM樣品臺(tái)上, 噴金后即可置于掃描電鏡(Zeiss Ultra 55)下觀察和拍照。另外, 為了避免酸化對一些有機(jī)結(jié)構(gòu)的破壞, 本文還準(zhǔn)備了未經(jīng)酸化處理的電鏡樣品, 即直接用毛細(xì)管吸取目標(biāo)細(xì)胞并吹在濾膜上, 待干燥之后直接噴金觀察。主要觀察特征有: 各類突起的形態(tài)和結(jié)構(gòu)、孔紋特征、內(nèi)殼面篩板膜結(jié)構(gòu)等。

1.3 分子系統(tǒng)學(xué)分析

離心法收集對數(shù)生長期藻細(xì)胞, 并提取總DNA[15]。利用引物D1R-F[16]和D3B-R[17]擴(kuò)增核糖體大亞基編碼基因(Large subunit ribosomal encoding gene, LSU)的D1—D3區(qū)序列。PCR產(chǎn)物送往上海立菲生物科技有限公司進(jìn)行純化和測序。

從NCBI下載海鏈藻屬物種及其鄰近屬種的LSU nrDNA序列信息。參考以往文獻(xiàn)[18], 選擇克羅麗紋藻Lampriscus kittonii、錘狀中鼓藻Bellero-

chea malleus、平滑井字藻Eunotogramma laevis、布氏雙尾藻Ditylum brightwellii、波狀石絲藻Lithodesmium undulatum為外類群。運(yùn)用BioEdit軟件進(jìn)行序列的比對和矩陣[19], 共有551個(gè)堿基用于最終的分析。基于MrModeltest 2.3[20]計(jì)算, 選擇的最適模型和參數(shù)為GTR+I+G ([AC=1.0449], [AG=3.4071], [AT=1.7247], [CG]=0.4855, [CT]=5.9824,[GT]=1.0000, gamma shape=0.5318, nucleotide frequencies: A=0.2099, C=0.2194, G=0.3136, T=0.2574), 用MrBayes 3.2[21]構(gòu)建貝葉斯推理樹(Bayesian Inference, BI)。

2 結(jié)果

2.1 形態(tài)學(xué)描述

狹線形海鏈藻Thalassiosira anguste-lineata(Schmidt) Fryxell & Hasle(圖版Ⅰ—Ⅱ)

員工除了掌握本科室的專業(yè)知識(shí)外，還要了解相關(guān)科室工作情況，以便更好地掌握全面的專業(yè)知識(shí)，為開展工作打好基礎(chǔ)，從而更好地服務(wù)孤殘兒童。如：抽派特殊教育老師和康復(fù)醫(yī)師參加孤殘兒童護(hù)理員培訓(xùn)；挑選康復(fù)骨干參加關(guān)于培智特殊教育課程和教學(xué)方面的培訓(xùn)；選派特殊教育老師參加兒童作業(yè)治療康復(fù)培訓(xùn)等。通過跨專業(yè)的培訓(xùn)，員工在本職崗位工作中不斷融入其他相關(guān)專業(yè)理念和方法，大大提高了服務(wù)水平。特殊教育注重孤殘兒童生活適應(yīng)，配合康復(fù)目標(biāo)。康復(fù)訓(xùn)練與生活、教育相結(jié)合，使康復(fù)內(nèi)容更為豐富，更貼近生活，為孤殘兒童的康復(fù)提供了更為有利的條件。保育配合康復(fù)、教育的目標(biāo)，鞏固教育和康復(fù)的成果。

Fryxell & Hasle 1977, p. 73, figs 22—34; Hoppenrathet al. 2007, p. 274, figs 6—7.

在培養(yǎng)條件下, 細(xì)胞呈緊密相連的長鏈狀群體(圖版Ⅰ-1、2), 未見多條膠質(zhì)絲相連的鏈狀群體。殼面規(guī)則圓形(圖版Ⅰ-3), 細(xì)胞內(nèi)布滿圓形、橢圓形以及不規(guī)則形色素體(圖版Ⅰ-3), 直徑為25.0—27.0 μm。環(huán)面觀呈矩形(圖版Ⅰ-2)。殼面孔紋呈切線狀排列(圖版Ⅱ-1), 密度為每10 μm內(nèi)13—16個(gè)。殼套高度為4—5個(gè)孔紋(圖版Ⅱ-7), 密度為每10 μm內(nèi)19—23個(gè)。殼面中央?yún)^(qū)至殼緣的一半處分布有若干支持突, 無外管(圖版Ⅱ-3), 基部有3—5個(gè)圍孔(圖版Ⅱ-4)。該支持突排列方式較為多變(圖版Ⅱ-3、4), 圍繞殼面中心點(diǎn)形成正六邊形時(shí)(圖版Ⅱ-3), 每個(gè)角僅有1個(gè)支持突; 而呈現(xiàn)近似正五邊形時(shí)(圖版Ⅱ-4), 其中一個(gè)角為2個(gè)較為靠近的支持突, 其余均為1個(gè)近中央支持突。殼面近中央處有1個(gè)中央大孔(圖版Ⅱ-3、4)。1環(huán)殼緣支持突(圖版Ⅱ-1、2), 基部有4個(gè)圍孔(圖版Ⅱ-6), 密度為每10 μm內(nèi)3—4個(gè)。但是該殼緣支持突分布不均勻(圖版Ⅱ-1、2), 可見有2個(gè)殼緣支持突緊密相鄰(圖版Ⅱ-7), 其外管末端緊縮呈球狀并且無明顯的管狀延伸(圖版Ⅱ-5、7)。1個(gè)殼緣唇形突(圖版Ⅱ-1、2、5、6), 位于2個(gè)殼緣支持突間并略微偏向其中1個(gè)(圖版Ⅱ-1、2), 該唇形突的外管末端開口略微膨大(圖版Ⅱ-5)。殼緣處無肋紋結(jié)構(gòu)(圖版Ⅱ-7)。

生境: 海洋浮游生活。

分布: 標(biāo)本采自我國的黃海南部(31°59.959′ N,122°29.632′ E, 7月)。本種主要分布于北大西洋的溫帶[23—25]、太平洋[26]以及美國南部海域[27]。

碟形海鏈藻Thalassiosira minicosmicaLee &Park(圖版Ⅲ—Ⅳ)

Park & Lee 2015, p. 164, figs 1—33.

大多數(shù)細(xì)胞單獨(dú)生活(圖版Ⅲ-2—4), 未見膠質(zhì)狀群體, 偶見兩個(gè)細(xì)胞組成的短鏈群體(圖版Ⅲ-1)。在自然樣品中, 細(xì)胞環(huán)帶的膜狀結(jié)構(gòu)有時(shí)有(圖版Ⅲ-3, 圖版Ⅳ-1)有時(shí)無(圖版Ⅲ-1), 但在人工培養(yǎng)條件下, 該特征完全消失(圖版Ⅲ-2、4)。

細(xì)胞殼面呈圓盤形(圖版Ⅲ-3、4), 直徑17.1—33.8 μm, 內(nèi)含圓形或橢圓形色素體(圖版Ⅲ),主要貼近細(xì)胞壁的內(nèi)側(cè)分布。細(xì)胞環(huán)面觀呈鼓形(圖版Ⅲ-1、2), 殼面隆起(圖版Ⅳ-2)。殼面孔紋小而密, 呈束狀(圖版Ⅳ-3)或切線狀(圖版Ⅳ-1)排列。其中殼面中部孔紋相對較疏, 密度為每10 μm內(nèi)16—22個(gè); 殼面靠邊緣處孔紋相對較密, 密度為每10 μm內(nèi)21—24個(gè)。殼套與殼面的界限不明顯, 殼套高度為3—5個(gè)孔紋(圖版Ⅳ-1、2、7), 密度是每10 μm內(nèi)29—40個(gè)。1個(gè)中央支持突(圖版Ⅳ-5、6),無外管(圖版Ⅳ-5), 基部具有4個(gè)圍孔(圖版Ⅳ-6), 內(nèi)殼面可見與之相鄰的1個(gè)中央較大孔紋(圖版Ⅳ-6)。1環(huán)殼緣支持突(圖版Ⅳ-1、3、4), 基部有4個(gè)圍孔(圖版Ⅳ-8), 密度為10 μm內(nèi)4—5個(gè), 有較細(xì)且明顯的外管(圖版Ⅳ-1—2、7)。殼緣處有1個(gè)唇形突(圖版Ⅳ-1—4), 位于2個(gè)殼緣支持突間, 但是比殼緣支持突略靠近殼面中央2—3個(gè)孔紋。相較于殼緣支持突, 唇形突的外管更長且更寬(圖版Ⅳ-2、7)。殼緣處無肋紋結(jié)構(gòu)(圖版Ⅳ-2)。

生境: 海洋浮游生活。

分布: 標(biāo)本采自溫州(5月)、青島(9月)和香港(12月)海域。本種首次報(bào)道于韓國[28]。

2.2 基于LSU rDNA序列的分子系統(tǒng)學(xué)分析

本文基于LSU rDNA D1—D3區(qū)間序列構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹(圖1)。MC1557和MC1562的基因完全相同, 形態(tài)學(xué)鑒定為狹線形海鏈藻。而這2個(gè)株系在分子系統(tǒng)樹上與一株狹線形海鏈藻聚為一支, 并具有較高的置信值(BPP＞0.90), 這表明分子系統(tǒng)樹的結(jié)果也支持形態(tài)學(xué)鑒定的結(jié)論。但同時(shí)它們與這一株美國圣華金河株系(DQ512414)也存在5個(gè)堿基的遺傳差異, 應(yīng)該是不同地理株系之間的差異。

碟形海鏈藻首次記錄于韓國[28], 但是最初的報(bào)道只對其形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行了研究, 并未提供任何分子序列信息。而本文建立的5個(gè)單克隆培養(yǎng)株系(MC369、MC372、MC544、MC1529以及MC1530)在形態(tài)學(xué)特征上完全符合之前報(bào)道的碟形海鏈藻,與此同時(shí)這5個(gè)株系具有完全相同的LSU nrDNA D1—D3序列, 因此我們將它們鑒定為碟形海鏈藻。Park和Lee[28]認(rèn)為碟形海鏈藻與小字海鏈藻T.minuscula的形態(tài)特征最為相似, 但也存在一些差異。而本文所構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹顯示碟形海鏈藻與小字海鏈藻聚在了同一個(gè)大分支上, 并且具有較高的置信值(BPP＞0.90), 之后這2個(gè)種又進(jìn)一步獨(dú)立分成了2個(gè)小支, 說明它們在遺傳學(xué)上存在差異,這也從分子系統(tǒng)學(xué)的角度驗(yàn)證了這2個(gè)物種之間的形態(tài)學(xué)區(qū)別。

2.3 海鏈藻屬分子系統(tǒng)學(xué)的結(jié)構(gòu)分析

現(xiàn)存的海鏈藻屬典型形態(tài)特征是: (1)細(xì)胞殼面圓形; (2)殼緣具有支持突和唇形突, 少數(shù)物種還具有閉合突; (3)殼面孔紋呈六邊形或多邊形, 中央大孔貫穿內(nèi)外殼面, 內(nèi)殼面處有篩板膜覆蓋[2]。但是從本文所構(gòu)建的貝葉斯系統(tǒng)發(fā)育樹(圖1)可以看出,海鏈藻屬物種并非聚類在一個(gè)分支上, 而是被骨條藻屬Skeletonema、漂流藻屬Planktoniella、小盤藻屬M(fèi)inidiscus、小環(huán)藻屬Cyclotella等其他鄰近藻屬所分隔, 因此基于形態(tài)學(xué)建立的海鏈藻屬并不是一個(gè)單系起源, 而是由多個(gè)并系類群所組成。此外,諾氏海鏈藻T. nordenskioeldii作為海鏈藻屬的模式種, 其系統(tǒng)學(xué)位置對于整個(gè)海鏈藻屬應(yīng)具有重要的指示意義, 但是在系統(tǒng)樹上該種僅與部分海鏈藻屬物種聚在一個(gè)小分支上, 并且短棘藻屬Detonula、小盤藻屬M(fèi)inidiscus、桿鏈藻屬Bacterosira物種穿插其中。除此之外, 還有其他一些海鏈藻屬物種的系統(tǒng)學(xué)位置較為特殊。如杰拉德海鏈藻T. guillardii和威氏海鏈藻T. weissflogii聚為獨(dú)立的一支;假微型海鏈藻T. pseudonana與小環(huán)藻屬物種聚在一起并且具有較高的置信值(BPP＞0.90); 結(jié)線形海鏈藻T. nodulolineata、狹線形海鏈藻以及地中海海鏈藻T. mediterranea位于同一個(gè)分支上, 但同時(shí)也被骨條藻屬所分隔開。這些獨(dú)立存在的小分支, 或許正是下一步海鏈藻屬系統(tǒng)學(xué)研究的方向之一。

3 討論

3.1 相似種的比較研究

圖1 基于核糖體大亞基D1—D3區(qū)間序列構(gòu)建的貝葉斯系統(tǒng)樹Fig. 1 Molecular phylogenetic tree from Bayesian analysis inferred from sequences of D1—D3 region of LSU rRNA

狹線形海鏈藻與相似種的比較研究狹線形海鏈藻最明顯的特征是殼面半中央?yún)^(qū)具有多個(gè)支持突, 并排列成環(huán)狀, 同樣具有這個(gè)特征的還有地中海海鏈藻、薩氏海鏈藻T. sackettii、威氏海鏈藻、杰拉德海鏈藻等[22,29,30]。狹線形海鏈藻與威氏海鏈藻、杰拉德海鏈的區(qū)別特征是前者為獨(dú)立篩板膜, 后兩者為連續(xù)篩板膜。此外, 狹線形海鏈藻殼緣支持突外管緊縮呈球狀, 后兩者則是開放的管狀結(jié)構(gòu)。狹線形海鏈藻與地中海海鏈藻的形態(tài)特征最為接近, 區(qū)別特征是: (1)殼面孔紋排列方式:狹線形海鏈藻為切線狀排列, 地中海海鏈藻為束狀并且有若干條放射狀硅質(zhì)肋紋; (2)篩板膜的形態(tài)特征: 狹線形海鏈藻是獨(dú)立篩板膜, 地中海海鏈藻的殼面中部是連續(xù)篩板膜, 殼套處則為獨(dú)立篩板膜;(3)半中央?yún)^(qū)支持突的排列方式: 狹線形海鏈藻有時(shí)會(huì)有2—3個(gè)支持突緊密相鄰的情況, 但地中海海鏈藻則是單獨(dú)分布; (4)半中央?yún)^(qū)支持突的位置: 狹線形海鏈藻的殼面支持突位于孔紋之間的硅質(zhì)壁上,而地中海海鏈藻的則是取代了殼面孔紋的位置。

Mahood等[27]基于形態(tài)特征將狹線形海鏈藻與地中海海鏈藻、湖沼海鏈藻T. lacustris、輻射鹽野藻Shionodiscus endoseriata(原輻射海鏈藻)劃分為同一類群, 劃分依據(jù)是它們的殼面半中央?yún)^(qū)具有一圈可變的支持突。威氏海鏈藻和杰拉德海鏈藻亦具有此特征, 但系統(tǒng)樹上卻顯示它們并不與狹線形海鏈藻聚為一支, 而是獨(dú)立聚在一個(gè)分支上。然而矛盾的是狹線形海鏈藻卻與地中海海鏈藻聚在一個(gè)小分支上, 這說明它們之間的親緣關(guān)系又是較為接近。但是目前由于缺少湖沼海鏈藻、薩氏海鏈藻等相關(guān)物種的分子信息, 所以難以判斷具有殼面半中央?yún)^(qū)支持突的海鏈藻屬物種是否為單起源。

之后Hernández-Becerril & Tapia Pe?a[26]根據(jù)殼面孔紋排列方式將狹線形海鏈藻與偏心海鏈藻T.eccentrica、厄氏鹽野藻范氏變種Sh. oestrupiivar.venrickae(原厄氏海鏈藻范氏變種)、細(xì)孔海鏈藻T.punctifera、門迪海鏈藻T. mendiolana、對稱海鏈藻T. symmetrica以上殼面孔紋偏心狀排列的物種歸為同一類群。然而分子樹上顯示狹線形海鏈藻與厄氏鹽野藻范氏變種以及偏心海鏈藻的系統(tǒng)學(xué)位置相距甚遠(yuǎn), 位于2個(gè)不同的大分支上, 說明它與厄氏鹽野藻范氏變種以及偏心海鏈藻的親緣關(guān)系較遠(yuǎn), 同時(shí)這也表明殼面孔紋的排列方式不能作為海鏈藻屬類群劃分的依據(jù)。

碟形海鏈藻與相似種的比較研究碟形海鏈藻的顯著特征是殼緣唇形突的位置比殼緣支持突更靠近殼面中央。在已報(bào)道的現(xiàn)生海鏈藻屬物種中, 安達(dá)曼海鏈藻T. andamanica、小字海鏈藻、斑點(diǎn)海鏈藻T. punctigera、管狀海鏈藻T. tubifera也具有此特征[31—35], 但是它們之間存在明顯的形態(tài)學(xué)區(qū)別。首先, 安達(dá)曼海鏈藻、斑點(diǎn)海鏈藻和管狀海鏈藻具有殼面支持突, 而碟形海鏈藻卻不具有這一特征。其次, 碟形海鏈藻的殼緣支持突具有外管結(jié)構(gòu), 而斑點(diǎn)海鏈藻無外管; 碟形海鏈藻無閉合突結(jié)構(gòu), 而管狀海鏈藻則有。就形態(tài)學(xué)特征而言, 小字海鏈藻與碟形海鏈藻最為接近, 它們都具有1環(huán)殼緣支持突, 無殼面支持突以及1個(gè)具有明顯外管的殼緣唇形突, 且唇形突的位置比殼緣支持突更加遠(yuǎn)離殼緣。這2個(gè)種之間也具有一定的形態(tài)學(xué)差異:(1)小字海鏈藻的殼緣唇形突與1個(gè)獨(dú)立的支持突相鄰, 這也是小字海鏈藻的特有特征, 碟形海鏈藻并不具有; (2)碟形海鏈藻具有殼緣支持突外管, 而小字海鏈藻則無外管; (3)碟形海鏈藻的殼套高度為3—5個(gè)孔紋; 小字海鏈藻的殼套僅為1—2個(gè)孔紋高度。

以往研究建立了細(xì)弱海鏈藻復(fù)合群T. subtiliscomplex[32,35], 將具有膠質(zhì)狀群體的細(xì)弱海鏈藻、萎軟海鏈藻T. mala、小字海鏈藻、斑點(diǎn)海鏈藻T.punctigera等12個(gè)海鏈藻屬物種歸于其中[31,32,36,37]。之后Park & Lee[28]在報(bào)道碟形海鏈藻時(shí)發(fā)現(xiàn)該種亦會(huì)形成膠質(zhì)狀群體(本文未觀察到該群體特征), 遂將其歸為細(xì)弱海鏈藻復(fù)合群, 同時(shí)基于形態(tài)學(xué)研究認(rèn)為膠質(zhì)狀群體不能作為物種劃分的依據(jù), 于是對細(xì)弱海鏈藻復(fù)合群進(jìn)行了重新定義, 并提出了細(xì)弱海鏈藻類群T. subtilisgroup這一概念, 將安達(dá)曼海鏈藻T. andamanica、雙環(huán)海鏈藻T. diporocyclus、倫德海鏈藻T. lundiana、碟形海鏈藻、小字海鏈藻、斑點(diǎn)海鏈藻和細(xì)弱海鏈藻以上7種海鏈藻歸為該類群。從本文所構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹上也顯示萎軟海鏈藻和小字海鏈藻等具有膠質(zhì)狀群體的海鏈藻并不聚在一起, 而是與它們獨(dú)立位于2個(gè)大的分支上, 這表明萎軟海鏈藻與它們的親緣關(guān)系相對較遠(yuǎn), 所以這也從分子學(xué)角度驗(yàn)證了膠質(zhì)狀群體特征不能作為海鏈藻分類學(xué)體系的劃分依據(jù)。此外, 斑點(diǎn)海鏈藻并不與小字海鏈藻、碟形海鏈藻、倫德海鏈藻聚在一起, 而是與偏心海鏈藻T. eccentric、圓海鏈藻T. gravida、膨脹海鏈藻T. tumida聚為了1個(gè)小分支, 并且具有較高的置信值(BPP＞0.90), 這表明斑點(diǎn)海鏈藻或與后3種海鏈藻的親緣關(guān)系更為接近。但是目前, 由于缺乏安達(dá)曼海鏈藻等其余3種海鏈藻的分子信息, 所以并不能對該類群進(jìn)行更為客觀的分析。因此, 單純的依靠形態(tài)學(xué)特征所建立的細(xì)弱海鏈藻類群是否成立, 還有待進(jìn)一步的研究。

3.2 海鏈藻屬的系統(tǒng)學(xué)研究

隨著越來越多的海鏈藻屬物種被報(bào)道, 部分學(xué)者開始嘗試對海鏈藻屬特定類群進(jìn)行系統(tǒng)學(xué)修訂。其中一些修訂工作得到了廣泛的認(rèn)可, 例如:Alverson等[38]基于唇形突遠(yuǎn)離殼緣, 支持突具有較長內(nèi)管而無外管, 將包括厄氏海鏈藻范氏變種、瑞茲海鏈藻T. ritscheri等在內(nèi)的26個(gè)種劃分出來, 并建立新屬——鹽野藻屬Shinodiscus, 基于LSU nrDNA和SSU nrDNA的序列信息所建立的貝葉斯系統(tǒng)發(fā)育樹中也支持這一藻屬的建立[18]。然而, 也有一些修訂工作并沒有被普遍接受, 例如: Stachura-Suchoples和Williams根據(jù)篩板膜的連續(xù)性建立了連篩藻屬Conticribra, 模式種為化石種: 三環(huán)連篩藻C. tricircularis, 同時(shí)他們也將具有連續(xù)篩板膜的現(xiàn)生種杰拉德海鏈藻、威氏海鏈藻、內(nèi)華達(dá)海鏈藻T.nevadica修訂至此屬[39]。但是該屬模式種的另一個(gè)顯著特征是具有三環(huán)殼緣支持突, 而這一特征在其修訂的現(xiàn)生海鏈藻中并不存在, 并且化石種分子數(shù)據(jù)的缺失也導(dǎo)致無法利用分子生物學(xué)技術(shù)去驗(yàn)證該屬的成立是否客觀。

迄今為止, 全球已報(bào)道的海鏈藻現(xiàn)生種約有170種, 而在NCBI上可查詢到基因序列的海鏈藻屬物種不過30種, 并且多數(shù)序列信息都是核糖體基因,分子數(shù)據(jù)的缺乏已成為制約海鏈藻屬系統(tǒng)學(xué)研究的重要因素, 這也是今后研究的一個(gè)重要內(nèi)容。

圖版ⅠP l ateⅠ

圖版ⅢPlateⅢ

圖版ⅣPlateⅣ

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